全 文 ：_一广主医学1 9工 g年第1 0卷第 2期
E LIA S测定血清中野觅菜花粉特异恤 g E
杭体的研究和临床应用
中山 医科 大学孙逸仙纪念医院 张德洪 刘启 良 李佛梅 张森泉
L
血清总 g IE水平的测定己证实有助于对支
气管哮喘 (简称哮喘 )的诊断和分型 , 但血清
总 lg E 的增高只说明有变态反应的存在而无特
异性 。 哮喘的发病主要 与抗原特异性 I g E 抗体
的产生有关 , 因此 , 更重要的是特异性病因诊
断 。 野宽菜 ( 刺 芡 , A m a r a n t h u s s p i n o s u s
lL n n ) 花粉是本地区引起哮喘过敏反应的最常
见吸入性花粉抗原之一 其分布地区广泛 , 全年均有开花 , 花粉量较大川 , 据 我 院 临 床观
察 , 71 . 4%哮喘患者皮试是阳性反应 , 提示其
在哮喘发病学上可能起重要作用 。 以往是通过
抗原皮试作为特异性病因诊断的依据 , 但抗原
皮试属体内检测方法 , 存在一些缺点 , 而体外
杭原特异 I g E 的测定不但可以弥补皮试的缺点
还可 作 前 后 比较性评价 , 在过敏症状出现前
己能测得特异性 gI E 抗体 , 是较理想的特异性
抗原检测方法 , 对哮喘的病因诊断和研究及治
疗都有实际意义 。 本文试图探索建立 E L IS A 测
定野芡菜花粉特异性 gI E 的方法并 应用 于临
床 , 探讨抗原特异性 gI E 与相应抗原皮试的关
系 。 为临床和科研工作提供有用的特异性病因
诊断方法 。
研究对象和方 法
一 、 研究对象 : 哮喘组 10 3例野 觅 菜花粉
皮试阳性和 25 例野芜菜花粉皮试阴性的外源性
和棍合性哮喘病人 , 皮试前 48 小时停用抗组织
胺类药 。 对照组红例脐血 , 加名野免菜花粉皮
试阴性正常健康人 ( 无过敏病史 ) 。
二 、 测定方 法 : 参 照 E n g va U 等 介 绍 的
B lL s A间接法 ’ ` ’进行测定 。 野芡菜花粉抗原由
本专业组用 oC aC 氏液提取 , 抗原提取 液蛋 白
含量为 1 . 3m g / m l , 皮内试验及特异性 gI E测定
均用同一批抗原提取液 。 选出实验中各最适工
作条件后 , 测定 1 03 例野芡菜 花 粉皮试阳性和
25 例皮试阴性哮喘患者血清中该抗 原 特 异性
I s E 水平 。
特异性 gI E 抗体水平 以光密度 ( o . D ) 值
表示 , 计算公式为 :
特异性 gI E水平 ( 0 . D值 )
样本实测 0 . D值一空白对 J报0 . D 道
一 阴性对照 o . D值一空 白对照 o . D似
特异性 gI E 水平超过正常人平均光密度值加 2
个标准差为阳性 。
三 、 统计方法 : 各组特异性 sI E 水平比较
用 t 检验 。
结 果
一 、 E L I S A 测定野芡菜花粉特异性 gI E的
结果 : 分别测定新生儿脐血 、正常人 、野觅菜皮
试阴性和阳性哮喘患者血清特异性 gI E 水平 。
经统计学处理各组平均特异性 I g E 水平与正常
人比较有显著或非常显著性的差异 (表 1 ) 。 本
衰 1 脐血 、 正常人 , 皮试阴性和阳性
哮嗯班者血清肠览菜特异性 1g E 比较
例数 O . D值 P值
阵 血 2 1 0 。 < 0 。 0 1
正 常 人 2 0 0 。 公
哮喘病人皮试 ( 一 )
哮喘病人皮试 ( + )
2 5 1
。
O
` 、
O
。
O』
1 0
.
