全 文 ：工艺·试验
《Technology＆Experiment》
doi:10.3969 /j.issn.1002-154X.2009.08.007
落葵多糖含量测定方法的研究
林爱琴　郭善慧＊　陈少昆
(福建师范大学福清分校 ,福建 福清 350300;＊福建出入境检验检疫局石狮办事处 ,福建 石狮 362700)
摘　要　比较了糖含量两种测定方法 ,苯酚 -硫酸法和蒽酮 -硫酸法 ,以葡萄糖为对照品 , 并测定落葵中多糖含量。
结果显示 , 苯酚 -硫酸法测定糖含量的精密度 、稳定性均优于蒽酮 -硫酸法 ,并用此法测得落葵多糖的含量为5.35%,
加样平均回收率 100.70%, RSD 1.15%。
关键词　落葵　多糖　苯酚 -硫酸法　蒽酮 -硫酸法
　
收稿日期:2009-06-12
基金项目:福建省教育厅科研资助项目(JB08251)
作者简介:林爱琴(1975～ ),女 ,讲师 、主要从事生物大分子方面研究
　StudyonMethodsforDeterminationofPolysaccharideContentfromBasela
LinAiqin　GuoShanhui＊　ChenShaokun
(FuqingBranchofFujianNormalUniversity, FujianFuqing350300;
＊ShishioficeofFujianExit—EntryInspectionandQuarantineBureau, FujianShishi362700)
Abstract　TwomethodsforDeterminationofPolysaccharidecontentfromBaselawasstudied.Phenol-sulfuric
acidmethodandanthrone-sulfuricacidmethodwereusedtocomparethestabilityandaccuracyoftheabsorption
curseafterchromogenicreaction.Theresultsshowedthatstabilityandaccuracyofthephenol-sulfuricacidmethod
wasbeter.Baselapolysaccharidecontentof5.35%, theaverageyield=100.70%, therecoveryRSD=1.15% were
determinedbythismethod.
Keywords　basela　polysaccharide　phenol-sulfuricacid　anthrone-sulfuricacid
　　落葵(BaselarubraL.)通称木耳菜 ,含有丰富的
无机盐和维生素 ,而且低热量 、少脂肪 ,还含有皂甙 、
葡聚糖 、粘多糖等药用成分。目前国内对落葵中多
糖 、皂甙等有效成分的研究甚少 。本实验从落葵中提
取多糖 ,对多糖含量测定方法进行比较 ,旨在找到一
种简便可靠的多糖含量测定方法 ,为落葵开发利用提
供依据 。
1 仪器与试剂
　　HH-4数显恒温水浴锅(国华电器有限公司),
GZX-9070MBE数显鼓风干燥箱(上海博讯实业有
限公司), 04967电子分析天平(上海越平科技仪器有
限公司), 721E型可见分光光度计(上海光谱仪器有
限公司),无水乙醇 、95%乙醇 、乙醚 、丙酮 、苯酚 、蒽
酮 、浓硫酸 、无水葡萄糖等均为分析纯
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第 23卷第 8期
2009年 8月 　　　 　　　　　　　 化工时刊ChemicalIndustryTimes　　　　　　 　　　　Vol.23, No.8Aug.8.2009
2 糖含量的测定方法与结果 [ 1、2]
2.1　最大吸收波长的选择
苯酚 -硫酸法:吸取一定浓度的葡萄糖对照品溶
液 0.2 mL,用蒸馏水补充至 2.0 mL,加入 5%苯酚
1.0mL、浓硫酸 5.0 mL,室温放置 30 min,于分光光
度计 470 ～ 510 nm范围内扫描 。测得最大吸收波长
为 488nm,结果如图 1所示 。
图 1　葡萄糖经苯酚一硫酸显色后的 UV谱图
Fig.1　UVspectrumofglucoseafter
phenol-sulfuricacidreaction
蒽酮 -硫酸法:吸取一定浓度葡萄糖对照品溶
液 0.2 mL,用蒸馏水补充至 2.0 mL,加入 0.2%蒽酮
-浓硫酸溶液 6.0 mL, 混匀 ,放在沸水浴中 15 min,
冷却至室温。于分光光度计 600 ～ 640 nm范围内扫
描 。测得最大吸收波长为 620 nm,结果如图 2所示。
图 2　蒽酮 -硫酸显色后的 UV谱图
Fig.2　UVspectrumofglucoseafter
anthrone-sulfuricacidreaction
2.2　稳定性考察
分别吸取适量的葡萄糖对照品溶液 ,按 2.1测定
方法操作 ,每隔一段时间重复测定最大吸收波长处吸
光度 ,观察吸光度随时间变化的情况。实验结果如表
1所示 ,在 1.5h内 ,苯酚 -硫酸法比蒽酮 -硫酸法稳
