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傣药灯台叶化学成分、药理作用、质量控制及临床应用研究进展



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傣药灯台叶化学成分、药理作用、质量控制及临床应用研究进展
杨妮娜1,2, 王灿红1, 赵应红2*
(1. 云南中医学院中药学院,云南 昆明 650500;2. 西双版纳傣族自治州傣医医院,云南 西双版纳
666100)
收稿日期:2015-10-08
作者简介:杨妮娜 (1988—) ,女,硕士,研究方向为中药质量控制与评价。Tel:15887615937,E-mail:547018935@ qq. com
* 通信作者:赵应红 (1968—) ,女 (佤族) ,主任药师,研究方向为药物制剂。Tel:15887797260,E-mail:328664811@ qq. com
摘要:本文通过调研国内外文献和傣医药相关资料,对灯台叶的化学成分、药理作用,质量控制和临床应用进行整理
研究,以期为该药材及其相关新产品的开发利用提供参考,并促进化学、药理及质量控制等现代研究和临床应用的有
机结合。
关键词:灯台叶;化学成分;药理作用;质量控制;临床应用
中图分类号:R284. 1;R285. 5 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2016)03-0645-06
doi:10. 3969 / j. issn. 1001-1528. 2016. 03. 035
随着空气污染日益加重,呼吸系统疾病逐渐成为临床
常见病和多发病[1-3],灯台叶作为常用傣药,被广泛用于
此类疾病的治疗与预防[4-7]。它为夹竹桃科鸡骨常山属植
物糖胶树 Alstonia scholaris (L.)R. Br. 的干燥树叶,傣语
习称“摆埋丁别”,味苦、微涩、寒,入火、水塔,具有
清火解毒、消肿止痛、止咳化痰的功效,主治咳嗽气喘、
百日咳、胃痛、泄泻、疟疾、跌打损伤、溃疡出血等疾
病,收载于《中国药典》 (1977 年版)和 《云南省中药
材标准》(2005 年版)第七册[8-9]。现代研究发现,灯台
叶主要含生物碱、黄酮、萜类等活性成分,具有止咳平
喘、解痉、抗炎、镇痛、抗肿瘤、抗疟疾、抗氧化、免疫
调节、调节肠胃、调节血脂和血糖等药理作用[10-16]。本
文现将近年来国内外关于灯台叶化学成分、药理作用、质
量控制的研究进行综述,同时调研傣医经典著作,阐述其
在傣医临床中的应用,为灯台叶及其制剂的进一步研究提
供依据和参考。
1 化学成分研究
1. 1 生物碱成分 目前从灯台树不同药用部位中分离出的
生物碱有 70 余种,绝大多数都存在于叶中,以单萜吲哚类
生物碱为主。按照骨架结构不同,可分为 8 类,即劲直胺
型、糖胶树碱、灯台树明碱、土波台文碱、鸭脚木明碱、
狄他树皮碱、狄他树皮定型、其他生物碱。其中,鸭脚树
叶碱、灯台树明碱、灯台碱、鸡骨常山碱、土波台文碱是
近年研究的热点[17 -19],结构见图 1。
从灯台叶中分离出的生物碱有 alistonitrine A、picrali-
nal、manilamine、N4 -methyl angustilobine B、19,20-(E)-
vallesamine、angustilobine B N4 -oxide、20 (S)-tubotaiwine、
6,7-seco-angustilobine B、 scholaricine、19-epi-scholaricine、
