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维药榅桲多糖抗血栓作用及其机制研究



全 文 :参考文献:
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网络出版时间:2015 -1 -9 13:37 网络出版地址:http:/ /www. cnki. net /kcms /doi /10. 3969 / j. issn. 1001 -1978. 2015. 02. 030. html
维药榅桲多糖抗血栓作用及其机制研究
美合日阿依·伊萨克,马 虎,周文婷,艾尼瓦尔·吾买尔
(新疆医科大学基础医学院药理学教研室,新疆 乌鲁木齐 830011)
Anti-thrombotic effect of polysaccharide of Cydonia
oblonga Mill and its mechamism
ISAK Mihray,MA Hu,ZHOU Wen-ting,UMAR Anwar
(Dept of Pharmacology,Xinjiang Medical University,Urumqi
830011,China)
doi:10. 3969 / j. issn. 1001 - 1978. 2015. 02. 030
文献标志码:A 文章编号:1001 - 1978(2015)02 - 0295 - 02
中国图书分类号:R-332;R284. 1;R364. 15;R973. 2
关键词:榅桲;多糖;抗血栓;抗凝血;抗血小板;机制
Key words:Cydonia oblonga;polysaccharides;anti-thrombosis;
anticoagulant;antiplatelet;mechanism
榅桲(Cydonia oblonga Mill,COM)具有降血压、调血脂、
补血、补肾、止泻、利尿等功效。还有资料报道榅桲具有抗氧
化、抗菌作用。其果实含有糖类、黄酮类、生物碱类、氨基酸
及多肽、鞣质、有机酸、挥发油等成分[1],其中糖类含量最高。
目前,在国内外尚未见到榅桲果实多糖结构及药理活性的相
关报道。大量研究证明,植物多糖具有增强免疫功能、抗肿
瘤、抗病毒、抗突变、抗衰老、抗凝血、降血糖和环境治理等生
物学效应[2 - 5]。本文就榅桲果实多糖对大鼠动、静脉血栓形
成的影响进行了研究,探讨其抗血栓作用及其可能的机制,
为进一步筛选抗血栓有效部位提供实验依据。
1 材料
1. 1 仪器 台式高速离心机(KH-120M,上海安亭科技仪器
厂),酶标仪(Model-680,日本) ,放射免疫计数器(GC-2016
γ,中国科大中佳公司) ,全自动血凝分析仪(德国)。
1. 2 药物与动物 榅桲果实多糖(自提) ,阿司匹林(Sigma,
收稿日期:2014 - 10 - 13,修回日期:2014 - 10 - 31
基金项目:国家自然科学基金(地区基金)资助项目(No 81260490)
作者简介:美合日阿依·伊萨克(1988 -),女,硕士生,研究方向:心
血管药理学,E-mail:mhray88@ 126. com;
艾尼瓦尔·吾买尔(1962 -) ,男,博士,教授,博士生导
师,研究方向:心血管药理学,通讯作者,Tel:0991-
4365602,E-mail:anwar. umar@ 126. com
No2000641) ,银杏叶片(天津天士力制药有限公司,批号
259) ;SPF 级 Wistar 大鼠 96 只,♂,体质量 220 ~ 260 g,均由
新疆医科大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(新)
2011 - 0004。
2 方法
2. 1 分组及给药 大鼠随机分成 6 组,即:空白组、阿司匹
林组(5 mg·kg -1)、银杏叶片组(20 mg·kg -1)、榅桲果实多
糖低、中、高(50、100、200 mg·kg -1)剂量组,每组 8 只。灌
胃给药 15 d,每天 1 次,容积为 10 mL·kg -1。
2. 2 实验方法 末次给药 1 h 后腹腔注射 3%戊巴比妥钠
(5 mL·kg -1)麻醉,参照文献[6 - 7]的方法改良制作血栓模
型,剪下血栓发生部位的血管,取出血栓。腹主动脉取血,枸
橼酸钠 1 ∶ 9 抗凝,混匀后 3 000 r·min -1离心 15 min,收集
