全 文 ：中国兽医科技 1 9 88年 第1 期
讨 论 与 小 结
Pr o t ei n A的发现为免疫学的研究提供了一种新的手段 。 本研究的结果 提示 : 不 同 动
物血 清中的 I g G与 Pr o to i n八具有不 同的亲和力 , 在采用 同一检测方法时存 在明显 的差异 。
有的动物如猪 、 豚鼠 、 犬等血清 , 在对流免疫电泳及琼脂双向扩散试验中与 P : · ot e in A反应
均有较高的效价 , 而马 、 猴 、 羊等血清与 P r ot e in A 的 反 应较弱 , 上述两项试验中的效价
均较低 , 而与家兔 、 鸡等血清则不发生反应 。 这一研究结果将有助于 P or et in A 及其制剂在
人 , 畜疾病的检测中得到更有效 、 合理的应用 。
结果还表 明同一种动物血清采用不 同的实验方法与 P r ot e in A 的反应亦 有 明 显不同 ,
如家兔血清的 I g G用琼脂双 向扩散和对流免疫电泳 , 均与 P r ot o in A 不发生沉淀反应 , 而在
E L IS A 中 , 特异性 I g G却能在与固相上的抗原结合后 , 与 P or t e in A 酶结合物 反 应 , 显示
较好的结合效果 , 提示对不 同的动物血清用 P r ot e in A 系列试剂作 Ig G 抗体检测时 , 应根据
其反应的特性选用不同的方法 , 方可达到理想的效果 。
M a r : i e r ( 1 9 7 9 ) 证 明了家兔 I g G 一般与 P r o t e i n A 不能反应 , 而 ` “ ” I标记的 P r o t e i n A
可用于测定兔 I g G 抗体 , 而且敏感性可达 I n g / m l ; L a n g o n e ( 1 9 8 0 ) 也发现山羊和绵羊 I g G
一般不与 P r ot e in A 反应 , 但是它们的 I g G抗体一旦结合于固相化的抗 原 或 半 抗 原上 , 用
` “ ” I标记的 P r ot e in A 则可与之发生明显的反应 。 他们认为 , ` “ ” I标记的 P r ot 。 i n A 仅与固
相免疫复合物上的 I g G 反应 , 而不与液相免疫复合物上的 Ig G 反应 , 本研究用 E L sI A 测定也
证实了这一点 。
值得注意的是用山羊 、 家兔等动物血清提纯的 I g G直接固相在载 体上与 P r以 e in A 不发
生反应 , 而将这些特异性 I g G 一旦和固相上的特异性抗原结合后和 P r ot ie n A 产生较强的反
应 。 可能是由于坛 G在被动吸附中 F c 段易与载体发生疏水性结合掩盖了 P r ot e in A 的 结 合
位上 , 在和特异性抗原反应后 , F a b段 结 合 在固相抗原上使 F c 段游离 , 易与 P r ot e in A 发
生结合 。 提示 P r ot e in A 和馆 G 的假免 疫 反应 , 也可能和工g G 的空间构型有关 。
研究结果表 明 , P r ot e in A 对不同动物的飞 G 反应性不同 , 就是同一种动 物的工g G , 采
用不 同的检测方法其与 P r ot e in A 的反应性也不完全相同 , 这在应用 P r ot e in A 的试验 中 ,
针对不同的检测动物 , 选用相应 的有效方法提供了有价值的参考。
参 考 文 献
〔 6 〕
F o r o g r e m
,
A
.
o t a l
:
J
.
Tm m ,: 且 0 1 , 9 7 , 8 2 2 一 8 2 7 , 1 9 6 6
K r o n v l l
,
G
.
e 全 a l J . 丁攫仍 : 几 0 1 , 1 0 5 , 1 1 1 6 , 1 9 7 0
章 谷生 : _匕海免疫学杂 苏 , 2 ( 5 ) , 50 , 1 9 8 2
王秀珍等 : 中华预防医学杂 志 , 1 , 13 , 1 9 8 5
M a
r
i
e r , R 一 J . I m m u n o l M e t h o d s , 2 8 , 4 1 , 1 9 7 9
L a n g o n e
,
J
.
H
. ,
J
.
