全 文 ：陶士强 ,张谦瑾 ,张　雨 ,等.葎草不同溶剂提取物对朱砂叶螨的毒力分析 [ J] .江苏农业科学 , 2011, 39(3):158-159.
葎草不同溶剂提取物对朱砂叶螨的毒力分析
陶士强 1 , 张谦瑾1 , 张　雨 1 , 吴福安 2
(1.江苏科技大学生物与环境工程学院 ,江苏镇江 212018;2.中国农业科学院蚕业研究所 ,江苏镇江 212018)
　　摘要:在温度(28±1)℃、相对湿度(75±10)%、光暗周期 16h-8h的条件下 , 研究了葎草不同溶剂(正己烷 、乙
醇 、乙酸乙酯)提取物对朱砂叶螨成螨和卵存活的影响。结果表明:正己烷 、乙醇 、乙酸乙酯提取物对朱砂叶螨成螨的
致死中浓度(LC
50
)分别是 6.746、17.007 1、 190.424 6 mg/mL。正己烷提取物 20 mg/mL对成螨 48 h校正死亡率达
100%,高于乙醇(51.7%)和乙酸乙酯(3.6%)提取物。 正己烷 、乙酸乙酯对朱砂叶螨卵的致死中量(LC50)分别是
4.838 5、11.745 3 mg/mL, 乙醇提取物对朱砂叶螨卵的死亡率和对照组没有显著差异。表明正己烷是能有效提取出
葎草中杀螨活性成分的有机溶剂。
　　关键词:朱砂叶螨;溶剂;葎草;毒力分析
　　中图分类号:S433.7　　文献标志码:A　　文章编号:1002-1302(2011)03-0158-02
收稿日期:2010-07-30
基金项目:国家蚕桑产业技术体系建设专项。
作者简介:陶士强(1966—),男 ,江苏常熟人 ,硕士 ,副教授 ,从事桑树
害虫防治研究。 Tel:(0511)85639697;E-mail:tshiq@sina.com。
　　朱砂叶螨 (TetranychuscinnabarinusBoisduval)是我国桑
树上的主要害虫之一 ,目前在防治方面常使用杀螨剂 ,由于其
体型小 、世代历期短 、繁殖力强 ,朱砂叶螨对杀螨剂的抗性问
题越来越突出 ,开发新的药剂已成当务之急 [ 1 ] 。植物源农药
是生物农药中的一类 ,是利用植物体内的次生代谢物质 ,对昆
虫具有拒食 、毒杀 、麻醉 、抑制生长发育及干扰正常行为的活
性 ,具有对环境影响小、有害生物不易产生抗药性 、对有益生
物安全等优点 ,受到国内外研究者的广泛关注 [ 2 -4 ] 。葎草是
一种在我国分布广泛 、生长迅速的杂草 ,张谦瑾等研究了葎草
乙醇和水提取物对朱砂叶螨的生物活性 ,发现乙醇提取物对
朱砂叶螨有较强的触杀作用 [ 5] 。本研究采用正己烷 、乙醇 、
乙酸乙酯 3种有机溶剂进行葎草中活性成分的提取 ,并研究
不同提取物对朱砂叶螨成螨和卵存活的影响 ,以便发现更有
效的提取溶剂 ,为研究开发一种新型的经济 、安全 、有效的植
物源杀螨剂提供理论基础 。
1　材料与方法
1.1　朱砂叶螨
朱砂叶螨试验种群 ,是未接触过任何药剂的敏感种群 ,由
中国农业科学院蚕业研究所提供 。将朱砂叶螨转移到采摘的
桑叶上 ,桑叶背面向上贴在垫有脱脂棉的培养皿中 ,培养皿内
加水保持一定湿度 ,定期更换桑叶 ,置于(28±1)℃、相对湿
度(75±10)%、光暗周期 16 h-8 h的光照培养箱中饲养和
繁殖 。
1.2　仪器和试剂
FA2104N型电子天平 、RE-52A型旋转蒸发仪 、IKA-
ALLbasic型分析型研磨机 、ZRX-1000DC型智能人工气候
培养柜(杭州钱江仪器设备有限公司)。国药集团的分析纯
试剂正己烷 、乙醇 、乙酸乙酯。
1.3　葎草提取
将干燥的葎草用电动粉碎机充分粉碎 ,过 60目筛 ,等量
称取 80 g粉状葎草各 3份 ,装入三角瓶内 ,分别加 400 mL有
机溶剂(正己烷 、乙醇 、乙酸乙酯),恒温培养箱 25℃浸提 2d,
过滤 ,得提取液 。再分别向三角瓶内加入 200 mL有机溶剂 。
