全 文 ：温度 80℃。其醇溶性浸出物 6.69% ～ 11.14%, 二苯乙烯苷 1.49%
～ 2.26%含量均大大高于《中国药典 》 2005版制何首乌的醇溶性
浸出物不得少于 5.0%,二苯乙烯苷不得少于 0.7%的限量规定。
为申请黑豆汁炖何首乌饮片生产批准文号提供理论依据。
参考文献:
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信息杂志 , 2001, 8(9):40.
[ 3 ] 　国家药典委员会.中国药典 , Ⅰ 部 [ S] .北京:化学工业出版社 ,
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业出版社 , 2005:90
[ 5 ] 　胡容峰 ,朱家壁 ,彭代银 ,等.综合评分法优化复方丹参口腔速溶片
制剂处方 [ J] .中国中药杂志 , 2006, 31(5):380
[ 6 ] 　叶定江 ,张世臣 ,潘三江.中药炮制学 ,第 1版 [ M] .北京:中国中医
药出版社 , 1999:348.
收稿日期:2006-08-18;　修订日期:2006-12-10
基金项目:浙江省嘉兴市科技局基金资助项目(No.2005AY3042)
作者简介:陈伟光(1952-),男(汉族),上海人 ,现任嘉兴学院医学院副教
授 ,主要从事天然药物化学成分的提取分离和定量分析研究.
正交设计研究葎草中总黄酮提取工艺
陈伟光 1 , 盛　静1 , 林　霞 1 , 屠婕红 1 , 睢凤英1 , 尹　秀 2
(1.嘉兴学院医学院 ,浙江 嘉兴　314001;　2.浙江大学医学院 ,浙江 杭州　310006)
摘要:目的 研究葎草叶中总黄酮的提取工艺条件。方法 采用正交实验法 ,以总黄酮含量为考察指标 ,对葎草的总黄酮
提取条件进行优选。结果 所考察的因素中 , 葎草的提取工艺各因数影响程度为:乙醇浓度 >溶剂用量 >提取时间;最佳
水平搭配为:A
2
B
2
C
1
。结论 葎草中黄酮类成分提取的最适宜工艺为:75%乙醇 ,料液比 1∶15, 回流提取 2次 , 1 h/次。
关键词:葎草;　总黄酮;　正交设计
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2007)03-0551-01
StudyonExtractionTechnologyforFlavonoidsinHumulusscandens(Lour)Merr.by
OrthogonalDesign
CHENWei-guang1 , SHENGJing1 , LINXia1 , TUJie-hong1 , SUIFeng-ying1 , YINXiu2
(1.MedicalSchoolofJiaxingUniversity, Jiaxing, Zhejiang, 314001, China;2.MedicalColege, Zhejiang
Uaiversity, Hangzhou310006, China)
Abstract:ObjectiveToascertainextractiontechnologyconditionforflavonoidsfromHumulusscandens(Lour.)Merr.Methods
Theoptimizingextractionconditiononthebasisofflavonoidsweredeterminedbyorthogonaldesign.ResultsTheorderoffactors
whichafectedtheflavonoidextractionwasethanolconcentration>solventquantity>extractionhours;thebestlevelmatchwas:
A2B2C1.ConclusionTheoptimumextractionconditionsare75% ethanolextractingwithmaterialandsolventratio1∶15 for1hourinwaterbathfor2 times.
