全 文 ：算盘子对溃疡性结肠炎大鼠细胞因子的影响
丁水平1 ,丁水生2 ,李涵志2
(1.华中科技大学同济医学院附属同济医院药学部 ,武汉　430030;2.广东省南海市南庄医院 ,528219)
[ 摘　要] 　目的:探讨中药算盘子提取物对溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型细胞因子的影响。方法:用 5%乙酸经结肠
灌注制备 UC 大鼠模型 ,分成对照组及药物组各 5只 , 选择未出现血性腹泻的大鼠 5只作为正常组 ,正常组和对照组每天
灌服0.9% NaCl溶液 2次 , 每次10 mL , 药物组每天灌服算盘子样品液 2次 , 每次10 mL , 3 周后处死 ,按 ELISA 法测定巨噬
细胞中肿瘤坏死因子(TNFα)和白细胞介素-6(IL-6)的含量。结果:药物组 TNFα和 IL-6 分别为(0.49±0.32)、(0.37±
0.15)ng·mL-1 ,明显低于对照组 , 与正常组无差异。结论:中药算盘子可以显著降低 UC 大鼠 TNFα和 IL-6的水平 ,有治疗
UC前景 。
[ 关键词] 　算盘子;结肠炎 , 溃疡性;肿瘤坏死因子α;白细胞介素-6
[ 中图分类号] 　R282.74　　　[ 文献标识码] 　A　　　[文章编号] 　1004-0781(2002)02-0076-02
Effects of Glochidion Puberum on the Production of TNFαand IL-6 in
Macrophage from Mice with Ulcerative Colitis
DING Shui-ping1 , DING Shui-sheng2 , LI Han-zhi2(1.Department of Pharmacy , Tongji Hospital Affiliated to the
Tongji Medical college , Huazhong University of Science and Technology , Wuhan 430030 , China;2.Nanzhuang
Hospital , Nanhai , Guangdong　528219 , China)
ABSTRACT　Objective:The aim is to study the effects of the extract from Glochidion Puberum (GP)on the production of TNFα
and IL-6 in macrophage from mice with ulcerative colitis(UC)induced by.　Methods:The animal model of UC was made by filling the
5%CH3COOH solution to the colon of 10 mice , who were randomly allocated to the control and treatment groups.5 normal mice were
used as normal control.10 ml of normal saline were fed to the control and the normal control mice , twice a day for a total of 3 weeks
before sacrifice.The same amount of Glochidion Puberum extract was fed to the mice in treatment group for the same period of time.The
ELISA method was employed to measure TNFαand IL-6.　Results:The contents of TNFαand IL-6 were 0.49±0.32 and 0.37±0.15 ,
respectively in the control group and significantly lower than those in the controls.However , no significant difference was found between
the control and the normal control mice.　Conclusion:GP can significantly lower the TNFαand IL-6 in mice with UC and might be
effective for treating UC.
