全 文 ： 中国现代应用药学 2013年 12月第 30卷第 12期 Chin JMAP, 2013 December, Vol.30 No.12 ·1289·
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收稿日期：2013-05-13



豨莶草的小鼠急性毒性及抗小鼠急性痛风性关节炎作用

蒋芳萍 1,2，傅旭春 3*，白海波 2(1.浙江大学药学院，杭州 310058；2.杭州华东医药集团生物工程研究院有限公司，杭州 310011；3.浙
江大学城市学院药物研究所，杭州 310015)

摘要：目的 豨研究 莶草醇提物和水提物的小鼠急性毒性及抗小鼠急性痛风性关节炎作用。方法 Bliss 豨法计算 莶草醇
提物和水提物的 LD50 豨；以尿酸钠诱导建立小鼠急性痛风性关节炎模型，观察 莶草醇提物和水提物的抗关节肿胀作用。
结果 豨 豨以 莶草生药计， 莶草醇提物的 LD50为 267.00 g·kg1 豨， 莶草水提物的 LD50为 147.91 g·kg1；小鼠急性痛风性
关节炎模型组、给药 24 h 豨 豨后 莶草醇提物组和 莶草水提物组的关节肿胀度分别为(0.134 8±0.049 3)，(0.098 0±0.034 0)
和(0.117 2±0.024 0)mL。结论 豨 豨 豨莶草醇提物的急性毒性显著低于 莶草水提物； 莶草醇提物的抗尿酸钠诱导的小鼠急
豨性痛风性关节肿胀作用优于 莶草水提物。
关键词：豨莶草；醇提物；半数致死量；痛风性关节炎
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：1007-7693(2013)12-1289-03

Mice Acute Toxicity of Siegesbeckia and Its Effect on Mouse Acute Gouty Arthritis

JIANG Fangping1,2, FU Xuchun3*, BAI Haibo2(1.College of Pharmaceutical Sciences, Zhejiang University, Hangzhou
310058, China; 2.Hangzhou Huadong Medicine Group Biotechnology R&D Institute Co.,Ltd., Hangzhou 310011, China;
3.Institate of Materia Medica, Zhejiang University City College, Hangzhou 310015, China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To study the mouse acute toxicity of both ethanol extract and water extract from siegesbeckia and
their effects on mouse acute gouty arthritis. METHODS Bliss method was used to calculate the LD50 of siegesbeckia extracts,
and the mouse acute gouty arthritis model induced by sodium uric acid was observed. RESULTS LD50 of ethanol extract and
water extract from siegesbeckia were 267.00 g·kg1 and 147.91 g·kg1, respectively. The joint swelling degrees of acute gouty
arthritis mouse 24 h after the modeling were (0.134 80.049 3), (0.098 00.034 0) and (0.117 20.024 0) mL for model group,
ethanol extract group and water extract group, respectively. CONCLUSION The acute toxicity of ethanol extract from
siegesbeckia is significantly lower than the water extract, and the effect of ethanol extract on mouse acute gout joint swelling
induced by sodium uric acid is better than water extract.
KEY WORDS: siegesbeckia; ethanol extract; LD50; gouty arthritis