sarpagine、N4 -demthylechitamine、 echitamidine、 strictamine、
akuammidine、vallesamine、lagunamine、losbanine、Nb-meth-
ylscholaricine、nareline ethyl ether、19-E-picrinine、vallesa-
mine Nb-oxide、 N-formylscholarine、 alschomine、 isoalscho-
mine、tubotaiwine、lagunamine、20 (S)-tubotaiwine、schol-
arine-N (4)-oxide、狄他树皮定、鸭脚嘎叮、肯乐因、N
(4)-甲基阿枯米辛、花冠木碱、那瑞灵、文特品、异肯乐
因、热嗪胺、瓦勒胺、17-O-乙酰基狄他树皮定、吴茱萸次
碱、伪阿桔米精、管台文、劲直胺、5β-甲氧基劲直胺、糖
胶树皮碱、N4 -去甲基狄他树皮碱等
[17-25]。
1. 2 黄酮类成分 惠婷婷等[26]通过乙醇回流提取、反相
硅胶色谱分离纯化,结合理化及波谱鉴定等手段,从灯台
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图 1 主要生物碱结构式
叶中分离出 8 个黄酮类成分,即山萘酚、槲皮素、异鼠李
素、异鼠李素-3-O-β-D-半乳糖苷、山萘酚-3-O-β-D-半乳糖-
(2→ 1)-O-β-D-木糖苷、山萘酚-3-O-β-D-半乳糖苷、槲皮
素-3-O-β-D-半乳糖苷和槲皮素-3-O-β-D-半乳糖-(2→1)-
O-β-D-木糖苷。杜国顺等[27]又从中分得 7,3,4-三甲氧
基-5-羟基黄酮、1-羟基-3,5-二甲氧基-双苯吡酮、3,5,
7,4-四羟基黄酮。
1. 3 萜类成分 灯台叶中的萜类成分以三萜为主,即齐墩
果酸、角鲨烯、乙酰-α-香树醇酯、胡萝卜苷、生育酚、灯
台叶素 A、yielded betulin、betulinic acid、ursolic acid、al-
stonic acids A、alstonic acids B、cycloeucalenol、cycloartanol、
lupeol、lupeol acetate、betulin 等[27-31]。其中,对熊果酸、
齐墩果酸、cycloeucalenol、cycloartanol、lupeol 的研究较多,
结构见图 2。
2 药理作用研究
2. 1 止咳平喘 单萜吲哚类生物碱是灯台叶止咳平喘的主
要成分,同时黄酮类成分也兼有一定的平喘作用,这与抑
制平滑肌细胞的外钙内流、内钙释放及蛋白激酶 C 信号传
导系统有关,而镇咳以外周作用为主[32]。杨坤芬和赵云
丽[33]采用豚鼠枸橼酸引咳法及组胺和氯化乙酰胆碱引喘
法,探索灯台叶碱对镇咳、平喘的最低有效剂量,发现其
平喘的最低有效剂量为 7. 5 mg /kg。杨泳等[34]以豚鼠为实
验对象,喷雾枸橼酸制造咳嗽模型,记录从喷雾结束到出
现第一次咳嗽的时间和 5 min内的咳嗽次数,选择 5 min内
咳嗽大于 10 次的豚鼠,灌胃给予灯台叶生物碱,发现该成
分有显著的止咳作用 (P < 0. 01)。然后,将 0. 2%组胺和
1%乙酰胆碱等体积混合,给豚鼠喷雾 30 s,记录从喷雾开
始至出现惊厥的时间,筛选潜伏期合格的动物,灌胃给予
灯台叶黄酮类成分,1 h 后再进行致喘实验,记录“引喘
潜伏期”,发现该成分有明显平喘作用 (P < 0. 01)。
2. 2 抗炎镇痛 灯台叶生物碱抗炎镇痛作用与抑制炎性递
