全 文 ：第 10卷　第 3期 胃 肠 病 学 和 肝 病 学 杂 志 Vol.10 No.3
2001年　　 9月 CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY September　 2001
＊广西科技厅青年科学基金课题(合同号 9912027)
作者单位:钟鸣　杨增艳　黄琳芸　余胜民 , 广西民族医药研究所
530001　雷晟　广西壮族自治区卫生防疫站　杨柏宁　广
西医科大学 530021
排钱草总生物碱对化学损伤性肝纤维化大鼠肝脏病理
及超微结构变化的影响＊
钟　鸣　杨增艳　黄琳芸　余胜民　雷　晟　杨伯宁
　　【摘要】　目的　观察排钱草总生物碱对肝纤维化大鼠肝脏组织病理改变的影响。方法　用四氯化碳(CCL4)复制肝纤维化大
鼠动物模型。结果　动物造模后光镜下肝细胞变性坏死程度加重 、胶原纤维分布明显增多。电镜下肝细胞及细胞器形态结构破坏
明显 ,贮脂细胞 、枯否氏细胞增多 ,胶原纤维分布广泛。经排钱草总生物碱治疗后 ,肝组织病变减轻 , 上述与纤维化有关细胞及胶原
纤维明显减少。结论　排钱草总生物碱可以减轻 CCL4致肝纤维化的病变程度 , 抑制肝纤维化的发展。
【关键词】　排钱草总生物碱　肝脏病理检查　超微结构
Effects of Desmodium Pulchellum(L.)Benth Total Alkaloids on Hepatic Fibrosis Rats Liver
Pathological and Ultrastructure Changes Induced by Chemical
Zhong Ming ,Yang Zengyan ,Huang Linyun , et al.
Guangxi National Medical Research Institute , Nanning , Guangxi 530001
　　【Abstract】Aim　To observe the curative effects of Desmodium Pulchellum(L.)Benth total alkaloids on hepatic fibro-
sis rats liver pathological tissue changes.Methods　The rats model of hepatic fibrosis was replicated by carbon tertachloride
(CCL4)hypodermic injection.Results　Optical injection , the denaturation and necrosis level of hepatocytes and the distribu-
tion of collagen fibrosis increased obviously after hypodermic injection of CCL4 for 6 weeks.Electron microscope , the shape and
structure of cell organells were destroyed obviously.Fat storing cells and kuppfer s cells increased.Collagen fibrosis distributed
extensively in the model groups.After 6 weeks treated with the total alkaloids of Dsemodium Pulchellum (L.)Benth , the
pathological changes and the collagen fibrosis related with hepatic fibrosis above-mentioned decreased significantly.Conclu-
sions　The total alkaloids of Desmodium Pulchellum (L.)Benth can decrease the pathological changes of hepatic fibrosis in-
duced by CCL4 , and prevent the development of hepatic fibrosis.
