全 文 ：Central South Pharmacy. August 2013, Vol.11 No.8　中南药学 2013 年 8 月 第 11 卷 第 8 期
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因此，中国药典 2010 年版中以 1-MID 作为哈蟆油鉴别的专
属性问题有深入实验和验证的必要。本研究目的以 1-MID
的定性为主，表 1 中所列的定量数据对各个组织中 1-MID
相对含量比较具有一定参考意义。
关于哈蟆油，包括其他中药材的鉴别方法，不宜采用
单一的化学物为判定真伪的标志。长期以来不同学者从不同
角度入手鉴别哈蟆油，包括基源鉴定法，性状鉴别法、显微
鉴别法、化学定性分析、化学定量分析、光谱分析（UV、
IR）、色谱分析（TLC、HPLC、GC-MS、电泳分析法、生物
鉴定法（放射性免疫分析、多聚酶链式反应）等 [13-14]，为更
好更全面的体现哈蟆油的质量标准奠定了基础。有文献报道
利用高效液相色谱法建立哈蟆油的指纹图谱，可以检出 17 个
相应位置稳定的共有峰 [15]，这种类似综合性的中药材鉴别方
法比单一组分的鉴别更加稳定可靠。中国药典 2010 年版哈蟆
油 1-MID 鉴别项是首次增补的内容，填补了中国药典 1985 年
版以来各版药典中无哈蟆油真伪鉴别的空白，起到了一定的
规范作用，然而，鉴别指标的专属性仍有待深入研究。

参考文献
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（收稿日期： 2013-04-24； 修回日期： 2013-05-29）
薜荔果的生药学研究及其黄酮的含量测定
张恩景，马莉 * （武汉市第三医院，武汉 430060）
摘要：目的　对薜荔果生药学进行研究，同时采用反相高效液相色谱法测定薜荔果药材中黄酮的含量。方法　对薜
荔果进行性状鉴别、显微鉴别和薄层色谱鉴别。采用 Phenomenex Gemini C18 色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），
流动相为乙腈 -0.5%冰醋酸梯度洗脱，流速为 1.0 mL·min－ 1，检测波长 254 nm，柱温 40 ℃。结果　芦丁在 5～ 100
μg·mL－ 1浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为 Y＝ 5.685×104X＋ 2 644（r＝ 0.999 9），平均加样回收
率为 98.8%。结论　研究结果可为薜荔果的生药鉴定、质量标准的制定提供一定依据。
关键词：黄酮；薜荔果药材；生药鉴别；薄层色谱；反相高效液相色谱法
中图分类号：R917, R931.5　　　　文献标识码：A　　　　文章编号：1672-2981(2013)08-0610-04
doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2013.08.015
Pharmacognostical study on Ficus pumila L. and content
determination of fl avone
ZHANG En-jing, MA Li* (Third Hospital of Wuhan, Wuhan 430060)
Abstract: Objective To carry out a pharmacognostical study on Ficus pumila L., and to develop an RP-HPLC method for
the content determination of fl avone in Ficus pumila L.. Methods Characteristic identifi cation and microidentifi cation of the

作者简介：张恩景，女，硕士，主管药师，主要从事临床药学工作，E-mail：413740340@qq.com * 通讯作者：马莉，女，硕士，药师，
主要从事医院药学工作，E-mail：mali51545@163.com
中南药学 2013 年 8 月 第 11 卷 第 8 期　Central South Pharmacy. August 2013, Vol.11 No.8
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Ficus pumila L. were examined. Catechin and quercetin were used as chemical reference in the TLC identifi cation. Phenomenex
Gemini C18 column (250 mm×4.6 mm, 5 μm) was employed with acetonitrile-0.5% glacial acetic acid as the mobile phase, and
the fl ow rate was 1.0 mL·min－ 1. The UV detection wavelength was 254 nm. Results The linear range of rutin was 5－ 100
μg·mL－ 1, the average recovery was 98.8% (n＝ 6), and the correlation coeffi cient was 0.999 9. Conclusion The pharma-
cognostical, characteristics, can be used as evidence for identifi cation and quality control of this medicinal plant.