质 COX、5-LOX有关,而与中枢无关,其乙醇提取物可显
著减少 FCA法诱导关节炎大鼠关节组织脂质过氧化水平,
明显增加抗氧化酶谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶和超氧
化物歧化酶活力,该作用与其抗氧化活性密切相关[35]。灯
台叶碱不同剂量连续灌胃给药 3 d 后,均能明显抑制二甲
苯致小鼠耳廓肿胀,抑制蛋清所致大鼠足跖肿胀,抑制大
鼠皮下棉球肉芽肿生成,减少醋酸扭体反应,增强 SOD 的
活性,减少一氧化氮、前列腺素 E2、MDA 水平[35-36]。
Arulmozhi等[37]以 FCA法诱导关节炎大鼠模型,观察灯台
叶乙醇提取物的抗关节炎作用,发现其活性良好,可降低
关节炎指数、体质量和白细胞浸润,明显减少关节组织脂
质过氧化水平,显著增加谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物
歧化酶活力。
2. 3 抗氧化作用 灯台叶水提物和醇提物均能有效抑制氧
化自由基,表现出明显的抗氧化活性。Antony 等[38]采用
DPPH、ABTS和 FRAP 法,研究灯台叶水、正丁醇、乙酸
乙酯提取物的抗氧化活性,发现水和正丁醇提取物作用较
明显。戴云等[39]采用分光光度法,研究醇提物的体外抗氧
化能力,以清除活性氧、抑制 DNA损伤、抑制脂质过氧化
能力为指标,与茶多酚相关能力进行对比,发现灯台叶乙
醇和正丁醇提取物的以上指标与茶多酚相当。莫菁莲[40]在
研究灯台叶醇提物抗肿瘤机制时发现,高剂量给药组荷瘤
小鼠中 H22肿瘤细胞活性氧 (ROS)的水平明显低于阴性
对照组。同时其血清中 GR、GSH-PX、CAT、SOD 活力均
有所升高,机体抗氧化能力增强,MDA水平下降,表明高
剂量给药组小鼠体内脂质过氧化的程度较低。
2. 4 免疫调节作用 莫菁莲[40]探究灯台叶醇提物对 H22肝
癌移植小鼠免疫的影响时发现,高剂量醇提物能增强小鼠
的碳廓清能力,提高机体体液免疫能力。韩芳[41]研究灯台
叶醇提物对 C57BL /6 荷瘤小鼠免疫功能的影响时发现,
高、中剂量组能显著提高小鼠血清白细胞介素-6、白细胞
介素-10、干扰素-γ的水平,而且高剂量组还能增强 T淋巴
细胞增殖能力,降低 CD4 + /CD8 +比例,从免疫分子和免疫
细胞水平提高荷瘤小鼠免疫功能。
2. 5 调节血糖的作用 Arulmozhi[42]在研究灯台叶乙醇提
取物对链脲霉素诱导糖尿病大鼠的降糖作用过程中发现,
它能显著降低血糖、糖化血红蛋白和脂质过氧化水平,同
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图 2 主要萜类结构式
时具有增加体质量、肝糖原、肌糖原和抗氧化的能力。Ra-
gasa等[43]从灯台叶二氯甲烷提取物中分离到 cycloeu-
calenol、cycloartanol、lupeol、lupeol acetate 和 betulin 等萜
类成分,通过葡萄糖耐受实验 (OGTT)发现,前三者的混
合物具有降血糖活性。
2. 6 抗肿瘤作用 灯台叶醇提物对人卵巢癌细胞 C200、
人乳腺癌细胞 MNK-7 及 MCF-7、人肝癌细胞 SNU-398 及
H22、Lewis 肺癌细胞、人宫颈癌细胞、HepG2、KB、HL-
60、人皮肤癌细胞等具有明显的抑制作用,但机制尚不明
确[40-41,44-49]。韩芳[49]采用 MTT 法和 PI /Annexin-V 染色法,
