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蟛蜞菊对小白鼠的急性毒性试验



全 文 :蟛蜞菊对小白鼠的急性毒性试验
梁方方1 ,莫毅2 ,赖志强1 ,杨家晃1 ,何仁春1 ,麦伟虹1
(1.广西畜牧研究所 ,南宁 530001;2.广西人口和计划生育研究中心 ,南宁 530021)
摘要:为全面评定蟛蜞菊的安全性 , 在进行蟛蜞菊对肉兔的慢性毒性试验的基础上 , 本试验采用灌胃法 ,通过对小白鼠的
脏器系数比较及组织病理学观察 ,测定了蟛蜞菊对小白鼠的急性毒性作用。试验结果如下:①试验结束后 , 对照组和试验组
小白鼠都无死亡;②宰杀的试验组小白鼠的各脏器无明显肉眼可见剖检病变;③试验组小白鼠的各脏器系数与对照组的差异
不显著(P>0.05);④试验组小白鼠肝脏的组织形态发生轻微变化 , 其他脏器正常。研究结果表明 , 蟛蜞菊可安全用于动物
饲料。
关键词:蟛蜞菊;急性毒性;小白鼠
中图分类号:S859.81     文献标识码:A     文章编号:1671-7236(2009)03-0223-03
  蟛蜞菊(Wedelia chinensis Merr .)属多年生半
直立或匍匐草本植物 ,能与多种杂草竞争 ,对光照反
应不敏感 ,能在各类瘦瘠的土壤上生长 ,但以在肥沃
而湿润的地方生长最盛 。兔 、鹅等小型草食动物喜
食蟛蜞菊 。为了评定蟛蜞菊的饲用价值 ,笔者曾进
行了桂牧 1号与蟛蜞菊饲喂肉兔效果比较试验及不
同比例蟛蜞菊粉饲喂肉兔效果比较试验(梁方方等 ,
2006;梁方方等 ,2007),各经 49 d试验 ,通过测定肉
收稿日期:2008-08-04
作者简介:梁方方(1979-),女 ,广西人 ,硕士 ,助理研究员 ,研究
方向:反刍动物营养与饲料开发。
通信作者:赖志强(1955-),男 ,广西人 ,研究员, 主要从事牧草
选育与栽培。 E-mai l:zqlpa@126.com
基金项目:广西青年基金项目(桂科青 0640034)。
兔部分血常规指标 ,血清生化指标及内脏器官的重
量 ,评定了蟛蜞菊对肉兔的慢性毒性作用 ,结果表
明 ,肉兔对蟛蜞菊无不良反应。为全面评价蟛蜞菊
的饲用价值 ,进行了小白鼠的急性毒性试验 。急性
毒性试验的主要目的是在饲喂药物过量的情况下 ,
测定小白鼠致死性 ,识别明显的体征和症状。
1 材料与方法
1.1 试验动物 昆明系清洁级小白鼠 ,购自广西医
科大学实验动物中心。
1.2 蟛蜞菊汁液的制备 用细胞匀浆器把剪细的
蟛蜞菊茎叶研磨成汁液 ,按 1∶1的比例往里面加蒸
馏水 ,稀释浓稠的蟛蜞菊汁液 ,用注射器将汁液吸
出 ,转移到移液管里备用。
1.3 试验设计 把新鲜的蟛蜞菊茎叶研磨成汁液 ,
养及活跃思维等作用;缬氨酸 、亮氨酸 、异亮氨酸等
氨基酸能改善运动性疲劳 ,提高大鼠的运动耐力;蛋
氨酸 、胱氨酸等含硫氨基酸具有重要的生理调节功
能 ,对肝脏也有积极保护作用(明会等 , 2000)。肉中
的鲜味主要来源于肌苷酸和风味氨基酸 ,谷氨酸钠
与肌苷酸的协同作用 ,可收到数十倍的呈味效果 ,可
以增加肌肉的风味 ,改善肉质 。本试验结果显示 ,武
定阉割鸡鸡肉中人体必需氨基酸和风味氨基酸含量
显著高于普通武定鸡 。这是因为阉割后武定鸡的生
理生化活动增强 ,血液中丙氨酸氨基转移酶(A LT)
和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性明显升高 。
转氨酶活力反映了氨基酸代谢强度的大小 ,因此武
定鸡阉割后氨基酸代谢增强 ,促进了机体内各种氨
基酸的合成 ,提高了体内各种氨基酸的含量 ,使武定
阉鸡具有极高的品质及食用价值。
4 结论
在本试验条件下 ,阉割能使武定鸡肌肉的 pH 、
嫩度 、失水率 、熟肉率 、肌纤维直径 、人体必需氨基
酸 、风味氨基酸等指标显著改善 ,阉割能提高武定鸡
的营养价值 ,改善风味 ,提高鸡肉品质质量 。
参 考 文 献
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再灌胃。用新鲜蟛蜞菊茎叶提取汁液 ,一方面最大
限度的保持了蟛蜞菊的化学成分 ,在不知道蟛蜞菊
是否有毒 ,有毒成分是什么的情况下 ,采用汁液灌胃
法最具代表性;另一方面 ,研磨获得的汁液非常利于
灌喂 ,能保证试验按质按量完成 。由于蟛蜞菊在肉
兔的慢性毒性试验中 ,对肉兔无不良反应。因此 ,在
本试验中 ,只设 1 个对照组和 1个试验组。试验组
采用小白鼠能承受的最大剂量灌喂 。
1.4 试验动物分组及管理 选择体况良好 、健康 、
体重相近的昆明系清洁级小白鼠 24 只 ,公母各半 ,
分为 2组 ,每组 12只 。为防止交配 ,公母分开饲养 ,
分 4个笼装 ,每个笼 6只 。试验Ⅰ组为对照组 ,灌喂
蒸馏水 。试验 Ⅱ组为试验组 ,灌喂蟛蜞菊汁液。按
小白鼠能承受的最大剂量 ,对照组和试验组小白鼠