3 1
。
5 2 < O
。
0 0 1
文采用正常人平均特异性 gI E 水平加 2 个标准
差作为正常上限 , 高于此标准 即特异性 gI E 测
定阳性 , 本文的正常上界为 1 . 26 0 . D值 , 脐血
和正常人特异性 gI E 水平均低于此上 限 , 大部
分 ( 2 2 / 2 5) 皮试阴性哮喘患者特异性 gI E水平亦
低于此限 , 而大部分 ( 7 9 / 1 0 3) 皮试阳性哮喘患
者则高于此上限 , 经统计学处理 , 各组平均特
异性 gI E 水平与正常人比较有显著或非常显著
DOI : 10. 13820 /j . cnki . gdyx . 1989. 02. 016
。 ` 8 3·
性差异 。 ,一二 、 哮喘患者血清野芡菜花粉特异 性 I g E
和过敏原皮试的关系 : 比较 1 03 例野觅 菜花粉
皮试阳性和25 例野觅菜花粉皮试阴性哮喘患者 ’
特异性 坛E 与皮试结果关系 , 1 03 例皮试阳性患
者中 , 特异性 gI E 阳性 79 人 ( 7 6 . 7% ) ; 25 例皮
试阴性患者 , 特 异性 gI E 阴性 2 人 (8 8 % ) 。
在共 12 8例患者中 , 两者结果一致者有 1 01 例 ,
总符合率为7 8 . 9% 。
衰 2 哮叨息密血清好览某
特异性 晒E与皮试的比较 ·
皮 试
_ _ _ _ _ _ _ _
_
_一一 一 合 计
+ 一
特异性 I叨 . 十 79 3 82
特异性 1 . E 一 24 2 46
合 计 1 0 3 2 5 1 28
. 特异性 I g E 超过正常上 限为阳性
讨 论
.特异性 I g E 水平 的判 定 标 准有 多 种形
式` ” ` ’ , 本文采用正常人平均特异 性 gI E 水平
加 2 个标准差作为正常上限 , 高于此标准即为
特异性 I g E 测定阳性 。 本文的正常上限为 1 . %
o
.
D值 。 我们注意到 , 脐血平均特异性 gI E 水
平为 0 . D值。 . 4 , 此值的 3 倍即 1 . 2 0 . D值 时 ,
与正常上限很接近 , 正常人特异性 gI E 水平均
在此范围内 , 由于脐血中总 I叨 和特 异性 gI E
含量很低 , 影响因素很少 , 且易获得 , 因此 ,
脐血可能是较理想的阴性参考血清 。
野芜菜花粉皮试阳性哮喘患者血清特异性
gI E 水 平与正常人和皮试阴性哮喘患者比较有
非常显著性增高 , 为野芡菜花粉特异性 I gE 的
侧定在临床应用提供了可能性 。 对新生儿脐血
的侧定结果显示 , 新生儿野芡菜 花 粉 特 异性
I叨 含量极微 , 与正 常人比较有非常显著性差
异 , 提示正常人血清中可能存在低水平的野英
菜花粉特异 I g E 抗体 , 表明正常人也可能在野
览菜花粉抗原刺激下产生抗 原 特 异 性 gI E 抗
体 。 但正常人并不产生过敏症状 , 野宽菜花粉
皮试阴性反应 。 这一事实 , 在一定 程 度 上 证
卖机体具有健全的免疫调节机制 , 抗原特异性
I g E抗体反应是处在受抑制状态 。 虽 然 这一结
果仍需进一步研究证实 , 但从免疫学理论来说
是完全可能的`” ’ 。 由此 . 我们设想 , 对婴幼儿
时期抗原特异性 lg E 抗体以及总 gI E 作定期追
踪观察 , 以特异性 I g E 和总 gI E 测定作为研究
手段观察抗原接触与哮喘发病的关系 , 有可能
对哮喘等变态反应性疾病的发病机理 , 病情观
察和治疗研究提供重要的线索。
有关资料提出 , 特异性 gI E 水平与相应皮
试反应强度有关 。` ’ 。 由于本文绝大部分病人皮
试结果为 ,’1 + ” , 未能对此进行观察 , 但亦注意
到 , 在皮试 阳性哮喘病人中 1 例皮 试是 ,’3 + ”强
阳性者 , 其特异性 lg E 水平为 2 . 1 2 0 . D 值 , 远
远高于正常上限 , 提示两者的关系可 能存在 。
但例数少 , 不能作结论 , 有待进 一步观察 。 较
多的研究指出 , 特异性 gI E 与过敏原皮试之间
的一致性往往有一定差距 `“ ’ 7 ’ 。 本 文的研究也
有类似结果 。 在25 例野芜莱花粉皮试阴性患者
中 , 两者的符合率为8 % ; 10 3例皮 试阳性患
者 , 两者的符合率为 7 6 . 7% ; 而 总符 合率为
78
.
