全 文 ：中国药师 , 9 9 9 年第 2 卷第 5 期 2 2 5
·药学研究 ·
蛇葡萄根的保肝降酶及抗 自由基损伤作用 关
张秀明 (湖北 中医学院 97 级研 究生 ) 陈科力 李翰明 张赤志 (湖北中医学院药学系 武汉 43 () 61 )
姚明全 (荆州市第一 人民医院 )
摘 要 用 件氛基半乳糖 ( O 一 ( alj N )制备大鼠急性肝损伤模型 , 检测血清谷丙转氨酶 (瓜 ’ f ) 、 谷草转氨酶 (八5 1、 )和肝 匀浆超
氧化物歧化酶 (义)D ) 、 丙二醛 ( N l l 〕A )含量 , 观察肝组织病理 变化 , 以 探讨中药蛇萄萄根 对急性肝损 害的保护 作用 结果显
示 : 蛇葡萄根能显著降低血清 、 U 」, 、 A ST 含量 , 提高以 刀) 含量 , 降低 M D A 含量 , 高剂量组还能减轻肝细胞受损程度 提 示
蛇葡萄根具有保肝降酶及抗 自由基损伤作用 〔
关键词 蛇葡萄 I ) 氨基半乳糖 急性肝损伤
葡萄科蛇葡萄属植物蛇葡萄 A 。 ,州吻八 对、 ; ca ( M i q . )
w
. 厂
f
.
W an g 的根为我 国民间中草药 , 具有清热解毒和 活血
化疲的作用 , 主要用 于治疗外伤科疾病 19 87 年我国台北
医学院 iL gl 一 L l n g Y an g 等川报道 , 以 巴14 和半乳糖胺诱导
初期培养的大鼠肝细胞产生毒性 , 从 12 0 种植物的醇提物中
筛选抗肝细胞毒性活性的药物 , 发现葡萄属 A . b re 二 i介交之u n -
。 、 al al T ar ut v
. 的根及其变种光叶蛇葡萄的根均可 显 著降低
c C坛和半乳糖胺所致的 八L T 升高 。 兹后 , 他们与 丫 巧h l t e ru
( )s hi m a 等合作 , 确定 了光 叶蛇葡萄根中抗肝细胞毒性的成
分 A n : p e lo p s i、 E rZ { 据研究 [ ’ , 4 , L in g一 L i n g Y a n 等报道所用
植物 A . 月~ i介“ u 、 ul at u T r au v
. 产 于我 国台湾 , 据其分布 ,
其与 A . , 。 〔二 ( M iq ) w . T . w an g 应为同 种植物 据此 ,
我们对其保肝作用进行 了体内实验研究
1 材料与方法
1 1 药物
蛇葡萄根采 自湖北省麻城县黄土 岗 , 原植物经作者鉴
定为蛇葡萄 A 对爪、 (M iq . ) W . T . W a gn ( ) 将该药材干燥后
粉碎成粗末 , 用 80 % 乙醇渗流 , 回收溶剂 , 残渣用蒸馏水溶
解 , 配成 1 m l含 1 9 生药的药液 , 用前混匀 。
联苯双酷滴丸 (北京协和药厂` ) , 批号 970 32( 八 D 一 G al N
(重庆医科大学化学教研室 ) , 批号 9 80 8 28 , 临用前用消毒生
理盐水溶解 , 以 I M 的 N 日0 11溶液调 pH 值至 7 , 最后 配成
浓度为10 % 的溶液 , 用前混匀 . )
谷丙转氨酶测定试剂盒 (上海荣盛生物技术有 限公司 ) ;
谷草转氨酶测定试剂盒 (上 海科华 一华菱诊断用 品 有 限公
司 ) ; 超氧化物歧化酶 (义 )D )测定试剂盒 , 丙 二醛 ( M l )A )测
定试剂盒 (南京聚力生物医学工_ 程研究所 ) _
1 2 动物
W ist
a r 大鼠 , 雌雄各半 , 体重 14 0 一 16 0 9 , 级标准 ,
山同济医科大学实验动物学部提供 , 合格 证号 为 医动字第
19
一
0 2 2 号 实验室 喂养 3 d 后开始实验
1
.
