免费文献传递   相关文献

维药榅桲提取物对大鼠实验性血栓形成的影响



全 文 :维药榅桲提取物对大鼠实验性血栓形成的影响
乌兰巴依尔1, 周文婷2, 杨永新2, 王雪飞2, 阿不来提·阿布力孜2, 依巴代提·吐呼提2, 艾尼瓦
尔·吾买尔2*
(1. 新疆巴州卫生学校,新疆 库尔勒 841000;2. 新疆医科大学,新疆 乌鲁木齐 830054)
收稿日期:2010-05-15
基金项目:新疆维吾尔自治区科技计划项目(201033126)
作者简介:乌兰巴依尔(1973 -),女(蒙),高级讲师,从事药理学教学,新疆少数民族科技骨干特配学员。Tel:15199059020 E-mail:wu-
lan37110666@ 163. com
* 通讯作者:艾尼瓦尔.吾买尔,男(维),教授,博士,硕士生导师,研究方向:心血管药理 。Tel:(0991)4362421 Email:anwar. umar@ 126.
com
关键词:榅桲;血栓形成;6-酮-前列腺素 F1a;血栓烷 B2;血栓形成模型
摘要:目的:探讨维药榅桲 Cydonia Oblanga Miller(COM)对大鼠动、静脉血栓形成的作用及其作用机制。方法:采用
FeCl3 诱导大鼠颈总动脉血栓形成模型和结扎法所致下腔静脉血栓形成模型考察榅桲提取物的抗血栓作用;以放射免疫
法检测血浆中的 6-酮-前列环素(6-keto-PGF1a)、血栓烷 B2(TXB2)含量 。结果:榅桲提取物显著延长 FeCl3 诱导大鼠颈
总动脉血栓形成时间,并显著减轻动脉血栓重量,显著减轻结扎法所致下腔静脉血栓重量,明显降低 TXB2 含量和增加
6-keto-PGF1a的含量。结论:维药 COM具有较强的抗大鼠动、静脉血栓形成作用,其抗血栓作用形成的机制与抑制血小
板聚集和抑制 TXB2 合成有关。
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2010)12-2056-03
榅桲(Cydonia oblanga Miller,COM)在我国有着
悠久历史,是蔷薇科(Rsaceae)榅桲属(Cydonia)的
果树[1],是维吾尔医应用历史悠久的常用药材之
一。维文名为比叶(Biye),别名为蛮檀,英文名
Quince。据《新疆维吾尔药志》及《维吾尔常用药材
学》记载,榅桲 Cydonia oblanga Miller 除了降血压、
调血脂等作用外,还有补血、补脑、补肾、止咳、止泻、
利尿、治胃病、肝病、头晕、心慌、治疗月经不调、心脏
病等功效,其温中解暑、消食除胀,治疗中暑吐泻,消
化不良、关节疼痛等疾病[2]。
本课题组前期通过对榲挬提取物的药理实验研
究,发现 COM具有强大的抗凝血和纤溶作用。本实
验进一步研究榲挬提取物的抗动、静脉血栓作用和
对大鼠血浆中 6-酮-前列腺素 F1a(6-keto-PGF1a),
TXB2 的影响。
1 仪器、材料、动物
1. 1 药品与试剂 榅桲提取物(新疆医科大学药
学院药理教研室提供),阿司匹林(Sigma,No
2000641),银杏叶片(天津天士力制药有限公司,批
号 259),6-keto-PGF1a放免试剂盒(北京普尔伟生物
科技有限公司,批号 S 10950216),TXB2放免试剂盒
(北 京 普 尔 伟 生 物 科 技 有 限 公 司,批 号 S
10950213)。
1. 2 仪器 BL1500 电子天平(北京赛多利斯仪器
系统有限公司),KH-120M型台式高速离心机(上海
安亭科技仪器厂),秒表(上海秒表厂),分析天平
(梅特勒-托利多仪器厂),SK8210HP 超声仪(上海
科导仪器厂),自动放免仪(中国科大中佳公司)。
1. 3 动物 Wistar 大鼠,♂性,49 只,体重 300 ~
350 g,清洁级,均由新疆医科大学实验动物中心提
供,动物合格证字号(SYXK2003-0001)。
2 试验方法
2. 1 榅桲水提取物对大鼠颈动脉栓塞的影响[3-5]