I m m u n o l M e t h
o d s
,
3 4
,
9 3
,
1 9 8 0
( 1 9 8 8年 2 月 17 日收稿 )
芒 麻 根 黄 酮 试 对 子 宫 肌 作 用 的 研 究
盛忠梅 朱天悼 卿上 田 刘君生
( 湖南农学院畜牧 一曾医系 )
肖千钧 李宗道 王春桃 黎觑程
( 湖南农学院竺麻研究所 )
摘要 苦麻根所含黄酮式对哺乳动物子宫的机能活动有一定的影响 。 通过离
体子宫实验观察 , 证明些麻根黄酮贰对怀孕子宫有 抑制作用 ;对未 怀孕子宫的机能活
动则具有兴奋性 。 对孕兔和未孕兔尿中孕二醇葡萄糖醛酸钠含量测定的结果 , 证明
中国兽医科技 1 9 8 8年 第 1 期
乡麻根黄酮式可使怀孕母兔尿中孕二醇葡萄糖醛酸钠含量升高 , 但对未孕兔尿中孕
二 醉葡萄糖醛酸钠的含量则 无明显影响 。
我国古代医著早有记载 , 竺麻根 、 叶有治孕妇腹痛 、 胎动不安 、 先兆流产的功效 。 为了
弄清楚芒麻根 、 叶所含各种成分及其药理作用 , 我们从 19 8 6年开始对竺麻根 、 叶所 含的几种
化学成分是否有安胎作用进行了预试 , 发现芒麻根黄酮贰对哺乳动物子宫肌的活动确有一定
的影响 。 为进一步证实其安胎作用 , 以便兽医临床使用竺麻根黄酮贰 , 特做了本试验 。
材 料 和 方 法
( 一 ) 试验动物 雌性家兔 15 只 , 怀孕 8 只 , 未怀孕 7 只 , 体重 2 . 5~ 3 . s k g , 体温 3 8 . 6
~ 39
.
4 ℃ ; 雌性豚鼠 8 只 , 怀孕 3 只 , 未怀孕 5 只 , 体重在 40 。~ 6 0 0 9 ; 小 白 鼠 12 只 , 怀孕
7 只 , 未怀孕 5 只 , 体重 4 5 . 6一 6 7克 。
( 二 ) 药物 芒麻根黄酮贰的提取 。 取本院竺麻研究所试验田的芒麻鲜根洗净 、 晒干 、
粉碎 。 称取 10 。鲍 , 用 75 % 乙醇浸泡 24 小时 , 然后于水浴上回流提取 3 次 , 每次 30 分钟 。 合并
滤液 , 减压回收乙醇至干 , 残渣加蒸馏水溶解 ( 加热至 85 ℃ ) , 趁热过滤 。 冷却后用乙酸 乙
醋萃取 , 回收乙酸乙醋 , 烘干 ( 65 ℃ ) 得总黄酮贰 。 将黄酮贰结晶配成 0 . 5%的溶 液 备用 。
催产素注射液 ( 5 单位八 m l ) , 系上海 中国天丰制药厂出品 , 批号 8 6 1 1 0 4 。 乙 醇 ( A R ) 、
正丁醇 ( A R ) 、 乙醚 ( A R ) 、 丙酮 ( A R ) 、 氢氧化钠 ( C P ) 。
( 三 ) 实验方法
1
. 芒麻根黄酮贰对动物离体子宫肌的作用采用离体子宫实验 方法 ( 按 M a g n us 法 ) 进
行 。 记录装置用成都仪器厂出产的 L M S一 Z A型二道生理记录仪 , 输入电阻 2 M Q , 灵 敏 度
为 2 m v / e m , 走纸速度为 0 . s m m / S 。
2
. 尿中孕二醇葡萄糖醛酸钠的含量测定 。 取母兔 10 只 , 怀孕母兔 5 只 , 未怀 _ 二母 协 5只 。
尿液收集方法 : 将兔置于兔笼内 , 底下置搪瓷盘 , 收集给药前 2 4小时及给竺麻根黄酮试后 24
小时和 48 小时的尿液 , 供测定孕二醇葡萄糖醛酸钠含量用 。 孕二醇葡萄糖醛酸钠的测定方法
按 V e n in n g 氏法操作 。
试 验 结 果
( 一 ) 竺麻根黄酮试对动物离体子宫的作用
1
. 对未孕家兔离体子宫肌的作用 ( 见图之 1 ) 。
2
. 对怀孕家兔子宫肌收缩活 动的作用 ( 见图之 2 ) 。
3
. 对未孕豚鼠子宫肌活动 的作用 ( 见图之 3 ) 。
4
. 对怀 孕豚鼠离体子宫活 动的作用 ( 见图之 4 ) 。
