全 文 ：2009 年总第 41 卷第 2 期
葎草 Humulus scandens（Lour）Merr.是桑科葎草
属一年生缠绕草本植物， 野生于田间路边， 又名乌爪
龙、拉拉藤、过肤龙等。本品味甘、苦，性凉、寒，无毒，功
善清热、利湿、止咳、解毒，可用于淋浊、泻痢、肺炎、肺
痈、肺结核、支气管炎、痔疮、痈肿、毒蛇咬伤等多种疾
病[1]。由于葎草的药理作用主要涉及抗菌和抗结核等作
用， 且其药理功能的发挥多与其自身的黄酮类物质有
关[2]，故本实验以葎草总黄酮为研究对象，从其不同月
份采集的植株不同部位中提取总黄酮并对其抗氧化能
力进行研究，以为今后更好地利用葎草资源提供参考。
1 实验材料
1.1 药物采集 于 2007年 8月和 10月， 分 2 次在
淮阴师范学院校园内采集经本院生物系罗玉明教授
鉴定的无虫斑、 无病变的葎草茎叶， 分类洗净后，
60℃烘干，磨成粉末，过 60目筛，备用。
1.2 仪器与试剂 T6 新世纪紫外分光光度计（北京
普析），TDL-5000B 离心机（海安亭科学医学仪器
厂），电子天平 BS210S（北京赛多利斯天平有限公
司 ，1/10000），HD-930 型组合式全温摇床 （江苏
太仓市实验仪器厂）。芦丁 （Rutin hydrate）对照品
为 SIGMA 公司产品 ，批号 ：R2303-5G。没食子酸
丙酯 （批号 Q/ZTH001-98）、2,4-二硝基苯肼 、邻
苯三酚、三羟甲基氨基甲烷（Tris）均为分析纯。
2 实验方法
2.1 葎草中总黄酮提取及测定 取葎草各部位干粉
5.0000g至圆底烧瓶中，精密称定，加乙醇 50mL，60℃水
浴 12h，滤过，残渣再加乙醇 50mL在相同条件下提取 2
次，合并 3次提取滤液于 100mL量瓶中，加乙醇稀释至
刻度，摇匀，待用。葎草中总黄酮测定方法参见文献[3]。
2.2 葎草中各种提取液对羟自由基清除率的测定[4]
利用 H2O2 与 Fe2+混合产生羟自由基 ， 即 ：H2O2+
Fe2+→·OH+H2O+Fe3+， 再在体系内加入水杨酸捕捉羟
自由基并产生有色物质。该物质在 510nm处有最大吸
收，用该吸光值来表示羟自由基的含量。反应体系中
含 8.8mmol/L H2O2 1mL，9mmol/L FeSO4 1mL，9mmol/L
水杨酸-乙醇 1mL，待测溶液 1mL，其中 H2O2是最后
加入并启动整个反应。37℃反应 0.5h后，12000r/min离
心 6min，然后以双蒸水作参比，在 510nm下测定吸光
度。 考虑待测溶液本身的吸光值不同， 以 9mmol/L
FeSO4 1mL、9mmol/L 水杨酸-乙醇 1mL、 待测溶液
1mL和双蒸水 1mL作为待测溶液的本底吸收值。清除
率计算公式为：清除率（%）=[A0-（AX-AX0）]/A0×100%。
其中 A0为空白对照液的吸光度，AX为加入待测溶液
后的吸光度，AX0为待测溶液的本底吸收值。每一吸光
值平行测 3次，取其平均值，结果用（x±s）表示。
2.3 葎草中各种提取液对超氧阴离子清除率的测
定[5] 对超氧阴离子的清除作用：采用邻苯三酚自氧
化法，取 0.05mol/L pH8.2 的 Tris-HCl 缓冲液 4.5mL
于试管中，置 25℃水浴中预热 20min，加入 0.1mL 各
供试液、2.5mmol/L 邻苯三酚 0.4mL， 混匀后在 25℃
水浴中准确反应 4min，立即用 8mol/L HCl 0.1mL 终
止反应，并在波长 299nm 处测定吸光度（A）值（以蒸
馏水调零）， 对照组用 0.1mL 蒸馏水代替供试液，同
时设立试剂空白管。计算清除率（%）=（A 对照-A 样
品）/A对照×100%，结果用（x±s）表示。
3 实验结果
3.1 芦丁工作曲线的绘制 取干燥芦丁对照品
25mg，精密称定，置 100mL 量瓶中，加乙醇溶解并
葎草的黄酮含量测定及抗氧化性研究
丁 勇 1，2 王新风 1 杨 芳 1
（1.淮阴师范学院生物系资源微生物研究所，江苏淮安 223300； 2.淮阴卫生高等职业技术学校，江苏淮安 223300）
摘 要 目的：对 8 月和 10 月采集的葎草全草、嫩头、叶和茎的总黄酮进行含量测定及抗氧化性能力研究。方法：采
用显色法测定葎草各部位中的总黄酮含量，利用改动的水杨酸法和邻苯三酚自氧化法对葎草各部位提取液进行抗氧化性
测定。 结果：10 月份叶中总黄酮含量最高， 达到 （3.72±0.07）mg/g， 提取的总黄酮抑制超氧阴离子自由基能力最高达到
70.3%，清除羟自由基能力最高达 74.4%。结论：葎草各部位都具有一定的抗氧化作用。
关键词 葎草 黄酮 显色法 超氧阴离子自由基 羟自由基
中图分类号 R282.71 文献标识码 A 文章编号 1672-397X（2009）02-0055-03
基金项目：江苏省教育厅高新产业项目（JHZD04-006）；淮安市科技局项目（SN0635）；淮阴师范学院教授基金（2006012）
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稀释至刻度，摇匀，即得。参照陈改敏等 [3]的方法，精