Wistar大鼠,♂性,49 只,体重 300 ~ 350 g,随机分为
7 个组:生理盐水组(假手术组),模型组,榅桲提取
物小、中、大剂量(20、40、80 mg /kg)组,阿司匹林组
(5 mg /kg)和银杏叶片组(20 mg /kg),连续灌胃给
药 14 d,在末次给药 1 h 后,后腹腔注射 3%巴比妥
0. 5 mL /100 g,将麻醉大鼠,在无菌条件下,将大鼠
仰卧位固定于解剖架上,颈部剪毛,常规碘酒酒精消
毒,铺巾后沿颈前正中线做长约 3 cm 切口,分离其
左颈总动脉 2 cm,其下置小片塑料薄膜(3 cm × 1. 5
cm)用于保护血管周围组织,将血管测温仪置于已
分离的颈动脉远心端,记录其温度后将吸有 40%
6502
2010 年 12 月
第 32 卷 第 12 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
December 2010
Vol. 32 No. 12
FeCl3 溶液的小滤纸片(1 cm × 1 cm)敷于左颈动脉
上[6-9]。
假手术组用吸有生理盐水的小滤纸片敷于左颈
动脉上。记录从敷上滤纸片开始颈总动脉表面温度
突降所需时间,即颈总动脉血栓形成时间,即为堵
塞时间(occluson time,OT)。用滤纸吸取残血,称血
栓重量及计算血栓抑制率。
血栓抑制率 =生理盐水组血栓重 -给药组血栓重
生理盐水组血栓重
×
100%
结果见表 1。
表 1 榅桲提取物对 FeCl3致大鼠颈动脉栓塞形成的影响(x ± s,n =7)
组别 动物数 /只 剂量 /(mg /kg) OT /min 血栓重量 /mg 抑制率 /%
生理盐水组 7 - - - -
模型组 7 - 8. 71 ± 1. 20 15. 15 ± 0. 59 -
银杏叶片组 7 20 15. 77 ± 4. 07* 7. 14 ± 1. 23* 52. 90*
阿司匹林组 7 5 19. 49 ± 2. 52* 6. 40 ± 1. 53* 57. 76*
小剂量组 7 20 26. 96 ± 3. 85* 9. 93 ± 1. 72* 34. 44*
中剂量组 7 40 33. 28 ± 5. 98* 6. 96 ± 1. 62* 54. 04*
大剂量组 7 80 40. 74 ± 5. 80* 5. 37. ± 1. 48* 64. 52*
与模型组比较,* P < 0. 01。
2. 2 榅桲提取物对大鼠静脉栓塞的影响[6-10]
Wistar大鼠,♂性,49 只,体重 300 ~ 350 g,动物分
组,给药,麻醉方法同 2. 1 项。在无菌条件下,将大
鼠仰卧位固定于架上,腹部剪毛,常规碘酒酒精消
毒,铺巾后沿腹部正中切开大鼠腹壁,分离下腔静
脉,并于左肾静脉下方预置丝线,备结扎用。结扎下
腔静脉关闭好腹腔,结扎后 4 h 重新打开腹腔,于结
扎线下方 2 cm处夹闭血管,同时结扎静脉侧枝,纵
行剖开血管,观察有无血栓形成,若血栓形成,用滤
纸吸取残血,称血栓重量及计算血栓抑制率。结果
见表 2。
表 2 榅桲提取物对大鼠静脉栓塞的影响(x ± s,n =7)
组别
动物数
/只
剂量 /
(mg /kg)
血栓重
量 /mg
抑制率
/%
生理盐水组 7 - - -
模型组 7 - 19. 35 ± 9. 51 -
银杏叶片组 7 20 7. 76 ± 2. 43* 59. 88*
阿司匹林组 7 5 6. 53 ± 1. 77* 66. 27*
小剂量组 7 20 10. 89 ± 4. 02* 43. 74*
中剂量组 7 40 7. 46 ± 2. 20* 61. 43*
大剂量组 7 80 4. 96 ± 2. 13* 74. 35*
与模型组比较,* P < 0. 01。
2. 3 榅桲提取物对对大鼠 TXB2 和 6-kato-PGF1a含
量的影响[11-12] Wistar 大鼠,♂性,49 只,体重 300
