全 文 ：收稿日期: 2007 09 24
作者简介: 陆春 ( 1978 ) ,女 ,壮族 ,广西邕宁人 ,助理工程师 ,从事制药工作。 * 通讯作者。
薜荔中多糖提取的试验
陆　春1 ,　莫肇高1 ,　梁家作2 ,　熊柳梅3*
( 1.康诺生化制药有限责任公司 ,　广西南宁　 530002;　 2.广西农业科学院蔬菜研究中心 ,　南宁　 530007;
3.广西农业科学院土壤肥料研究所 ,　南宁　 530007)
摘要: 对薜荔中果胶和可溶多糖进行提取分离试验 ,结果表明 ,从薜荔果实的种子分离得到的果胶由鼠李糖、
葡萄糖组成 ,可溶多糖组成中含有葡萄糖 ,果胶中有 4部分不同的分子量 ,多糖中有 2部分不同分子量 ,在 3400cm-1、
2900cm-1、 1600cm-1、 1200～ 1000cm-1有糖类的特征吸收峰。
关键词: 薜荔 ;果胶 ;多糖 ;提取
中图分类号: S949. 95　 文献标识码: A　　　　　文章编号: 1002— 8161( 2007) 06- 0678- 03
Extraction of polysaccharides fromF icus pumila L.
LU Chun
1 , MO Zhao-gao
1 , L IANG Jia-zuo
2 , XION G Liu-mei
3*
( 1. Nanning Kangnuo Biochemical Pharmaceutical Co L td. , Nanning 530002, China; 2. Vegetable
Research Centre , Guangx i Academy of Agricultural Sciences, Nanning 530007, China; 3. Soil and
Fertilizer Research Institute, Guangx i Academy of Agricultural Sciences , Nanning 530007, China )
Abstract: The pectin and w ater-soluble po ly sa ccharide o fFicus pumila ( L. ) f ruits wa s ex tract ed and isolated.
The results show ed that the pectin isolated fr om the seeds fr uit o fFicus pumila consisted of rhamnose and gluco se.
The w ater so luble po lysaccha ride consisted o f glucose. Th e pectin and the po ly saccha ride consisted o f 4 and 2 dif-
ferent mo lecula r w eight frac tions, respectiv ely, which show ed cha racte ristic absorptions spectrum o f ca rbohydrate
at 3400cm-1、 2900cm-1 , 1600cm-1 , 1200-1000cm-1 respectiv ely.
Key words: Ficus pumila ( L. ) ; pectin; po lysaccha ride; iso la tion
　　薜荔 ( Ficus pumila L. )属桑科榕属植物 ,别名
凉粉果 ,常绿攀缘或匍匐灌木 ,主要分布在我国云
南、广西、湖南、四川、湖北等地。薜荔果实富含果胶 ,