血浆,分装,冻存于 - 80℃。
2. 3 指标测定 称血栓重量,计算血栓抑制率,测定影响凝
血、纤溶及血小板功能的指标。
2. 4 统计学处理 数据均用 SPSS 16. 0 统计分析软件进行
处理,各组数据以 珋x ± s表示,各组数据比较采用 t检验。
3 结果
3. 1 榅桲果实多糖对血栓重量的影响 中、高剂量组均能
减轻动、静脉血栓重量,抑制血栓形成,差异有统计学意义
(P < 0. 05)(Tab 1)。
Tab 1 Effect of COM polysaccharides on thrombus weight(珋x ± s,n =8)
Group
Dose /
mg·kg -1
Artery
WWT/mg
Inhibitory
rate /%
Vena WWT
/mg
Inhibitory
rate /%
Control - 9. 63 ±1. 55 - 6. 14 ±0. 73 -
Aspirin 5 4. 84 ±0. 87* 49. 85 ±4. 14* 1. 48 ±0. 29* 75. 86 ±4. 52*
Ginkgo leaf tablets 20 5. 21 ±1. 00* 46. 11 ±4. 60* 2. 70 ±1. 43* 56. 12 ±6. 35*
Low dose 50 8. 40 ±0. 93 10. 21 ±5. 32 4. 08 ±1. 40 33. 42 ±5. 21
Middle dose 100 6. 51 ±0. 64* 32. 41 ±2. 75* 3. 22 ±2. 05**47. 55 ±4. 46**
High dose 200 5. 97 ±1. 85* 40. 64 ±6. 04* 2. 15 ±1. 54**64. 81 ±5. 38**
* P < 0. 05,**P < 0. 01 vs control group
3. 2 榅桲果实多糖对凝血功能的影响 高剂量组对个别指
标略有影响,而低、中剂量组均没有影响,差异无统计学意义
(Tab 2)。
·592·中国药理学通报 Chinese Pharmacological Bulletin 2015 Feb;31(2) :295 ~ 6
Tab 2 Effect of COM polysaccharides on coagulation function(珋x ± s,n = 8)
Group Dose /mg·kg - 1 TT /s PT /s APTT /s FIB /g·L -1 AT -Ⅲ /ng·L -1 PC /mg·L -1 D-D /pg·L -1
Control - 30. 88 ± 3. 28 16. 86 ± 0. 82 25. 20 ± 3. 86 1. 95 ± 0. 51 58. 52 ± 1. 59 3. 10 ± 0. 43 2 833. 5 ± 654. 17
Aspirin 5 40. 18 ± 1. 29** 18. 80 ± 2. 08** 38. 41 ± 0. 74* 1. 87 ± 0. 13 61. 58 ± 6. 17* 3. 16 ± 0. 08 2 545. 7 ± 153. 76**
Ginkgo leaf tablets 20 39. 38 ± 1. 06** 18. 16 ± 1. 94* 33. 88 ± 1. 22* 1. 74 ± 0. 10 60. 01 ± 4. 08 3. 09 ± 0. 14 2 708. 6 ± 262. 57*
Low dose 50 32. 01 ± 1. 38 16. 16 ± 1. 61 27. 66 ± 4. 19 1. 79 ± 0. 14 56. 05 ± 0. 75 2. 94 ± 0. 06 2 418. 9 ± 123. 77**
Middle dose 100 33. 76 ± 1. 22 16. 27 ± 1. 82 28. 41 ± 5. 74 1. 80 ± 0. 13 57. 54 ± 3. 86 3. 03 ± 0. 14 2 779. 4 ± 151. 37
High dose 200 37. 30 ± 1. 28** 16. 92 ± 5. 15 33. 71 ± 1. 59* 1. 67 ± 0. 20 62. 63 ± 4. 48* 3. 13 ± 0. 14 2 544. 4 ± 175. 33**
* P <0. 05,**P <0. 01 vs control group
