全 文 ：2008.11 试验研究
摘要:目的研究大孔吸附树脂纯化葎草总黄酮的工艺。 方法 采用 D101、HPD300、HPD400、AB-8
大孔吸附树脂对葎草总黄酮进行吸附纯化。以总黄酮的收率、质量分数为考察指标综合评价。结果
AB-8 大孔吸附树脂具有最佳的吸附洗脱参数， 其动态饱和吸附-洗脱量达 42.3mg/g，5 倍体积蒸
馏水、6倍体积 50%乙醇依次洗脱， 总黄酮收率为 90%，质量分数为 85%。 结论 AB-8 大孔吸附树
脂对总黄酮综合性能较好，适合于葎草总黄酮的分离纯化。
关键词: 葎草；总黄酮；AB-8树脂；分离纯化
Separation and purification of flavonoids from Humulus
scandens (Lour) Merr is by macroporous adsorbtion resin
Wen yong-ju Shen xiu-li Kang yan-ping
Yichun University, Yichun, 336000
Abstract: Objective To study the technology for purification of flavonoids from Humulus scandens
(Lour) Merr is by maeroporus adsorbtion resin。 Methods LD605， D101， DA 201， N KA 29， and
AB28 types of macroporus adsorbtion resins were used to separate and purify the flavonoids from Hu-
mulus scandens (Lour) Merr. The yields and purities of the p roducts were compared as indexes. Re-
sults AB-8 Type m acroporus adsorbtion resin had optimum adsorption and elution parameters with it
sdynamic saturated adsorption ratio up to 42.3mg/g. After eluted with 2 BV of distilled water and 2 BV
40% ethanol, the yields of to flavonoids was 85%， and content was 80%. Conclusion The AB-8 type
macroporu adorsption resin show better comprehensive adsorption property and can be used to separate
and pu rify the flavonoids from Humulus scandens (Lour) Merr.
Key words: Humulus scandens (Lour) Merr ; flavonoids; AB-8 resin; separation and purification
肖道安 1 石秋杰 *2 闻永举 1 申秀丽 1
(宜春学院， 江西宜春，336000;南昌大学化学研究所，南昌，330031)
葎草为一年生或多年生蔓性桑科植物,又名拉拉
藤、拉拉蔓、五瓜龙、拉拉秧、过沟龙,长达数米 ,生于
沟边、路旁、荒地。 我国大部分地区均有分布,生长密
集,极易采收。 葎草具有甘、苦、寒的性能 ,有清热解
毒、消肿、利尿功效,主治肺热咳嗽、肺痈、虚热烦渴、
热淋、水肿、小便不利、湿热泻痢、热毒疮疡、皮肤搔
痒等。 不仅可以作为药用，而且营养丰富,可作蔬菜、
饲料。 葎草叶含木犀草素葡萄糖苷、大波斯菊苷、牡
荆素等黄酮类成分。其黄酮含量在 2.4%，但乙醇提取
浸膏总黄酮含量最高达 13.66%，较为偏低。大孔吸附
树脂是一类新型非离子型高分子化合物， 主要通过
表面吸附、表面电性或形成氢键等作用进行吸附，具
有选择性好、解析容易、可反复利用等特点，目前主
要用于工业脱色、 医药工业的药物生物活性物质和
中药化学成分的提取分离纯化。 本实验在以往的研