3 方法
大鼠随机分为 6 组 , 每组 8 只 , 雌雄各半 , 除正 常组 、
* 本课题 为湖北省自然科学基金 资助项 目
D
一
G al N 损伤组外 各组 按表中所给剂 量灌 胃给药 叫 , 连
续 7 〔 l 末次给药后 l h 除正常组外其余各组均腹腔 注射 1 0
% 的 D 一〔扭 IN 溶液 ( 6 00 , 11 g’ 雌 ’ ) , 禁食不禁水 , 2 4 h 后断
头取血 (不抗凝 ) , 按试剂盒说明书测定血清中 lA ’ 1( 金 氏
法 ) 、 八 S刁, (紫外 一苹果酸脱氢酶法 ) 另从右叶肝脏相同部位
切取 一小块肝组织 , 在冰浴下用生理盐水制成 10 叹,肝匀浆 ,
按试剂盒说明书测定 义 )l )( 黄膘吟氧化酶法 ) 、 M l叭 (硫代巴
比妥酸缩合法 ) 。 切取左叶肝脏 巨部位 大致 相同的 、 小块肝
组织 , 置 10 % 福尔马林液 中固定 , 按常规脱水 、 透 明 、 浸
蜡 、 包埋 、 切片 、 卜IE 染色 , 最后镜检 肝损伤严重程 度分级
如下 : ( 一 )无明显病变 ( + )肝细胞发生 变性 , 胞浆疏松及
混浊肿胀 。 ( + + )有范围较小的点状坏死或灶状坏 死 ( 十
+ + )有范围较大的带状坏死 或片状坏死 、 肝病理切片镜检
结果经 iR id t 分析 , 损伤组与正 常组有 显著差异 , 表明造模
成功 、 中 、 高剂量蛇葡萄根组 与损伤组相比均有 显著差 异 ,
肝损伤程度明显减轻 。 联苯双醋组 与损伤组 、 低剂量组与损
伤组无明显差异 A U r 、 入S刁. 、 义)I ) 、 M T)A 用方差分析 , 肝
损伤程度用 iR id t 分析
2 实验结果
蛇葡萄根提取物对 力 一 (翻 N 诱导大 鼠肝损伤的保护作用
见表 l 、 2
2
.
1 血清八U r 、 八g }、
损伤组与正常组有显 著差异 (尸 < 0 . () 1 ) 八U r 、 A盯 明
显升高 , 联苯双醋组 、 低高剂量的蛇葡萄根组均与损伤组有
显著差异 , A l丁 、 A S I , 明 显降低 低高剂量 蛇葡萄根组 、 联
苯双醋组相互间无 明显 差异
2
.
2 肝匀浆 吸 )I ) 、 Ml ) A
损伤组与正常组有显 著性差异 ( 尸< 0 . 0 1 ) , 阳D 明 显降
低 , M l )A 明显升高 。 两种剂量 的蛇葡萄根组 与损伤组相 比 ,
均有非常显著性 差异 , 城 )I, 明 显升高 , M l )A 明 显降低 两
种剂量的蛇葡萄根 组之间相 比较 , 低剂量组 以 )I 明 与自高上
高剂量组 (尸 < 0 . 05 ) 。 两种剂量的蛇葡萄根组 与联苯双醋组
相比 , 义)l 〕均非常明显高于联苯双酷组 , 有非常显著性 差异
( 尸 < 0 . 0 1) 、 肝匀浆 M l )八 含量 : 低 、 高剂量蛇葡萄根组 、 联
苯双醋组相互间无明显差异 、
2 2 6 C h i n a P ha m la e i s t 19 99
.
V
c , 1
.
2 N
o
.
5
表 1 蛇葡萄根提取物对 D 一G al N 肝损伤大鼠血清 A L I , 、 A S T 活力及肝损伤程度的影响
组别 剂量 g’ 吨 一 ’ A U I , ( j 士 、 ) IU · 1 0 0m l 一 ` A S T (历 士 、 ) IU · L 肝损伤程度
+ + + + + +
内j月z勺`
正常组
D aG lN 损伤组
联苯双醋组
蛇葡萄根组
0
.
0 5
7
4
2
.
5 6 士 5 2 . 1 6
6 4 3
.
6 3 士 8 2 . 4 2 爷
4 7 6
.
2 5 士 6 4 . 4 2△
3 6 6
.
2 5 士 17 3 7 6△
4 6 2
.
6 3 士 14 3 . 5 5△
2 1 1
.
5 6 士 3 5 . 4 8
8 8 3
.
3 9 士4 3 8 . 4 0 朴
5 0 0
.
7 0 士 18 6 . 0 8△
3 2 6
.