由离体子宫收缩曲线 ( 图之 1 ~ 4 ) 可以看出 , 竺麻根黄酮贰对家兔和豚鼠未孕子宫肌
的活动具有加强收缩力的作用 。 在 40 m l乐 氏液中加入 2 . s m g芒麻根黄酮贰 , 就能增强子宫肌
的节律性收缩 , 使收缩力增强 , 频率加快 , 张力也有所提高 , 当剂量加大到 5 m g时 ,这种作
用更明显 。 给药后子宫收缩的振幅高峰和低峰与给药前比 较差异显著 ( P < 0 . 0 5 ) ,而冲洗后的
振幅与给药前比较差异不显著 ( P > 0 . 05 ) 。 收缩频率稍有增多 。 怀孕兔和豚 鼠 的子宫肌在
竺麻根黄酮贰的作用下 , 收缩力明显减弱 , 频率减慢 , 张力减弱 , 给药后子宫肌收缩振幅的
高峰和低峰与给药前比较差异显著 ( P < 0 . 05 ) 。 , 这表明竺麻根黄酮贰具有抑制怀孕 子宫肌
活动的作用 。
5
. 对未孕小 白鼠子宫肌活动 的作用 ( 见图之 5 ) 。
6
. 对怀 孕小 白鼠子宫肌活动 的作用 ( 见图之 6 ) 。
由曲线图 5 、 6 可以看出 , 芒麻根黄酮贰对小白鼠未孕子宫具有加强收缩作用 。 给药后
中国兽医科技 1 9 8 8年 第 n 期一 - 一 . .洲 尸护, , . ` . 口. . 、 -一一一一 一一一 一- 一 -一— - 一一抽~ 口抽 . . . . . . 口曰` ~ ~的收缩振幅高峰和低峰与给药前 比较差异显著 ( P < 0 . 05 ) , 但收缩频率无明 显变化 。 对怀孕小 白鼠子宫肌则具有抑制作用 ,使收缩力减弱 , 给药后收缩振幅与给药前比较 差异显著 ( P< 0 . 05 ) , 收缩频率减少 。
A 6 0 5 B 6 0 5 C 6 0 5 D 6 0 5
1
. 未 孕兔 2 . 怀孕兔 3 . 未孕豚鼠 4 . 怀孕豚 鼠 5 . 未孕小白鼠 ; 6 . 怀孕小 白鼠
麻根黄酮贰 2 . s m g / 4 o m l乐氏液后 C . 给竺麻根黄酮贰 5 m g / 4 o m l乐氏液后
A
. 给药前 B . 给竺
D
. 冲洗子 宫后
兰麻根黄酮试对动物离体子宫收缩活动曲线图
( 二 ) 竺麻根黄酮试对母兔尿 中孕二醇葡萄糖醛酸钠水平的影响 尿 中孕二醉葡萄糖醛
酸钠系雌性动物体 内孕酮的代谢产物 。 测定尿中孕二醇葡萄糖醛酸钠的含量 , 可以在一定程
度上间接反映体 内孕酮的含量 。 测定结果 , 竺麻根黄酮贰能使怀孕母兔尿中孕二醇葡萄糖醛
酸钠的含觉增加 ,这种作用在给药 4 8小时后比较明显 。表 明些麻根黄酮贰对怀孕兔体内孕酮的
分泌有促进作用 , 给药后 4 8小时的含量与给药前比较差异极显著 ( P < 0 . 0 1 ) 。 对未 孕兔尿
中孕二醇葡萄糖醛酸钠含量测定结果 , 给药后 24 、 4 8小时的含量与给药前比 较无 明显 差别
( P > 。 . 05 ) 。 这表 明竺麻根黄酮贰对未孕兔体 内孕酮的分泌无明显作用 。
讨 论 与 小 结
( 一 ) 离体子宫试验结果 , 证明些麻根黄酮贰对动物怀孕子宫有抑制作用 , 使子宫收缩
力减弱 , 张力变小 , 频率变慢 ; 对未孕子宫则有兴奋性 , 使子宫收缩增强 , 张力提高 , 频率
加快 。芒麻根黄酮 贰对怀孕子宫的抑制作用 ,可能是促进孕酮的分泌 , 使体内孕酮含量升高 ,
抑制 A T P 酶的活性 , 致 A T P 生成减少 , 子宫肌细胞 内钙离子的转运受阻碍 , 因而使 子 宫的
收缩力减弱 , 频率减慢 。 而对未孕兔子官肌的兴奋作用 ,可能是与子宫肌上的 E R : 型受体结
合产生类似雌激素的作用 ; 也可能是与子宫肌上的 P G 型受体结合 , 形成复 合体 , 从而 激活
c A M P酶 , 使 c A M P的浓度及子宫肌细胞内钙离子浓度升高 , 因而使子宫收 缩 加 强 , 频 率
加快 。