密量取对照品溶液 0，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，3.5mL，
分别置 7 个 10mL 量瓶中，各加入 5%亚硝酸钠溶液
0.4mL， 摇匀， 放置 6min， 再加入 10%硝酸铝溶液
0.4mL，摇匀，放置 6min，加入 1mol/L 氢氧化钠溶液
4mL，95%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置 15min 后，在
502nm 以 1 号溶液为参比进行测定，以吸光度 A 为
纵坐标，质量浓度 C 为横坐标绘制标准曲线，回归
方程为：A=1.1354C-0.0082，R2=0.9996，表明芦丁对
照品溶液在 25.0～87.5μg/mL 范围内线性关系良好。
3.2 不同月份采集葎草各部位的总黄酮含量 按
2.1 项下方法测定不同月份葎草各部位的总黄酮含
量，结果见图 1。由图 1 可知，8 月份葎草不同部位中
总黄酮含量：叶＞全草＞嫩头＞茎，叶与茎中含量差距
最高，其比值为 10.16；10 月份的比较：叶＞嫩头＞全
草＞茎，还是叶与茎中含量差距最高，其比值已达到
15.17。10 月份全草、 嫩头和叶总黄酮含量明显比 8
月份要高（P<0.01），但其茎中总黄酮含量与 8 月份
相比基本持平（P=0.221）。10 月份叶中总黄酮含量最
高，达到（3.72±0.07）mg/g。
图 1 不同月份葎草不同部位总黄酮含量
3.3 不同月份采集葎草不同部位的黄酮提取液对超
氧阴离子自由基的清除率 采用 2.3 项下邻苯三酚
自氧化法， 测得不同月份葎草不同部位的黄酮提取
液对超氧阴离子自由基的清除率，结果见图 2。由图
2 可知，8 月份的葎草不同部位提取的总黄酮抑制超
氧阴离子自由基能力在 50%～71%之间，抑制能力最
强的茎是最差叶的 1.76 倍；10 月份的抑制能力在
42%～69%之间， 此期间抑制能力均比 8月份略微下
降，抑制能力最强的茎是最差叶的 1.84倍。且在不同
月份采收的葎草各部位对超氧阴离子自由基的清除
率在嫩头和叶中存在差异（P＜0.01），在全草和茎中
差异不显著（P=0.165、P=0.039）。
图 2 葎草总黄酮对超氧阴离子自由基的清除率
3.4 不同月份采集葎草不同部位的黄酮提取液对羟
自由基的清除率 采用 2.2项下方法，测得不同月份
采集葎草不同部位的黄酮提取液对羟自由基的清除
率，结果见图 3。由图 3 可知，8 月份的葎草不同部位
提取的总黄酮清除羟自由基能力在 40%～75%之间，
清除能力最强的叶是最差嫩头的 1.85 倍；10 月份的
清除能力在 42%～73%之间，此期间清除能力比 8 月
份有所增加（除了叶），清除能力最强的全草是最差
嫩头的 1.71倍。 且在不同月份采收的葎草各部位对
羟自由基的清除率在茎和叶中存在差异 （P＜0.01），
在全草和嫩头中差异不显著（P=0.378、P=0.586）。
图 3 葎草总黄酮对羟自由基的清除率
4 讨论
实验中我们发现不同月份采集葎草不同部位的
黄酮提取液对超氧阴离子自由基（O2-·）和羟自由基
（·OH）均具有明显的清除能力。
本研究测得葎草总黄酮含量最高可达到（3.72±
0.07）mg/g，葎草的总黄酮提取液清除·OH 能力最高
达到 74.4%，抑制 O2-·能力最高达到 70.3%。葎草茎
中总黄酮的含量在两个月中都是最少， 但是其抑制
O2-·能力却都是最高的， 其原因可能是与茎中的黄
酮类物质的结构有关， 可能茎中的黄酮类物质虽然
含量低，但却是以具有高度抗氧化性的形式存在，从
而显示比较强的抗氧化能力 [6-7]。葎草叶中总黄酮含
量在两个月中都是最高，8 月所采葎草叶提取液清
除·OH 能力最佳， 而 10 月清除·OH 能力最佳的是
全草的提取液。总而言之，葎草的全草和叶总黄酮提
取液清除·OH 能力比抑制 O2-·能力更强， 其嫩头的
两种能力基本持平，而茎的抑制 O2-·能力更强。本研
究结果表明， 葎草黄酮类化合物可作为自由基吸收
剂， 可有效地清除因衰老而引起的植物体内产生的
自由基。
综上所述， 不同月份采集的葎草其不同部位的
总黄酮含量存在一定差异， 但都具有较好的抑制
O2-·和清除·OH 能力。综合其药用和营养价值，我们
认为葎草具有很好的开发潜力。
5 参考文献
[1] 陈仁寿.葎草的古今效用琐谈.吉林中医药，1991（2）：32
[2] 李俊婕，王晓静.葎草的研究进展.齐鲁药事，2007，26（6）：
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中国现代应用药学杂志，2006，23（8）：798
[4] 马晓华，连宾.几种常见食用菌清除羟基自由基能力的研
究.食品与发酵工业，2005，31（10）：25
[5] 刘刚，王辉，张先洲，等.青藤碱清除氧自由基和抗脂质过
氧化作用.中草药，2006，37（1）：84
[6] 鲁晓翔，陈杰，唐津忠.四种茶花的抗氧化性研究.食品研
究与开发，2006，27（8）：22
[7] 张立新，杭瑚，王宗花，等.某些常见蔬菜抗氧活性的研究.