【Key Words】　Desmodium pulchellum (L.)Benth total alkaloids Hepatic pathological test Ultrastructure
　　排钱草(Desmodium pulchellum ,(L.)Benth)为广西
民间常用草药 ,据《中药大辞典》记载具有清热利湿 、活
血祛瘀等功效[ 1] 。民间常用来治疗急慢性肝炎 、子宫
脱垂 、血吸虫病肝脾肿大 、跌打损伤等。Ghosal[ 2]等曾
报道了排钱草对动物血压及心律失常等方面的影响 ,
作者曾报道了排钱草粗提物(水 、醇提取物)对大鼠实
验性肝纤维化的影响[ 3] 。根据文献记载和试验证明 ,
排钱草含多种吲哚类生物碱[ 4] ,为探讨该药物生物碱
类是否有直接的抗肝纤维化活性 ,本文观察了排钱草
总生物碱对化学损伤性肝纤维化大鼠肝脏病理及超微
结构变化的影响 。
材料与方法
　　一 、材料
1 、实验动物:Wistar 大鼠 75只 ,体重 232.7±12.2
g ,雌雄兼用。由广西中医药研究所实验动物室提供。
2 、药物:排钱草总生物碱参照文献[ 3]介绍的方法
进行提取和鉴定 。秋水仙碱(昆明制药股份有限公司 ,
批号 980825)。
3 、主要试剂:四氯化碳 、戊二醛 、多聚甲醛均为国
产分析纯 。
　　二 、方法
1 、动物模型:参考文献[ 5]进行 ,即以四氯化碳为
·230·
第 3期 碱对化学损伤性肝纤维化大鼠肝脏病理及超微结构变化的影响＊ ·231·
诱导剂 ,使肝组织形成慢性损伤和肝纤维化的方法。
各组动物除空白组外均进行造模 ,具体方法为第一次
皮下注射 CCL4 5 ml/kg ,以后改为 CCL4 40%花生油溶
液3 ml/kg ,每周 2次 ,连续 6周。
2 、分组及给药方法:完成造模后 ,各组按以下方法
进行治疗试验:(A)空白对照组 ,动物每天给予蒸馏水
20 ml/kg 灌胃 ,连用 42天:(B)病理组:同 A组 。(C)高
剂量组:动物每天给予排钱草总生物碱 15 mg/kg 灌
胃 ,连续 42天;(D)低剂量组:动物每天给予排钱草总
生物碱 10 mg/kg 灌胃 ,余同 C 组;(E)阳性对照组:动
物每天给予秋水仙碱 0.1 mg/kg灌胃 ,余同 C组。
3 、取材及超微结构观察:于实验第 42天 ,于戊巴比
妥钠麻醉下腹主动脉采血测定血清学指标(另文报道)并
将动物解剖 ,各组随机取 2只 ,右肝组织切取组织块 ,其中
一部分用 10%福尔马林液固定 ,HE染色制片用光镜观
察。另取部分肝组织切成每块 1mm3 ,用 2.5%戊二醛固
定后即送广西医科大学电镜室进行后固定 ,包埋切片 ,用
HITACHI-500透射电子显微镜观察并照像。
结果
　　1 、空白对照组:光镜下肝细胞形态大小正常 ,肝小
叶结构正常 ,分界明显 ,无炎性细胞浸润 ,汇管区见胶
原纤维少许 。电镜下肝细胞内细胞器结构如线粒体 、
粗面内质网形态正常 ,肝细胞核双层膜完整 ,核孔清
楚。贮脂细胞 、枯否氏细胞和成纤维母细胞均无增生
现象(见图 1)。
图 1　正常对照组　20000×
　　2 、病理组　造模 42天后 ,光镜下肝细胞坏死及炎
性细胞浸润明显 ,肝小叶失去正常结构 ,肝细胞索排列
紊乱 ,小叶散在性坏死 ,胶原纤维增生明显。电镜下可
见较多的肝细胞坏死;较多肝细胞破坏 ,部分细胞只剩
胞核;线粒体密度升高 ,嵴减少或消失;粗面内质网呈
紧密板层排列 ,糖原体减少或消失 ,肝纤维大量增生 ,
邻近纤维膈的肝细胞表面微绒毛稀少或缺乏 ,可以找
到较多贮脂细胞 ,枯否氏细胞和成纤维母细胞以及多
种炎性细胞浸润 。(见图 2 、图 3)。
图 2　病理组　3800×
图 3　病理组　8500×
　　3 、高剂量组:光镜下炎性细胞浸润及肝细胞坏死
明显比病理组轻 。电镜下肝细胞及细胞核形态接近正
常组 ,线粒体膜清楚完整 ,嵴可见 ,糖原丰富;肝细胞核