Keywords:Humulusscandens(Lour.)Merr.;　Totalflavonoids;　Orthogonaldesign
　　葎草为桑科植物 Humulusscandens(Lour.)Merr.的全草。
具清热解毒 、利尿消肿等功效 , 用于肺结核潮热 、胃肠炎 、痢疾 、淋
证 、痔疮等证。据报道葎草全草含青兰苷 、天门冬素 、挥发油 、鞣
质及树脂;葎草叶含木犀草素葡萄糖苷 、大波斯菊苷 、牡荆素等黄
酮类成分 [ 1] 。我们在研究葎草提取物的抗菌作用时发现 , 其水
提取液对革兰氏阳性菌具有较强的抗菌活性 ,并证实抗菌作用与
葎草中所含的黄酮类成分有关。 本研究通过正交实验法考查了
乙醇浓度 、溶剂用量 、提取时间三因素对葎草叶中总黄酮提取率
的影响 , 以确定其最佳提取条件 , 为合理开发葎草资源提供科学
依据。
1　仪器与材料
岛津 UV-2401PC紫外分光光度计 , SWB5200型超声清洗机
(上海必能信超声有限公司), 电子天平(北京赛多利斯), 芦丁对
照品(中国药品生物制品检定所 , 批号 0080 9705), 其他试剂均
为分析纯。葎草采自嘉兴郊区 , 由本学院生药 、天然药物化学教
研室陈伟光老师鉴定 。
2　方法与结果
2.1　标准曲线制备 精密称取干燥至恒重的无水芦丁 20 mg,置
100ml的容量瓶中 ,加 60%的乙醇至刻度 , 摇匀 , 即得 0.20 mg/
ml对照品溶液。精密吸取该对照品溶液 2, 4, 6, 8, 10 ml, 分别置
25 ml的容量瓶中 , 加 5%亚硝酸钠溶液 1.0ml, 摇匀 ,放置 6min,
加 10.0%的硝酸铝溶液 1.0 ml, 摇匀 , 放置 6 min, 加 4%的氢氧
化钠溶液 10.0ml, 用 60%的乙醇稀释至刻度 , 摇匀 ,静置 10 min
后于 512 nm处测吸光度 [ 2] 。以浓度为纵坐标 , 吸光度值为横坐
标进行线性回归 ,得回归方程为:A=0.011 4 C+0.025 7, r=
0.999 7。线性范围:0.4 ～ 2.0 mg/ml。
2.2　样品提取与测定 分别称取葎草叶粉末 3.000g, 以表 1因
素水平 ,按 L9(34)正交实验表选择的条件回流提取 2次 , 过滤 ,
合并提取液 ,回收乙醇 , 水浴蒸干 , 70℃干燥 3h,干燥器中冷却后
称重 , 浸膏得率(%)=浸膏重 /样品重 ×100%。结果见表 2。
表 1　因素水平
水平 A乙醇浓度(%)
B
溶剂量 /倍
C
提取 t/h
1 50 10 1
2 75 15 1.5
3 95 20 2
2.3　浸膏中总黄酮的测定 取葎草浸膏 , 加 60%乙醇 , 超声助
溶 , 定容于 50 ml的容量瓶中 , 3 000 r/min离心 15 min,精密吸取
上清液 1.00 ml, 按标准曲线制备项下处理测定黄酮含量。结果
见表 3。
2.4　正交实验设计及结果 直观分析 , 由表 2可见 , 乙醇浓度
(A)对总黄酮提取影响最大 , 溶剂用量(B)次之 , 提取时间(C)影
响最小 ,几无影响。 最优水平组合为 A
2
B
3
C
3
即溶剂为 75%乙
醇 、 20倍量溶剂 、回流提取 2 h/次。
方差分析结果见表 4。由表 4可见乙醇浓度对总黄酮提取
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2007VOL.18NO.3 时珍国医国药 2007年第 18卷第 3期
有显著影响 , 而溶剂用量 、提取时间无显著影响。
表 2　浸膏得率与浸膏中黄酮含量 %
实验号 浸膏得率 浸膏中黄酮
1 17.66 10.81
2 22.59 9.74
3 23.30 9.80
4 15.66 13.14
5 18.02 13.66
6 19.24 12.60
7 11.09 11.90
8 13.02 11.68
9 13.77 11.21
表 3　正交设计及实验结果
实验
号
A
乙醇浓度
B
溶剂用量
C
提取 t/h
D
空白 黄酮 /生药
1 1 1 1 1 1.91
2 1 2 2 2 2.20
3 1 3 3 3 2.28
4 2 1 2 3 2.06
5 2 2 3 1 2.46
6 2 3 1 2 2.42
7 3 1 3 2 1.32
8 3 2 1 3 1.52
9 3 3 2 1 1.54
K1 6.39 5.29 5.85 5.91K2 6.94 6.18 5.80 5.94
K3 4.38 6.25 6.07 5.86
R 2.56 0.96 0.21 0.08
　　最佳水平搭配 A2B3C3;元素主次顺序 A>B>C
表 4　方差分析结果
方差来源 离均差平方和 自由度 均 方 F值 P值
A 1.252 0 2 0.626 0 28.822 0 <0.05
B 0.235 0 2 0.117 5 5.410 3
C 0.055 4 2 0.027 7 1.276 4
D(误差) 0.043 4 2 0.021 7
　　F0.05(2, 2)=19.0
3　讨论
3.1　 通过正交实验 , 从表 2数据可见因素主次顺序 A>B>C,
最佳因素水平为 A
2
B
3
C
3
。 75%乙醇提取总黄酮得率最高 , 50%
乙醇提取浸膏得率虽高 ,但黄酮含量较低 , 而且过滤困难 ,说明浸
膏中无效成分(如糖 、淀粉)较多 , 95%乙醇提取液浸膏量最少 ,
糖类杂质少 ,但黄酮含量也最低 , 且叶绿素含量较高。而 75%乙
醇提取浸膏适中 , 浸膏中黄酮含量最高 、杂质少 、操作方便;溶剂
量对总黄酮提取影响稍小 , 15倍量乙醇与 20倍量乙醇总黄酮收
率基本相当;提取时间因素的水平对总黄酮含量影响最小 , 几无
差别。方差分析结果也证明溶剂用量 、提取时间无显著影响。 综
合其他因素 ,从节约溶剂 、能源和时间考虑 , 将 B3改为 B2 , 将 C3
改为 C1 ,由此确定提取工艺为 A2B2C1。即葎草中黄酮类成分回
流提取的适宜工艺为:用 75%乙醇 , 料液比为 1∶15, 回流提取 2
次 , 1h/次。
参考文献:
[ 1 ] 　尹海波 ,王　颖 ,郑太坤 ,等.中国葎草属植物的研究进展 [ J].辽宁
中医学院学报 , 2001, 3(1):60.