Key words: fl avone; Ficus pumila L.; pharmacognostical identifi cation; TLC; RP-HPLC
薜荔果（Ficus pumila L.）别名奶母，木莲，凉粉果 [1] 等，
系桑科榕属植物薜荔的隐花果 [2]，是一种药食两用植物。主
要分布于我国和日本，在我国主要分布于湖北、江苏、安徽、
广西等省区。薜荔的药用价值和营养价值很早就为人所知，
因而薜荔在我国具有悠久的药用历史 [3]，其应用以野生为主。
吴文珊等 [4] 对薜荔进行相关的研究，发现其黄酮类物质的含
量颇高，而黄酮类化合物是一类生理活性较强的化合物，在
植物的品质评价和质量控制方面具有重要意义。笔者对该药
用植物进行了较系统的生药学研究，同时对薜荔果中的黄酮
类成分进行了含量测定，为薜荔果的生药鉴定、质量标准的
制定和质量控制提供科学依据。
1 材料
1.1 仪器与试药
显微镜 XSZ-3 型（重庆光学仪器厂）；Shimaszu LC
20A 高效液相色谱仪（日本，配备 LC-20AD 泵、SIL-20A
自动进样器，SPD-M20A 紫外检测器及 LC solution 色谱工
作站）；Mettler-Toledo AG285 型分析天平（Soitzerland）；
ZF-I 型三用紫外分析仪（上海顾村电光仪器厂）。乙腈
（色谱纯，美国 DIKMA 公司）；儿茶素（批号：110877-
200001，纯度：97.2%）、槲皮素（批号：100081-200406，纯度：
97.4%）、芦丁（批号：100080-200306，纯度：90.5%）均购
自中国药品生物制品检定所；甲醇、石油醚等为分析纯。
1.2 药材来源
薜荔果采自湖北十堰等 10 个不同产地，经湖北中医
药大学药学院鉴定教研室陈科力教授鉴定为薜荔果 Ficus
pumila L. 正品（见表 1）。
2 方法与结果
2.1 药材性状
本品长 3.5～ 5 cm，直径 2.5～ 4 cm，表面黄棕色至黑
褐色。顶端截形，边缘稍凹后，中央向上圆突，突起正中有
1 个小孔，孔内充塞膜质小苞片，孔外四周通常有细密的褐
色或黄棕色绒毛；下端渐狭细或柄状，常连有短的果柄。果
柄基部有苞片。切开后内壁黄棕色至红棕色，其内全部充满
疏松似海绵；内表面近孔口密生众多苞片及枯萎的花，细小
朱红色且有光泽的圆球状果实。气微，味苦涩。
2.2 显微鉴别
粉末：本品粉末黄棕色。表皮细胞类方形至多角形，细
胞壁略平直，直径约 7.5～ 25 μm。含晶细胞类方形或类多角
形，每个细胞内含草酸钙方晶或棱晶，草酸钙方晶直径约 8～
18 μm。薄壁细胞大小不等，长短不一，导管以螺纹导管为主，
也有梯纹导管和网纹导管，直径 8～ 24 μm，结果见图 1。
2.3 薄层色谱鉴别
2.3.1 儿茶素的鉴别 [5]
① 供试品溶液的制备：取薜荔果粉末 2.0 g（过 4 号筛），
加甲醇溶液 20 mL，超声提取 30 min，放冷，滤过，滤液减
压回收蒸干，残渣加水 5 mL 溶解，用乙酸乙酯萃取 2 次，
每次 10 mL，合并乙酸乙酯液减压回收，残渣加甲醇 1 mL
溶解作为供试品溶液。
② 对照品溶液的制备：取儿茶素对照品适量，加甲醇制成
每 1 mL 含 0.5 mg 的溶液，作为对照品溶液。
表 1 10 批薜荔果药材的产地和采集时间
Tab 1 Origin and collection time of 10 lots Ficus pumila L.
