全 文 ：现 代 医 学
Modern Medical Journal 2012，Jun;40(3) :263
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［收稿日期］2011-09-30 ［修回日期］2011-12-11
［基金项目］广东省重点学科基金(9306) ;广东省大学生创新实验项目基金(KY1012)
［作者简介］周毅(1990-) ，男，广东珠海人，在读医学本科生。E-mail:greatzhouyi1990@ yahoo． cn
［通信作者］刘文 E-mail:liuw422@ yahoo． com． cn
·论 著·
野牡丹提取物对实验动物血栓形成的影响
周毅1，黄智艺1，杨夏敏1，郑允1，陈汉华1，罗燕媚1，刘文2
(1．广东医学院 第一临床医学院，广东 湛江 524023;2．广东医学院 生物化学与分子生物学研究所，广东 湛江 524023)
［摘要］目的:研究野牡丹提取物(Melastoma candidum P． E，M． candidum P． E)对小鼠和大鼠血栓形成的影
响。方法:(1)将 40 只昆明小鼠随机分成生理盐水组(10 ml·kg －1)、M． candidum P． E 低剂量组(5 mg·
kg －1)、M． candidum P． E 高剂量组(10 mg·kg －1)和血栓通组(30 mg·kg －1) ，每组 10 只，通过小鼠腹腔分别注
射生理盐水、M． candidum P． E或血栓通。各组用药后 30 min，采用剪尾法和玻片法测定小鼠出血时间(BT)
和凝血时间(CT)。(2)将 32 只 SD 大鼠随机分成生理盐水组(10 ml·kg －1)、M． candidum P． E 低剂量组
(10 mg·kg －1)、M． candidum P． E 高剂量组(20 mg·kg －1)和血栓通组(30 mg·kg －1) ，每组 8 只，通过大鼠颈外
静脉分别注射生理盐水、M． candidum P． E或血栓通。各组用药 5 min后，用血栓生成仪测定大鼠 5 min内的
颈总动脉的平均阻塞率。结果:(1)小鼠 M． candidum P． E 低剂量组的 BT［(3. 25 ±0. 45)min］和 CT［(0. 95 ±
0. 16)min］明显短于小鼠生理盐水组的 BT［(7. 17 ± 1. 80)min］和 CT［(1. 50 ± 0. 15)min］，两组间差异均
有统计学意义(P ＜ 0. 05) ;与生理盐水组比较，小鼠 M． candidum P． E 高剂量组的 BT［(11. 55 ± 1. 11)min］
和 CT［(2. 30 ± 0. 24)min］、血栓通组的 BT［(13. 75 ± 1. 64)min］和 CT［(2. 10 ± 0. 31)min］均有延长，差异
有统计学意义(P ＜ 0. 05) ;与血栓通组比较，小鼠 M． candidum P． E高剂量组的 BT和 CT差异无统计学意义
(P ＞ 0. 05) ;(2)大鼠 M． candidum P． E低剂量组的颈总动脉平均阻塞率［(86. 56 ± 1. 54)%］明显高于生理
盐水组［(63. 15 ± 9. 74)%］(P ＜ 0. 05) ;大鼠 M． candidum P． E 高剂量组的颈总动脉平均阻塞率［(49. 35 ±
13. 23)%］、血栓通组的颈总动脉平均阻塞率［(8. 00 ± 9. 00)%］均较生理盐水组降低，但差异均无统计学意
义(P ＞ 0. 05)。结论:低剂量 M． candidum P． E有促凝血作用，高剂量 M． candidum P． E有抗凝血作用。
［关键词］野牡丹提取物;出血时间;凝血时间;血栓形成
·362·
［中图分类号］R285． 5 ［文献标识码］A ［文章编号］1671-7562(2012)03-0263-04
doi:10． 3969 / j． issn． 1671-7562． 2012． 03． 004
Effect of Melastoma candidum P． E on thrombosis of
experimental animals
ZHOU Yi1，HUANG Zhi-yi1，YANG Xia-min1，ZHENG Yun1，
CHEN Han-hua1，LUO Yan-mei1，LIU Wen2
(1． First Clinical College，Guangdong Medical College，Zhanjiang 524023，China;2． Institute of Biochemistry and Molecular Biology，
Guangdong Medical College，Zhanjiang 524023，China)
［Abstract］Objective:To study the effect of Melastoma candidum P． E (M． candidum P． E)on thrombosis of