作者简介：蒋芳萍，女，博士，工程师 Tel: (0571)88014858 E-mail: fangpingjiang@163.com *通信作者：傅旭春，男，博士，教
授 Tel: (0571)88018711 E-mail: fuxc@zdu.edu.cn
豨莶草为菊科植物豨莶、腺梗豨或毛梗豨莶
的干燥地上部分，收载于中国药典 2010年版。豨
莶草性味辛、苦、寒，归肝、肾经，具有祛风湿、
利关节和解毒的功效，常用于风湿痹痛、筋骨无
DOI:10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2013.12.004
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力、腰膝酸软、四肢麻痹、半身不遂、风疹湿疮
等[1]。以豨莶草为原料的中成药豨莶丸、豨桐丸和
豨桐胶囊，豨莶草都以水煎或原粉入药。近年来，
对豨莶草乙醇提取物的化学成分和生物活性的研
究越来越多[2-6]，显示其潜在的临床应用前景。高南
南等[7]比较了 2个豨莶草物种水提物的小鼠急性毒
性，关建红等[8-10]研究了豨莶草水提物以及不同部
位的毒性，但很少见研究豨莶草醇提物毒性的文献
报道。本实验采用尿酸钠诱导小鼠急性痛风性关节
炎模型研究豨莶草乙醇提取物和水提物的抗关节
肿胀作用，并比较了这 2种提取物的急性毒性。
1 材料与试剂
1.1 动物
清洁级 ICR小鼠，体质量 18~22 g，♀♂各半，
由浙江省实验动物中心提供，实验动物生产许可
证号：SCXK(浙)2008-0033。试验前，将小鼠置
(23±2)℃屏障级动物房中饲养一周，标准饲料，
饮用水为自来水。
1.2 药品与试剂
豨莶草饮片(杭州中药饮片厂，批号：110103，
由浙江中医药大学张水利教授鉴定为豨莶草饮片
Siegesbeckia Herba)；氯化钠注射液(浙江莎普爱思
制药有限公司)；尿酸(sigma 公司)；吐温 80(南京
威尔有限公司)；秋水仙碱片(西双版纳药业有限责
任公司)。
1.3 仪器
PL2001-L 电子天平(梅特勒-托利多仪器有限
公司)；YLS-7B 足趾容积测量仪(山东省医学科学
院设备站)；JHS-080型精密恒温恒湿箱(上海精宏
实验设备有限公司)。
2 方法与结果
2.1 豨莶草水提物的制备
取豨莶草 5 kg，10倍量水浸泡 2 h，然后煎煮
2 h，3 次，合并提取液浓缩后放入烘箱烘干，粉
碎，备用。试验时用蒸馏水配制成所需浓度使用。
2.2 豨莶草醇提物的制备
取豨莶草 5 kg，8倍量 70%乙醇浸泡 2 h，回
流提取 2 h，3次，合并提取液回收乙醇后烘干，
粉碎，备用。试验时用蒸馏水配制成所需浓度使用。
2.3 尿酸钠晶体的制备
在无菌条件下将 6 mL 1 mol·L1 NaOH 溶液、
1 g尿酸和 194 mL蒸馏水混合并煮沸，使尿酸完
全溶解，搅拌，自然降温，滴入 1 mol·L1的 HCl
至 pH 值为 7.0，4 ℃冰箱保存 24 h，弃上清液，
用生理盐水洗涤沉淀 3 次并将沉淀物水分吸干，
置于 70 ℃干燥箱烘 2 h，将所得粉末研细，过孔
径为 250 m的金属筛，备用。
2.4 尿酸钠溶液的制备
实验前将尿酸钠结晶置于 180 ℃烤箱烘烤
2 h，用 95%乙醇洗涤离心(3 500 r·min1，10 min)3
次，室温自然干燥。取自然干燥后的尿酸钠晶体
500 mg，加 9 mL生理盐水和 1 mL吐温 80，加热
搅拌，配制成 50 g·L1尿酸钠溶液。
2.5 小鼠急性毒性试验
将动物禁食不禁水 12 h后，按♀♂各半，随
机分 14 个组，每组 10 只。根据预试验结果，豨
莶草水提组和豨莶草醇提组均设 7 个受试剂量(以
提取物浸膏计)：36，28，25.6，20.48，16.384，
9.6，4.8 g·kg1。灌胃给药后，按不同剂量配制相
应浓度药液，等体积给药，各组给药体积均为
0.4 mL·(10 g)1，观察动物的中毒反应及死亡情况，
记录中毒反应症状及死亡时间。
用 Bliss方法软件(DAS 3.3.2)计算 LD50值。
2.6 抗小鼠急性痛风性关节炎作用试验
将动物随机分成 4 个组，即模型组、秋水仙
碱组(阳性对照组)、豨莶草醇提组和豨莶草水提
组，每组 10只。采用小鼠右后足足底皮下注射尿
酸钠溶液制备模型。造模后小鼠右后足出现肿胀，
显示造模成功，造模 1 h后给药。秋水仙碱组、豨
