全 文 ：第 6 卷 增刊
19 92 年 10月
中 日 友 好 医 院 学 报
J O URN A LF O CH IN A
一
J AP AN F R I EN D SH P IH T P O S I A L
V ol
.
6
,
S u P P I
·
o e t o be r
,
19 9 2
蒲种壳多糖的免疫药理活性
李 洁 辛 张玉琴 丛 笑 赵武述 陈玉武 薛 智
(临床医学研究所免疫室 药物药理室 )
摘要 蒲种壳多糖 ( sL c )P 含有 14 . 1%的蛋白质和 81 %的多糖 , 其糖类由鼠李糖 、 岩藻
糖 、 甘露糖 、 菊萄糖 、 半乳糖和 已糖醛酸组成 。 I名C P 有使正常小 鼠脾淋 巴细胞凝集和有丝
分 裂的活性 ; 有促进活化的淋 巴细胞增殖的效应 。 正常小 鼠口服 sL c P 后 , 脾脏 白细胞增
多 、 脾淋 巴细胞产生白细胞介素 2 (I L一 2) 的水平提高 。 口服 sL c P 可部分地拮杭环磷酞胺
降低 白细胞数和 IL 一 2 产生的抑制作用 。
关键词 蒲种壳 多糖 有丝分裂 免疫增强
IMM U N O P H A R M A C O L O G I C A L A C T I V I T I E S O F L C S P O L Y S A C CH A R I D E S
L i J ie
, e t a l 1 9 9 2
,
6 ( S u P I
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)
:
2 5 4
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,
nI s t i t u t e o f C功 l i ca l M e d i ca l cS i e n e es )
A b s t r a e t : T h e P r o te in
一
b o u n d Po ly as e e h a r id e s w
e r e i s o l a t e d f r o m L
.
s ie e r a r i a ( M o l i n a ) S ta n d l
.
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.
e l a v a t a eS r ( L S C )
, a n d t h e i r ir n幻n u n o P h a r m a e o 10 g l c a l a e t i v i ti e s w e r e t e s t e d
.
SL C P
o l y sa e e h a r id e s
( L S C P ) co n t a in 14
.
1% p
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oet i
n s a n d 8 1% su g
a r s i n e lu d i n g r h a m n os e
,
f u e ose
,
g lu e os e
,
g a l a ct os e
,
m a n n o s
e a n d h e x u r o n i e a e id
.
L S C P h a ve a g g l u t i n a t i n g a n d m i t og e n i e P r o Pe r t i e s o n n or m a l m o u s e
l y m P h o e y t e s
.
T h e y P r o m o et t h e P r o li f e r a t io n o f P H A
,
C o n A o r L P S
一 a e t iv a t e d l y m Ph o e y t e s
.
o r a l
a d m i n i s t r a t i o n of L s C P 4 0 0 m g / k g
·
d X 6 o b v io u虹y i n e r e a s e s t h e s p一e n se l e u e oc y t es a n d I L 一 2
P r o d u e t i o n o f t h e s Pl e n i e l y m Ph o e y t e s
.
A d m i n i s t r a t i o n o f L S C P e o u ld P a r t ia ll y a n t a g o n i z e e y
-
e lo Ph o s Pha m id e ( C y e )
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f f e e t o f d ec
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一
2 rP od u ct i o n o f l y m Ph oc y t es
f r o m C y e
一
t r e a t e d m i e e
.
K e y w o r d s : L
.
s i e e r a r i a ( M o li n a ) s t a n d l
.
V a
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.
e la v a t a s e r ; op l y sa e e h a r ide ; 而 t o g e in e e f f e e t ; im -
m u n o P o te n ti a t i n g
包括中草药来源在内的许多多糖有刺激机
体免疫功能的活性 〔卜 5〕 , 有的还是药物免疫药
理 活性的主要成份 。 迄今尚未见蒲种壳 [ L
S i e e r a i a ( M o il n a ) S t a n d l
`
v a r
.
e la v a t a S
e r
] 多糖
的报道 。 本文初步研究了该多糖免疫药理活
性 。
l 材料与方法
L I 蒲种壳多糖
陈玉武等困制 自老熟 的蒲种壳干燥果片
(杭州产 ) , 经水煎 、 醇析 、 去蛋 白和超滤而得 。
分子量 1 万以上 , 是一类含蛋白质的多糖 〔L
s i e e r ar i a ( M o l i n a ) S ta n d l
.
v a r
.
e la v a at S
e r
.
Po ly sa e
-
e h a r i d e s
, 昭e P ) 。 其组成成分详见结果部分 。
1
.