高达 13. 5%～ 14. 1% [ 1, 2]。多糖作为一种无细胞毒的
免疫促进剂 ,具有抗菌、抗病毒、抗寄生虫、抗肿瘤、
抗辐射、抗衰老等功能 ,在医疗保健中的应用日益广
泛。同时 ,多糖生物资源的开发利用和研究日益活
跃 ,成为天然药物、生物化学、生命科学的研究热点。
薜荔资源丰富 ,容易种植 ,其药用价值和营养价值具
有很大开发潜力 ,但目前对薜荔的研究尚很少 ,对其
果胶 (多糖 )提取的研究报道就更少。 探讨薜荔中果
胶的提取 ,不仅可以充分开发利用薜荔丰富的野生
资源 ,而且还可为深入研究多糖结构及其与多糖活
性关系提供借鉴 ,也有利于解释传统中药的药理。
1　材料与方法
1. 1　材料
干薛荔籽 ,采自广西隆安县。 主要仪器与设备:
旋转蒸发器 ,循环水式多用真空泵 ,恒速搅拌器 ,光
栅分光光度计 ,红外光谱仪。主要试剂: 甲醇 ,无水乙
醇 ,三氯甲烷 ,乙酸乙酯 ,甲酸 ,浓硫酸 ,苯酚 ,茚三
酮 , Sephadex G50,薄层析硅胶 GF250( 60型 ) ,羧甲
基纤维素钠 ( CMC)。
1. 2　方法
1. 2. 1　多糖的提取分离　 ( 1)脱脂: 取一定量的薜
荔籽 ,常温下用工业甲醇浸泡 48h。 ( 2)提取: 将浸泡
液抽出 ,薜荔籽晾干后用蒸馏水浸泡 2h ,待胶质吸
涨后 ,以少量蒸馏水冲洗 ,用纱布压滤 ,得到粘稠溶
·678· 广西农业科学　 2007年第 38卷第 6期
胶状提取液 ,淡黄色。重复 2次 ,合并滤液。 ( 3)分级:
将提取液静置 24h,提取液分为上层凝胶不溶区和
下层澄清可溶区 ,用布滤分离 ,得到果胶和可溶多
糖。 ( 4)分离:在果胶中加入 3倍体积的无水乙醇中 ,
沉淀 ,为胶状。静置 0. 5h后 ,过滤除去水和乙醇 ,将
沉淀浸泡于乙醇中洗涤 ,静置 24h后 ,过滤获得沉
淀 ,用旋转蒸发器真空加热干燥 ,得到果胶粗产品。
1. 2. 2　除蛋白　取适量果胶和可溶多糖分别溶于
水 ,在滤纸上点样 ,待样品溶剂挥发干燥后 ,点样处
滴加 1%茚三酮 -甲醇溶液 ,于烘箱内 80℃加热
10min,与空白 (只滴茚三酮溶液 )对比 ,有紫色斑点
则表明含有蛋白质。两种溶液中加入等量体积氯仿 ,
混合剧烈振荡 20min以上 ,静置 ,待分层后用分液漏
斗小心分出上层水层。反复多次 ,直至水层用茚三酮
溶液检测不含蛋白质为止。
1. 2. 3　分子量分布　用蒸馏水充分溶胀 Sephadex
G50,约48h。使凝胶分散在水中 ,装入柱中 ( 2. 0cm×
75. 0cm)。柱子下口预先塞好棉花 ,打开下口让水流
出 ,凝胶自然沉降。用蒸馏水反复洗至柱面不再下降
为止。各取适量果胶和可溶多糖溶于蒸馏水中 ,各取
5mL上样。为了避免样品液被稀和柱面搅动影响洗
脱结果 ,先打开下口放水 ,待水面刚到柱面时停止放
水 ,用滴管沿着柱子内壁小心加入样品液 ,最后用少
量蒸馏水冲洗柱子内壁。然后开始洗脱 ,以蒸馏水为
洗脱剂 ,控制流速约为 0. 6mL /min,以每管 3mL收
集流出物。取少量用苯酚硫酸跟踪检测 ,保留含糖部
分。所保留各管各取 0. 50m L流出物 ,加 0. 50mL 5%
苯酚溶液 ,摇匀。迅速加入 1. 0mL浓硫酸 ,显色后放
置一定时间 ,并水冷至室温 ,颜色稳定后 ,以空白
( 0. 50mL蒸馏水+ 0. 50mL 5%苯酚溶液+ 1. 0mL
浓硫酸 )作为参比 ,于 490nm处 ,用 1cm比色皿 , 722
光栅分光光度计测吸光度。显色稳定时间的确定:取
一份溶液显色 ,间隔一定时间测定吸光度 ,结果表 1。
表 1　显色时间对样品溶液吸光度的影响
显色时间
(min)