较完整 ,可见双层核膜及核孔 ,粗面内质网排列比较规
则 ,部分有脱颗粒现象。肝血窦 、肝细胞与细胞分界清
楚 ,肝细胞之绒毛清晰可见 ,可见不连续纤维膈 , Dissel
腔内贮脂细胞明显减少 ,周围胶原纤维及成纤维细胞
及炎症细胞明显减少 。(见图 4 、图 5)。
·232· 胃 肠 病 学 和 肝 病 学 杂 志 第 10卷
　　4 、低剂量组:电镜下改变基本同高剂量组 ,但内质
网脱颗粒现象较高剂组严重 ,部分线粒体嵴不清。(见
图6 、图 7)。
图 4　高剂量组　3800×
图 5　高剂量组　20000×
图 6　低剂量组　3800×
图 7　低剂量组　20000×
图 8　阳性组　3800×
　　5　阳性对照组:电镜表现基本同高剂量组 ,但肝
细胞增生及内质网脱颗粒现象较高剂量组严重 ,部分
线粒体嵴不清。(见图 8)。
讨论
无论是化学试剂诱导的肝纤维化模型 ,还是异种
抗原物质和免疫制剂诱导的肝纤维化模型 ,其病理改
变主要起源于汇管区 、肝细胞周围和增殖的小胆管周
围。其中汇管区的肝纤维化首先是纤维从汇管区呈放
射状扩展 ,胶原纤维增生并相互连接 ,将肝小叶分膈为
假小叶 。肝细胞周围的肝纤维化 ,其特点是正常肝小
叶内没有或缺乏成纤维细胞 ,甚至当肝小叶内已有明
显的胶原纤维存在仍难见到 ,在肝细胞大量变性坏死
同时 ,网状纤维变成较粗的胶原纤维 ,并逐渐增厚 ,残
存肝细胞呈代偿性增生 ,形成结节。胶原纤维也可在
肝窦周围发生沉着 ,同时肝细胞的微绒毛明显减少或
消失 ,内皮细胞下胶原纤维沉着而形成基 (下转第 251 页)
第 3期 生长抑素治疗重症急性胰腺炎的疗效再评价 ·251·
讨　论
重症急性胰腺炎来势凶猛 ,并发症多 , 病死率较高 , 目前尚
没有特殊有效的治疗方法控制 SAP 的发展。一般认为其发病
机制系各种致病因素致胰腺消化酶的激活 , 并产生一系列炎症
介质 、细胞因子促进急性胰腺炎的发生发展[ 3] 。SAP 是一种全
身的炎症反应 ,胰腺局部炎症的恶化和胰外器官损害的发生与
之密切相关。生长抑素可抑制胰腺的分泌[ 4] ,并具有对细胞保
护作用和对局部炎症的抑制作用[ 5] 。因此 , 应用生长抑素治疗
可能有利于减少合并症的发生发展 , 控制全身炎性反应程度 ,
从而改善预后。
经对比研究 , 生长抑素治疗后血清淀粉酶显著降低 , 临床
腹痛缓解时间明显缩短(P<0.05),从而减轻了 SAP病变程度 ,
缓解了临床症状。 Binder 合并症积分与 SIRS 积分下降幅度两
组间差异有显著性(P <0.05), 提示了生长抑素在 SAP 早期应
用 ,可明显改善机体重要脏器的功能状态 , 控制全身炎性反应
程度。治疗组病死率低于对照组 , 尽管差异无显著性(P >
0.05), 但已显示生长抑素治疗的临床价值 , 有改善预后的趋
势 ,而平均住院日相差不明显 , 可能与治疗开始时治疗组病情
相对较重有关。
由于急性胰腺炎的病变与胰腺缺血有关 ,而缺血又是由于
炎性介质和血管活性物质过度释放所致 , 虽然生长抑素可减轻
炎性介质释放 , 但其本身亦可直接导致胰腺和腹腔的血流减
少 ,可能会影响对重症急性胰腺炎的治疗价值的判断 , 而局部
并发症的发生率虽有下降 ,但差异无显著性亦可能与此直接相
关 ,今后可配合应用扩血管药物并进一步加强对比研究。
参考文献
[ 1] 中华医学会外科分会胰腺外科学组.第四次全国胰腺外科学术会
议摘要汇编.泰安 , 1992 , 1
[ 2] Binder M ,Uhl W , Friess H , et al.Octreotide in the treatment of acute pan-
creatitis:result s of a unicenter prospective trial with three different oct reotide
dosages.Digest ion ,1994 , 55 Suppl 1 ,55:20-3