3. 3 榅桲果实多糖对纤溶功能的影响 高剂量组能提高
PLG含量(P < 0. 05) ,t-PA、PAI-1 均略有变化,但差异没有
统计学意义(Tab 3)。
Tab 3 Effect of COM polysaccharides on
fibrinolytic function(珋x ± s,n = 8)
Group
Dose /
mg·kg - 1
PLG/
μg·L - 1
t-PA/
ng·L - 1
PAI-1 /
ng·L - 1
Control - 839. 30 ± 22. 68 10. 49 ± 3. 20 320. 83 ± 90. 48
Aspirin 5 932. 62 ± 66. 83** 13. 92 ± 1. 27* 332. 50 ± 35. 67
Ginkgo leaf tablets 20 872. 15 ± 70. 42* 13. 44 ± 1. 47 314. 18 ± 34. 83*
Low dose 50 812. 01 ± 45. 57 9. 66 ± 1. 24 412. 81 ± 73. 34
Middle dose 100 827. 86 ± 135. 31 12. 69 ± 1. 37 369. 60 ± 36. 85
High dose 200 914. 38 ± 86. 17* 13. 76 ± 1. 13 319. 56 ± 36. 95
* P < 0. 05,**P < 0. 01 vs control group
3. 4 榅桲果实多糖对血小板功能的影响 中、高剂量组均
明显升高 6-keto-PGF1α含量(P < 0. 01) ;降低 VWF、TXB2 含
量(P < 0. 05),差异有统计学意义(Tab 4)。
Tab 4 Effect of COM polysaccharides on
platelet function(珋x ± s,n = 8)
Group
Dose /
mg·kg - 1
VWF/
ng·L - 1
P-selectin /
ng·L - 1
6-keto-PGF1α /
ng·L - 1
TXB2 /
ng·L - 1
Control - 1 777. 7 ± 144. 52 15. 94 ± 0. 60 20. 13 ± 4. 67 430. 48 ± 39. 49
Aspirin 5 1 706. 3 ± 50. 49* 13. 90 ± 1. 25 19. 54 ± 1. 33 107. 48 ± 16. 75**
Ginkgo leaf tablets 20 1 714. 3 ± 50. 46* 13. 34 ± 1. 03 18. 86 ± 1. 32 88. 66 ± 9. 33**
Low dose 50 1 774. 1 ± 61. 02 14. 83 ± 0. 98 20. 73 ± 1. 46 281. 30 ± 36. 34
Middle dose 100 1 684 ± 44. 48* 14. 18 ± 1. 36 29. 50 ± 1. 42**112. 75 ± 28. 87**
High dose 200 1 675 ± 48. 75* 13. 48 ± 0. 22 39. 11 ± 7. 05**105. 92 ± 23. 75**
* P < 0. 05,**P < 0. 01 vs control group
4 讨论
血小板参与血栓形成过程的许多环节,在血栓形成过程
中起核心作用。实验结果表明,榅桲果实多糖对于凝血、纤
溶系统的影响不明显;而能减轻血栓重量,抑制血栓形成;升
高具有抑制血小板聚集作用的 PGI2 代谢产物 6-keto-PGF1α
含量,降低体内强效的血小板聚集剂 TXA2 代谢产物 TXB2
含量。TXB2 和 6-keto-PGF1α相互作用,抑制血小板聚集,从
而抑制血栓形成。VWF是反映血管内皮细胞损伤的相对特
异的血液学指标,是血小板黏附起点,VWF 明显升高,表明
内皮功能损伤,内皮损伤为血小板黏附聚集和血栓形成提供
结构基础。本实验中榅桲果实多糖降低 VWF含量而抑制血
栓形成。实验结果提示榅桲果实多糖抗血栓作用主要与抑
制血小板黏附和聚集有关。由于仅做了体内实验,而参与血
栓形成的因素很多,这有待于做进一步的研究和探索论证。
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