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日本多花紫藤组培快繁技术研究



全 文 :ChineseAgriculturalScienceBuletinVol.22No.22006February
htp:/zntb.chinajournal.net.cn
彩色树种因具有丰富多彩的不同于常规的可供观
赏的叶片颜色和鲜艳花朵,在园林绿化、城市美化及提
升人居环境质量等方面日益发挥着重要的作用。欧、
美、日等发达国家于20、30年前在城市绿化方面大量
应用彩色树种,装扮“彩色街景”,打造花园城市品牌。
是中国曾于20世纪30年代引进法国梧桐作为行道树
并在全国推广。目前,在彩色树种引进利用方面,上海、
北京、大连已走在全国前列。
日本多花紫藤(JapaneseW.foribumda图1F)为落
叶豆科紫藤属木质藤本,树高4~5m,树冠扩张、平顶,
叶色变化丰富,新叶古铜色或紫色,逐渐变为绿色,秋
季则由绿色变为橘红色。晚夏开花,圆锥花序蓝紫色,
有清香,先叶开放,耐粗放,较耐寒,耐修剪,对SO2抗
性强。在日本广泛用于亭、榭、棚架栽培,同时也做盆
日本多花紫藤组培快繁技术研究
翁锦周,甘勇辉,林加耕,吴维坚,林江波,张树河
(福建省农业科学院闽台园艺研究中心,福建漳州363005)
摘 要:以日本多花紫藤种子无菌播种小苗茎及落地苗带腋芽茎段为外植体,研究了不同时期在不同培
养条件下分生组织的诱导发育情况。结果表明:初代培养的适宜培养基为 MS+BA2mg/L+NAA
0.1mg/L+3.5%蔗糖;继代增殖以光强 1500~2000Lx,温度 (25±1)℃,pH5.8~6.0,培养基以 MS+BA
2mg/L+IBA0.5mg/L+3%蔗糖增殖率最高,25~30d即可转接继代,每代增殖倍数为2.8~3.6倍;生根培
养以1/2MS+ABT0.5mg/L+IBA0.5mg/L+2.5%蔗糖在光强 1500~2000Lx,温度(25±1)℃条件下,生根
率达95%以上。同时,对组培苗假植基质也进行了研究筛选,以河砂+草炭+谷壳灰=2:1:1处理效果较
好,移栽成活率达86.5%。
关键词:日本紫藤;组培;快繁技术
中图分类号:S687.3 文献标识码:A
StudyonTissueCulturePropagationinJapaneseWisteriaForibumda
WengJinzhou,GanYonghui,LinJiageng,WuWeijian,LinJiangbo,ZhangShuhe
(Fujian-TaiwanHorticultureResearchCenter,FujianAcademyofAgriculturalSciences,Zhangzhou,Fujian363005)
Abstract:Seedlingstemswithlateralbudswereusedasexplantstostudytheshootinductionandpropaga-
tioninJapaneseW.foribumdaunderdiferenttissueculturecondition.Aneficientplantregenerationsys-
temfromexplantsofJapanesewisteriahasbeenestablishedinthisstudy.Theoptimalmediumforthein-
ductionofmultipleshootsatthefirststageofcultureisMSmedium supplementedwithBA2mg/L,
NAA0.1mg/L,and3.5%sucrose.Highfrequencyoffurthermultiplicationwereobtainedinthemediumof
MScontainingBA2mg/L,IBA0.5mg/L,and3%sucrose (pH5.8~6.0),undercoolwhitefluorescentlightof
1500~2000Lxat(25±1)℃.Theproliferationratiowas2.8~3.6atintervalsof25~30days.Therootingratein
themediumof1/2MSsupplementedwithABT0.5mg/L,IBA0.5mg/L,and2.5%sucrosecouldreachover
95%.Theregeneratedplantletsweretransplantedsuccessfulyinmixturesoilwithsand:peat:huskashes(2:
1:1)withsurvivalrateof86.5%.