的灌喂量都是 1 mL/只。使用注射器 ,每天灌胃 1
次 ,早上空腹前灌胃 ,灌胃后投食。前 7 d 为预试
期 ,后 7 d为正试期。日常对小白鼠的饲养管理按
常规进行 ,每天投食 3次 ,自由采食及自由饮水 ,每
周打扫卫生 2次(丁荣光 ,1994)。
试验过程中观察小白鼠的死亡情况及精神状
态 ,并做好记录 。试验结束后捕杀全部小白鼠 ,剖
检 ,逐一观察并记录脏器的变化 。分别从试验组和
对照组中选择 4只小白鼠 ,公母各半 ,做脏器系数测
定及组织切片观察。
1.5 病理变化观察及脏器系数测定 试验的第 15
天 ,称重后 ,剖检全部小白鼠 ,观察病变并取小白鼠
的心 、肝 、脾 、肾 、肺 、大脑 、小脑 ,称重后 ,用 100 mL/
L 中性福尔马林固定 ,石蜡包埋 ,切片厚 5 ~ 6 μm ,
HE染色 ,显微镜观察 。计算称重后的心 、肝 、脾 、
肾 、肺的脏器系数。
1.6 测定指标 试验后小白鼠的体重;小白鼠的
心 、肝 、脾 、肾 、肺 、大脑 、小脑的重量;小白鼠的脏器
系数:心系数 、肝系数 、脾系数 、肾系数 、肺系数;心 、
肝 、脾 、肾 、肺 、大脑 、小脑的组织切片 。脏器系数:是
指某个脏器的湿重与单位体重的比值 ,通常以 100 g
体重计 。
2 结果分析与讨论
2.1 临床观察 整个试验过程中 ,对照组和试验组
的小白鼠采食 、饮水均正常 ,无一死亡 。但试验组小
白鼠的精神状态比对照组小白鼠的亢奋。说明蟛蜞
菊不含对小白鼠致死的物质 ,但含对小白鼠起兴奋
作用的物质 。
2.2 小白鼠脏器病理变化观察 试验结束后 ,剖杀
全部小白鼠 ,观察小白鼠的心 、肝 、脾 、肾 、肺的病理
变化。结果表明 ,试验组小白鼠的各脏器无明显肉
眼可见剖检病变。
2.3 蟛蜞菊对小白鼠脏器系数的影响 对脏器系
数的测定 ,结果见表 1。对表 1中对照组和试验组
小白鼠的各脏器系数分别做 t检验 ,经检验 ,试验组
小白鼠的心系数 、肝系数 、脾系数 、肾系数 、肺系数与
对照组小白鼠的差异不显著(P >0.05)。结果表
明 ,小白鼠灌喂蟛蜞菊汁液后 ,蟛蜞菊对小白鼠的
心 、肝 、脾 、肾 、肺的脏器系数没有影响 。由于动物的
某些脏器(如心 、肝 、肾 、肺等)有特异的代偿机能 ,如
果对脏器没有实质性的损害 ,其脏器系数可能变化
不大 ,这与小白鼠脏器病理变化观察结果相符。而
脏器的组织形态学变化早于脏器系数的变化 ,因此
脏器组织形态学的变化是检查药物对脏器影响较灵
敏的方法之一 ,蟛蜞菊对小白鼠的影响 ,有赖于小白
鼠脏器组织形态学的观察(王冉等 ,2005)。
表 1 小白鼠的脏器系数
对照组 试验组
小白鼠编号 12 8 9 11 2 5 1 6
体重(g) 29.7 29.05 27.85 27.01 31.4 32.38 26.6 26.59
心重(g) 0.2 0.15 0.12 0.13 0.16 0.23 0.14 0.14
系数(%) 0.6734 0.5164 0.4309 0.4813 0.5096 0.7103 0.5263 0.5265
肝重(g) 1.62 1.39 1.24 1.4 1.63 2.02 1.22 1.35
系数(%) 5.4545 4.7849 4.4524 5.1833 5.1911 6.2384 4.5865 5.0771
脾重(g) 0.16 0.12 0.13 0.14 0.13 0.21 0.15 0.12
系数(%) 0.5387 0.4131 0.4668 0.5183 0.4140 0.6485 0.5639 0.4513
肺重(g) 0.22 0.16 0.19 0.19 0.19 0.23 0.19 0.21
系数(%) 0.7407 0.5508 0.6822 0.7034 0.6051 0.7103 0.7143 0.7898
肾重(g) 0.37 0.33 0.29 0.33 0.41 0.41 0.3 0.28
系数(%) 1.2458 1.1360 1.0413 1.2218 1.3057 1.2662 1.1278 1.0530
2.4 脏器组织形态学观察 试验组和对照组肝脏 标本都有不同程度水变性 、脂肪变性及灶状慢性炎
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细胞浸润 ,试验组水变性病变较重 ,不同性别间无明
显差异;两组肾标本均有轻度肾小管水变性 , 血管
球 、肾小囊 、肾间质血管等结构未见明显异常;两组
脑标本均有小灶状慢性炎细胞浸润及小软化灶 ,但
两组间均无明显差异 ,不同性别间亦无明显差异 。
大脑神经元 、小脑蒲肯野细胞和神经胶质细胞未见
明显异常;心内膜 、心肌 、心外膜组织结构和细胞形
态未见明显异常;肺内支气管 、肺泡结构清晰 ,间质
血管及结缔组织结构清晰 ,未见明显异常;脾被膜 、
红髓 、白髓及边缘区结构未见异常;脾索 、脾窦结构