2 小鼠及分组处理
N IH 小鼠 , 雄性 , 体重 18 士 1 9 , 购 自中医
研究院动物中心 。
动物随机分组 : I 组等体积生理盐水 op ,
, 女 , 31 岁 , 实习研究员
增刊 李 洁等 :蒲种壳多糖的免疫药理活性
作为对 照 ;, 组环 磷酞 胺 ( e y e lo p h o s p h a m i d e ,
e y e
, 上海制药十二厂 ) ip 2 2 0 m g / k g · d x Zd
后 , 等体积生理盐 水 oP ; 班 组 C yc iP dZ 后 ,
SL C P 5 0 0 m g / k g
·
d 又 6d Po ; VI 组 SL C P 5 0 0
m g / k g
·
d 又 6d p o 。于停药后第 Zd 摘脾 ,检查免
疫功能 。
1
.
3 致有丝分裂效应和白细胞介素 2 ( i nt er -
le u k in Z
,
i L
一
2 ) 产生的测定参见文献 〔5 、 7〕
1
.
4 L s cP 对活化淋巴细胞增殖的促进效应
正常小鼠的脾淋巴细胞 ,分别用 P H A ( iD f -
f e o ) 0
.
] 5%
、
e o n A ( s i gm a ) 5 卜g / m l 或 L P s
( s ig m a ) 2 0眼 / m l 活化 3d , 用 F ie o ll 法 回收活化
的细胞 。
活化淋巴细胞 2 火 1 0 5 / m l , 加或不加 SL C p
一2 5 拼g / m l , 保温 2 4h , 最后 6h 每培养孔加 3H -
T d R 1s k B q
, 测定参入的 e pm 。
1
.
5 L A K 细胞的诱导方法见文献 [ 8〕
2 结果
.2 1 SL
C P 的组成
SL C P 含蛋 白质 14 . 3%和 81 %的糖类 。 经
测定发现其 由鼠李糖 、 岩藻糖 、 甘露糖 、 葡萄
糖 、 半乳糖和已糖醛酸组成 , 这些单糖及衍生
物的分子 比 , 依次为 。 . 81 : 。. 7 : 。. 75 : 1 . 0 :
.0 50
: .2 5 ; 蛋白质部分氨基酸的克分子百分
比为 : A s p 1 3 . 0 8 , T h r 7 . 5 5 , eS r 5 . 9 3 , G l u
1 5
.
0 0
,
G L y 7
.
3 0
,
A l a 7
.
9 8
,
C y s 0
.
3 3
,
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.
3 0
,
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.
6 8
,
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.
3 2
,
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.
4 5
,
T y r 2
.
3 6
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4
.
9 9
,
L y s 3
.
1 2
,
H i s 0
.
9 0
,
A r g 4
.
5 2 和 p n o
3
.
1 8
。
.2 2 L S C P 的致有丝分裂效应
正常小鼠脾淋巴细胞加 sL c P 培养 , 细胞
凝集 、 细胞体积增大 , 呈不规则形 ; 胞浆增多
及 核仁 由致 密变疏松 , 呈典型的母 细胞化 。
用 3H 一 T d R 参入法测定 , 结果见表 l 。 SL C P 的致
有丝分裂效应甚至可与 P H A 和 oC n A 的作用
相比 。
.2 3 SL C P 促进活化淋巴细胞增殖结果见
表 2
L S C p 对 p H A 、 C on A 和 L p s 活化的细胞 ,
均有显著地促进增殖作用 , 且 SL c P 对 P H A 和
表 l 招 C P 对正常小鼠淋巴细胞的有丝分裂效应
多糖浓度 3 H一 dT R 参入 多糖浓度 坡 一dT R 参人昭 / m 1 c pm 灭士胭 阻 / m l c nIP 又士朋
0 24 9 0士 1 9 1 1 2 5 4 79 8 2士 8 0 4 1 `
7
.
8 2 2 3 1士 1 4 4 2 5 0 6 7 6 2 3士 2 6 2 2 价
15
.
6 2 0 6 78士 4 2 0 价 5 0 0 7 00 6 8士 7 9 3 6 .
3 1
.
2 2 5 3 96士 12 1 4 . 1 0 0 0 8 18 7 1土 4 0 8 否
6 2
.
4 3 09 4 1士 3 8 0 4 .
砚一 4 餐 P < 0 . 0 1
表 2 L S C P 对 P H A 、 oC -nA 或 u 书 活化淋巴细胞分裂的效应
3 H
dR 参入 cP m
活化淋巴细胞 L S C P
12 5 件g /m l
r 1L Z
1 0 U /m l
I卜 2+ 1另 C P
1 o u / m r 1 2 5 协g / m l
由 P H A 活化
由 c o n A 活化
由 L SP 活化
1 06 6土 3 5 7
13 0 0士 2 1 0
3 7 0 0士 4 2 2
2 06 2士 6 1 4 1 “
2 47 6 3士 6 6 0 梦
2 6 0 36士 3 9 4 6 奋
9 38 6士 2 3 2 6 .