0 0 士 12 7 . 8 6△
4 4 3
.
5 7 士 16 9 . 3 4△
与损伤组相比 , △ P < 0 . 0 1 , △ △ P ( 0 . 05 与正常组相 比 , 苦 P ( 0 . 0 1
表 2 蛇葡萄根提取物对 D 一G al N 肝损伤大鼠肝 以工〕活性和 N江〕A含 t 的影响
组别 剂量 g’ 掩 以〕 D (厉 士 、 )N u · g 一 ’ 肝 N l 〕A (厉 士 、 )
~
l
·
g 一 1肝
正常组
D
一
aG lN 损伤组
取苯双醋组
蛇葡萄根组
0 0 5
7
8 2 0
.
16 士 7 6 . 5 7
6 4
.
9 4 士 5 0 . 0 5 件
5 7
.
8 8 士 4 2 . 0 1
3 2 1
.
8 5 士 2 2 5 . 0 1△
5 2 3
.
7 2 土 1 0 6 . 4 4。
2 6 8
.
6 1 士 6 3 . 9 6
4 3 8
.
0 6 土 16 8 . 7 1 苍
3 5 5
.
8 3 士 7 2 . 2 8
2 4 6
.
3 9 士 5 3 . 4 3△
2 7 6
.
9 5 土 2 6 . 1 9△
* △ 同表 1
2
.
3 肝损伤程度
肝病理切片镜检结果经 iR id t 分析 , 损伤组与正常组有
显著差异 , 表明造模成功 。 高剂量蛇葡萄根组与损伤组相 比
均有显著差异 , 肝损伤程度明显减轻 。 联苯双醋组与损伤
组 、 低剂量组与损伤组无明显差异 。
3 讨论和小结
D
一
aG lN 所致肝损伤模型 的肝组织病理学特征与人类病
毒性肝炎极为相似 , 且有极好的重现性和 一定的可逆性 5[] 。
D
一
G a 1N 通过在细胞 内与尿昔二磷酸 ( U l ) P )结合形成复合
物 , 致使 U l) P 耗竭 , 从而导致 R N A 和蛋白质的合成障碍 ,
最终导致肝细胞坏死 。 另一方面 , D 一 aG lN 引起肝细胞 内
aCz
十增多和 M才十 减少 e[] 。 aCz + 增多会抑制线粒体的呼吸功
能 , 激活磷脂酶 , 分解膜磷脂 , 破坏溶酶体膜 , 使蛋白水解
酶释放 , 并使黄嗓吟脱氢酶转化为黄嗦吟氧化酶 , 加速氧化
自由基产生 , 从而使肝细胞损伤加剧川 。 岌〕D 能抑制黄嗓吟
脱氢酶转化为黄嗦吟氧化酶 , 减少氧化自由基产生 , 减轻肝
细胞损伤 。 氧 自由基能攻击生 物膜 中的多不饱 和脂肪酸
( P U下 A )引发脂质过氧化作用 , 并因此形成脂质过氧化物如
醛基 ( M公气)及新的氧自由基等 。 初始的一个活性氧化导致
很多脂类分解产物的形成 , 氧自由基不但通过生物膜中 P U -
F A 的过氧化引起细胞损伤 , 而且还能通过脂质过氧化物的
分解产物引起细胞损伤 。 因而 M刃A 的量常常可反映机体内
脂质过氧化的程度 , 间接地反映出细胞受损的程度 。
D
一
aG lN 致大鼠急性肝损伤后 , 两种剂量的蛇葡萄根均
能降低血清 A L丁, 、 A引 , , 升高 以工) 活力 , 降低 Nl ) A 含量 ,
高剂量组能减轻肝组织受损程度 , 说明蛇葡萄根具有降酶 、
抗氧自由基损伤 、 在一定剂量下促进肝细胞修复的作用 。 与
损伤组相比 , 联苯双醋组血清中 A L T 、 A S T 明显降低 , 但肝
匀浆 岌 ) 1) 、 M l )A 、 肝组织受损程度与其无明显差异 。 由此可
见 , 蛇葡萄根对 D 一 aG 1N 致大鼠急性肝损伤有明显的防治作
用 , 其作用优于联苯双酷 , 其机理可能与促进肝细胞修复 ,
抑制过氧化反应 , 清除氧化 自由基有关 。
参 考 文 献
1 L ing
一
L ing y
a ll g , K u n
一
Y ign y
e n , Y 〕` s h ion bu K i阳 , et a l . 儿】t ih e aP -
t o t o x i e a e toln
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col 明渗产 , 1 9 8 7 , 1 9 : 1 0 3一 1 10
2 、、〕 s h i t e ru 晓h iarn , Y uj i U e on . 凡川祀】叩 s ins D , E , H a n d e i-s 儿1 1 -
详 lo sP in E , O lig o s t ill祀 n es f
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l咪olP s i s b r ve ip e dcun u la t a v ar
.