1 2 3 4 5 6 7
果糖 0. 606 0. 577 0. 540 0. 531 0. 530 0. 530 0. 529
可溶多糖 0. 206 0. 165 0. 157 0. 148 0. 149 0. 148 0. 150
由表 1可以看出 ,显色 5min后 ,样品吸光度基
本不变。所以 ,在用苯酚-硫酸法测定此两种多糖时 ,
显色 5min即可。
1. 2. 4　组成成分分析　 ( 1) TLC板制备:在适量的
质量分数为 1% ～ 2%羧甲基纤维素钠 ( CMC)溶液
中加入适量薄层层析硅胶 GF254( 60型 )。加数滴丙
酮 ,搅拌均匀后倒在干净的载玻片 ( 7. 5cm× 2. 5cm )
上 ,轻轻振动均匀 ,放置过夜晾干 ,于烘箱中 110℃活
化 1h。 ( 2)显色检出方法: 1g苯酚加 5mL浓硫酸于
95m L乙醇中。 检出手续:喷洒 ,在 110℃加热 10～
15min,加热将加深斑点。 ( 3)分别称取果胶和可溶
多糖各 1g ,加入 60mL 30%硫酸 ,使其全部溶解 ,回
流 15h以上水解。水解后溶液用 BaCo3中和至中性 ,
减压抽滤取清液。清液用旋转蒸发器真空加热蒸干 ,
少量甲醇溶解。 与鼠李糖、 D-葡萄糖、 D-甘露糖、 D-
半乳糖、 D-木糖、 D-树胶醛糖并列点板 ,进行展开和
显色。
1. 2. 5　红外光谱　采用 KBr固体压片法测定果胶
和可溶多糖的红外光谱 ,测定范围为 4000～
400cm
-1。
2　结果与分析
2. 1分子量分布
凝胶柱层析结果 (图 1,图 2)不是单一对称的峰
型 ,说明果胶和可溶多糖都不是均一组分的多糖。其
中 ,果胶有 4个峰 ,可溶多糖有 2个峰 ,说明从薜荔中
提取的果胶中可能含有 4部分不同的分子量 ,可溶
多糖中有 2部分不同分子量。
2. 2　组成成分分析
水解产物与 6种标准单糖并列点板薄层层析 ,
比较比移值。果胶的水解产物与鼠李糖、葡萄糖有相
同比移值的斑点 ;可溶多糖的水解产物与葡萄糖有
相同比移值的斑点 ,另有一斑点和 6种标准单糖均
不相同。可知 ,从薜荔中提取的果胶和可溶多糖均为
·679·陆春等:薜荔中多糖提取的试验
杂多糖 ,组成果胶的主要单糖为鼠李糖和葡萄糖 ,可
溶多糖组成中含有葡萄糖。
2. 3　红外光谱分析
红外图谱 (图 3,图 4)显示 ,果胶和可溶多糖均出
现糖类特征吸收峰。 但在 1600cm-1左右的吸收峰强
度存在很大差异 ,这是因为果胶是一种脂。 1200～
1000cm
-1间的吸收峰 ,是由两种 C-O伸缩振动所引
起的 ,其中一种是 C-O-H的 ,一种是糖环的 C-O-C。
在 950～ 800cm-1均没有吡喃环骨架振动峰 ,估计不
是吡喃型糖环。
3　小结
试验结果表明 ,从薜荔果实的种子分离得到的
果胶主要由鼠李糖、葡萄糖组成 ,可溶多糖组成中有
葡萄糖。多糖作为功能性食品和药物 ,由于其完全无
毒副作用和多方面的生理活性 ,因而具有其他药物
难以比拟的优势。目前对多糖的研究依然多为对资
源的挖掘和粗提物的生理活性实验 ,对多糖的化学
组成和结构研究方面仍然有许多具有挑战性的工
作。进一步深入研究多糖结构及其与多糖活性关系 ,
也有利于解释传统中药的药理。
参考文献:
[1 ]　刘晓庚 ,丁悦琴 ,陈梅梅 . 薛荔果中几种生命元素和果
胶的变化研究 [ J ].中国野生植物资源 , 1995, ( 2): 15-
18.
[ 2]　颜文斌 ,姚茂君 ,谷臣华 .薜荔籽的基本成分分析 [ J].
吉首大学学报 , 2000, 21( 2): 1-3.
(责任编辑　卢庆南 )
·680· 广西农业科学　 2007年第 38卷第 6期