~ 350 g,动物分组,给药,麻醉及手术方法同 2. 2
项。在无菌条件下,造模 90 min 后,快速分离腹主
动脉,取一次性 1 mL注射器吸取消炎痛-EDTA. Na2
液约 1 mL备用,取一次性 3 mL 抽血管快速腹主动
脉穿刺取血 3 mL,即刻将消炎痛-EDTA. Na2 液 0. 2
mL注入抽血管内,颠倒混匀,4 ℃离心 3 500 r /min,
15 min,分离血浆,- 20 ℃保存。采用放射免疫法
检测大鼠血浆中的 6-酮-前列环素(6-keto-PGF1a)、
血栓素 B2(TXB2)含量。结果见表 3。
表 3 榅桲提取物对大鼠血浆中 TXB2 和 6-kato-PGF1a
含量的影响(x ± s,n =7)
组别
动物数
/只
剂量 /
(mg /kg)
6-keto-PGF1a
/(pg /mL)
TXB2 /
(pg /mL)
生理盐水组 7 - 593. 96 ± 357. 89 242. 20 ± 117. 40
模型组 7 - 267. 22 ± 255. 05 717. 32. ± 299. 21
银杏叶片组 7 20 498. 80 ± 30. 98* 255. 25 ± 199. 68*
阿司匹林组 7 5 170. 60 ± 103. 77 78. 21 ± 42. 47*
小剂量组 7 20 558. 52 ± 314. 22 411. 01 ± 225. 02
中剂量组 7 40 334. 77 ± 156. 02* 191. 55 ± 154. 36*
大剂量组 7 80 384. 42 ± 334. 22* 91. 59. ± 62. 04*
与模型组比较,* P < 0. 05。
2. 4 实验数据的分析与处理 实验结果用 x ± s 表
示,各组之间比较采用 t 检验,试验结果数据采用
SPSS16. 0 统计软件包处理。
3 结果
3. 1 榅桲水提取物对大鼠颈总动脉栓塞的影响
结果如表 1 显示,与模型组相比,榲桲提取物各剂量
组均显著延长 OT,显著减轻动脉血栓重量(P <
0. 01)。榲桲提取物小、中、大剂量组的血栓抑制率
为 34. 44%、54. 04%、64. 52%。表明榅桲提取物能
延长 OT,抑制动脉血栓形成。
3. 2 榅桲提取物对大鼠静脉栓塞形成的影响 结
果如表 2 显示,与模型组相比,榲桲提取物各剂量组
显著减轻静脉血栓重量(P < 0. 01)。榅桲提取物
小、中、大剂量组静脉血栓抑制率分别为 43. 74%、
61. 43%、74. 35%。表明榅桲提取物能显著抑制静
脉血栓形成,且呈较好的量效关系。
3. 3 榅桲提取物对大鼠血浆中 TXB2 和 6-kato-
7502
2010 年 12 月
第 32 卷 第 12 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
December 2010
Vol. 32 No. 12
PGF1a含量的影响
[13,14] 结果如表 3 显示,与生理
盐水组相比,模型组 6-keto-PGF1a含量显著降低(P
< 0. 05),且 TXB2 含量显著升高(P < 0. 05);与模型
组相比,榲桲提取物小、中、大剂量组均明显降低
TXB2 含量,升高 6-keto-PGF1a的含量(P < 0. 05)。
4 讨论
FeCl3可损伤血管内皮损伤诱发血小板黏附和
聚集,促进血栓形成。静脉结扎使局部血流瘀滞都
能引起血管内皮细胞损伤,低氧,可激活凝血因子和
凝血酶在局部达到凝血过程所需的浓度,启动内源
性凝血系统,内皮细胞变性坏死,使血管内皮下的胶
原暴露于血流,可激活内源性和外源性凝血途径使
凝血酶、凝血因子活化,使凝血功能亢进。因血管内
皮细胞损伤使 PGI2 合成减少,血浆 TXA2 合成增
加,进一步促进血小板黏附和聚集,TXA2-PGI2 间平
衡失调,可引起血管收缩,血小板聚集,促进血栓形
成。
榅桲提取物各剂量组与模型组比较,均显著延