mice and rats． Methods: (1)Forty Kunming mice were randomly divided into the saline group(10 ml·kg －1) ，low-
dose M． candidum P． E group(5 mg·kg －1) ，high-dose M． candidum P． E group (10 mg·kg －1)and Xueshuantong
group(30 mg·kg －1) ，with 8 rats in each group． A set amount of saline，M． candidum P． E or Xueshuantong were
correspondingly injected into the peritoneal cavity of mice in each group． After 30 minutes of injection，cutting-tail
method and capillary method were used to determine effects of M． candidum P． E on mice bleeding time (BT)and
coagulation time(CT)for every group． (2)Thirty-two SD rats were randomly divided into the saline group(10 ml·
kg －1) ，low-dose M． candidum P． E group(10 mg·kg －1) ，high-dose M． candidum P． E group(20 mg·kg －1)and
Xueshuantong group(30 mg·kg －1) ，with 8 rats in each group． A set amount of saline，M． candidum P． E or
Xueshuantong were correspondingly injected through the jugular vein of rats in each group． After 5 minutes of
injection，a thrombosis inducer was used to determine the average blocking rate of the carotid artery of rats within
5 minutes． Results: (1)The BT ［(3. 25 ± 0. 45)min］and CT ［(0. 95 ± 0. 16)min］in low-dose M． candidum
P． E group were significantly shorter than those in saline group ［BT (7. 17 ± 1. 80)min，CT (1. 50 ± 0. 15)
min］，respectively(all P ＜ 0. 05)． Compared with saline group，the BT and CT in high-dose M． candidum P． E
group［BT (11. 55 ± 1. 11)min，CT (2. 30 ± 0. 24)min］ or Xueshuantong control group［BT (13. 75 ± 1. 64)
min，CT (2. 10 ± 0. 31)min］were longer(P ＜ 0. 05)． There was no significant difference in either BT or CT
between high-dose M． candidum P． E group and Xueshuantong control group(P ＞ 0. 05)． (2)The average blocking
rate of the carotid artery in the low-dose M． candidum P． E rat group ［(86. 56 ± 1. 54)%］was significantly higher
than that in the saline group ［(63. 15 ± 9. 74)%］(P ＜ 0. 05)． The average blocking rate of carotid artery in the
high-dose M． candidum P． E group ［(49. 35 ± 13. 23)%］ and Xueshuantong control group［(8. 00 ± 9. 00)%］
were lower than that in the saline group，but the difference was not statistically significant(P ＞ 0. 05)．
Conclusion:Low-dose of M． candidum P． E has procoagulant effect，while high-dose of M． candidum P． E has an
