全 文 ：收稿日期:2000-04-09初稿;2000-06-12修改稿
基金项目:国家自然科学基金资助项目(39860047)
　食用菌学报　2000.7(3):48～ 52
　Acta Edulis Fungi
不同培养基对松口蘑菌丝生长的影响
魏铁铮　许广波　傅伟杰　梁运江　刘文利
(延边大学农学院园艺系 , 吉林龙井　133400)
摘　要　以 PDA 为基础 ,分别加入松口蘑土 、松枝 、松针 、糙皮侧耳菌丝和麦麸浸汁 , 制备成
琼脂培养基 ,对照 PDA 和浜田氏培养基培养松口蘑纯菌丝。结果表明 , 糙皮侧耳菌丝麦麸汁培养
基的效果明显优于包括浜田氏培养基在内的其它配方 , 松口蘑土培养基也有良好表现。松口蘑菌
丝在不同培养基上形成的菌落特征也不尽相同。进一步的试验结果表明 , 在采用几种不同真菌菌
丝为原料制成的菌丝麦麸汁培养基上 ,松口蘑菌丝生长速度的差异并不明显。
关键词　松口蘑;培养基;菌丝生长速度;菌落形态
松口蘑[ Tricholoma matsutake (S.Ito et Imai)Sing.]属伞菌目(Agaricales),口蘑科(Tri-
cholomataceae),口蘑属(Tricholoma)〔1 , 2〕 ,是一种经济价值极高的食(药)用外生菌根菌 ,在日
本和韩国市场深受欢迎 ,有“菇中之王”的美誉。由于松口蘑必需从赤松等共生植物根系中获
取养分〔2〕 ,营养习性十分特殊 ,所以其菌种的分离和扩繁一直是困扰食用菌工作者的一个难
题。近年来 ,国内外关于松口蘑营养特性 ,尤其是母种培养基方面的研究鲜见报道。笔者就不
同培养基对松口蘑菌丝生长速度和菌落形态的影响进行了研究 ,现将研究结果报道如下 。
1　材料与方法
1.1　供试菌种
松口蘑纯培养菌种于 1998年 8月由采自吉林省安图县的松口蘑子实体分离得到 ,用装有
PDA 培养基的 100mL三角瓶培养 。
1.2　培养基
1.2.1　不同母种培养基对松口蘑菌丝生长的影响
1.2.1.1　PDA培养基
1.2.1.2　浜田氏培养基　葡萄糖 20g ,干酵母 5g , KH2PO4 1g ,1N HCl调节 pH 至 5.0〔2〕。
1.2.1.3　松口蘑土培养基　PDA +松口蘑土浸汁(松口蘑土 500g ,加水后煮沸 30min ,四层纱
布过滤 ,取滤液加入培养基)〔2〕 。
1.2.1.4　松枝培养基　PDA+松枝浸汁(松枝 50g ,方法同上)。
1.2.1.5　松针培养基　PDA+松针浸汁(松针 50g ,方法同上)。
1.2.1.6　糙皮侧耳菌丝浸汁培养基　PDA +糙皮侧耳木屑种浸汁(糙皮侧耳木屑种 100g ,方
法同上)。
1.2.1.7　糙皮侧耳菌丝麦麸汁培养基　PDA +糙皮侧耳木屑种浸汁+麦麸浸汁(糙皮侧耳木
屑种 100g ,麦麸 50g ,方法同上)。
以上各配方均加入琼脂 2%,蒸馏水定容至 1000mL。
1.2.2　几种不同真菌菌丝浸汁对松口蘑菌丝生长的影响
分别用培养 30d后的糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)、灰树花(Gri fola frondosa)、黑木耳
(Auricularia auricula)、亚侧耳(Hohenbuehelia serot ina)、桑黄(Phel linus igniarius)、姬松茸
(Agaricus blazei)、硫磺菌(Laet iporus sulphureus)、葡酒色被孢霉(Mortierel la vinacea)等的木
屑种(包含培养料)为原料制成不同的菌丝麦麸汁培养基 ,观察其对松口蘑菌丝生长速度的影
响。
1.3　实验方法
各种配方的培养基分别装入 100mL 三角瓶中 ,每瓶 50mL , 115℃灭菌 20min。将坐标纸
裁成窄条 ,经灭菌后放入三角瓶中 ,使其平贴在固体培养基的表面 ,用来测量菌落直径 。将同
一三角瓶的松口蘑母种用手术刀切成边长 3mm 的小方块 ,取菌丝块的表层 ,分别接种于各种
培养基的表面 ,每种配方重复 5 次。培养物置于 22℃下培养并记录 15d和 45d 后的菌落直
径。取直径之差计算菌丝日生长量 ,进行方差分析 ,并描述每种培养基上松口蘑的菌落形态 。
按各种培养基配方分别制备其液体培养基 ,相同条件下灭菌处理后测定 pH 值。
2　结果与分析
2.1　不同母种培养基对松口蘑菌丝生长速度的影响
从不同配方的松口蘑母种培养基菌丝日生长量方差分析结果(表 1)中可以看出 ,在糙皮
表 1　不同母种培养基上松口蘑菌丝生长速度的比较结果(SSR法)