同样条件下浸提 1d,过滤 ,得提取液 。合并提取液并用旋转
蒸发仪浓缩至膏状 ,称重 ,置于 4 ℃冰箱中保存备用 。
1.4　葎草提取物对朱砂叶螨成螨的毒力测定
成螨的毒力测定采用圆叶片法 [ 2 ] 。桑叶用打孔器打成
直径为 3 cm的圆叶片 。将供试的葎草 3种有机溶剂提取物
用水配制成浓度为 40 mg/mL的母液(母液中加入少量相应
有机溶剂和 1%二甲亚砜),试验设 40、20、10、5、2.5 mg/mL
等 5个浓度 ,以水(其中也加入少量相应有机溶剂和 1%二甲
亚砜)作对照 。用毛笔将成螨转移到圆叶片背面 ,每个圆叶
片上 20头成螨 ,将圆叶片正面贴在带有湿棉花的培养皿内 ,
在温度(28±1)℃、相对湿度 60% ～ 80%的环境下放置 4h。
解剖镜下剔除死亡或受伤个体 ,记录活螨数 。将载有成螨的
圆叶片在药液中浸渍 5 s后取出 ,用滤纸迅速吸干成螨周围
多余的药液 。 48 h后检查 ,用毛笔轻触螨体 ,以螨足不动者
为死亡 。设 3个重复 。用 Abbot公式计算校正死亡率 。
校正死亡率 =[ (处理死亡率 -对照死亡率)/(1-对照
死亡率)] ×100%
1.5　葎草提取物对朱砂叶螨卵的毒力测定
药剂配制方法同 “1.4”。卵的毒力测定方法参照文献
[ 6] 。将雌成螨用毛笔转移到置于湿棉花上的圆叶片背面 ,
每个圆叶片上接 20头成螨 ,设 3个重复 。雌螨在(28±1)℃
下 4 h内产卵 ,然后移去雌螨 。将带有卵的圆叶片在上述药
液中浸渍 5s后取出 ,晾干 ,将圆叶片正面贴在带有湿棉花的
培养皿内 ,置于培养箱中饲养 , 5d后记录卵的孵化数 。以水
处理作对照 。
1.6　数据处理
不同处理后朱砂叶螨卵和成螨生存率的影响采用 SPSS
13.0软件中概率分析方法 ,用于计算致死中浓度(LC50 )及其
95%置信区间 [ 7] 。朱砂叶螨卵不同处理后存活率比较采用
—158— 江苏农业科学　2011年第 39卷第 3期DOI :10.15889/j.issn.1002-1302.2011.03.108
SPSSone-wayANOVA方差分析 ,应用 Duncan s多重比较检
验结果的差异性 。
2　结果与分析
2.1　葎草提取物对朱砂叶螨成螨的毒力测定
从表 1可见 ,正己烷提取物对朱砂叶螨成螨的 LC50最低 ,
为 6.746 0mg/mL,乙醇提取物次之 ,为 17.007 1 mg/mL,乙
酸乙酯提取物最高 ,为 190.424 6 mg/mL。乙酸乙酯提取物
LC50值是正己烷提取物的 28.23倍 ,乙醇提取物 LC50值是正
己烷提取物的 2.52倍 。正己烷 20 mg/mL处理的朱砂叶螨
校正死亡率达 100%,乙醇 20mg/mL处理的朱砂叶螨校正死
亡率 51.7%,乙酸乙酯 20 mg/mL处理的朱砂叶螨校正死亡
率 3.6%。可见正己烷提取物对朱砂叶螨的触杀活性最强 。
2.2　葎草提取物对朱砂叶螨卵的毒力测定
从表 2可见 , 正己烷提取物对朱砂叶螨卵 LC50值为
4.838 5mg/mL,乙酸乙酯提取物对朱砂叶螨卵 LC50值为
11.745 3 mg/mL,正己烷提取物对朱砂叶螨的杀卵效果高于
乙酸乙酯提取物 。
表 1　葎草提取物(正己烷 、乙醇 、乙酸乙酯)对朱砂叶螨成螨的毒力
溶剂 毒力回归方程
LC50
(mg/mL)
LC50的 95%置信区间
(mg/mL)
正己烷 y=9.955 0x-8.253 2 6.746 0 6.111 1～ 7.430 3
乙醇 y=2.210 3x-2.720 1 17.007 1 11.244 6～ 30.427 2
乙酸乙酯 y=2.117 8x-4.828 1 190.424 6