anticoagulant effect．
［Key words］Melastoma candidum P． E;bleeding time;clotting time;thrombosis
野牡丹主要来源于野牡丹科植物，具有清凉止
血、活血化瘀的功效，能用于温毒发斑、吐血、经闭痛
经、肿痛疮毒、跌打损伤等病症［1 － 2］。因此，野牡丹
具有很好的临床应用价值，且其资源丰富，开发利用
前景光明。野牡丹提取物(M． candidum P． E)是由野
牡丹的叶子和根经过煎煮法［3］提取而成的水溶液。
研究发现，从野牡丹分离得到的提取物中含有多种
不同类型的化合物，包括槲皮素及其苷类、木犀草素
及其苷类和黄酮醇类及其苷等［4］。目前国内外有关
野牡丹提取物的研究报道较少，对其药理活性研究
仍处于空白。为了进一步探究野牡丹提取物的药理
作用，我们设计并实施了本实验，观察不同剂量的野
牡丹提取物对小鼠岀血时间、凝血时间及对大鼠血
栓形成的影响。
·462· 现代医学(Modern Medical Journal) 2012 年 6 月，40(3)
1 资料与方法
1． 1 药品与试剂
M． candidum P． E由本实验室煎煮提取［3］，血栓通
注射液为广西梧州制药集团股份有限公司产品，水合
氯醛为上海金贸泰化工有限公司产品，其余为国产分
析纯试剂。
1． 2 仪器
电子天平、大烧杯、规格分别为 1 ml 和 2 ml 的注
射器、小鼠笼、滤纸、眼科剪、镊子、秒表、玻片、大头针、
YLS-14B血栓生成仪、小动物解剖板、手术刀、组织剪、
组织钳、止血钳、玻璃分针、动脉夹、静脉夹、棉线、纱
布、小烧杯。
1． 3 动物
昆明种小鼠 40只，雌雄各半，体质量为(20 ± 2)g;
SD大鼠 32只，雌雄不限，体质量为(300 ±50)g，均由广
东医学院动物实验中心提供。
1． 4 方法
1． 4. 1 小鼠分组及出血时间(BT)测定(剪尾法)［5］
40只小鼠随机分为 4 组:生理盐水组(10 ml·kg －1)、
M． candidum P． E 低剂量组(5 mg·kg －1)、M． candidum
P． E高剂量组(10 mg·kg －1)和血栓通组(30 mg·kg －1) ，
每组 10 只。小鼠腹腔注射给药后30 min，用剪刀于小
鼠尾尖 0. 5 cm 处剪断，开始出血时用秒表计时，每隔
30 s以滤纸粘断端出血处，至滤纸上完全不见红色血迹
时为止，记为该小鼠出血时间。出血时间最长观察
60 min，超过 60 min仍出血的按 60 min计算。
1． 4. 2 小鼠凝血时间(CT)测定(玻片法)［5］ 在给药
后 1 h，摘小鼠眼球采血，用玻片法测定凝血时间:小鼠
取眼球后，在玻片两端各滴 2滴直径约 5 mm的血滴，立
即用秒表计时。每隔 30 s用大头针将血滴由外向内轻
轻挑动 1次，直至观察到 2滴血液都挑出血丝为止。从
采血开始至挑起血丝止，即为凝血时间，凝血时间最长
观察 30 min，超过 30 min不凝血的按 30 min计算。
1． 4. 3 大鼠分组及颈总动脉的平均阻塞率测定［6］ 将
SD大鼠随机分成 4 组:生理盐水组(10 ml·kg －1)、
M． candidum P． E 低剂量组(10 mg·kg －1)、M． candidum
P． E高剂量组(20 mg·kg －1)和血栓通组(30 mg·kg －1) ，
每组 8只。腹腔注射 10%水合氯醛溶液 4. 5 ml·kg －1麻
醉后，将大鼠固定于小动物解剖板上，钝性分离左颈外
静脉和右颈总动脉，从左颈外静脉注射药物野牡丹提取
物，5 min后用 YLS-14B 血栓生成仪通过电刺激(电流
1 mA，刺激时间 5 min)诱导大鼠右颈总动脉内血栓形
成，观察右颈总动脉血栓阻塞情况，并打印出相关的
数据。
1． 5 统计学处理
实验数据用珋x ± s表示，采用 SPSS 13． 0统计软件进
行方差分析(one-way ANOVA)。
2 结 果
2． 1 M． candidum P． E对小鼠 BT和 CT的影响
见表 1。
表 1 各组小鼠 BT、CT比较(珔x ± s) min
组 别 n BT CT
生理盐水组 10 7. 17 ±1. 80 1. 50 ±0. 15
M． candidum P． E低剂量组 10 3. 25 ±0. 45a 0. 95 ±0. 16a
M． candidum P． E高剂量组 10 11. 55 ±1. 11ab 2. 30 ±0. 24ab
血栓通组 10 13. 75 ±1. 64a 2. 10 ±0. 31a
与生理盐水组比较，a P ＜ 0. 05;与血栓通组比较，b P ＞
0． 05
由表1可见，M． candidum P． E低剂量组(5 mg·kg －1)
小鼠的 BT和 CT 明显缩短，与生理盐水组比较，差异
有统计学意义(P ＜ 0. 05)。M． candidum P． E 高剂量
组(10 mg·kg －1)和血栓通组(30 mg·kg －1)小鼠的 BT
和 CT均明显延长，与生理盐水组比较差异有统计学