Table 1　The comparison of T.matsutake mycelium growth rate on di fferent media using SSR method
培养基
Media
pH
菌丝生长量(mm/ d)
Mycelium growth rate(mm/ d)
1 2 3 4 5
平均值(mm)
Mean (mm)
差异显著性
Dif ference in significance
0.05 0.01
糙皮侧耳菌丝麦麸汁培养基
P .ostreatus
mycelium ext ract-w heat
bran ext ract medium
5.77 0.60 0.57 0.60 0.67 0.60 0.608 a A
浜田氏培养基
Hamata medium
4.92 0.57 0.57 0.53 0.57 0.53 0.554 b B
松口蘑土培养基
Medium w ith the
ext ract of T .matsutaue
grow th zone soil
5.48 0.57 0.50 0.57 0.50 0.53 0.534 bc BC
糙皮侧耳菌丝浸汁培养基
P.ostreatus mycelium
extract medium
5.62 0.57 0.50 0.53 0.50 0.50 0.520 bc BC
松枝培养基
Pine twig ext ract medium 6.69 0.47 0.50 0.53 0.50 0.50 0.500 c C
PDA 6.52 0.47 0.43 0.43 0.47 0.43 0.446 d D
松针培养基
Pine needle ext ract medium
6.45 0.30 0.30 0.30 0.33 0.30 0.306 e E
493 期　　　　　　　　　　　魏铁铮等:不同培养基对松口蘑菌丝生长的影响
侧耳菌丝麦麸汁培养基上 ,松口蘑菌丝生长速度最快 ,与其它配方培养基相比 ,差异都达到了
极显著水平。其后依次是浜田氏培养基 、松口蘑土培养基 、糙皮侧耳菌丝浸汁培养基 、松枝培
养基 、PDA培养基和松针培养基。浜田氏培养基 、松口蘑土培养基和糙皮侧耳菌丝浸汁培养
基之间 ,菌丝生长速度存在差异 ,但在 0.05水平上未达到显著水平。松口蘑土培养基 、糙皮侧
耳菌丝浸汁培养基和松枝培养基上 ,松口蘑菌丝生长速度同 PDA培养基相比 ,差异都达到了
极显著水平。在松针培养基上 ,松口蘑菌丝的生长速度明显不如 PDA 培养基。
松口蘑纯菌种在糙皮侧耳菌丝麦麸汁培养基上之所以表现出较快的生长速度 ,其原因是
多方面的 。首先 ,各类食用菌在细胞组分和含量上具有一定的相似性 ,这就使得一种食用菌菌
丝的浸出物可能对另一种食用菌菌丝的生长起促进作用。因此 ,糙皮侧耳菌丝浸汁中的一些
成分能够被松口蘑利用 ,以满足其生长的需要。其次 ,前人的研究证明 ,松口蘑能够利用的无
机态氮源为氨态氮 ,而且许多种类的维生素对松口蘑菌丝生长也有促进作用〔1 ～ 3〕。根据松口
磨菌丝在许多不含无机态氮的培养基上生长良好的事实可以断定 ,某些种类的有机态氮也可
以作为松口蘑的氮源 。另外 ,松口蘑需要同赤松形成营养共生关系 ,主要从赤松根系中吸收养
分 ,所以有机态氮的营养效果似乎应该更好。麦麸中含有丰富的有机态氮和维生素 ,因而能够
加速松口蘑菌丝的生长。最后 ,松口蘑菌丝生长最适 pH 是 5.5〔4〕 ,而糙皮侧耳菌丝麦麸汁培
养基的 pH是 5.77(表 1),能够满足松口蘑菌丝生长对酸度的要求 。
松口蘑土是从松口蘑发生地采来的 B层土壤 ,含有赤松的须根 、松口蘑同赤松形成的菌
根和大量分散在土壤中的松口蘑菌丝 ,松口蘑土的 pH 值一般在 4.5 ～ 5.5之间〔1 ～ 3 , 5～ 7〕 。按
照生态模拟的方法 ,以松口蘑土为原料制备的培养基 ,在营养成分和酸碱度(表 1)方面都与天
然松口蘑的生活环境有较大的相似性 ,所以能够促进松口蘑菌丝快速生长。在我们以往的试
验中 ,松口蘑土培养基在松口蘑子实体组织分离和菌丝扩繁中被长期采用 ,一直有良好的表
现。
从营养角度分析 ,菌丝浸汁培养基和松枝培养基对松口蘑菌丝生长的促进作用也是因为
其中含有能满足松口蘑生长的某些特殊物质 。前人的试验表明 ,松针浸汁对松口蘑纯菌丝生
长有促进作用〔2〕。而本次试验却未发现这种趋势 ,这可能是由于加入松针数量不当造成的。
2.2　不同真菌菌丝浸汁对松口蘑菌丝生长速度的影响
从方差分析结果(表 2)可以看出 ,除以桑黄为原料制成的菌丝麦麸汁培养基的菌丝生长