表 2　葎草提取物(正己烷 、乙酸乙酯)对朱砂叶螨卵的毒力
溶剂 毒力回归方程
LC50
(mg/mL)
LC50的 95%置信区间
(mg/mL)
正己烷 y=0.889 8x-0.609 3 4.838 5 2.347 4～ 7.244 9
乙酸乙酯 y=2.512 1x-2.687 6 11.745 3 9.630 4～ 14.322 0
　　由图 1可见 ,乙醇提取物对朱砂叶螨卵的毒杀作用不明
显 ,不同浓度处理朱砂叶螨卵的孵化率都在 80%左右 。
5 mg/mL的孵化率最低 ,为 68.8%,与对照组相比 ,不同浓度
的乙 醇提取物处理 得到的卵的孵 化率差异不显著
(F=2.442 , df=4 , P=0.122)。
3　小结
目前 ,对葎草的研究主要集中在葎草的生物学特性 、生态
学特性 、地理学分布 、营养价值的开发 、药用价值的开发等方
面 。葎草含有一些特殊的化学物质 ,如木犀草素 、葡萄糖苷 、
胆碱 、挥发油 、鞣质 、树脂 、天门冬酰胺等物质 [8 ] 。对杀虫作
用的研究较少 ,黄钢等发现葎草提取物对淡色库蚊幼虫的
24 h致死率达 76.67%[ 9] 。
　　葎草不同溶剂(正己烷 、乙醇 、乙酸乙酯)提取物对朱砂
叶螨成螨和卵存活的影响结果表明 ,正己烷提取物表现出较
强的生物活性 ,明显优于乙醇和乙酸乙酯 ,正己烷是更适合葎
草活性成分提取的溶剂 。研究结果为综合开发利用葎草资
源 、进一步从葎草中筛选和分离杀虫活性成分奠定了基础 。
有关葎草中杀虫活性成分分离 、鉴定尚待进一步研究 。
参考文献:
[ 1]吴福安 ,王兴科 ,余茂德 ,等.桑园害虫朱砂叶螨的研究进展 [ J].
蚕业科学, 2006, 32(3):386-391.
[ 2] TsolakisH, RagusaS.Efectsofamixtureofvegetableandessential
oilsandfatyacidpotassiumsaltsonTetranychusurticaeandPhyto-
seiuluspersimilis[J] .EcotoxicologyandEnvironmentalSafety, 2008,
70:276-282.
[ 3]周宇杰 ,丁　伟 ,王春升.青蒿粗提物对朱砂叶螨生物活性的初
步研究 [ J] .西南农业大学学报:自然科学版 , 2006, 28(2):305-
308, 321.
[ 4]张永强 ,丁　伟 ,赵志模 ,等.黄花蒿提取物对朱砂叶螨生物活性
的研究 [ J] .中国农业科学 , 2008, 41(3):720-726.
[ 5]张谦瑾 ,陶士强 ,吴福安.葎草提取物对朱砂叶螨生物活性的研
究 [ J] .江苏蚕业 , 2009(1):10-13.
[ 6] HussenH, Abou-ElelaM, AmerSAA, etal.Repelencyandtoxic-
ityofextractsfromCapparisaegyptiaL.toTetranychusurticaeKoch.
(Acari:Tetranychidae)[ J] .ActaPhytopathologicaetHungarica,
2006, 41(3/4):331-340.
[ 7]陶士强 ,吴福安.40%乐桑乳油对朱砂叶螨毒力测定的 SPSS分
析 [ J] .广西蚕业 , 2005, 42(4):24-28.
[ 8]高政权 ,孟春晓.葎草研究进展 [ J] .安徽农业科学 , 2007, 35
(31):9982-9984.
[ 9]黄　钢 ,潘文亮 ,高占林.河北省杀(抑)虫植物对淡色库蚊幼虫
毒效作用初步研究 [ J] .中国媒介生物学及控制杂志 , 2000, 11
(1):27-29.
—159—陶士强等:葎草不同溶剂提取物对朱砂叶螨的毒力分析