意义(P ＜ 0. 05)。M． candidum P． E 高剂量组(10 mg·
kg －1)小鼠的 BT和 CT明显延长，与血栓通组比较，差
异无统计学意义(P ＞ 0. 05)。
2． 2 M． candidum P． E 对大鼠电刺激致血栓形成的
影响
见表 2。
表 2 各组大鼠颈总动脉的平均阻塞率(珔x ± s)
组 别 n 颈总动脉的平均阻塞率 /%
生理盐水组 8 63. 15 ± 9. 74
M． candidum P． E低剂量组 8 86. 56 ± 1. 54a
M． candidum P． E高剂量组 8 49. 35 ± 13. 23b
血栓通组 8 8. 00 ± 9. 00b
与生理盐水组比较，a P ＜ 0. 05;与生理盐水组比较，
b P ＞ 0． 05
由表 2 可见，在同等条件下对各组大鼠进行电刺
激，M． candidum P． E低剂量组(10 mg·kg －1)大鼠颈总
动脉的平均阻塞率明显增高，与生理盐水组比较，差异
有统计学意义(P ＜ 0. 05)。M． candidum P． E高剂量组
(20 mg·kg －1)、血栓通组(30 mg·kg －1)分别与生理盐水组
比较，颈总动脉的平均阻塞率均有所降低，但差异均无统
·562·周毅，等．野牡丹提取物对实验动物血栓形成的影响
计学意义(P ＞0. 05)。
3 讨 论
凝血与抗凝血功能平衡是机体重要的防御功能之
一。当机体由于某种原因而导致出血时，可先后启动
外源性凝血系统和内源性凝血系统，从而产生止血作
用。在激活凝血系统的同时，抗凝血系统和纤溶系统
也被激活。抗凝血系统的激活，可防止凝血过程的扩
散;纤溶系统的激活则有利于局部血流的再通。可见
机体的凝血、抗凝血、纤溶系统之间维持动态平衡，保
证了正常的血液循环。此外，血小板和血管内皮细胞
在维持这一平衡中也具有重要作用［7］。通过测定小
鼠 BT和 CT，以及大鼠颈总动脉的平均阻塞率，能比较
客观地反映药物对机体是促凝血还是抗凝血的作用。
本研 究 结 果 显 示，低 剂 量 (5 mg· kg －1 )
M． candidum P． E 能明显缩短小鼠 BT和 CT，与生理盐
水组比较，差异有统计学意义(P ＜ 0. 05)。这表明低
剂量的 M． candidum P． E 具有止血、促凝血的作用，但
随着 M． candidum P． E 剂量增加至 10 mg·kg －1，或者
应用注射血栓通(30 mg·kg －1)时，小鼠 BT和 CT均明
显延长，且两药效果相当(P ＞ 0. 05) ，表明高剂量 M．
candidum P． E(10 mg·kg －1)能抑制小鼠血栓形成，起
到活血化瘀、抗凝血的作用。
为了进一步证明低剂量的 M． candidum P． E 具有
止血、促凝血的作用，而高剂量的 M． candidum P． E 能
起到活血化瘀、抗凝血的作用，我们又制作了大鼠血栓
模型，观察该药在大鼠体内是否发挥此特性。通过实
验，我们发现电刺激已注射低剂量 M． candidum P． E
(10 mg·kg －1)的 8 只大鼠，颈总动脉的平均阻塞率明
显高于注射生理盐水的大鼠(P ＜ 0. 05)。这符合我们
的预期结果，表明 M． candidum P． E 低剂量确有促进
血栓形成、缩短血栓形成时间的作用，起到了止血、促
凝血的目的。然而在使用 M． candidum P． E 高剂量
(20 mg·kg －1)进行大鼠实验时，我们却发现，大鼠颈
总动脉的平均阻塞率虽有所降低，而且与生理盐水组
及血栓通组比较有较大差异，但经统计学处理 3 个实
验组的大鼠颈总动脉的平均血栓阻塞率差异无统计学
意义 (P ＞ 0. 05)。这让我们对其产生了疑问:
M． candidum P． E的药性是否具有明确的浓度依赖性?
M． candidum P． E在机体内究竟如何发挥促凝血和抗
凝血的作用?通过实验结果表明，M． candidum P． E 对
凝血系统的作用存在一定的浓度依赖性，但其机制尚
不明确。由于从野牡丹分离得到的提取物中含有多种
不同类型的化合物，包括了槲皮素及其苷类、木犀草素
及其苷类和黄酮醇类及其苷等［4］。其中槲皮素及其
苷类已被证实具有明显的抗凝血作用，它们可以抑制
经胶原激活的血小板酪氨酸蛋白磷酸化，进而减少血
小板聚集以及胶原激活的血栓形成，从而起到抗凝血
的作用［8］。而木犀草素及其苷类则被证实具有明显
的促凝血作用［9］。我们推测，当给机体注射低剂量
M． candidum P． E时，主要以木犀草素及其苷类发挥促
凝血的作用;而在使用高剂量 M． candidum P． E 后，机
体内则因槲皮素及其苷类的抗凝血作用占主导地位，
其功能掩盖了木犀草素及其苷类在体内发挥的促凝血
作用。
综上所述，M． candidum P． E对机体的血液系统具
有较大的影响，M． candidum P． E 在低剂量的时候，具
有止血、促凝血的作用，而在高剂量的时候则起到活血
化瘀、抗凝血的作用。本实验为进一步研究该药物在
血栓形成方面的作用，提供了一定的参考。
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