速度明显落后外 ,其它培养基上松口蘑菌丝的日生长量虽略有差异 ,但都未达到极显著水平 。
说明上述多数真菌菌丝制备的菌丝麦麸汁培养基对松口蘑菌丝生长速度的影响无明显差异 。
以往松口蘑子实体组织分离 ,特别是菌柄基部分离时经常会得到葡酒色被孢霉 ,该菌生长速度
快 ,常被误认为松口蘑〔1 , 2 , 4 , 8〕 。有报道说 ,以葡酒色被孢霉为原料制备的培养基对松口蘑菌
丝生长有促进作用〔8〕 。我们的结果与之相同 ,但是同其它几种供试真菌相比 ,其效果并非最
好。
2.3　不同配方培养基对松口蘑菌落形态的影响
不同配方培养基上松口蘑的菌落形态表现出一些相似之处 ,如一般为草帽状 , 有明显外
沿 ,菌落边缘都有放射状波曲 ,但也存在明显的差异。在 PDA 培养基 、松枝培养基 、松针培养
基 、糙皮侧耳菌丝浸汁培养基和糙皮侧耳菌丝麦麸汁培养基上 ,松口蘑气生菌丝较明显 ,直立 、
紧密且扭结成束 。在糙皮侧耳菌丝浸汁培养基上 ,松口蘑气生菌丝末端有细小分枝 ,在糙皮侧
50 食　用　菌　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　7 卷
耳菌丝麦麸汁培养基上则分枝更为明显 。在浜田氏培养基和松口蘑土培养基上 ,松口蘑形成
的草帽状菌落并不十分明显 ,而是表现出中央略微隆起 ,四周平展的特征 ,表面的气生菌丝隐
约可见 。这可能是因为这两种培养基的 pH 值较低(表 1),经过高温灭菌后 ,部分琼脂分解导
致培养基硬度降低 ,不能支撑松口蘑菌丝更高地向上隆起。各培养基上气生菌丝一般为白色 ,
唯独在糙皮侧耳菌丝麦麸汁培养基上呈灰黄色 ,说明气生菌丝颜色的变化与麦麸汁中某些成
分有关。
表 2　不同菌丝麦麸汁培养基上松口蘑菌丝生长速度的比较(SSR法)
Table 2　The comparison of T.matsutake mycelium growth rate on di fferent kinds of
mycel ium extract-wheat bran extract media(MEWBEM)using SSR method
培养基
Media
菌丝日生长量(mm/ d)
Mycelium day grow th rate(mm/ d)
1 2 3 4 5
平均值(mm)
Mean (mm)
差异显著性
Dif ference in significance
0.05 0.01
黑木耳菌丝麦麸汁
A.auricula MEWBEM 0.63 0.60 0.67 0.60 0.63 0.626 a A
硫磺菌菌丝麦麸汁
L.sulph ureus MEWBEM 0.60 0.67 0.63 0.60 0.57 0.614 ab AB
灰树花菌丝麦麸汁
G.f rondosa MEWBEM 0.60 0.60 0.63 0.60 0.63 0.612 ab AB
葡酒色被孢霉菌丝麦麸汁
M.vinacea M EWBEM 0.60 0.60 0.57 0.67 0.60 0.608 ab AB
糙皮侧耳菌丝麦麸汁
P .ostreatus MEWBEM 0.57 0.60 0.60 0.63 0.60 0.600 ab AB
姬松茸菌丝麦麸汁
A .blazei MEWBEM 0.63 0.57 0.60 0.60 0.57 0.594 abc AB
亚侧耳菌丝麦麸汁
H .serot ina M EWBEM 0.57 0.57 0.57 0.60 0.57 0.576 bc AB
桑黄菌丝麦麸汁
P .igniarius MEWBEM 0.53 0.53 0.57 0.60 0.57 0.560 c B
3　讨论
3.1　松口蘑菌丝生长需要配方合理的培养基和良好的生活条件 。以真菌 ,特别是常见食用菌
菌丝为原料制备的糙皮侧耳菌丝麦麸汁培养基能够满足松口蘑生长的这些要求 ,其使用效果
明显优于被长期沿用的浜田氏培养基 ,且不需要调节 pH ,制备简便 ,原料来源广 ,有较强的实
用性和较好的推广价值 ,是一种良好的松口蘑母种培养基。
3.2　依据生态模拟方法设计制备的松口蘑土培养基在松口蘑纯菌种分离和扩繁中也较有用 。
3.3　不同配方培养基上松口蘑菌落形态不完全相同 ,松口蘑菌落形态与培养基成分和理化状
况有密切关系。了解不同培养基上松口蘑的菌落形态对于松口蘑纯菌种的分离鉴定 ,具有一
定的指导意义。有关松口蘑菌落形态与母种培养基组成成分以及 pH 值之间的关系 ,有待今
后进一步研究探讨。
参　考　文　献
1　谭伟.松口蘑栽培理论及方法.食用菌学报 , 1994 , 1(1):53～ 63.
