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蓝花参止咳化痰的药效及急性毒性试验



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蓝花参为桔梗科植物蓝花参 [Wahlenbergia
marginata (Thunb.) A. DC]的根或全草 [1],为民间
习用草药,福建省各地有分布且应用历史较久,又
名寒草、金线吊葫芦。本品性平,味甘微苦,有补虚
健脾、化痰止咳等作用,用于小儿疳积、自汗盗汗、
咳嗽痰多等症 [2]。 蓝花参的药学研究和临床报道
较多 [3-4],但药理研究报道甚少。 为适应蓝花参临
床应用需要, 我们进行了蓝花参止咳化痰的药效
试验和急性毒性(LD50)试验,现将结果报道如下。
1 实验材料
1.1 药物 蓝花参全草干品购于福州回春中药
饮片厂有限公司,批号 11010501,经福建中医药大
学药学院杨成梓副教授鉴定为 [Wahlenbergia
marginata (Thunb.) A. DC]。 远志购于福建中医药
大学国医堂;复方磷酸可待因溶液(南昌立健药业
有限公司,批号:K2111123)。
1.2 药物制备 蓝花参经水提醇沉得到水提液 1
g /mL、2 g /mL(含生药);醇沉物配成 1 g /mL(含生
药)备用。 远志水煎浓缩 1 g /mL(含生药)。
1.3 动物 昆明种小白鼠, 雌雄兼用, 体质量
(20±2)g,福建中医药大学实验动物中心代购,动
物许可证号:SCXK (沪)2007-0005, 合格证号:
SYXK(闽)2009-0001。
1.4 试剂与仪器 无水亚硫酸钠(上海联试化工
试剂有限公司,批号 :20110210);50%浓硫酸 (衡
阳市凯信化工试剂有限公司,批号:20100623);酚
红(广东省汕头市西陇化工厂,批号:20060602);
NaHCO3(济南市历城区鑫园化工有限公司,批号:
98417);752 型紫外光栅分光光度计 (上海正慧工
贸有限公司)。
1.5 SO2气体的制备 用 250 mL 抽滤瓶,侧口套
上 SO2 收集袋,瓶中盛 0.5 g 无水亚硫酸钠,滤瓶
塞上装一酸式滴定管,内吸 50%浓硫酸 5 mL。 打
开滴定管上的活塞, 浓硫酸滴入滤瓶与无水亚硫
酸钠反应,产生 SO2气体储存于收集袋中,应用时
用注射器吸取即可。
2 实验方法
2.1 止咳试验 采用二氧化硫引咳法 [5]。 小鼠 60
只,随机分成 6 组,每组 10 只,雌雄各半。实验设:
模型对照组;0.04 g / kg 复方磷酸可待因组 (阳性
对照组);10 g / kg 蓝花参组 (蓝花参高剂量组);5
g / kg 蓝花参组 (蓝花参中剂量组);2.5 g / kg 蓝花
参组 (蓝花参低剂量组);10 g / kg 蓝花参醇沉物
组。 各剂量药物均配成等体积 20 mL, 按体质量
0.2 mL / 10 g 灌胃;模型对照组小鼠给等体积饮用
水,连续灌胃 3 d,末次灌胃后 1 h,小鼠放入 250
mL 的玻璃容器内, 注入 SO2气体 10 mL, 观察并
记录 6 组小鼠咳嗽的潜伏期 (从注入二氧化硫至
发生咳嗽所需的时间)和 5 min 内咳嗽次数。
2.2 祛痰试验 根据气管酚红排泌法 [5]
2.2.1 酚红标准曲线制备 取 100 mg 的酚红,用
5%NaHCO3 溶解,配成每 mL 含 1 mg,顺次进行倍
比稀释成每 mL 含酚红 10、5、3、1、0.7、0.3、0.1 μg,
在紫外分光光度 546 nm 处测 OD 值,以酚红浓度
蓝花参止咳化痰的药效及急性毒性试验
张文清 1,念其滨 1,陈婷婷 2,叶 华 3,曾茂贵 3
(1. 福建卫生职业技术学院附属福建省级机关医院,福建 福州 350003;2. 福建中医药大学药学院,福建 福州 350122;
3. 福建中医药大学附属第二人民医院,福建 福州 350003)
关键词:蓝花参;止咳化痰;药效试验;急性毒性试验
中图分类号:R285.5 文献标志码:B 文章编号:1004-5627(2012)05-0042-02
收稿日期:2012-05-30
作者简介:张文清(1970—),女,副主任药师,主要从事医院药学临床研究。
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Journal of Fujian University of TCM October 2012,22(5)