H a n c e i or
t s
. 月了〕么叉诀em ist 即 , 1 99 3 , 3 3 ( 1 ) : 1 7 9一 1 8 2
3 王文采 . 葡萄科的新发现 . 植物分类学报 , 1 9 79 , 1 7( 3 ) : 75
4 陈科力 , 陈远兵 ,罗毅 ,等 . 野葡萄根原植物的调查研究 . 中药材 ,
1 9 9 6
,
1 9 ( 4 )
: 1 76
5 陈奇 . 中药药理研究方法学 贵阳 : 贵州人民出版社 . 19 3 , 85 4
6 杜荔著 , 唐望先 , 但自力 , 等 . 中药肝炎平对急性肝损害防治作用
的实验研究 . 同济 医科大学学报 , 1 997 , 2 6 ( 2 ) : 1 51
7 钱涯邻 . 乙肝 1 号方对实验性急性肝损伤小 鼠抗 自由基损伤作
用 . 南京铁道医学院学报 , 19 9 8 , 1 7 ( 1 ) : 8
( 19 9 9 0 5 2 4 收稿 )
月桂氮罩酮及其混合透皮促进剂对苯佐卡因透皮吸收的影响
李盾 郑明新 王越 (深圳市人民医院药学部 5 1802 0 )’
摘 要 目的 : 研究月桂氮革酮 ( aoz ne )及其混合透皮促进剂对苯佐卡因透皮吸收的影响 。 方法 : 以简单小室为装置 , 以离体
大鼠皮为渗透屏障 , 用 紫外分光光度法测定 13 种供试品透皮接受液的苯位卡因浓度 。 结果 : 经方差分析 , 含 7 %
~
的苯
佐卡因软青的接受液浓度明显高于含 1 % , 3 % , 5 % , 10 % , 13 % , 16 % ~
e 的软青 (尸 < 0 . 0 1 ) ; 含 ~
e 和二甲基亚矾
(D M岌 ) )的混合透皮促进剂其接受液浓度明显高于单一 的 ~
e 组 (尸 < 0 . 0 5 ) 。 结论 : ~
e 时苯佐卡因有极显著的透皮促进
附页 C lli n aP h ra n ca list 1 999, V 6 1. 2 N c ) . 5
A B S T R A C T S O F O R I G I N A L A R T I C L E S
E f fl 叉 t s o f t h e R o t o f A m eP l 0 P s i s S i n i c a on P or t ce t ign L i v e r
,
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, 阴d R es i s t ign F er R od i e l e l川 u叮
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u b e i Q 刃l e g e of T . C . M , W Ll ll a n , 4 300 6 1 , P . R . Ch in a
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r a de 9 7
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in H u ibe 肠 11e g e o f T . C . M .
A丑S FR AC T CA u t e h e l〕a t i e i nj u口 n 五 xl e l of ar t s w er i dn u e de b y 俘 aG lN
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e t二 t司 . C h a z l g es o f h is t 0 I〕a t h o l呢 y we er ( )bse vr ed . T he r比 u lt s s hi 〕w 司 t ha t t h e e x tacr t of n x 〕 t s of A m州。 sP i s
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喇 u e i眼 e nz ” 爪巴 邵 ld esr is t i飞 lr e ar d i e le inj l」r y .
KE Y 硒D R D 6 A m加 ldP s is s i n ica , D aG lN , cA u t e h叩 a t i e inj u yr ( p . 22 5 )
E f h咒 t o f L a u r o c a P r a r . a n d I st M i x ed T ar n sd e n n a l A b so r P t ing A ce lear
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L I I沁n , Z h en M in x i n , W a l l g Y u e
P ll a m l a e y 】无p ar tm e n t , S ll enz h e ll P哪l e ’ s h洗 I〕i tal , S he nz he n 5 18 02 0 , p . R . C h in a
A叹刃R AC T A im : oT s t u d y t h e e f ce t of l a u 找℃a p amr (LP ) an d i
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