9%
, 显示两种方法的一致性 尚有 一 定差
距 。 两者差别的原因可能与下 述 因素有关 :
( 1) 皮试反应机理与特异性 gI E测定不同 。 皮试
反应是复杂的生物学过程 , 与肥大细胞的质和
量 , 肥大细胞膜 gI E 受体数目 、 肥大细胞膜上
特异性 gI E 水平及肥大细胞介质释放能力和皮
试对介质的反应性有关。 特异性 gI E 测定是免
疫学反应 , 仅表明血中特异性 I gE 水平 ; ( 2) 抗
原浓度直接影响皮试结果 , 不适合的浓度可致
假阳性或假阴性 , 不纯抗原含有的非特异性抗
原成份会导致肥大细胞组织胺释放 , 也可导致
皮试假阳性 。 抗原效价也会影响皮试结果 。 皮
试本身的因素也可影响其结 果 , ( 3) 组织和血
清中的特异性 坛 E 抗体水平 并 不一致 ; ( 4) 抗
原和特异性 坛E 抗体在体内和体外的反应性可
能有所不同` 7 ’ , ( 5) 特异性 gl E 测定 系 统中不
纯抗原可 引起非特异性结合增加而特异性结合
减少 , 可能造成测定结果的假阳性和假阴性 ;
( 6) 抗原特异性I沙抗体的存在 , 干扰了特异性
户东医学 1 9 8 9 年第10 卷第 2 期 奋, 3 9 ·
I g E 的测定 ; ( 7) 短时程致敏性 gI G 抗体亦可引
起皮试反应阳性 `吕 ) 。 囚此 , 特异性 gI E 测 定和
皮试之间的不一致是可 以理解的 。
特异性 gI E 和皮试不一致的差距 , 有可能
通过提高特异性 I g E 检测的敏感性和特异性 ,
适当的病例选择和采用纯化的抗原得以较好的
解决。 H o f m a n 等 `” 用纯化的抗原比较特异性
I叨 与皮试的一致性显示 , 以皮 试 ,’2 * ” 以上为
阳性时 , 两者的符合率为 98 % 。 因此 , 本文认
为 , 制备纯度较高的抗原 , 做好抗原标准化工
作及选用适当的皮试抗原浓度 , 为特 异 性 gI E
测定提供优质纯化抗原 , 就有 可 能使 特异性
下叨与过敏原皮试之间差距缩小 , 特异性 gI E测
定就能更可靠地应用于临床 。
综上所述 ,本文研究显示 , 新生儿脐血和正
常人血清野芡菜花粉特异性 gI E 水平均在正常
范围内 , 大部分 ( 2 2 / 2 5人 )野芡莱 花 粉皮试阴
性哮喘患者特异性 gI E 水平亦在正常范围内 。
大部分 ( 79 / 1 0 3人 )皮试阳性哮 喘 患 者 特异性
gI E 高于正常范围 , 与正常人比较有非常显著
性差异 (P < 0 . 0 0 1) , 显示用本法测定抗原特异
性 gI E 抗体是可行的 , 为临床对支气管哮喘等
外源性过敏疾病的特异性病因诊断提供了一项
有用的实验室检查方法 。 比较野芡莱花粉特异
性 gI E 抗体测定与相应过敏原皮试结果 , 两者
尚存在一定差距 , 两者符合率在皮试阴性哮喘
患者为88% , 皮试阳性哮喘者为76 . 7% , 总符
合率为 ( : 姐 / 1 2 8 ) 7 8 . 9 ;石。 因此 , 临 床 应用中
两种方法可相互配合相互补充而使特异性病因
诊断更可靠和准确 。
参 考 文 献
1
. 赖乃撰等 : 中华 耳 鼻 咽 喉科杂志 1 9 8 3 , 18
( 4 ) : 2 1 9
2
.