研究灯台叶醇提物对体外培养的肿瘤细胞增殖和凋亡的影
响,发现其质量浓度在 0. 1 ~ 2. 0 mg /mL时,能剂量依赖性
地显著抑制人卵巢癌、乳腺癌和肝癌细胞的增殖,具有一
定细胞毒作用,可能是灯台叶抗肿瘤的机制之一;在 1 ~ 1
000 μg /mL时,对鸡胚尿囊膜血管生成有显著抑制作用,
也可能与其抗肿瘤作用相关。另外,其高剂量组能显著提
高 C57BL /6 荷瘤小鼠血清中干扰素-γ、白细胞介素-6、白
细胞介素-10 的水平,对肿瘤生长有明显抑制作用,而且呈
剂量依赖性增加,从免疫水平提高了荷瘤小鼠的抗肿瘤作
用[41]。同时,灯台叶醇提物还能清除自由基、降低移植瘤
细胞的活性氧 ROS,减轻机体氧化损伤,进而抑制肿瘤
生长[40]。
3 灯台叶及其制剂的质量控制研究
3. 1 我国现行中药质量控制概述 目前,中药质量控制模
式借鉴了西药的相关方法,以鉴别、检查和含有量测定为
主[50],但中药成分复杂,构效关系不明确,疗效是多成分
协同作用的结果,故仅以单个或多个成分的含有量来评价
中药质量具有一定局限性,不能满足现代中药质量控制的
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需要。近年来,指纹图谱技术应运而生,其注重宏观规律
的特征分析,强调多个成分相对稳定的比例关系及位置顺
序相互制约的完整色谱或综合光谱特征[51],凭借“整体
性”和“模糊性”的特点,在中药质量控制中得到广泛应
用,主要有紫外光谱、红外光谱、薄层色谱、液相色谱、
气相色谱、毛细管电泳及相关联用技术。但由于中药化学
成分受产地、采收期、加工方法、气候、土壤等因素影响
较大,在指纹图谱中选择合理的指纹信息进行中药质量控
制和评价相对困难,部分药物的化学成分难以用一般的光
谱和色谱来体现[52]。因此,研究者又提出了 “谱效学研
究”、“等效成分群”、 “生物效价研究”、 “组分结构理
论”、“中药基因组学”、“中药代谢组学”、“中药蛋白质组
学”等理论和方法,应用于中药质量控制研究[53-54]。
3. 2 灯台叶及其制剂质量控制 目前,灯台叶及其制剂的
质量标准滞后。该药材曾收载于《云南省药品标准》1974
年版和《中国药典》1977 年版,在 2013 年纳入《云南省
中药材标准》2005 年版第七册,其质量控制仅涉及以对照
药材为参照的薄层鉴别[55]。1977 年至 2013 年之间,由于
相关质量控制仅局限于颜色反应,导致市场上灯台叶的质
量参差不齐,安全性和有效性无法得到保障。灯台叶片和
灯台叶颗粒分别收载于《国家中成药标准汇编 (中成药地
方标准上升国家标准部分) ,内科,肺系 (二)分册》和
《中国药典》2015 年版 (一部) ,在薄层鉴别的基础上,增
加了鸭脚树叶碱含有量测定[56]。另外,有关灯台叶及其制
剂的质量控制研究鲜有报道[57-59]。梁聂彦、陈学松建立面
条树中鸭脚树叶碱的 HPLC含有量测定法[57]。饶高雄等[58]
建立灯台叶颗粒中鸭脚树叶碱含有量分析的 HPLC 法。刘
璇等[59]建立同时测定灯台叶中鸭脚树叶碱、齐墩果酸和熊
果酸含有量的方法。药材的质量直接决定了制剂的质量,
进而影响到临床用药的安全性和有效性,如今灯台叶及其
制剂的质量标准在不断提升,但仍处于较低的水平。
4 临床应用
4. 1 灯台叶在呼吸系统疾病治疗中的应用 灯台叶是傣医
临床常用药物,被广泛地用于治疗拢答儿 (颌下淋巴结肿
大)、拢达儿 (腮腺肿大)、乃多皇迈唉列习特来 (肺热咳
嗽,痰多)、拢唉 (嗽) ,习火 (哮喘)、拢唉习火 (咳嗽,
