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外源激素对杂种酸模叶组培效果的影响



全 文 :外源激素对杂种酸模叶组培效果的影响
张 磊1 ,王震星1 ,刘玉芹1 ,臧风艳1 ,张文华1 ,刘 芳1 ,翟学信2
(1天津农学院 园艺系 ,天津 300381; 2 天津市板桥农场 ,天津 300222)
摘要: 对不同外源激素配比影响杂种酸模叶组培效果进行了试验 , 结果表明 ,诱导形成愈伤组织
和分化形成芽的最佳激素配比为 MS+1 mg/ L IBA+1 mg/ L 6-BA;促进芽丛分化的激素配比为
1/ 2 MS 附加0.5 mg/ L 6-BA+0.8 mg/ L IBA。还对试管内和试管外生根的激素选择及其成活率
进行了比较 ,试管外生根明显优于试管内生根。
关键词: 杂种酸模;外植体;芽丛;移栽
中图分类号:S482.8;S336  文献标识码:A  文章编号:1000-7091(2000)02-0081-04
杂种酸模系由蓼科(Polygonaceae)酸模属(Rumex )的 2个野生种远缘杂交后选育而成的
多年生饲料作物 。具有耐盐碱 、耐旱 、耐涝 、抗寒 、速生 、高产 、优质等生物学特性 ,非常适宜在
盐碱土 、风沙土等土壤栽培;其粗蛋白含量在 30%左右 ,且含有多种维生素及氨基酸 ,营养成
分好于苜蓿 、羊草 、串叶松香草等优质牧草;鲜草产量可达 150 t/hm2 以上 。该作物的推广种
植将改变传统的改土观念 、措施及途径 ,即由土地适应生物到生物适应土地 ,体现出改造与适
应相结合的原则 ,为盐碱土 、风沙土标本兼治 ,开辟了新的 、更为广阔的途径 。
目前 ,杂种酸模种子价格昂贵 ,并系远缘杂交种 ,后代性状不稳定而且严重分离 ,采用组培
技术进行繁育不仅可以保持品种特性 ,还可以降低成本 。
本研究以杂种酸模的叶子为外植体 ,探讨不同外源激素配比对诱导愈伤组织和芽丛分化
的影响 ,研究不同激素及浓度对芽丛生根和组培苗移栽成活率的影响 。
1 材料和方法
取天津市宁河县一年生的杂种酸模叶片为外植体 。切成 1 cm2大小接种在培养基上 。
诱导愈伤组织形成和分化的基本培养基为改良的 MS ,附加不同浓度和配比的 6-BA ,
IBA和 NAA(表 1 、表 2),蔗糖浓度为 10 ~ 30 g/L ,琼脂 0.7%,pH 值 5.8 ,培养室温度(26±2)
℃,光照强度 2 500 lx ,光照 12 h/d。试管内生根培养基为 MS 附加不同浓度的 NAA 和 IBA ,
蔗糖浓度为 10 g/L 。试管外生根 ,芽苗长到 2 ~ 3 cm 时扦插在含有石至石的浅盘器皿中 ,浇 1/2
M S附加不同浓度 NAA 和 IBA 的营养液 ,置于实验条件(25 ℃)下培养;芽苗用不同浓度
NAA 浸蘸 。2种试管外生根方法 10 d后观察生根率[ 1 ,2] 。
 收稿日期:1999-03-10
 作者简介:张 磊(1952-),男 ,教授 ,主要从事植物组织培养研究工作。
华北农学报 2000 , 15(2):81~ 84   
Acta Agriculturae Boreali-Sinica   
2 结果与分析
2.1 不同激素配比对诱导愈伤组织分化芽丛的影响
外植体消毒后接种于附加不同浓度和不同配比外源激素的培养基上 ,25 d后观察愈伤组
织的形成及分化情况。由表 1可见 ,在未加入 6-BA的 7号培养基中 ,只形成愈伤组织而未
形成芽 ,其余 6种因附加了 6-BA都分化形成了芽 ,说明 6-BA对芽的形成起着关键的作用 。
但在 6-BA 浓度相同的情况下 ,不同的生长素物质对愈伤组织形成和芽的分化作用不同 ,最
易形成愈伤组织的激素配比 ,并不一定最利于芽的形成 ,反之亦然。从上述实验结果看 , 4号
和 2号为最佳激素配比 ,不仅有利于愈伤组织的形成 ,而且有利于芽的分化 。
表 1 不同外源激素对杂种酸模叶形成的影响
编 号 激素组合(mg/ L) 接种外植体数
诱导愈伤组织
块数 %
分化成芽
块数 %
1  IBA 0.5+6-BA 1.0 30 23 76.7 17 73.9