食品科学，1999，20（11）：21
第一作者：丁勇（1963-），女，副教授，本科学历，
从事糖尿病中药治疗作用的实验及临床研究。
通讯作者：王新风。电子邮箱：wangxf@hytc.edu.
cn
收稿日期：2008-08-11
编辑：乔 婧 吴 宁
香薷、薄荷、荆芥穗、防风为临床上常用的芳香
解表类药物 。 香薷为唇形科植物石香薷 （Mosla
chinensis Maxim.）的干燥地上部分，含有香荆芥酚、
百里香酚、香薷醇、香薷酮等挥发油类成分 [1]。薄荷
为唇形科植物薄荷（Mentha haplocalyx Briq.）的干
燥地上部分，含有左旋薄荷醇、左旋薄荷酮、异薄
荷酮 、胡薄荷酮 、胡椒酮等挥发油类成分 [2]。荆芥
穗 为 唇 形 科 植 物 荆 芥 （Schizonepeta tenuifolia
Briq.）的干燥花穗，含有右旋薄荷酮、消旋薄荷酮、
胡椒酮、右旋柠檬烯等挥发油类成分 [3]。防风为伞
形科植物防风 （Saposhnikovia divaricact （Turcz.）
Schischk.）的根，含有辛醛、β-桉叶醇等挥发油类成
分 [4]。药理研究表明这 4 种药物所含的挥发油均具
有解热、发汗等作用。本研究利用顶空-气质联用的
方法对这 4 种中药中的挥发性成分进行了初步研
究，以求为进一步鉴别、开发、利用这 4 种药材提供
科学依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器 美国 Agilent GC 6890-MS 型气相色
谱-质谱联用仪， 配 Agilent G1888 型顶空进样器、
NIST05a 标准谱库。FW 100 型高速万能粉碎机 （北
京市永光明医疗仪器厂）。
1.2 药材 香薷、薄荷、防风药材购自南京市药业股
份有限公司中药饮片厂， 荆芥穗药材购自安徽亳州
药材市场。4种药材均经南京中医药大学吴启南教授
鉴定。
2 方法与结果
2.1 实验条件 色谱柱：DB-5MS （30.0m×250μm×
0.25μm）；顶空瓶：20mL；进样口温度：200℃；分流进
样（分流比 3∶1）；载气：氦气，流速 1.0mL/min；进样时
间：1min；EI 源温度：230℃； 四极杆温度：150℃；EM
电压：1100V。
2.2 供试品处理 取各药材饮片适量用高速万能粉
碎机粉碎，过 40 目筛，分别装于具塞三角烧瓶中密
芳香解表类中药香薷、薄荷、荆芥穗、防风中
挥发性成分的气质联用分析
马国娟 李 晖 陈 勇 张 芹 王静静
（南京中医药大学药学院，江苏南京 210046）
指导：张 丽
摘 要 目的：用顶空-气质联用方法分析香薷、薄荷、荆芥穗、防风药材中挥发性成分。方法：药材粗粉直接顶空进
样，对主要峰采用 NIST05a 谱库检索并给出归属。结果：利用 MS 的高灵敏性对这 4 种药材进行检测，主要检出峰数目分
别为 23、18、25、25 个，均占总峰面积的 80%以上，分属于萜类、醇类、烯类以及酚类等结构。结论：利用顶空进样、气质联用
的分析方法检测香薷、薄荷、防风、荆芥穗药材中挥发性成分，方法简便、快速、实用。
关键词 香薷 薄荷 荆芥穗 防风 挥发性成分 气质联用 顶空进样
中图分类号 R282.71 文献标识码 A 文章编号 1672-397X（2009）02-0057-03
基金项目：江苏省高等学校大学生实践创新训练计划（NzyA07008）
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