KEY WORDS　Glochidion puberum;Ulcerative colitis;TNFα;IL-6
　　溃疡性结肠炎(ulcerative colitis ,UC)好发于 20 ～ 40
岁的患者 ,复发率较高 ,研究表明 ,白细胞介素-1(IL-
1)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素
(INF)、肿瘤坏死因子(TNF)在 UC的组织破坏及炎症
反应中起着重要作用 。肿瘤坏死因子α(TNFα)是最早
引起全身炎症反应的因子 ,TNFα※IL-1※IL-6是细胞
因子联级反应过程[ 1] 。大戟科算盘子属植物算盘子
[ Glochidion puberum (L)Hutch , 下简称 GP] ,属小灌
木 ,又名算盘珠 、野南瓜 、馒头果 、狮子滚球等 。该药具
有清热利湿 、祛风活络的功效 ,可用于感冒发热 、疟疾 、
急性胃肠炎 、消化不良 、痢疾 、风湿性关节炎 、跌打损
伤 、白带异常 、痛经等[ 2] 。通过民间走访调查 ,我们发
现该药用于治疗溃疡性结肠炎具有确切疗效 。笔者将
乙酸经肠腔灌注制得大鼠溃疡性结肠炎模型 ,通过 GP
提取物作用后 ,对 IL-6和TNFα进行定量测定 ,比较其
[ 收稿日期] 　2001-08-23
[ 作者简介] 　丁水平(1966 -), 男 , 湖北应城人 , 在读硕
士 ,主管药师 , 从事医院药学工作。
影响炎性因子水平的强度 ,以图佐证其疗效并寻找活
性部位。
1　材料与仪器
1.1　药材和试剂　药材:GP 产于湖北省应城市 ,经湖
北中医学院鉴定为大戟科算盘子属植物算盘子的干燥
地上部分。试剂:TNFα和 IL-6 试剂盒(北京邦定泰克
生物有限公司);新生小牛血清(NBS ,沈阳安迪生物高
科技公司 ,批号 991130);RPMI-1640细胞培养液(Fibco
公司生产);0.9%NaCl注射液(华中科技大学同济医
学院附属同济医院自制)。
1.2　动物　SD大白鼠 ,雄性 ,200 ～ 250 g ,华中科技大
学同济医学院实验动物学部提供。
1.3　仪器　CO2 培养箱(1815TC 型 , Shel-Lab 公司生
产);酶标仪(MK3型 , Labsystem Dragon公司生产)。
2　方法与结果
2.1　GP 样品液制备　取 10 kg GP 粉碎成粗粉 ,加水
煎煮 2次 ,每次 2 h ,合并水煎液 ,沉淀 24 h ,取上清液 ,
真空干燥器蒸干 ,得水提物 500 g ,每克相当于 20 g 生
·76· Herald of Medicine Vol.21 No.2 February 2002
药。取400 g 配制 10%的样品水溶液 。
2.2　大鼠溃疡性结肠炎模型的制备　将 0.5 mL 5%
乙酸用聚乙烯导管插入大鼠结肠内 ,作用10 ～ 20 s后 ,
注入 0.9%NaCl 5 mL ,冲洗 3次 。3 d后 ,选择未出现
血性腹泻大鼠 5只作为正常组 ,出现血性腹泻大鼠分
成2组 ,每组 5只 ,分别作为药物组和对照组。正常组
和对照组每天灌服 0.9%NaCl溶液 2次 ,每次 10 mL ,
药物组每天灌服样品液 2次 ,每次 10 mL ,持续饲养 3
周后处死 ,用已消毒的含 2%NBS 的 RPMI-1640液洗
出肠道巨噬细胞 ,再用含 10%NBS的 RPMI-1640液调
节巨噬细胞浓度为每毫升 2×106 个 ,于培养板每孔各
加入 1 mL ,置CO2 培养箱内培养 24 h ,用 RPMI-1640培
养液清洗培养板各孔 ,即得粘附于孔壁的鼠巨噬细胞。
2.3　TNFα和 IL-6标准曲线制备　按 ELISA检测法 ,
将TNFα和 IL-6试剂盒内标准品用 RPMI-1640 液作倍
比稀释 ,每个浓度作 2个孔 ,用酶标仪检测 ,制备两者
的标准曲线 ,结果在 0.1 ～ 6.0 ng·mL-1范围内 ,两者均
呈线性关系。表明在此法范围的 TNFα和 IL-6含量与
其相应的吸收值之间有良好的线性关系 ,正常组及对
照组 TNFα和 IL-6水平预试均在此范围内。
2.4　各组中大鼠 TNFα和 IL-6定量检测　分别取 1