2  IBA 1.0+6-BA 1.0 27 21 77.8 19 90.5
3  NAA 0.5+6-BA 1.0 30 26 86.7 10 38.5
4  NAA 1.0+6-BA 1.0 29 24 82.8 19 79.2
5  2 , 4-D 0.5+6-BA 1.0 31 31 100 7 22.6
6  2 , 4-D 1.0+6-BA 1.0 32 32 100 5 16.6
7  2 , 4-D 2.0 28 28 100 0 0
2.2 不同激素配比对芽丛分化的影响
将分化形成的芽接种在 1/2 MS 附加不同配比 6-BA和 IBA 的培养基中 ,15 d后观察芽
丛的形成及生长状况 。从表 2的结果看 ,6-BA 的存在影响着芽丛的形成 ,在 IBA 浓度相同
的情况下 ,形成芽丛的数量取决于 6-BA 的浓度 。在下表 4种激素配比中 , 6-BA 0.5mg/ L
+IBA 0.8 mg/L 的组合适宜芽丛的形成 ,且芽丛生长健壮。说明低浓度的 6-BA 有利于芽
丛的形成和发育 ,而高浓度的 6-BA对芽丛的形成不利 。
表 2 不同外源激素对丛生芽形成的影响
编 号 激素组合(mg/ L) 接种苗数 形成芽丛数 每株芽丛数
1  6-BA 2.0+IBA 0.8 28 56 2.0
2  6-BA 1.5+IBA 0.8 22 46 2.1
3  6-BA 1.0+IBA 0.8 26 87 3.4
4  6-BA 0.5+IBA 0.8 32 113 3.5
2.3 不同外源激素对组培苗试管内外生根的影响
芽丛组培苗接种在试管内生根培养基的生根情况列于表 3 ,可以看出 ,试管内生根适宜激
表 3 不同激素对杂种酸模组培苗试管内生根的影响
外源激素 浓度(mg/ L) 处理数(株) 生根数(株) 生根率(%)
NAA 1.0 32 26 81.3
NAA 2.0 35 31 88.6
IBA 1.0 33 13 39.4
IBA 2.0 36 18 50.0
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素是 NAA 。试管外生根采用扦插方法生根 ,苗高 3 cm 左右 ,带 3 ~ 5片叶子 ,消毒后扦插在含
有石至石为基质的育苗盘中 ,定期浇含有不同激素的营养液 ,10 d后统计生根情况 。从表 4可
见 ,NAA比 IBA 更有利于杂种酸模的生根[ 3] 。
表 4 不同外源激素对杂种酸模组培苗试管外生根的影响
外源激素 浓度(mg/ L) 处理数(株) 生根数(株) 生根率(%)
NAA 1.0 40 31 77.5
NAA 2.0 40 29 72.5
IBA 1.0 40 16 40.0
IBA 2.0 40 18 45.0
  受生长环境影响 ,NAA对促进试管内外生根的效果存在一定差异 ,试管内小环境好 ,无污
染 ,所以生根率高一些;而试管外是在有菌条件下完成生根过程 ,有部分芽苗受污染死亡 ,从而
导致生根率偏低 。
2.4 浸蘸不同浓度的 NAA对生根的影响
从试管中取出芽丛苗分成单株 ,每株带 3 ~ 5片叶子 ,表面消毒后用不同浓度 NAA 浸蘸 2
h后扦插在含有石至石或棉花的浅盘中 , 10 d后观察生根情况 ,从表 5 结果看 , 100 mg/L NAA
对生根有利 ,生根率达 63.3%,而高浓度 200 mg/L 的 NAA 反而抑制了生根 。从表 5的生根
率也可以看出 ,浸蘸 NAA处理不如低浓度 NAA长时间浸泡材料对生根有利。
表 5 浸蘸不同浓度的 NAA对生根的影响
外源激素 浓度(mg/ L) 处理数(株) 生根数(株) 生根率(%)
NAA     50 30     16 56.6
NAA 100 30 19 63.3
NAA 200 30 3 10.0
2.5 组培苗移栽成活率调查
我们对试管内生根和试管外生根的组培苗进行移栽成活率的比较 ,试管内生根的组培苗
开瓶炼苗 5 d后进行移栽 ,试管外扦插生根的苗15 d(含 10 d生根期)后移栽。结果表明 ,试管
外扦插生根苗移栽成活率高达 93.6%,远大于试管内生根苗的成活率(69.3%),前者在生根