编号（No.） 产地（origin） 采集时间（collection time） 编号（No.） 产地（origin） 采集时间（collection time）
1 湖北十堰 2008-07-02 6 江苏射阳 2008-06-07
2 湖北蕲春 2008-07-09 7 安徽亳州 2008-05-14
3 广西玉林 2008-04-16 8 安徽淮北 2008-05-21
4 广西南宁 2008-04-23 9 四川达州 2008-07-28
5 福建福州 2008-06-30 10 四川成都 2008-06-04
图 1 薜荔果粉末显微图
Fig 1 Micrographs of Ficus pumila L. powder
A. 草 酸 钙 方 晶（calcium oxalate crystals）；B. 导 管（catheter）；C.
表皮细胞（epidermal cell） ；D. 含晶细胞（crystal cell）
A 草酸钙方晶 B 导管
C 表皮细胞 D 含晶细胞
③ 鉴别：照薄层色谱法（中国药典 2005 版一部附录Ⅵ B）
试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各 5 μL，分别点于同一
块以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 GF254 薄层板上，以
甲苯 - 甲酸乙酯 - 甲醇 - 甲酸（10 : 8 : 2 : 0.4）为展开剂，展
开，展距为 12 cm，取出，晾干，喷以 5% 的香草醛硫酸溶液，
在 105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品
色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，见图 2。
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号筛）4.0 g，置于索氏提取器中，加石油醚（沸程 60～ 90
℃）150 mL，加热回流 2 h，至提取液无色，弃去石油醚，
取出，将药渣挥干后，移入烧瓶中，精密加入 50 mL 甲醇，
称定重量，回流提取 3 h，放冷，称重，用甲醇补足重量，
精密量取续滤液 40 mL，置蒸发皿中蒸干，残渣用甲醇溶解
并转移置 10 mL 量瓶中，用甲醇定容，摇匀，过滤，滤液过
0.45 μm 微孔滤膜，作为供试品溶液。
2.4.4 专属性考察 取芦丁对照品溶液（100 μg·mL－ 1）及
薜荔果供试品溶液，按照“2.4.1”项下色谱条件进液相分析
测定，记录相应色谱图，考察测定方法的特异性，结果见图 3，
测得芦丁的保留时间约为 37.5 min，峰形良好，无杂质干扰。
2.3.2 槲皮素的鉴别 [6]
① 供试品溶液的制备：取薜荔果粉末 2.0 g（过 4 号筛），
加甲醇溶液 20 mL，超声提取 30 min，放冷，滤过，滤液减
压回收蒸干，残渣加水 5 mL 溶解，用氯仿萃取 2 次，每次
10 mL，合并氯仿液减压回收，残渣加甲醇 1 mL 溶解作为
供试品溶液。
② 对照品溶液的制备：取槲皮素对照品适量，加甲醇制成
每 1 mL 含 0.5 mg 的溶液，作为对照品溶液。
③ 鉴别：照薄层色谱法（中国药典 2005 版一部附录Ⅵ B）
试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各 5 μL，分别点于同一
块以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 GF254 薄层板上，以
氯仿 - 乙酸乙酯 - 甲酸（5 : 2 : 1）为展开剂，展开，展距为
12 cm，取出，晾干，喷以三氯化铝溶液，加热至斑点显色
清晰。供试品色谱中，在与对照品槲皮素色谱相应的位置上，
显相同颜色的斑点，见图 2。
2.4 含量测定
2.4.1 色谱条件 色谱柱为 Phenomenex Gemini C18 柱（250
mm×4.6 mm，5 μm），乙腈 -0.5% 冰醋酸梯度洗脱（见表 2），
流速为 1.0 mL·min－ 1，检测波长 254 nm，柱温 40 ℃，进样
量 10.0 μL。理论塔板数按芦丁峰计算应≥ 6 000。
表 2 梯度洗脱程序
Tab 2 Gradient elution
时间
（time）/min
乙腈
（acetonitrile）/%