[ 3] 陈灏珠主编.实用内科学第.10版.北京:人民卫生出版社 , 1997:
1649-57
[ 4] Jenkins SA , Berein A.Review article:the relative effctiveness of somatostatin
and octreotide therapy in pancreatic disease.Aliment Pharmacol Ther , 1995 ,
9(4):349-61
[ 5] 殷保兵 ,蔡端 ,张群华 ,等.急性坏死性胰腺炎肾损伤的机制及早期
生长抑素治疗后的影响.肝胆胰外科杂志 , 1999 ,11(2):74-6
收稿日期　2001　04　10
(上接第 232 页)　底膜 ,导致肝细胞物质与氧的交换障碍。
增殖的小胆管周围纤维化 ,主要因长期的瘀胆所致 ,这
时多从胆管周围开始 ,大量结缔组织包绕小胆管 ,毛细
胆管的基底膜含有较多的纤维成分 。本实验也观察到
了上述的一些基本病理改变。但肝纤维化是一个动态
的过程 ,若消除了肝损伤的致病因素 ,或进行治疗后肝
纤维化往往可能会发生逆转 ,表现为肝原纤维的降解
与吸收。这些过程主要由肝内的胶原酶 、透明质酸酶 、
弹性蛋白酶 、组织蛋白酶和吞噬细胞等来完成 ,排钱草
及其生物碱通过以上的作用途径可能具有促进纤维降
解与吸收功效。
排钱草具有清热利湿 、活血祛瘀等功效 。试验证
明:排钱草总生物碱具有明显的保肝作用 ,能显著提高
大鼠血清中TP 和ALB的含量 ,降低大鼠血清HA 、γ-球
蛋白含量及 ALT 活性 , 降低大鼠肝脏中羟脯氨酸
(Hyp)的含量 。提示排钱草总生物碱既能保护肝细
胞 ,减少肝细胞坏死 ,减少肝脏中纤维组织的形成 ,又
能促进已形成的肝纤维降解 ,从而起到抗肝纤维化的
作用[ 5] 。本报告从病理学角度再次显示排钱草总生物
碱有明确的抗纤维化作用。光镜和电镜观察显示:按
治疗肝纤维化实验研究方法 ,在形成化学损伤性肝纤
维化大鼠模型后 ,给予 20 mg/kg 和 15 mg/kg 排钱草总
生物碱治疗 42天后肝细胞结构完整 ,细胞变性 、坏死
及炎症细胞浸润程度均明显减轻 ,无明显纤维组织增
生。肝细胞器如线粒体 、内质网大多能维持正常形态
结构 ,贮脂细胞和成纤维母细胞数量减少 ,胶原纤维数
量减少 ,纤维膈有溶解 、吸收趋势 。因此 ,排钱草生物
碱对实验性肝纤维化具有明显的治疗作用 ,且在一定
剂量范围内随疗程的延长作用有所增强 ,量效关系也
能体现出来 。有关作用机理尚需进一步的研究 ,有关
胶原成分的定性定量分析也将另文报道 。
参考文献
[ 1] 江苏新医学院.中药大辞典.下册.上海:上海科学技术出版社 , 1986
(缩印本):2091
[ 2] Ghosal-S , Banerjee-sK , Bhattacharya-sK , et al.Chemical and pharmacologi-
cal evaluation of Desmodium pulchellum.Planta-Med , 1972 , 21(4):389-
409
[ 3] 钟鸣 ,黄琳芸 ,余胜民 ,等.排钱草对大鼠实验性肝纤维化的影响.
中西医结合肝病杂志 , 1999 ,9(4):22-4
[ 4] Ghosal-S , Murkerjee B.Occurrence of 5-methoxy-N , N-dimethyltryptamine
oxide and other tryptamines in Desmodium pulchellum.Chem Ind , 1965, 19:
793-4
[ 5] 陈奇.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社 , 1993:846
[ 6] 钟鸣 ,余胜民 ,黄琳芸 ,等.北京:排钱草总生物碱对实验性肝纤维
化动物相关指标的作用.(待发表)
收稿日期　2001　01　15