mL 已备有鼠巨噬细胞样品于培养板孔中 ,每个样品做
5个孔 ,取样品上清液作 TNFα和 IL-6作定量检测 ,结
果见表 1。药物组与对照组比较 ,差异有显著性 ,实验
表明 GP 提取物对抑制 TNFα和 IL-6有明显效果。实
验发现正常组 SD 大白鼠中 TNFα和 IL-6水平明显低
于UC大鼠模型 ,表明溃疡结肠炎组织中 TNFα和 IL-6
含量明显高于正常个体 ,与文献[ 3]相符。
2.5　结肠组织检查　结肠组织检查发现 ,对照组粘膜
表 1　算盘子对 TNFα和 IL-6 的影响 ng·mL-1 , n =5
项目 正常组 对照组 药物组
TNFα 0.46±0.21 3.85±0.46 0.49±0.32
IL-6 0.42±0.17＊ 3.17±0.39 0.37±0.15＊
　　注:与对照组比较 , ＊P <0.01
下纤维组织增生 ,有假性息肉样病变或粘膜溃疡 ,而药
物组基本上恢复正常状态 ,无上述病变 。
3　讨论
①对于轻 、中型活动期 UC 药物治疗 ,目前多采用
水杨酸偶氮磺胺吡啶(SASP)及其衍生物与 5-氨基水
杨酸(5-ASA)进行局部应用 ,但长程维持疗法存在肾毒
性 、费用高及依从性问题 ,短程治疗易复发 。重度 UC
药物治疗采用环孢菌素 ,缺点更多 。 ②UC 病因未明 ,
可能与多因素有关。发病机制可能为环境与免疫因素
作用于遗传易感宿主而致病。我们研究发现 GP 可明
显影响TNFα和 IL-6水平 ,而荷兰学者研究显示 ,炎症
性肠病免疫应答高低与基因表达有关 ,因此 GP 可能
系通过免疫调节治疗 UC ,对 GP 进行深入研究可能开
发出新的免疫调节药物。 ③目前中药如锡类散 、云南
白药 、补脾益肠丸 、结肠炎丸及单味中药苦参 、白芨等 ,
治疗UC虽可使症状好转 ,但疗效是有限的 ,因此对GP
治疗 UC的研究具有开拓性。
[ 参考文献]
[ 1] 　邓长生 ,夏　冰 , 主编.炎症性肠病[ M] .北京:人民卫生出
版社 , 1998.95.
[ 2] 　全国中草药汇编小组 ,主编.全国中草药汇编(上册)[ M] .
北京:人民卫生出版社 , 1982.910-911.
[ 3] 　Kusugamin K , Fukatsu A , Tanimoto M , et al.Elevation of
interleukin-6 inflammatory bowel disease is macrophage and
epithelial cell-dependent[ J] .Dig Dis Sci , 1995 , 40:949.
新斯的明致过敏反应 2例
王海荣
(山东省文登中心医院 ,264400)
[ 关键词] 　新斯的明;过敏反应
[ 中图分类号] 　R971.91　　　[ 文献标识码] 　B　　　[ 文章编号] 　1004-0781(2002)02-0077-01
　　例1 ,女 , 28 岁 , 1999 年 6月剖宫产术后 36 h腹胀 ,给予新斯
的明1 mg , im , 8 min 后出现强烈胃痛 , 继之恶心 、呕吐 、头晕 、憋
闷 、全身无力及皮疹 、血压下降。 考虑为过敏反应。 治疗:给予
1∶1 000肾上腺素 0.5 mL , im , 吸氧 , 根据病情对症给阿托品 1
mg , iv ,以缓解胃绞痛 , 20 min 后恢复正常。
[ 收稿日期] 　2001-02-29
[ 作者简介] 　王海荣(1968-),女 ,山东文登人 ,大专 ,护师。
例 2 , 女 , 30 岁 , 1999 年11月剖宫产术后 48 h 尿潴留。给新
斯的明 1 mg , im。 10 min后出现胃绞痛 、恶心呕吐 、出汗 、嗳气 、上
腹部不适 、胸部紧束感 、全身无力。诊断:过敏反应。治疗:给予
1∶1 000肾上腺素0.5 mL , im ,吸氧。 15 min后上述症状缓解。
新斯的明为季铵类化合物 , 短暂性抗胆碱酯酶药 , 主要用
于重症肌无力 、术后腹胀和尿潴留治疗。 过敏者临床较少见。
本文 2例发生过敏反应时均首先表现为胃肠道症状。 临床极
易误诊 , 及时准确诊断 ,抓住治疗时机极为重要 。
·77·医药导报 2002年 2月第 21卷第 2期