0.5% 冰醋酸
（0.5% acetic acid）/%
0～ 17 5 95
17～ 32 5～ 25 95～ 75
32～ 57 25～ 35 75～ 65
57～ 80 35～ 65 65～ 35
80～ 110 65 35
2.4.5 线性关系考察 精密吸取对照品溶液，分别配制成系
列 浓 度 5、10、20、40、80、100 μg· mL－ 1， 按“2.4.1”
项下色谱条件测定，以浓度（X）为横坐标，峰面积（Y）
为纵坐标进行线性回归，得回归方程：Y ＝ 5.685×104X＋
2 644，r＝ 0.999 9。结果表明，芦丁在 5～ 100 μg·mL－ 1
与峰面积呈良好的线性关系。
2.4.6 精密度试验 取本品对照品溶液，连续进样 5 次，测
定其中黄酮的含量，其含量依次为 0.021 4%、0.023 0%、
0.021 1%、0.021 0%、0.021 2%，RSD 值为 1.1%（n＝ 5），
表明本方法精密度良好。
2.4.7 稳定性试验 取本品同一供试品溶液于制备后分别放
置 0、2、4、6、8、12、24 h，分别精密吸 10 μL，注入液相
色谱仪中进行测定，黄酮的含量依次为 0.0212%、0.0215%、
0.021 3%、0.021 6%、0.021 7%、0.021 5%、0.021 5%，RSD
值为 1.0%，表明供试品液中黄酮含量在 24 h 内稳定性良好。
2.4.8 重复性试验 精密称取本品同一批样品 5 份，按“2.3”
项下方法制成供试品溶液，精密量取上述供试品溶液各
10.0 μL，注入色谱仪中，测定峰面积，计算 RSD 为 0.70% （n
＝ 5），表明本方法重复性好。
2.4.9 加样回收试验 精密称取湖北十堰的薜荔果药材粉末
6 份，每份约 2 g，分别准确加入一定量的芦丁对照品，依
“2.4.3”项下方法制成供试品溶液，精密吸取各供试品溶液
10 μL 注入色谱仪，测定，计算回收率。算得平均回收率为
98.8%，RSD 为 1.1%，结果见表 3。
2.4.10 样品测定 取不同产地的薜荔果药材 10 批，按“2.4.3”
项下方法制备供试品溶液，并按外标法计算薜荔果药材中黄
酮含量，结果见表 4。
3 讨论
3.1 薜荔果生药学鉴别
试验结果表明薜荔果的显微特征较明显：无节乳汁管呈
长条形或长圆形，内含棕色团块状分泌物；内含草酸钙方晶
或棱晶；导管以螺纹导管为主，也有梯纹导管和网纹导管。
以上特征可作为鉴别薜荔果真伪的参考依据。以儿茶素和槲
图 3 薜荔果供试品及芦丁对照品 HPLC 图谱
Fig 3 HPLC chromatogram of sample and reference substance
A. 供试品（sample）；B. 芦丁对照品（rutin control）；1. 芦丁（rutin）
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 t/min 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 t/min
1
A
1
B
2.4.2 对照品溶液的制备 精密称取低温真空干燥至恒重的
芦丁对照品适量，用甲醇溶液定容于 10 mL 的量瓶中，配成
1 mg·mL－ 1 的储备液。精密吸取储备液 1 mL，用甲醇溶
液定容于 5 mL 量瓶，配成 200 μg·mL－ 1 的溶液，作为对
照品溶液。
2.4.3 供试品溶液的制备 精密称取薜荔果药材粉末（过二
A：1. 湖北蕲春（Hubei Qichun）；2. 广西玉林（Guangxi Yulin）；3. 福建福
州（Fujian Fuzhou）；4. 安徽亳州（Anhui Bozhou）；5. 四川达州（Sichuan
Dazhou）；6. 儿茶素对照品（catechin）；B：1. 槲皮素对照品（quercetin）；
2. 广西玉林（Guangxi Yulin）；3. 福建福州（Fujian Fuzhou）；4. 安徽
亳州（Anhui Bozhou）；5. 湖北十堰（Hubei Shiyan）
图 2 儿茶素及槲皮素薄层色谱图
Fig 2 TLC of catechin and rutin
1 2 3 4 5 6
A B
1 2 3 4 5
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表 3 芦丁加样回收试验 (n ＝ 6)
Tab 3 Recovery of rutin (n ＝ 6)
