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蜈蚣草孢子萌发的最适培养基研究



全 文 :2012年第 16期 现代园艺
蜈蚣草是凤尾蕨科凤尾蕨属的多年生草本植物,别名蜈
蚣蕨、长叶甘草蕨、舒筋草、牛肋巴;蜈蚣草植株高30~
200cm,根状茎短,密被线状披针形黄棕色鳞片;叶簇生,叶柄
长10~30cm,直立,叶柄、叶轴及羽轴均被线形鳞片;叶矩圆
形至披针形,长 10~100cm,宽 5~30cm,羽状复叶;叶片无
柄,线形,长 4~20cm,宽 0.5~1cm,中部羽叶最长,先端渐
尖,先端边缘有锐锯齿,基部截形,心形,稍呈耳状,下部各羽
叶渐缩短,叶亚革质,两面无毛,脉单一或一次叉分,孢子囊
群线形,囊群盖狭线形,膜质,黄褐色;生于山坡、路边的钙质
土或石灰岩壁缝中,蜈蚣草株型分散,不直立,喜温暖、湿润、
阴暗的环境,忌涝,要求荫蔽、空气湿润、土壤透水良好。
蜈蚣草的繁殖一般有成熟孢子繁殖、分株法繁殖和组织
培养繁殖3种方法。由于前2种技术繁殖效率不高,所以现
在的研究多集中在利用组织培养的方法,通过孢子萌发来获
得大量组培苗。
1 实验材料及方法
1.1 实验材料
蜈蚣草成熟的孢子(采自湖北宜昌)。
1.2 培养基配方
(1)MS培养基,(2)将原来MS培养基中pH值调为7.0,
另外在培养基中加入CaCO3粉末。
表1 不同浓度培养基(CaCO3浓度为g/L)
1.3 操作步骤
1.3.1 培养基的配置。按照培养基配方分别配置MS和MS
(改)培养基,将各种液体试剂按照用量规格加入1000ml大烧杯
中,轻轻摇匀后,用pH试纸进行溶液酸碱度测定,在烧杯中加
入盐酸或氢氧化钠将pH调到培养基所要求的范围之内;之后
称取相应分量的琼脂加入烧杯中,在加入适量蒸馏水,放置于微
波炉中加热知道琼脂全部溶解,溶液为透明的为止。
1.3.2 分装培养基。将煮好的培养基冷却至50℃左右时
分装到各个培养盒中,每盒大约装盒子的2/5,然后等待培养
基冷却凝固。
1.3.3 播孢。待培养基凝固后,将蜈蚣草孢子均匀地撒在
培养基表面,盖上盖子,保持空气的流通。
1.3.4 培养。将撒上孢子的培养基放置于25℃的恒温箱中,
日光灯作为光源,光照强度为2000~3000Lx,光照时间16h/d。
1.3.5观察记录。培养期间每天到实验室进行观察,记录
孢子萌发的时间,萌发情况,原叶体形成时间及形成情况等。
1.3.6 数据分析。将观察到的试验结果,数据进行分析整
理,找出最适合蜈蚣草孢子萌发的培养基。
2 结果与分析
从播孢后的第2天开始记录,我们发现培养基中的萌发
情况大概为:
13d后各培养基先后出现绿色小点,孢子开始萌发,17d
后出现绒毛状丝状体,23d后孢子发育成绿色,逐渐形成叶片
状原叶体且体积不断增大,40d后绿色块状周边形成绿色紧
密球,球状体在培养基上迅速增殖并在较短时间内形成疏松
的群体块;随着小球状体的继续增殖而不断变大,60d后逐渐
形成芽,并开始分化出小叶片,即孢子体。
通过实验观察可以得到以下2组图表(图1、2)。
考虑到蜈蚣草的生长环境是偏碱性的,所以此次研究不
仅继续利用传统MS培养基进行培养对照,还对MS培养基
进行改动,主要是提高培养基的pH值,以接近蜈蚣草真实的
生活环境。在培养基中加入CaCO3粉末,也是增强碱性环境。
实验结果表明,改良的MS培养基更适合蜈蚣草孢子萌发,有
利于蜈蚣草的快繁研究。
3 研究展望
据国际上的报道,在正常土壤中普通植物的含砷量一般不
超过3mg/kg,我国谷类作物的含砷背景值为0.07~0.08mg/kg,豆
类为0.02~0.56mg/kg,蔬菜类为0.001~0. 39mg/kg,木本植物小
于0.78kg/mg。蜈蚣草的最大含砷量约相当于普通植物体中大量
元素磷的含量,比普通植物的含砷量高数万倍、甚至数十万倍。
参考文献
1 周向军.砷超富集植物蜈蚣草的离体培养及植株再生[J].资源开发与
市场,2010(8)
2 韩德伟,关丽霞,王振龙.铁线蕨孢子组织培养与快速繁殖研究[J]. 安
徽农业科学,2010(29)
(责任编辑 王蔓)
蜈蚣草孢子萌发的最适培养基研究
李江浩 王玢琪
(中国地质大学环境学院,湖北 武汉 430074)
摘 要:通过在不同培养基上进行培养,观察统计了蜈蚣草孢子的萌发情况,包括萌发率、萌发时间,寻找出了蜈蚣
草孢子组织培养的最佳孢子萌发培养基。
关键词:蜈蚣草;培养基;孢子萌发
MS 1/2MS 1/4MS MS(改)1/2MS(改)1/4MS(改)
CaCO3 0 0.2 0.2 0.2
CaCO3 0.5 0.5 0.5
CaCO3 1.0 1.0 1.0
CaCO3 1.5 1.5 1.5
试验研究
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DOI:10.14051/j.cnki.xdyy.2012.16.105