全 文 ：第 14 卷 第 2 期 吉　林　林　学　院　学　报 Vol.14 No.2
1998 年 4 月 JOURNAL OF JILIN FOREST RY UNIVERSITY Apr.1998
收稿日期:1997-12-26.
接骨木的快速繁殖研究
杨振国　程广友　唐晓杰
(吉林林学院资源环境系 ,吉林市 ,132013)
摘要　在 MS 培养基中进行基尖培养 ,研究植物激素对器官形成的影响.试验结果表明:BAP 可明显促进芽的形
成和增殖 , BAP 和 NAA 结合使用有助于苗的形成和生长.合适的培养基为 MS+NAA(0.2 mg/ L)+BAP(1.0
mg/ L)或者 MS+NAA(0.2 mg/ L)+BAP(3.0 mg/ L).NAA 对根的诱导有促进作用 , 诱导生根用 1/2 MS 附加
NAA(0.2 mg/ L), 当无根苗转入生根培养基 ,诱导生根获得完整植株 ,试管苗移栽成功.
关键词　接骨木 ,植物激素 , 快速繁殖 ,器官形成
分类号　S723.1
接骨木(Sambucus wi lliamsi i Hance)在自然条件下主要靠种子繁殖 ,但种子繁殖出苗率低且慢 ,并受
季节限制 ,品种易混杂 ,不能保持优良种性.采用组织培养进行快速繁殖研究 ,可为接骨木种苗工厂化生产
提供新途径.
1　材料与方法
1.1　试验材料
于 4月份在吉林林学院校园内取接骨木成年树的枝条 ,剪取带顶芽或侧芽的茎段 ,水培长出新梢后待
用.
1.2　外植体消毒和接种
将接骨木茎段用清水洗净 ,放入大烧杯中 ,置于无菌室超净工作台上 ,先用 70%酒精表面消毒 30 s ,倒
去酒精 ,用无菌水冲洗干净 ,再加入 0.1%HgCl2消毒 9 min ,消毒后用无菌水冲洗 5 次 ,切取 1 cm 茎尖进
行接种培养.
1.3　培养基和培养条件
表 1　不同激素浓度所对应的培养基序号
Tab.1　Medium orders corresponding to different concentration of hor-
mone in medium
ρ(NAA)/mg·L-1 ρ(BAP)/mg·L
-1
0 1.0 3.0 5.0
0　 11 12 13 14
0.1 21 22 23 24
0.2 31 32 33 34
0.4 41 42 43 44
　　基本分化培养基为 MS 培养基 ,蔗糖浓
度为 3%,pH 值为 5.8 ,生长素用 NAA ,细胞
分裂素用 BAP ,以不同浓度的 NAA 和 BAP
配成 16个浓度组合(见表 1).每个浓度组合
接种 40个外植体.接种后置于培养室内光照
培养 ,每日光照 10 ～ 12 h ,光强度为 1500 ～
2000 lx ,培养室温度 22 ～ 26 ℃.
2　结果与分析
2.1　植物激素对接骨木器官形成的影响
接骨木茎尖接种培养后植物激素种类和浓度的不同 ,对愈伤组织的形成和器官的分化有明显的差异 ,
表 2为培养 30 d的统计结果(移植数量为 40).在不加任何植物激素的 MS 基本培养基中 ,茎尖不产生愈
伤组织 ,也没有不定芽和不定根的分化 ,形成独苗 ,这证明了植物激素在诱导植物器官的形成中起着重要
的作用.
表 2　植物激素对接骨木器官形成的影响
Tab.2　The effects of plant hormones on organogenesis
Medium order Pollution number Callus induction/ % Bud induction/ % Root induction/ %
11 2 0 0 0
12 4 36.1 83.0 0
13 0 52.5 90.0 0
14 0 45.0 92.5 0
21 3 94.6 0 40.5
22 0 100.0 90.0 5.0
23 1 84.6 100.0 0
24 0 95.0 95.0 0
31 0 100.0 0 52.5
32 0 100.0 100.0 27.5
33 1 100.0 100.0 0
34 0 100.0 100.0 0
41 2 100.0 0 36.8
42 0 100.0 62.5 35.0
43 0 100.0 85.0 0
44 3 100.0 81.0 0
　　NAA 对接骨木茎尖愈伤组织的形成有明显的促进作用 ,随 NAA浓度的增加 ,愈伤组织生长的就越发
旺盛 ,当 NAA 浓度为 0.2 mg/L 时形成的愈伤组织多为白色或淡黄色 ,较疏松 , 而当 NAA 浓度为
0.4 mg/L时形成的愈伤组织颜色较深 ,并且紧密.NAA 单独使用对不定芽的分化基本没有作用 ,在只有
NAA 而没有 BAP 的培养基中均没有不定芽的分化 ,而 NAA与 BAP 配合使用则可促进芽的分化 ,并且比
单独使用 BAP 时效果更好.NAA对不定根的形成有促进作用 ,在浓度为 0.1 ～ 0.4 mg/L 的培养基中均有
不定根的分化 ,但随 BAP 浓度的增高 ,根的分化率明显下降直到为零 ,这与植物组织培养中植物器官发生
和细胞分裂素与生长素的比值有关 ,在其它植物中多有类似的报道〔2 , 3〕.