福建中医药大学学报 2012 年 10 月 第 22 卷 第 5 期
42
DOI:10.13261/j.cnki.jfutcm.002709
表 1 6 组止咳疗效比较(x±s)
组 别
模 型 对 照 组
蓝花参高剂量组
蓝花参中剂量组
蓝花参低剂量组
磷 酸 可 待 因 组
蓝花参醇沉物组
小鼠 /只
10
10
10
10
10
10
潜伏期 / s
9.3±8.7
25.9±8.52)
19.9±7.01)
13.5±10.7
60.6±27.62)
31.1±20.21)
注:与模型对照组比较,1) P<0.05,2) P<0.01。
5 min 咳嗽数 /次
174.5±29.3
123.5±35.61)
162.7±16.6
156.8±24.7
105.1±39.02)
143.4±19.51)
表 2 6 组祛痰作用比较(x±s)
组 别
模 型 对 照 组
蓝花参高剂量组
蓝花参中剂量组
蓝花参低剂量组
远 志 组
蓝花参醇沉物组
小鼠 /只
10
10
10
10
10
10
OD 值
0.0253±0.0076
0.0406±0.02491)
0.0302±0.0083
0.0293±0.0142
0.0820±0.02662)
0.0380±0.01321)
注:与模型对照组比较,1) P<0.05,2) P<0.01。
酚红排出量 / (μg /mL)
0.5317±0.3417
0.6137±0.07981)
0.5427±0.2578
0.5317±0.2732
0.6289±0.31942)
0.5988±0.12431)
表 3 不同剂量蓝花参提取物致小鼠死亡情况
给药剂量 / (g / kg)
80
64
51.2
40.96
小鼠 /只
10
10
10
10
死亡 /只
10
6
3
0
死亡率 /%
100
60
30
0
为横坐标(X),OD 值为纵坐标(Y),求回归方程:
Y=17.11843X-0.77480 r=0.9995
校正酚红含量:酚红含量 /小鼠体质量
化痰率=(给药组的校正酚红含量 /模型组的
校正酚红含量)×100%
2.2.2 祛痰试验 小鼠 60 只, 随机分成 6 组,每
组 10 只,雌雄各半。 实验设:模型对照组;10 g / kg
远志浓缩液组 (阳性对照组);10 g / kg 蓝花参组
(蓝花参高剂量组);5 g / kg 蓝花参组(蓝花参中剂
量组);2.5 g / kg 蓝花参组 (蓝花参低剂量组);10
g / kg 蓝花参醇沉物组。 各剂量药物均配成等体积
20 mL,按体质量 0.2 mL / 10 g 灌胃 ;模型对照组
小鼠给等体积饮用水,连续给药 3 d,末次灌胃给
药 30 min 后, 小鼠腹腔注射 5%酚红 (500 mg /
kg),30 min 后处死小鼠,剥离气管周围组织,剪下
自甲状软骨下至气管分支处的一段气管, 放入盛
有 2 mL 生理盐水的试管中冲洗,再加入 5%NaH-
CO3 0.1 mL,离心取上清液,在波长 546 nm 处测
OD 值,代入回归方程,计算酚红量。
2.3 LD50 试验 经预试实验测得蓝花参提取物
引起动物 0%(Dn)剂量为 40 g / kg,引起 100%死
亡(Dm)的剂量为 80 g / kg。 按组间剂量比(1∶0.8),
试验设 4 个组,1~4 组小鼠蓝花参提取物剂量分
别为 80 g / kg、64 g / kg、51.2 g / kg、40.96 g / kg,配
成等体积 40 mL,按体质量 0.4 mL / 10 g 灌胃。 选
小鼠 40 只,随机分 4 组,每组 10 只,雌雄各半,小
鼠禁食不禁水 16 h,分别灌胃蓝花参提取物后,小
鼠恢复正常饲养,连续观察 2 周,纪录小鼠毒性反
应和死亡数。
3 结 果
试验结果见表 1~表 3。
第 5期 张文清等:蓝花参止咳化痰的药效及急性毒性试验
根据改良寇氏法计算,LD50为 58.54 g / kg,相
当临床日用量的 117 倍 。 LD50 95%的可信限为
54.4826~62.5974 g / kg。 结果表明蓝花参按有效
剂量给药急性毒性小,安全范围大。
4 结 论
试验表明用二氧化硫引咳法、 气管酚红排泌
法证明蓝花参水提醇沉液和醇沉物具有明显的止
咳化痰作用,LD50相当临床日用量的 117 倍,为蓝
花参的进一步开发利用提供了实验依据。
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