长了 OT(P < 0. 01);显著减轻动脉和静脉血栓重量
(P < 0. 01)。均明显降低 TXB2 含量(P < 0. 05),升
高血浆中 6-keto-PGF1a的含量(P < 0. 05)。实验结
果充分证明,榅桲提取物具有抗血栓作用,其作用可
能是通过抑制 TXA2 合成酶,从而使 TXA2 生成减
少,提高 6-kato-PGF1a而产生 PGI2 的途径增强,从而
维持 TXA2-PGI2间平衡,促进血管扩张,抑制血小板
聚集而抑制血栓形成。榅桲提取物抗动脉血栓作用
与抑制血小板黏附和聚集有关;抗静脉血栓形成作
用与抑制凝血酶、凝血因子有关。榅桲提取物具有
较强的抗动、静血栓作用,在抗血栓方面有一定的开
发利用价值。
参考文献:
[1] 茹克娅·沙德克.维吾尔常用药材学(上册)[M].乌鲁木齐:
新疆科技卫生出版社,1993:233.
[2] 新疆维吾尔自治区卫生厅,维吾尔药材标准(上册)[M]. 乌
鲁木齐:新疆科技卫生出版社,1991:183.
[3] kurz K D,Main B W,Sandusky G E Ratmodel of arterial thrmbo-
sis induced by ferric chloride[J]. Throm B Res,1990,60(4):
269-280.
[4] 刘小光,徐理纳. 一种能评价溶栓和抗栓药的大鼠大脑中动
脉血栓模型[J].药学学报,1995,30(9):622-667.
[5] 张玉珍. 银杏叶提取物(EGB)对大鼠局部脑缺血及颈静脉血
栓形成的保护作用[J].药学学报,1998,33(12):901-905.
[6] 刘 瑜,董小黎.血栓动物模型的建立[J]. 首都医科大学学
报,2002,23(3):871-872.
[7] 张 浩.血栓形成动物模型研究进展[J]. 浙江中西医结合杂
志,2007,17(4):462-464.
[8] Reyer L. Failure of asprin at different doses to modify experimen-
tal thrombsis in rat[J]. Thromb Res,1980,18(5):669-674.
[9] 蒋 辛,赵良中,张海龙,等. 原花青素对大鼠实验性血栓形
成的影响[J]. 中国实验血液学杂志,2007,15(3):617-620.
[10] Rhodes J M,Cho J S,Gloviczld P,et al. Throm bo lysis for exper-
imental deep venous throm bo sis maintains valvular competence
and vasoreactivtiy[J]. Vasc Surg,2000,31(6):1193-1205.
[11] 徐叔云,卞如源,陈 修主编.药理学实验方法[M].第 3 版.
北京:人民出版社,2005:1270-1273.
[12] Shan CW,Lin J H,Jin YH lnhibitory effects of prcainamide on
rabbit plaelet aggregation and thromboxane B2production in vitro
[J]. J Acta Pharmacol Sin,1991,19:164-166.
[13] 金云海,单春文,程远远,等.花椒油素滴肺血栓及 6-酮-前列
腺素 F1a和血栓素 B2 的影响[J]. 中药新药与临床药理,
2000,11(2):88-98.
[14] 邓伟峰,赵伟杰,吕 莉,等.乌苏瑞宁的抗血栓作用[J]. 中
草药,2007,38(12):1836-1838.
8502
2010 年 12 月
第 32 卷 第 12 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
December 2010
Vol. 32 No. 12