Keywords:JapaneseWisteria,Tissueculture,Propagation
基金项目:福建省科技厅项目“新型彩色树种日本紫滕组培快繁及产业化示范”(2005D067)。
第一作者简介:翁锦周,男,1964年出生,1989年毕业于福建农学院植保系,获农学士,现任福建省农业科学院甘蔗研究所副所长,副研究员,已发表
论文20余篇,主要从事生物技术在农业上的应用研究。通信地址:363005福建省漳州市龙文区朝阳镇登科洲福建省农科院甘蔗研究所内。Tel:
0596-2122665,E-mail:scjzhw@yahoo.com.cn。
收稿日期:2005-11-22,修回日期:2005-11-28。
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中国农学通报 第22卷 第 2期 2006年 2月
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景、行道树应用。欧、美等国家在城市绿化中喜用亚洲
紫藤品种[1]。中国上海于1999年开始引进日本紫藤。
采用播种、扦插、嫁接、压条等传统繁殖方法,速度较
慢、效率较低、成本高,特别是种子,每粒需3元以上且
发芽率低,远远不能满足极大的市场需求。目前,许多
名贵花卉采用组织培养,进行工厂化生产,快速加繁。
然而,鉴于该树种组织培养难度大,迄今为止,尚未有
本紫藤组培快繁技术研究的文献报道[2~4],严重影响了
该树种的推广应用。笔者从2004年起对日本紫藤外植
体的建立、分化、继代增殖及生根、假植等一系列技术
进行了系统的研究,以期面向市场、实现该树种产业化
快速生产奠定技术基础。
1材料与方法
1.1材料
2004年1月至2005年5月,在福建省农科院甘
蔗研究所组培中心进行试验。以日本多花紫藤种子无
菌接种小苗茎段及落地苗幼嫩带腋芽茎段作为外植
体。
1.2方法
1.2.1外植体建立 取日本多花紫藤落地苗的健壮嫩梢
茎段,经自来水冲洗干净,置于超净工作台上用 75%
酒精浸泡 30s,后置于 a.0.1%升汞溶液中浸
10~15min;b.10%次氯酸钙溶液中浸20~25min,再用
无菌水冲洗4~5次,以无菌滤纸吸干水分,切取带1~2
个腋芽茎段接种于初代培养基上。a、b各处理20瓶,
每瓶接1个带腋芽茎段。种子经上述方法消毒,先接种
于基本培养基上催芽、培养,后切取上部茎段接种于初
代培养基上。
1.2.2 初 代 培 养 初 代 培 养 基 配 方 :a.MS+
BA2mg/L+NAA 0.1mg/L+3.5% 蔗 糖 ;b.MS+BA
3mg/L+IBA0.2mg/L+3.5%蔗糖。培养温度(25±1)℃。
光照强度1500~2000Lx。
1.2.3继代增殖培养 继代培养基配方:a.MS+
BA1mg/L+IBA0.5mg/L+3.5%蔗糖;b.MS+BA1mg/L+
IBA0.5mg/L+3% 蔗 糖 ;c.MS+BA2mg/L+IBA
0.5mg/L+3.5%蔗糖;d.MS+BA2mg/L+IBA0.5mg/L+3%
蔗糖;e.MS+BA1mg/L+NAA0.1mg/L+3.5%蔗糖;f.
MS+BA1mg/L+NAA0.1mg/L+3%蔗 糖 ;g.MS+
BA2mg/L+NAA0.1mg/L+3.5%蔗糖;h.MS+BA2
mg/L+NAA0.1mg/L+3%蔗糖。pH值均为5.9,结合添
加活性炭等添加物进行配方筛选。光照强度
1500~2000Lx,培养温度(25±1)℃。
1.2.4生根培养 培养基配方:a.1/2MS+IBA1mg/L+
NAA0.1mg/L;b.1/2MS+IBA2mg/L+NAA0.1mg/L;c.
1/2MS+ABT 0.5mg/L+IBA0.5mg/L;d.1/2MS+
ABT1mg/L+IBA0.5mg/L。pH值均为5.9,糖2.0%~3.