BAP 对接骨木不定芽的分化有显著的诱导和促进作用 ,在不同浓度的 BAP(1.0 ～ 5.0 mg/L)培养基
中均有芽的分化增殖 ,在部分培养基中对芽的诱导分化率达到 100%,BAP 与 NAA配合使用效果更好 ,不
仅能使芽的分化数量增加 ,同时能促进芽生长成苗 ,最合适的配方组合是:MS +NAA(0.2 mg/L)+BAP
(1.0 mg/L)和 MS+NAA(0.2 mg/L)+BAP(3.0mg/L).
2.2　继代培养
将接骨木外植体经初步培养 5 ～ 6周后形成的含有愈伤组织的芽苗丛切割成若干块 ,转入分化培养基
MS+NAA(0.2 mg/L)+BAP(3.0 mg/L)进行继代培养 ,每 5 ～ 6周继代一次 ,可使芽苗以 2 ～ 4倍速度增
殖 ,其间可将壮苗直接转入生根培养基生根形成完整植株.
2.3　生根培养
将无根苗转入生根培养基 , 生根培养可采用大量元素和微量元素减半的 1/2 M S 培养基附加
0.2 mg/L的 NAA.一般转移 10 d后开始生根 ,20 d后可长出 2 ～ 3条根 ,根系生长良好 ,移栽容易成活.在
分化培养基中培养 5 ～ 6周后也有部分芽苗基部形成不定根 ,在继代转移培养时 ,可将无根芽苗继代或转
入生根培养 ,同时可将有根小苗直接移栽 ,形成芽根一次培养 ,可缩短培养周期 ,简化程序 ,提高工作效率.
·107·第 2 期 杨振国等:接骨木的快速繁殖研究 　　　
2.4　幼苗移栽
组织培养产生的接骨木试管苗 ,由于一直生长在温度适宜 、湿度较大 、光照较弱的培养瓶内 ,要将试管
苗移入土壤栽培 ,是一个很大的转变 ,因此在移栽前要将瓶口打开 ,进行炼苗 2 ～ 3 d ,移栽基土可用腐殖土
或园土与河沙两者 1∶1混合使用 ,移栽初期可用塑料薄膜覆盖保持一定温度和湿度 ,半月后可去掉覆盖
物 ,适当注意防止强光照射 ,成活率为 85%.
3　结　　　论
NAA对接骨木茎尖脱分化形成愈伤组织有促进作用 ,并可有效促进根的分化 ,生根培养基可用 1/2
M S+NAA(0.2 mg/L).
BAP 对接骨木芽的分化和生长有明显的促进作用 ,分化培养基可用 MS+NAA(0.2 mg/ L)+BAP
(1.0 mg/L)或者 MS+NAA(0.2 mg/ L)+BAP(0.3 mg/L).
试验证明 ,利用接骨木茎尖进行组织培养 ,可以在短时间内获得大量遗传性状相对稳定一致的苗木 ,
是接骨木快速繁殖的有效途径.
References
1　Chen Kegui(陈可贵), Du Fengguo(杜凤国), Song Jinghua(宋景花).A Preliminary Study on the Pollen Morpholog y of
Sambucus in Jilin Province.Journal of Jilin Fo restry University(吉林林学院学报), 1992 , 8(2):39 ～ 46
2　Wang Xiuqin(王秀琴), Liu Chunhui(刘春惠), Lin Rong(林荣).Study on Rapid P ropagation of Gynostemma Pentaphyl-
lum.Guihaia(广西植物), 1992 , 12(1):59～ 63
3　Jin Bo(金波),Wang Jifang(王纪方), Jia Chunlan(贾春兰).Study on Cabbage Feoral Axis Culture.Acta Ho rticulturae
Sinica(园艺学报), 1982 , 9(1):53～ 57
On Rapid Propagation of Sambucus willamsii
Yang Zhenguo　Cheng Guangyou　Tang Xiaojie
(Resources and Env iromnent Department of J ilin Forestry University , Ji lin ,132013)
Abstract　New buds were g row n in MS basal medium and the effects of plant hormones on organogenesis
w ere studies.The results show ed that BAP stimulated the format ion and proliferation of buds , the combination
use of BAP and NAA is beneficial to formation and g row th of shoots.The Suitable medium are MS +NAA
(0.2 mg/L-1)+BAP(1.0 mg/L-1)and MS+NAA(0.2 mg/L -1)+BAP(3.0 mg/ L-1).The use of 1/2
M S basal medium with NAA(0.2 mg/L-1)is beneficial to induce root formation.When the shoots were
transfered into rooted medium and formed whole root sy stems.Transplanting seedling in the test-tube was suc-
ceeded.
Keywords　Sambucus wi lliamsii ,Plant ho rmones ,Rapid propagation ,Organogensis
·108·　　　 吉　林　林　学　院　学　报 第 14 卷