[ 2 ] 　盛 萍 ,王新铃 ,杨学斌 ,等.罗布麻总黄酮提取工艺的优选 [ J] .时
珍国医国药 , 2006, 17(4):587.
收稿日期:2006-07-28;　修订日期:2006-11-20
基金项目:四川省教育厅自然科学重点科研项目(No.2003A136)
作者简介:王世宽 (1964-),男(汉族),重庆江北人 ,现任四川理工学院生
物工程系副教授 ,硕士学位 ,主要从事农产品贮藏与加工工作.
鼠曲草中黄酮类化合物的微波辅助提取研究
王世宽 , 潘　明 , 郭春晓 , 刘　璐
(四川理工学院 ,四川 自贡　643000)
摘要:目的 应用微波法提取鼠曲草中的黄酮类化合物。方法 采用单因素实验 正交实验 , 研究了乙醇体积分数 、料液
比 、微波作用时间 、微波功率对鼠曲草黄酮提取量的影响规律。结果 微波提取法的最佳工艺条件为微波作用时间 5
min,乙醇体积分数 15%, 料液比 1∶60(g/ml), 微波功率 700W。在此参数组合条件下 ,黄酮提取率为 4.72%。 结论 与
传统溶剂法的对比实验表明 ,微波法不仅节省时间 , 而且提取效率高 ,是一种快速 、高效 、节能的新型提取工艺。
关键词:鼠曲草;　黄酮类物质;　微波辅助提取
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2007)03-0552-03
Microwave-AssistedExtractionofFlavonoidsfromChaphaliumaffineD.Don
WANGShi-kuan, PANMing, GUOChun-xiao, LIULu
(DepartmentofBioengineering, SichuanInstituteofTechnology, Zigong643000, China)
Abstract:ObjectiveAnovelextractionprocessofflavonoidsfromChaphaliumafineD.Donbymicrowave-assistedextractionwastested.MethodsThesingleexperimentalfactor, suchasmicrowavepower, percentofethanolvolume, microwavetreating
time, ratioofsolidtoliquidwasstudied.Then, theoptimumparameterswereobtainedbyorthogonaltest.ResultsTheoptimum
parametersweretheratioofsolidtoliquid1∶60(g/ml), microwavetreating5 min, themicrowavepowerration700W, percent
ofethanolvolume15.Theextractionrateofflavonoidswas4.72% attheoptimumparameters.ConclusionComparedwiththe
traditionalsoluentextraction, microwave-assistedextractionforchaphaliumafineD.Donflavonoidshasthecharacteristicsof
shorterextracttimeandhighereficiecyandthecostislow.
Keywords:ChaphaliumafineD.Don;　Flavonoids;　Microwave-assistedextraction
　　鼠曲草 GnaphliumaffineD.Don别名:佛耳草 、清明菜 , 系菊
花科鼠曲草属植物。本草原名 “鼠耳 ”始载于 《名医别录》《本草
拾遗》称:“鼠曲草 , 生平岗熟地 , 高尺余 , 叶有白毛 , 黄花”, 已收
载于《中国药典 》 1977年版 Ⅰ 部中 [ 1] 。 据测定 , 鼠曲草全草含
5%黄酮苷 ,黄酮类化合物具有抗氧化 、抗过敏 、抗炎 、抗菌 、抗突
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时珍国医国药 2007年第 18卷第 3期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2007VOL.18NO.3