( 二 ) 测定尿中孕二醇葡萄糖醛酸钠含量的结果 , 证明芒麻根黄酮贰能促进怀孕动物体
中国兽医科技 1988年 第n 期 13
内孕酮的分泌 。 怀孕期间 , 由于雌二醇水平下降 , 孕酮水平升高 , 因而使子宫肌收缩力减弱 ,
频率变慢 。 测定未孕兔尿中孕二醇葡萄糖醛酸钠含量 , 结果表明竺麻根黄酮贰不能使未孕兔
尿中孕二醇含量增加 。
参 考 文 献
〔 1 〕 盛忠梅等 : 中国兽医杂志 , 1 0 ( 5 ) , 3 5一遵0 , 2 9.5 4
〔 2 〕 盛忠梅等 : 中国兽医科技 , 1 0 , 1 6一 1 8 , 1 9 5了
〔 3 〕 李时珍著 : 本草纲 目 ( 校订本第二分册 ) , 人民卫生出版社 , 97 一 9了8 , 1 9 7 7
〔 4 〕 全国兽医中草药经验选编组 : 全国兽医中草药制剂经验选编 , 科学出版社 , 1 9了7
〔 5 〕 山东 医学院药理教研组 : 药理学实验指导 , 人民卫生 出版社 , 75 , 1 9 6 0
〔 6 〕 P . B . 霍克著 : 实用生物化学 ( 下册 ) , 人民卫生出版社 , 4 9 9 , 1 9 6 1
( 19 8 5年 2 月 1 3 日收稿 )
含硫日粮对雏鸡淋巴器官的硒代谢及免疫功能影响的研究朴
孙先忠 王学波 王 燕
( 东北农学院兽医系 )
摘要 应用星布罗雌性雏鸡研究了不同硫水平 日粮对雏鸡某些淋巴器官的硒代
谢及免疫功能的影响 。 结果表明 日粮硫显著影响淋 巴器官的硒 代谢 , 二者呈负相关
关系 ;并降低雏鸡的淋 巴细胞总数 、 脂酶染色阳性 ( A N A E 千 ) 淋 巴细胞数和颗粒型
A N A E
+ 淋 巴细胞数 。
硫是机体 中不可缺少的一种元素 , 是生物素 、 硫胺素 、 辅酶 A及含硫的肮氨酸与蛋氨酸
的必需组分 。 但如果机体摄取过多的硫则能妨碍硒对细胞的保护作用 。 日粮硫量增加可导致
尿 7 6 eS 排出量增加 , 硒在体内的滞留量降低 。 当母羊 日粮中含硫量达 0 . 功% 以上时 , 其所生
羔羊的白肌病发病率增高 。 硒一硫对蟾赊心肌细胞生理特性具有拮抗作用 , 硫可拮抗亚硒酸
钠慢性中毒所致的鼠生长抑制作用 。 硫对硒的拮抗作用在其他器官组织中是否存在 , 尚未见
报道 。 因此 , 我们以星布罗雏鸡为实验动物 , 研究了不 同硫水平 日粮对雏鸡某些淋巴器官的
硒代谢和免疫功能的影响 。
材 料 与 方 法
( 一 ) 实验动物与分组 选用 1 日龄星布罗雌性雏鸡 80 只 , 随机分为四 组 〔 A ; 、 A Z 、
A
3 、
A
、 〕 , 每组 20 只 。 A ,组喂以购自哈尔滨市饲料科学研究所的肉用雏鸡商品日粮 , 日粮
含硫量为 0 . 1 4 9 6% , 含硒量为 o . Z o 2 5 p p m 。 A Z 、 子、 3 、 A 4组分别喂 以 补 加 0 . 2% 、 0 . 4% 和
。 . 6 %硫 ( 以硫酸钠形式 ) 的相同肉用雏鸡商品日粮 。
( 二 ) 实验程序
1
. 实验 自 7 月 2 日开始到 8 月 31 日止 , 历时40 天 , 实验过程中 , 每隔 10 天剖杀雏鸡 1
次 , 每次每组 3 一 4 只 , 共检测 4 次 。
2
. 雏鸡剖杀前心脏采血 , 做白细胞计数 ; 涂片做白细胞分类计数和脂酶染色阳性 ( A
N A E
+
)淋巴细胞计数 。 A N A E + 淋巴细胞计数法 : 脂酶染色后 ,计数 2 0 个淋巴细胞 ,其胞 浆
中有红色颗粒者为颗粒型 A N A E + 淋巴细胞 , 胞浆中有片状红染者为弥散 型 A N A E + 淋巴细
胞 , 二者之和为总 A N A E + 淋巴细胞 , 分别除 2 0 , 得到各 自百分比 , 然后计算 :
, 本文承蒙史言教授审阅 , 特此致谢 。