清晰 ,可见骨髓外造血 ,未见异常;精原细胞 、精母细
胞 、精子 、支持细胞 、间质未见明显异常 。结果表明 ,
心 、肺 、脾和睾丸标本均未见异常。说明本试验中小
白鼠主要受影响的脏器是肝脏 。
笔者测定 ,新鲜蟛蜞菊中有毒物质香豆素的含
量约为 24.278 mg/kg ,而小白鼠口服香豆素的半致
死量为 0.47 g/kg 。体重 30 g 的小白鼠 ,需服 14.1
mg 的纯香豆素才会中毒。如果小白鼠采食新鲜的
蟛蜞菊 ,要 1次吃完 0.5808 kg 才会中毒 。从小白
鼠采食量方面考虑 ,小白鼠 1 次不可能进食那么多
鲜蟛蜞菊 。因此 ,本试验不会出现小白鼠死亡现象 ,
但小白鼠的脏器会受影响 。本试验结果与预期结果
相符 。
3 小结
目前 ,蟛蜞菊属植物已知的化学成分主要以黄
酮类 、萜类成分为主 ,此外还包括有机酸类 、酚酸类 、
香豆素类 、甾体类 、三萜皂甙类等。据有关文献报
道 ,蟛蜞菊属植物在许多国家作为民间药 ,具有保肝
利胆 、抗病毒 、抗炎等功效 , 《新编植物志》中记载蟛
蜞菊W.chinensis具有清热 、解毒 、祛瘀 、消肿的功
效 ,主要用于治疗白喉 、百日咳 、痢疾 、痔疮 、跌打损
伤 ,南方各省民间常用于治疗咽喉炎 、喉痹 、喉蛾等。
福建省卫生防疫站曾试用于预防麻疹 。在笔者进行
的蟛蜞菊对肉兔的慢性毒性试验中 ,肉兔对蟛蜞菊
无不良反应;本试验中蟛蜞菊对小白鼠的急性毒性
作用表明 ,蟛蜞菊对试验组小白鼠肝脏的组织形态
学轻微影响 ,说明蟛蜞菊可安全用作动物饲料。
参 考 文 献
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Acute Toxicity Test ofWedelia Chinensis to Mice
LIANG Fang-fang1 , MO Yi2 , LAI Zhi-qiang1 , YANG Jia-huang1 , HE Ren-chun1 , MAI Wei-hong1
(1.Guangxi Institute of Animal Science , Nanning 530001 , China;
2.Guangx i Re search Cente r of Population and Family P lanning , Nanning 530021 , China)
Abstract:In order to fully eva luate the safety o f the Wedelia chinensis , ba sed on the chronic tox icity test of Wedelia
chinensis to rabbits , w e conducted the acute to xicity test o f Wede lia chinensis to mice administered by or al.In the test , we ob-
serv ed the histopathology of the mice and compared their viscera coefficients.The results showed that:①In the cour se o f the
test , mice of the contro l o r test g roup didn t die;②The re wa s no patho lo gical change been found in v iscera , af te r mice of the
test g r oup w ere killed;③Viscera coef ficients of mice w ere no significant difference(P >0.05)betw een the contr ol and test
gr oup;④Liver tissue of mice in test g roup changed slightly , while o the r viscera had no change.I t indicated that:Wedelia
chinensis can be safely used a s animals fo rage.
Key words:Wedelia chinensis;acute to xicity;mice
书 讯
  2004 、2005年合订本(每册 70元),并有少量 1999 、2000 、2001 、2002 、2003年合订本(每册 40元)。
如有订购者 ,请汇款到:100193中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 《中国畜牧兽医》编辑部收。
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