513 期　　　　　　　　　　　魏铁铮等:不同培养基对松口蘑菌丝生长的影响
2　郑稚莺 , 潘学仁 ,刘振钦等.食用菌栽培学.哈尔滨:哈尔滨出版社 , 1995.448～ 465.
3　杨新美.食用菌栽培学.北京:中国农业出版社 , 1996.226～ 238.
4　杨民和 , 刘咏梅 ,杨新美等.松口蘑的菌丝分离及纯培养研究.华中农业大学学报 , 1997 , 16(3):272 ～ 276.
5　Xu Guangbo , Fu Weijie , Wei Tiezheng et al.Ecolo gical Charateristics of Soil Grow n with Tricholoma Matsu-
take.Pedosphere , 1997 , 7(4):355～ 360.
6　傅伟杰 , 许广波 ,刘继生等.长白山松口蘑分布及生态研究.食用菌学报 , 1996 , 3(3):46 ～ 50.
7　傅伟杰 , 许广波 ,杨淑荣等.长白山区松口蘑发生地土壤状况的研究.土壤学报 , 1998 , 35(1):140 ～ 144.
8　杨民和 , 杨新美 ,陈立国.松口蘑与宿主根际微生物相互关系研究.江西农业大学学报 , 1997 , 19(4):76 ～
79.
Effect of Different Kinds of Media on the
Growth Status of Tricholoma matsutake Mycelium
Wei Tiezheng　Xu Guangbo　Fu Weijie　Liang Yunjiang 　Liu Wenli
(Horticulture Department , Agriculture Colleg e of Yianbian University , Longjing , Jilin　133400)
Abstract　Ex tracts of Tricholoma matsutake grow th zone soil , pine twig s , pine needles , Pleurotus ostreatus
mycelium and w heat bran were put into the PDA resp.to make different kinds of agar media , then pure strain of
T.matsutake w as inoculated on them resp.to compare with the grow th status of pure T.matsutake mycelium on
PDA or Hamata medium.The result showed that the P.ostreatus mycelium ex tract-w heat bran ex tract medium
w as superior to Hamata medium and other media significantly , and that the effect of T .matsutake grow th zone soil
ex tract medium w as good too.While the colonial morphologies of T.matsutake g rowing on different kinds of media
w ere not identical completely.And the result of further experiments showed that the g rowth rate of T .matsutake
mycelia on the media mixed with different fungal mycelial ex tract resp.had no obvious difference.
Key words　Tricholoma matsutake;Medium;Mycelium g rowth rate;Colonial morphology
欢迎订阅《科技情报开发与经济》
本刊是公开发行的综合性科技期刊 ,双月刊。刊号:ISSN1005-6033 、CN14-1157/ N。
本刊为大 16 开 ,自办发行 , 每期定价 5.50 元 , 全年定价 33.00元。地址:山西省太原市迎泽大街 366
号　邮编:030010　联系人:曹明顺　银行开户名称:山西省科学技术情报研究所　汇款开户
行:太原市工商银行新建南路分理处　帐号:04126405218
欢迎订阅 2001年《食品与发酵工业》
《食品与发酵工业》是国家中文核心期刊 、优秀刊物 ,并为中国科技论文期刊统计源收录 。
《食品与发酵工业》从 2001年 1月起改为月刊 ,每月下旬出版 , 16开 ,90页 ,全年定价 120元 。
全国各地邮局均可订阅 ,本刊编辑部亦常年办理订购业务。凡直接向本编辑部订阅者 ,本编辑
部将赠送精美纪念品一份 。订阅者请通过邮局或银行汇款。汇款地址:北京市朝阳区霄云路
32号中国食品发酵工业研究所《食品与发酵工业》编辑部 　邮编:100027 　电话:010-
64645559　传真:010-64671277　邮发代号:2-331　国外代号:BM350　银行户名:中国食
品发酵工业研究　开户行:北京市工商行左家庄分理处　帐号:089109-79
52 食　用　菌　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　7 卷