取样量（sample
weight）/g
样品含量（sample
amount）/mg
加入量（added
amount）/mg
测得量（detected
amount）/mg
回收率
（recovery）/%
平均回收率
（average recovery） /%
RSD
/%
2.001 2 0.424 2 0.420 0 0.838 6 98.7
2.002 7 0.424 5 0.420 0 0.841 7 99.3
2.007 6 0.425 6 0.420 0 0.846 2 97.7 98.8 1.1
2.008 1 0.425 7 0.420 0 0.844 3 100.1
2.004 4 0.424 9 0.420 0 0.843 0 99.6
2.003 8 0.424 8 0.420 0 0.834 6 97.6
表 4 不同产地薜荔果药材中黄酮的含量 (n ＝ 3)
Tab 4 Flavonoids content of Ficus pumila L. of different
origins (n ＝ 3)
产地
（origin）
黄酮含量
（fl avonoid
content）/%
产地
（origin）
黄酮含量
（fl avonoid
content）/%
湖北十堰 0.021 2 江苏射阳 0.020 1
湖北蕲春 0.025 4 安徽亳州 0.024 5
广西玉林 0.022 4 安徽淮北 0.022 2
广西南宁 0.020 1 四川达州 0.022 6
福建福州 0.020 2 四川成都 0.022 4
皮素为指标性成分，采用薄层色谱法对薜荔果药材进行了定
性鉴别，比较了 10 余种不同的色谱系统，结果以甲苯 - 甲
酸乙酯 - 甲醇 - 甲酸（10 : 8 : 2 : 0.4）为展开剂时儿茶素的
分离效果好，以氯仿 - 乙酸乙酯 - 甲酸（5 : 2 : 1）为展开剂
时槲皮素的分离效果好，且方法简便易行、专属性强。
3.2 芦丁含量测定液相条件筛选
本试验对流动相甲醇 - 水、乙腈 - 水、甲醇 -0.5% 冰醋
酸、乙腈 -0.5% 冰醋酸系统进行了比较研究，结果表明，以
乙腈 -0.5%冰醋酸梯度洗脱分离效果较好，满足分离技术要求。
3.3 供试品制备方法
为了使薜荔果中的黄酮类成分提取完全，同时除去影
响测定的干扰性成分，采用石油醚回流以除去脂溶性较大
的成分，然后将提取物以甲醇提取，对回流时间 0.5、1.5、
2、3 h 黄酮的含量进行了比较，结果表明回流 3 h 效果较好，
黄酮含量相对较高。因而供试品溶液先采用石油醚回流脱
脂，然后甲醇回流 3 h。
3.4 研究结论与意义
本试验对10个不同产地的薜荔果药材进行了含量测定，
试验结果表明薜荔果药材中黄酮的含量在 0.020%～ 0.025%，
不同产地药材含量存在着一定的差异，该研究为薜荔果药材
的质量控制提供一定的依据。

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高效液相色谱法测定复方雷尼替丁胶囊中
盐酸雷尼替丁的含量
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摘要：目的　建立测定复方雷尼替丁胶囊中盐酸雷尼替丁含量的方法。方法　色谱柱：Kromasil C18（5 μm，4.6
mm×250 mm）；柱温：35 ℃；流动相：0.6%磷酸溶液（用 50%氢氧化钠溶液调节 pH值至 7.10±0.05）-乙腈
（83 ：17）；检测波长：230 nm；流速：1.0 mL • min－ 1，进样量：10 μL。结果　盐酸雷尼替丁在 0.010 85～ 0.542
41 mg • mL－ 1线性良好（r2＝ 0.999 7），最小检出量为 1.182 63 ng，平均回收率为 99.8%（n＝ 6），RSD为 1.0%。
结论　建立的方法简便、灵敏、专属性好、结果准确，适用于复方雷尼替丁胶囊中盐酸雷尼替丁含量的测定。
关键词： 高效液相色谱法；复方雷尼替丁胶囊；盐酸雷尼替丁；含量测定
中图分类号：R917　　　　文献标识码：A　　　　文章编号：1672-2981(2013)08-0613-04
doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2013.08.016

作者简介：石笑弋，女，药师，主要从事药物分析工作， Tel：13723891941， E-mail：40623099@qq.com