过程中逐步适应了环境 ,经受了自然环境的锻炼 ,不适应环境的弱苗在生根过程中已经被淘
汰 ,移栽苗都是抗逆性强的壮苗 ,容易成活。
3 讨论
3.1 不同外源激素对杂种酸模叶形成芽丛的分析
2 ,4-D在杂种酸模叶诱导愈伤过程中的细胞启动脱分化阶段起主导作用 ,而在诱导分化
阶段效果不如 IBA和 NAA ,说明 2 , 4-D有抑制芽形成的副作用。NAA 和 IBA 分别与一定
浓度的 6-BA 配伍可促使诱导愈伤和分化 ,激素配比不同诱导和分化结果不同 ,当组织内细
胞分裂素/生长素的比值高时 , 6-BA 起主导作用 ,诱导芽的分化。因此 ,适当降低生长素的
比例 ,可促使芽丛的形成 。
3.2 试管内生根和试管外生根的比较
本次试验虽然可以看出试管内生根率明显高于试管外的生根率 ,但它在生根之后移栽之
832期            张 磊等:外源激素对杂种酸模叶组培效果的影响
前幼苗需要一个炼苗过程 ,从无菌状态的生长环境中过渡到有菌环境条件 ,在这期间一些弱
苗 、小苗因不适应环境条件的变化而死亡 ,降低了实际移栽成活率 ,而试管外生根的苗 ,不需要
一个特定的炼苗过程 。
3.3 试管外生根可节约成本 ,节约空间
在组培工厂化生产出酸模芽丛之后 ,即可开始扦插生根 ,扦插生根容器多种多样 ,可以在
各种原料制成的浅盘中 ,也可在廉价的营养钵 、育苗盘及其它简易容器中进行。扦插基质可以
是石至石 、棉花或其它物质 ,扦插空间可以在培养室外有自然光照射的地方。而试管内生根需
要MS培养基和在培养室内完成生根过程 。相比之下 ,试管外扦插生根节约成本 ,节约空间 ,
提高了移栽成活率 ,因此这是一项值得应用和推广的技术。
参考文献:
[ 1]  中国科学院上海植物生理研究所细胞编译室.植物组织和细胞培养[ M] .上海:上海科学技术出版社 ,
1978.
[ 2]  陈文龙 ,冯学赞 , 王大双.华北林木组培工厂化育苗技术研究[ M] .北京:中国科学院技术出版社 ,
1992.65.
[ 3]  张 磊 , 王震星 ,甘长强.梨组培苗室内嫁接技术的研究[ J] .中国果树 , 1998 ,(1):25.
Influence of Explant Hormone on Efficacy of
Leaf Cultural Tissue in Hybrid Slam
ZHANG Lei1 ,WANG Zhen-xing1 , LIU Yu-qin1 ,
ZANG Feng-yan1 , ZHANG Wen-hua1 , LIU Fang1 ,ZHAI Xue-xin2
(1 Department of Ho rticulture , T ianjin Agricultural Co llege , Tianjin 300381 , China;
2 T ianjin Banqiao Farm , Tianjin 300222 , China)
Abstract: Efficacy of leaf cultural tissue in hybrid slam with different explant hormone w as test-
ed.The best hormone making up of production callus and spli ted bud w as MS+1.0 mg/L IBA+
1.0 mg/L 6-BA.The hormone making up of production bud tussock was 1/2 M S+0.5 mg/L 6
-BA+0.8 mg/ L IBA.The product ion root of test-tub inside and outside w ith hormone selection
and survival rate w ere compared , the test-tub of outside is better than that of inside.
Key words: Hybrid Slam ;Explant;Bud tussock;Transplant
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