定 ,变异系数 RSD分别为 0.71%和 2.34%。
表 1　显色稳定性的试验比较
Table1　Compareofthestability
时间 /min
吸光度 0 15 30 45 60 75 90 RSD/(%)
苯酚 -硫酸法 0.467 0.461 0.460 0.456 0.450 0.450 0.448 0.71
蒽酮 -硫酸法 0.472 0.463 0.453 0.442 0.430 0.416 0.410 2.34
表 2　显色精密度实验结果
Table2　Compareofprecisionresults
编号
吸光度 1 2 3 4 5 RSD/(%)
苯酚 -硫酸法 0.485 0.480 0.483 0.480 0.478 0.28
蒽酮 -硫酸法 0.472 0.465 0.440 0.431 0.443 1.75
2.3　精密度考察
分别吸取适量的葡萄糖对照品溶液 5份 ,按 2.1
方法进行操作 ,结果如表 2所示 ,苯酚 -硫酸法精密
度明显高于蒽酮 -硫酸法 , 变异系数 RSD分别为
0.28%和 1.75%。
以上结果表明苯酚 -硫酸法比蒽酮 -硫酸法显
色在稳定性和精密度上都要好 ,因此落葵多糖的含量
测定采用苯酚 -硫酸法 。
3 落葵多糖含量测定方法与结果
3.1　落葵多糖的提取
称取粉状落葵 30g加 1∶15(W/V)水提取 1 h,温
度为 95℃左右 ,不断进行搅拌。 1 h后趁热抽滤 ,滤
渣按上述方法重复提取一次 ,合并滤液 (黄色的液
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林爱琴等　落葵多糖含量测定方法的研究　　　　　　　　　　　 　　2009.Vol.23, No.8　 化工时刊
体)。将滤液浓缩 ,用无水乙醇沉淀 ,静止过夜 ,离心
收集沉淀物 ,上清液回收乙醇。沉淀物依次用无水乙
醇 、丙酮洗涤多次 ,烘干即为落葵粗多糖。提取工艺
流程如图 3所示 。
图 3　落葵多糖提取工艺流程示意图
Fig.3　Technologicalflowchartofthe
polysaccharideextractedfromBasela
3.2　落葵多糖含量的测定 [ 3、4]
3.2.1　标准曲线的绘制
准确称取经 105℃干燥恒重的葡萄糖 25 mg,置
于 250 mL容量瓶中 ,加蒸馏水至刻度 ,摇匀。吸取葡
萄糖对照品溶液 0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、
0.40mL分别置于 25 mL容量瓶中 ,用蒸馏水补充至
2.0mL,加入 5%苯酚 1.0mL、浓硫酸 5.0 mL,室温放
置 30min,于 488 nm处测定吸光度 ,以葡萄糖含量为
横坐标 ,吸光度为纵坐标 ,绘制标准曲线 ,结果见图 4。
图 4　葡萄糖溶液吸收曲线
Fig.4　Absorptivecurveofglucosesolution
3.2.2　样品测定
准确称取落葵多糖 25 mg用蒸馏水溶解后定容
于 250 mL容量瓶中 ,吸取 1.0 mL样品溶液 ,用蒸馏
水补充至 2.0mL,按标准曲线步骤操作测得吸光度值
为 0.273,代入标准曲线方程进行计算:
样品溶液液中葡萄糖的含量 (0.273 -
0.0389)/21.903 0.0107(mg)
多糖的含量(%) [样品溶液液中葡萄糖的含
量(mg)×稀释的倍数 /多糖的质量(mg)] ×100%
(0.0107×25×20/100)×100%=5.35%
3.2.3　回收率试验
称取已知含量的样品 ,添加不同量的葡萄糖 ,进
行回收率试验 ,计算平均回收率为 100.70%, RSD
1.15%,具体结果见表 3。
表 3　加样回收率试验结果
Table3　Resultofrecoveryexperiments
编号 样品量 /mg 葡萄糖加入量 /mg 理论量 /mg 测得量 /mg 回收率 /(%) 平均值 /(%) RSD/(%)
1 0.22 0.011 0.231 0.229 99.24
2 0.24 0.012 0.252 0.2558 101.5
3 0.30 0.014 0.314 0.322 100.25 100.70 1.15
4 0.32 0.015 0.335 0.33498 99.99
5 0.40 0.018 0.418 0.4286 102.5
4 结　论
　　通过本实验 ,苯酚 -硫酸法在 5 ～ 40 μg范围内
呈良好的线性关系 ,而且其稳定性 ,重复性和回收率
方面均可以得到满意的结果 。此方法是测定落葵多
糖含量的理想方法 。该法具有操作简便 ,试剂便宜 ,
灵敏度高等优点 。
参考文献
[ 1] 　钟方晓 , 任海华 , 李岩.多糖含量测定方法比较 [ J] .时
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浙江大学出版社 , 1999:12 ～ 13
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