18 5 0 6士 1 3 7 7 ,
2 3 4 9 2士 6 17 `
2 0 12 5士 1 4 0 1 ’
2 9 1 8 8士 1 8 45 书
, 一 4 v . 、 . c 组 * 尸 < 0 . 0 1
C on A 活化的淋 巴细胞在外源性 IL 一 2 推 动下
的增殖 , 也有 明显促进作用 。
2 SL C P 对 L A K 细胞诱导的影响
SL e p 促进 L A K 细胞生成 (表 3 ) , 加 SL e P
1 2 5 林g / m l 可提高 7 7% ~ 1 1 2% 。
.2 5 SL C P 的体内免疫效应
表 4显示小 鼠服作 sL c P后 , 白细 胞增多 ,
表 3 璐cP 促进 L A K 细胞生成
L A K 细胞生成 cP m诱导条件 —LS C P (一 ) L S C P ( + )r】Les Z 4 0 U / m l 4 8 2 2士 5 2 8 7 4 0士 2 37 9H C M 2 0 ;石, r IL 一 2 S U / m l 1 5 6 1 1士 3 07 3 3 9 0 3士 7 17 “H C M 2 0% , r IL 一 2 1O U /创 18 6 8 8士 18 19 3 3 0 8 1士 2 15 6 `: ~ 4 v . s . 相应不加多糖组 * p < 0 . 0 1
中 日 友 好 医 院 学 报 6卷
表 4比C P体内促进免疫的活性
组别
对照
给药后体重 8脾淋巴细胞 x1 0, /只 脾白细胞 丫 1。? /只 IL 一 2产生 u / m l
18
.
8土 0 . 6 7
1 4
`
7士 4 . 2
1 5
.
7士 2 . 1
1 7
.
3士 1 . 5
3
.
6 4士 0 . 6 7
8
.
3 0士 1
3
.
3 8士 1 . 3 0
1 0
.
9 0士 4 3 0
yC
C y e十 1石 C P
5
.
1 8
5
.
1
6
.
6 0
W 」万 C P
1 3
.
4 0士 3 . 3 0 1 0土 1 2 . 4 0
632607巧
.353.3
二d一匀7只Uōh亡只
产生 IL 一 2 的水平提高 , 且对 C yc 的抑制作用有
一定的拮抗作用 。
产生也高于 c yc 组 , 说明贷c P 有提高免疫拮
抗 c yc 的作用 。
3 讨论 4 参考文献
与 PH A 、 c on A 等有丝分裂一样 , L S C p 也
是一种含蛋 白质的复合多糖 , 也有凝集和致有
丝分裂作用 。 sL c P 的有丝分裂活性很高 , 除表
1所列数据外 , 本文还专门将其与 P H A 和 Con
A 比较 , 用 3H 一 T d R 参入法显示 , 加 SL C p 1 2 5
卜g / m l 刺激的有丝分裂反应 , 比最适剂量 PH A
刺激的反应高 1 倍 。 PH A 和 c on A 只作用于 T
细胞 , L p S 只作用于 B 细胞 , 前者称为 T 细胞
有丝分裂原 ; 后者称为 B 细胞性有丝分裂原 。
表 2 的结果显示 sL c P 促进 P H A 和 c on A 活
化的细胞增殖 , 抑制 L sP 活化的淋巴细胞增
殖 , 说明 sL c P 可能也是 T 细胞性有丝分裂 。
表 4是 2 批体内动物实验的结果 , 由于动
物批间的差异 ,实验结果在趋势一致的前提下 ,
也有差异 。 口服 sL c P 的小鼠脾白细胞数和脾
淋 巴细胞产生 IL 一 2 的水平提高 。 用 C yc 处理的
同时服用 sL c P , 白细胞可少下降 20 % , IL 一 2 的
C h iha ar G
.
In l m u n o Pha r m a c 0 10 g y of 食 n t i n a n an d 砂u ca n . lm -
m u n o Ph ar l ll a co l
, 19 8 4
,
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8 5
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, 19 8 8
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, 曰 5 . E c o no 而 c a n d M曰 ica 生lP an t
R e s e a山 V o l 1 . A ca dem i e P r es , 19 8 5 . 1 1 3
S e r g e e v A V , e t a l
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r u m o r a e t iv i t y
o f op l y as c hr id es o f P lan t or i g ln
.
iB u U E ks P BOI I M e d
,
19 8 5
,
10
:
7 4
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疫作用的研究 . 中日友好医院学报 , 19 8 9 , 3 : 194
陈玉武 , 薛智 . 蒲种壳免疫活性多糖 . 中日友好医院学报 ,
19 9 2
,
6 (增刊 ) : 2 4 8
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华微生物和免疫学杂志 , 19 9 1 , 1 1 ( 6 ) : 3 8 1
赵武述 , 等 . 对癌症患者外周血产生 L A K 细胞能力的观
察 . 中日友好医院学报 , 19 8 9 , 3 : 76
( 29 9 2
一
0 1
一 10 收稿 x o g Z一 0 6一 2 5 第 2 次修回 )