E n g v a l l E a n d P e r lm a n n P: J Im m un
o l
1 97 1; 1 0 9 . 1 2 9
3
.
V o l l e r A :价 t e r o ge ne o su e n z y m e一 i m m un o a ·
s sa y s a n d t he i r a P Pil e a t i o sn
.
I n
,
M a g fo
E n Z y m e
·
jm m u n o a s a y
.
F l o r i d a : C R C P r e s
I n e
.
1 98 0
:
1 8 1~ 1 96
4
. 蒋成淦 : 酶免疫测定法 第一版 北京 人民
卫生出版社 1 98 4 , 1 26~ 1 3 2
5
. 北京医学院 主编 : 基础和临床免疫学 第一版
北京 人民卫生出版社 1 98 1 : 1 36~ 1 56
6
.宋济范 .等 : 中华微生物学和免疫学杂志 198 2 ;
2 ( 2 )
:
74
7
。
A h拍t e d t 5 e t a l , C l in A l l e r g y 1 9 7 4; 4 , 1 3 1
8
.
P a r is h W E
: S k in s e sn i t i z迈 9 N o -n I叨 a n t -
i ob d i e s a s o e i a t io n b e t w e e n h u m a n l哪 S ·
T吕 a n d l价 4 . nI : B r e n t L H o l b o r ow J e -
ds P or gr mI m
u n o l
。
1
. v o l
.
4 C l i n ie a l A s P
,
e e st l
。
A m s t e r d e m
: N o t t h H o l l a n d P u b li s
-
h in g C o mP an
y 1 9 7 4
, 1 9~ 2 8
9
。
H o f f m a n D R a n d H a d d a d Z H
: J A l l e r gy
C l i n I m m u n O I 1 97 4 ; 5 4 ( 3 )
: 1 63
仁明 “ 心“ 心“ 《 “ 《 “ 心“ 心“ 心“ 《 “ 《 “ 《 “ 《 “ 《 “ 《 “ 《 “ 《 “ 《 “ 《 “ 心“ 心“ 心“ 《 “ 《妞《 “ 《叹解仪《 “ 心“ 《 “ 《 “ 心“ 《心舰“ 《 “ 《 “ 《忱《伙《 “ 《 《砚 “ 《 “ 《
产
用抗体治疗皮肤癌
据报道 , 澳 大利亚科学家最近 已在临床上开始试脸一种能抑制人体恶性黑素瘤细胞扩散和生
长的抗体 。 他们 采用标准小 白蔽单 克隆抗体培养技术制造 出一种能与两 种神经节武脂 的特珠物质
相结合 ( 神经 节戒脂是 .黑素瘤细胞壁土形成的脂质块 ) 的杭体 , 将这种杭体注 入人体 内后 , 它就
会与神经 节武脂结合 而包围肿瘤细胞 , 使其不能接合到血管的内皮细胞上 而被诱捕 , 从而防止 了
痰的转移 ; 与抗体接触的瘤细 胞不能再附着到其他蛋白质上 ,所’以肿瘤细胞不能生长 。 当然被 “ 围
困 ” 的肿瘤细胞仍有复发的危险 , 因此必须别除受损的肿瘤细胞才能保证肿瘤的彻底治愈 。 他们
的试脸也表明 , 包上一层杭体后 的肿瘤细胞更容易被药物杀死 , 所以杭体与药物合用效果更佳 。
目前他们正将这种抗体应用于临床 以观察其疗效并准备制 成抗体制 剂 , 以期注入人体 后产生
更多的抗体 , 这样效果更好 。
林万莲 译编 自 《 英文报刊资材 》 医学类 1 9 8 8 , ( 19 ) : 1艺 张素文 校