莶草醇提组和豨莶草水提组分别灌服秋水仙碱、
豨莶草醇提物和豨莶草水提物混悬液，模型组灌
服蒸馏水，并于第 1次给药 8 h和 22 h后进行第 2
次和第 3 次给药，各组每次给药体积均为
0.1 mL·(10 g)1，相当于秋水仙碱 0.975 mg·kg1或
豨莶草 1 000 mg·kg1(按生药量计)。
观察小鼠造模后肢的红、肿、痛及自由活动
状况，并分别于造模后 12，24 h测量造模后足趾
容积，计算肿胀度：肿胀度=造模后小鼠右后足的
足趾容积-造模前小鼠右后足的足趾容积；肿胀度
以 sx  表示，进行单因素方差分析。
3 结果
在小鼠急性毒性试验中，小鼠灌胃后，很快
出现竖毛，蜷缩症状，活动减少，严重者静卧不
动、四肢强直性抽搐、死亡。随着给药剂量的下
降，2个豨莶草提取物组都出现中毒症状减轻、死
亡时间延长、死亡数减少的现象。对死亡动物尸
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检，肉眼观察各脏器，未见明显变化。观察小鼠
存活情况，24 h 后存活小鼠中毒反应症状较轻，
随着时间延长能恢复正常；48 h 后存活小鼠正常
饮食、活动，毒性反应基本消失。小鼠死亡时间
及存活情况见表 1。
表 1 小鼠急性毒性试验结果(n=10)
Tab 1 The results of mice acute toxicity test(n=10)
豨莶草水提组 豨莶草醇提组 受试剂量/
g·kg1 出现死亡 时间/min 存活数/只
出现死亡
时间/min 存活数/只
36 7 0 12 0
28 10 1 13 2
25.6 13 2 15 6
20.48 15 2 13 6
16.384 17 4 17 7
9.6  10  10
4.8  10  10
将死亡效应计数及剂量相关数据输入 DAS 3.3.2
软件，使用 Bliss方法进行分析，求得 LD50值。结
果：水提组的 LD50=16.73 g·kg1，相当于生药
147.91 g·kg1；醇提组的 LD50=22.24 g·kg1，相当
于生药 267.00 g·kg1。经统计检验，P<0.01，说明
2组 LD50值差异有显著统计学意义，豨莶草乙醇提
取物的小鼠急性毒性明显低于其水提物。
小鼠在注射尿酸钠造模后，右后肢小腿至足
趾部出现红肿，受损侧后肢时常提起，活动减少，
其关节明显肿胀。给药后的阳性对照组、豨莶草
醇提组和豨莶草水提组的小鼠关节肿胀程度均有
所下降，结果见表 2。
表 2 豨莶草提取物对急性痛风性关节炎小鼠关节肿胀度
的影响(n=10， sx  )
Tab 2 Effects of siegesbeckia extracts on the joint swelling
in acute gout arthritis mice(n=10, sx  )
肿胀度/mL 组 别 给药剂量/
mg·kg1·次1 12 h 24 h
模型组 0 0.191 70.040 3 0.134 80.049 3
豨莶草醇提组 1 000 0.159 40.038 3 0.098 00.034 01)
豨莶草水提组 1 000 0.174 70.028 0 0.117 20.024 0
秋水仙碱组 0.975 0.151 30.046 81) 0.079 10.044 02)
注：与模型组比较，1)P<0.05， 2)P<0.01
Note: Compared with model group, 1)P<0.05, 2)P<0.01
经统计检验，给药 24 h后秋水仙碱组和豨莶
草醇提组的小鼠关节肿胀程度明显低于模型组。
4 讨论
痛风性关节炎是一种由于人体内尿酸含量异
常升高，尿酸盐在关节等部位析出而引发的炎症
反应，其发病率呈升高趋势。目前我国临床治疗
以秋水仙碱、别嘌呤、丙磺舒和苯溴马隆等西药
为主，均有较大的不良反应。研究开发药效好、
不良反应低的中药正越来越受到重视，相应的研究
报道也越来越多[11-13]，豨莶草就是其中之一[2-10]。
本实验的毒理和药效初步研究结果显示，豨莶草
醇提物能显著减轻急性痛风性关节炎小鼠的关节
肿胀，水提物虽然也有一定的疗效，但不如醇提
物；而且就小鼠急性毒性而言，其毒性又明显低
于水提物。因此，豨莶草乙醇提取物具有相当大
的临床应用前景，值得深入研究和开发。
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收稿日期：2013-05-14