究基础上以葎草醇提取液为研究对象， 采用大孔树
脂吸附技术进行了纯化， 同时对大孔吸附树脂进行
了筛选实验， 以找出对葎草总黄酮进行有效分离纯
化的树脂并确定最佳工艺。
1 仪器与试药
大孔吸附树脂分离纯化葎草
总黄酮的工艺研究
* 通讯作者：石秋杰，女（汉族），教授，博士，博士生导师，现南
昌大学化学研究所，主要从事工业催化方向研究。
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试验研究 2008.11
1.1 仪器
旋转蒸发器 RE-2000 （上海亚荣生化仪器厂）、
循环水真空泵 SHZ-Ⅲ型 （上海亚荣生化仪器厂）、
BS224S 电子分析天平 (北京赛多利斯)、T6 紫外分光
光度计(北京普析通用仪器有限公司)，UV win5 软件、
WH22震荡仪(上海沪西分析仪器厂)。
1.2 试药
葎草（采自宜春袁州区，80℃干燥）、芦丁对照品
（中国生物制品检验所，批号：0080 9705)、大孔吸附
树脂 D101，乙醇、甲醇、醋酐、三氯醋酸、浓硫酸均为
分析纯。
2 方法与结果
2.1 葎草药材中总黄酮的测定
2.1.1 标准曲线制备 精密称取干燥至恒重的无水
芦丁 20mg，置 100ml的容量瓶中，加 60%的乙醇至刻
度，摇匀，即得 0.20 mg/ml 对照品溶液。 精密吸取该
对照品溶液 2ml，4ml，6ml，8ml，10ml，分别置 25ml 的
容量瓶中， 加 5%亚硝酸钠溶液 1.0ml， 摇匀， 放置
6min， 加 10.0%的硝酸铝溶液 1.0ml， 摇匀， 放置
6min，加 4%的氢氧化钠溶液 10.0ml，用 60%的乙醇
稀释至刻度，摇匀，静置 10min 后于 512nm 处测吸光
度。 以浓度为纵坐标，吸光度值为横坐标进行线性回
归，得回归方程为: A=0.0114 C+0.0257, r=0.9997。 线
性范围：0.4～2.0mg/ml。
2.1.2 供试品溶液的制备 称取葎草叶粉末 500g，
75%乙醇 15 倍回流提取 1h，提取 2 次，合并提取液，
减压回收乙醇，加水稀释，以石油醚脱脂，弃去石油
醚液，水液定容至 500ml，即得供试品溶液。
2.1.3 测定 精密移取葎草水液 1ml， 加 60%乙醇，
定容于 10ml 的容量瓶中，按标准曲线制备项下处理
测定黄酮含量 。 得水液中总黄酮的质量分数为
13.2mg/ml。
2.2 大孔吸附树脂静态吸附和解吸试验
2.2.1 不同树脂对葎草总黄酮的静态吸附量试验
称取不同型号大孔吸附树脂 2.0g， 置 100ml 烧杯中，
加样品溶液 50ml，每隔 5min 振摇 10S，持续 10h，充
分吸附后，滤过，测定吸附前后溶液的吸光度值，计
算静态吸附率。 吸干经静态饱和吸附总黄酮后的各
型号树脂表面水分， 精密加入 75%乙醇 50ml， 每隔
5min 振摇 10s，持续 10h，充分解吸附后，测定洗脱液
中总黄酮的质量浓度，计算饱和吸附量和解吸率。 结
果见表 1。 可以看出 HPD100大孔吸附树脂吸附率和
解吸率均较高。 故选择 HPD100 大孔吸附树脂进行
进一步试验。
q= (P0-P1)Vm
；E= (P0-P1)P0
×100%；D= P2×Vmq ×100%
其中 q 为树脂的吸附容量(mg/g 干树脂)；E、D 分
别为吸附率和解吸率；P0 为葎草总黄酮提取液质量
浓度 (mg/ml)；P1、P2分别为吸附后和解吸后的滤液质
量浓度 (mg/ml)；m 为树脂质量 (g)；V 为解吸液体积
(ml)。
2.3 大孔吸附树脂动态吸附和解吸试验考察
2.3.1 动态吸附考察 将葎草提取液分别缓慢加入
装有 HPD100 树脂柱 (2.5cm×40cm)中 ，控制流量为
1BV/h，每 1BV 为 1 个流份，测定所各流份中的总黄
酮的质量浓度，结果见图 1。可以看出，从第 9个流份
开始，葎草总黄酮出现较大量泄漏,增至第 22 个流份
以后，曲线趋于平缓，即此时 HPD100 树脂对葎草总
黄酮的动态吸附趋于饱和，吸附量可达 40.66mg/g。
2.3.2 冲洗杂质用水体积的考察 将经预处理的
HPD100 大孔吸附树脂装入玻璃柱(2.5cm×40cm)中，
用 13.2mg/ml 葎草水溶液上样，以 1BV/h 上柱，上样