0%。光照强度1500~2000Lx左右,培养温度 (25±
1)℃。
1.2.5生根苗假植 假植基质配方:a.河沙:草炭:谷壳灰
=2:1:1;b.红心土:草炭:谷壳灰=2:1:1;c.河沙:草炭=3:
1;d.红心土:谷壳灰=3:1。采用营养杯育苗,每处理假
植200株。
2结果与分析
2.1不同消毒处理对外植体生长的影响
日本多花紫藤种子经 75%酒精浸泡 30s后以 a
(0.1%升汞)、b(10%次氯酸钙)两个方法处理污染率分
别为10%和15%,差异不显著,表明两种方法均可采
用。带腋芽嫩茎段经75%酒精处理后以0.1%升汞浸泡
处理外植体污染率25%,以10%次氯酸钙处理污染率
为35%,b处理成功率低于a处理,但其外植体恢复生
长快,表明0.1%升汞对嫩茎段消毒效果好,但其毒性
较强,初代培养时间约延长12~16d(图1A)。
2.2初代培养
试验结果表明,a处理培养带腋芽嫩茎段经 15d
左右腋芽开始萌动,抽出1~2个侧芽小枝,30d左右小
枝可长至3~4cm长,每个小枝有3~4节,而b处理抽
生侧芽小枝时间长,1个月后腋芽才开始缓慢萌发(图
1B)。
2.3继代增殖培养
剪取小枝茎段继代增殖(图1C),结果表明(表
1),处理d.MS+BA2+IBA0.5+3%糖;b.MS+BA1+I-
BA0.5+3%糖,次其继代增殖过程中单个小枝茎段产生
丛生芽较多,每丛有2~4个芽,多的达5个芽以上,平
均为2.8~3.6个芽。d处理丛生芽长势好,b处理长势
略差。经成对法t测验,d处理优于a处理,差异达显著
(t=2.761),比c处理优,差异达极显著(t=4.380)。从继
代增殖试验结果看,培养基中生长素添加以IBA培养
效果较NAA好,后者在培养过程中较易产生疏松愈
伤组织,产生分化芽能力较弱;降低培养基中大量元素
及糖浓度有利于继代增殖。
2.4生根培养
切取继代增殖培养丛生芽中2~3cm左右、带1~2
个腋芽小茎段接种到生根培养基(图1D)。结果表明
(表2),培养材料接种于生根培养基 15~20d,嫩茎段
腋芽开始萌发,基部也开始生根。生根率以c处理为最
高,达96.7%,其次分别为d、a、b处理。经t测验,c处
理与a处理差异达显著(t=2.562),与b处理差异达极
显著(t=5.371)。添加活性炭对培养材料生根没有促进
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效果,反而有一定抑制作用。
2.5假植育苗试验
生根苗长成两片完整叶以上,经7~10d练苗后进
行假植(图1E)。相对湿度保持95%以上7~10d,以遮
阳网遮蔽。从表3可看出,a处理效果最好,成活率为
86.5%,发新根较快,生长整齐,其它处理效果依次为
c.b.d处理。
3小结与讨论
3.1两年来探索了日本多花紫藤组培快繁中芽的诱
导、继代增殖、促根、假植等技术的研究,成功地建立了
一套较为高效的组培快繁技术体系,即继代周期为
25~30d,增殖倍数2.8倍以上或繁殖比例1:2万株的
组培继代增殖培养基配方,生根率达96.7%的生根培
养基配方及组培苗假植基质比。
3.2由于日本多花紫藤继代增殖培养材料自身具有一
定自养能力,对大量元素、激素(尤其是细胞分裂素)和
糖要求降低,相应降低这些成分浓度有利于培养材料
的增殖生长。培养基中生长素添加以IBA培养效果较
好,培养过程中产生愈伤组织少,分化芽能力较强。
3.3日本多花紫藤在组培中会出现褐化现象,而褐化
与光照存在一定的关系,褐化是植物体内的酚类物质
合成转化为醌类物质的结果,而酚类物质的合成和氧
化相关的酶都是光诱导型的,正常的田间光照下的外
植体各种酶活性很高[5]。因此,有关光照对日本多花紫
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滕组培诱导的影响有待于进一步的研究。
3.4日本较早进行紫藤品种收集、鉴定、改良选育工
作,品种多。中国进行此方面工作很少。随着植物组织
培养和快繁脱毒技术在现代农业优异种苗繁育的广泛
应用,日本多花紫藤作为一类新型的优异的城市园林
绿化彩色树种,近年来,在上海、江苏等地已供不应求,
价格居高不下(30~50cm高的小苗5元/株,3年生高
约250cm的100元/株)。因此,通过研究,对于丰富城
市绿化树木品种、增添城市彩色景观及推动产业化都
将产生积极的影响,具有良好的社会、经济和生态效
益,市场前景广阔。
参考文献
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2 黄广礼,黄治化.紫藤的栽培技术[J].云南农业,2003,(2):8
3 李万文.紫藤的四大优点.中国花卉盆景[J].2003,(5):22~23
4 冯玉元.神奇的紫藤.中国林业[J].2004,(5):41
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darknessorlowlevelofiradiance[J].JHortSci,1990,65:103~111
(责任编辑:陶冶之)
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