喘息不定)等呼吸系统疾病[60]。傣医经典著作 《档哈雅
龙》中记载到,咳嗽者取摆埋丁别 (灯台树叶)30 g 煎
汤,以红糖为引内服;小儿咳喘病取贺麻年 (苦卡拉)15
g,摆埋丁别 (灯台树叶)15 g,毫怀咪王 (钩藤对钩)15
g,穿心莲 10 g,捣细粉,化水调匀,药粉搓成小丸药内
服;《傣医方剂学》中治疗拢达儿 (腮腺肿大)时,取摆
埋丁别 (灯台树叶)鲜品适量,加少许青黛,捣烂外敷患
处;拢唉习火 (咳嗽,喘息不定)取贺罗呆哼 (黄姜花
根)20 g,摆埋丁别 (灯台树叶)20 g,煎汤服;西双版
纳州傣医医院制剂室生产的灯台叶止咳合剂和棉榔青口服
液均为灯台叶制剂,十几年来由于疗效显著,备受广大患
者认可[61-62]。
4. 2 灯台叶在疑难杂症治疗中的应用 “风病理论”是
傣医基础理论的重要组成部分,灯台叶除被用于治疗呼吸
系统疾病外,还常应用于风病等疑难杂症,如农杆农暖
(乳腺炎、乳腺肿痛)、“拢匹勒”(月子病致头昏目眩,周
身酸痛麻木)、拢梦曼 (荨麻疹)、拢洞烘 (斑疹瘙痒)、
纳勒冒麻、纳勒冒沙么 (妇女闭经、痛经)、拢梅接路多
火档 (风湿肢体关节疼痛)、拢沙力坝 (狂躁型精神病)
和“拢匹把母” (癫痫病)。 《档哈雅龙》中写到,治疗
“拢匹把母”(癫痫病)时取摆埋丁别 (灯台树叶)捣细蒸
熟,加分因 (阿魏) ,地利糯过 (犀鸟唾液)15 g,喃麻威
(佛手叶)调匀外包; “农兵杆兵飞” (乳房包块、生疮)
取摆埋丁别 (灯台树叶)捣烂,加红糖外包; “沙力坝”
不言不语,取摆庄 (酸桔叶)、摆埋丁别 (灯台树叶)捣
烂外包[61,63]。
5 小结与展望
灯台叶为我国传统傣药材,在民间药用历史悠久,主
产于广东、广西、海南、福建、云南、台湾等地,收载于
《中国药典》(1977 年版)和《云南省中药材标准》(2005
年版)第七册,被广泛地用于拢答儿 (颌下淋巴结肿大)、
乃多皇卖唉列习特来 (肺热咳嗽)、习火 (哮喘)等呼吸
系统疾病和农杆农暖 (乳腺疾病)、“拢匹勒”(月子病)、
拢梦曼 (荨麻疹)、“拢匹把母”(癫痫病)等疑难杂症的
治疗与预防。灯台叶富含生物碱、萜类和黄酮,其中以生
物碱和萜类的研究较为深入,是其主要活性成分。其中,
单萜吲哚类生物碱 (鸭脚树叶碱、鸡骨常山碱、灯台碱、
土波台文碱)是灯台叶止咳平喘、抗炎的主要物质基础;
熊果酸、齐墩果酸、cycloeucalenol、cycloartanol、lupeol 与
其抗肿瘤、调节血脂、血糖、免疫等药理作用相关。
虽然灯台叶在化学和药理研究方面取得了一定进展,
但仍然存在一些问题。首先,灯台叶执行标准较低,质量
控制研究较少,因此建立该药材的质量控制及评价方法是
亟待解决的问题,也是保证临床疗效的关键。其次,灯台
叶现代研究不能脱离傣医药基础理论的指导,但目前大多
数相关研究是从天然产物的角度出发,对临床的指导意义
较小[64-65]。例如,灯台叶治疗农杆农暖 (乳腺疾病)、“拢
匹勒”(月子病)、拢洞烘 (斑疹瘙痒)、拢沙力坝 (狂躁
型精神病)、“拢匹把母”(癫痫病)等疾病并没有得到现
代研究的证明。同时,灯台叶醇提物抗肿瘤、调节血脂血
糖等作用不易在临床上推广,因其提取方法与传统水煎煮
相违背[40-42,66]。基于以上问题,本课题组今后将借助现代
手段,以傣医药基础理论为指导,探索灯台叶的质量控制
方法和治病防病的物质基础与作用机制,为开发相关新药
提供实验依据,使民族医药为人类的健康事业贡献一份
力量。
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