8BV，吸附完全后，分别以 1、2、3、4、5、6、7BV 水冲洗
(流量为 2ml/min)，每 1BV 为一个流份，测定吸光度，
计算总黄酮的质量分数， 同时测定每一流份的出膏
量，计算总黄酮的的损失率，见表 2。 可以看出，洗脱
表 1 不同树脂对知母总黄酮的静态吸附、解吸附能力
树脂 q（mg/g） E（%） D（%）
D101 44.1 57.6 95.5
HPD100 61.1 79.9 93.4
HPD300 49.1 64.2 96.6
HPD400 63.8 82.4 78.9
图 1 HPD100 大孔吸附树脂量与吸附时间关系
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2008.11 试验研究
图 3 乙醇洗脱用量的考察
水洗体积对吸附总黄酮的影响
水洗体积 总黄酮量(mg) 出膏量(mg) 损失率(%)
1 1.01 185.62 0.96
2 1.08 67.43 1.02
3 0.98 34.19 0.93
4 0.92 12.65 0.87
5 0.52 7.86 0.49
6 0.61 7.45 0.58
7 0.71 7.02 0.67
体积出膏量大于流出的总黄酮的量， 第五个洗脱体
积以后出膏量与总黄酮的量比例基本恒定， 不再减
小，选择 5BV为洗脱杂质用水量。
2.3.3 洗脱剂乙醇体积分数的确定 黄酮类化合物
易溶于甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂中，但由于甲醇
和丙酮的毒性和挥发性，因而选择乙醇作为洗脱剂。
实验选用体积分数为 20%～80%乙醇溶液对吸附饱
和度吸附树脂按照解吸步骤进行解吸，测定解析率，
确定洗脱剂乙醇的体积分数。 结果见图 2可见，乙醇
分数为 60%时，解吸附率最高，即解吸附液中的黄酮
量最高， 表明此体积分数的乙醇极性与提取液中黄
酮的极性相近，易于洗脱。
2.3.4 洗脱剂用量的考察 葎草水提液 8 倍量上
HPD100 树脂柱后， 分别以蒸馏水 5 倍量以 2ml/min
除杂，然后用 60%乙醇，每 20ml 为一个树脂床体积，
分别测定各洗脱液流份中葎草总黄酮的质量浓度，
计算解吸率， 确定洗脱剂的最佳用量， 绘制洗脱曲
线，结果见图 3。 可以看出：随着洗脱剂用量增大，解
吸率提高，但当洗脱剂量大于 6 时，解吸率的增大幅
度已不明显，从节省溶剂的角度考虑，选择洗脱剂的
量与树脂柱床比例为 6︰1。
2.3.5 吸附-洗脱性能稳定性试验 准确量取已处
理好的 AB28 干树脂约 80g，湿法装入玻璃柱(50cm×
4cm)中，葎草提取物溶液 150ml(13.2mg/ml)以 1BV/h
上柱，用蒸馏水洗 5BV 后，用 6BV 60% 乙醇以 1BV/
h洗脱，收集洗脱液。重复以上操作。重复上述操作 2
次，分别将各次洗脱液减压蒸发，浓缩，干燥，测定。
结果总黄酮的量分别为 2.65、2.71、2.68 g， 转移率分
别为 91.44% 、93.15% 、92.13% ， 质量分数分别为
84.47%、83.40%、85.12%。
3 结论
通过对 5 种大孔吸附树脂的静态吸附研究发现
HPD100 型大孔吸附树脂是一种比较理想的树脂，吸
附量大， 解吸率高， 较适合葎草中总黄酮的分离纯
化，具有操作简便、重现性好、消耗少等优点，具有较
好的推广应用前景。
葎草中总黄酮的纯化工艺选用 HPD100 大孔吸
附树脂， 上柱药液质量浓度为 0.125～0.20mg/ml，50g
湿态树脂可以处理 15g 生药， 洗脱流量为 1BV/h，以
蒸馏水洗脱 2BV 后，再用 40%乙醇洗脱收集 2BV 即
可。 葎草提取液未纯化之前总黄酮的质量分数为
48%左右，出膏率为 26%，所得纯化物中总黄酮的质
量分数在 80%以上，出膏率为 15%，可见经过大孔吸
附树脂纯化后体积分数提高 30%以上， 出膏率降低
了 10%以上，从而为新药开发提供了选择。
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图 2 不同乙醇体积分数对 HPD100 大孔吸附树脂的影响
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