全 文 :陆英及其提取物乌索酸对小鼠出血和凝血时间的影响
易增兴,熊筱娟,李四玲
(宜春学院 化学与生物工程学院,江西 宜春 336000)
①
摘 要:目的:通过实验研究陆英及其提取物乌索酸对动物出血、凝血时间的影响。方法:分别灌胃给予小
鼠陆英水煎剂、乌索酸 (15、30、60mg /kg)、生理盐水,每天一次,共给药 7 天,采用断尾法测定小鼠的出血时
间,玻片法测定小鼠的凝血时间。结果:与生理盐水组比较,陆英、乌索酸 (15、30、60mg /kg)组均有显著性
差异 (p < 0. 05)。结论:陆英和乌索酸均能明显延长小鼠出血时间和凝血时间,与其活血化瘀功效相符。
关键词:乌索酸;陆英;出血时间;凝血时间
中图分类号:R965. 1 文献标志码:A 文章编号:1671 - 380X (2011)08 - 0077 - 02
The Effect of Sambucus Chinensis and Ursolic Acid to Mouse about Bleeding Time and Blood Clotting Time
YI Zeng - xing XIONG Xiao - Juan LI Si - ling
(Chemistry and Bioengineering College Yichun University,Yichun 360000 China)
Abstract:Objective:Through study the sambucus chinensis and ursolic acid to mouse about the bleeding time and clotting time of
blood clots. Initial proof Sambucus chinensis and Ursolic acid the effectiveness of the blood circulation removing extravasted blood.
Methods:Gavage adminstration to mouse about sambucus chinensis,ursolic acid (15,30,60mg /kg)and NS. Once a day,seven
days a total of administration. The bleeding time was measured using tail - cutting method,and the coagulation time was measured u-
sing the slice methods. Results:sambucus chinensis and ursolic acid (15,30,60mg /kg)could significantly prolonged bleeding time
and clotting time. Conclusion:sambucus chinensis and ursolic acid can be prolonged bleeding time and clotting time,play the effect of
the blood circulation removing extravasted blood.
Key words:Sambucus chinensis;Ursolic acid;Bleeding time;Clotting time
乌索酸 (ursolic acid,UA)又名熊果酸、乌苏酸,属
五环三萜类化合物,化学名 (3β) - 3 - Hydroxyurs - 12 -
en - 28 - oic acid,分子式 C30H48O3,分子量 456。乌索酸
在自然界分布较广,在陆英、枇杷叶、熊果等植物中以游
离或与糖结合成苷的形式存在。具有抗肝炎、抗病毒、抗
炎抑菌及降血脂等多种药理活性[1]。陆英 (Sambucus
chinensis)又名接骨草、臭草、八棱麻、走马风,为忍冬科
接骨木属植物,生于山坡、路旁、溪边、荒野灌丛中,分
布于华北、华东、华南、西南及陕西、甘肃、宁夏等省区,
以根、茎及叶入药,具活血散、祛风除湿、通经活络之功
效,用于跌打损伤、风湿痛、脱臼、肾炎水肿、脚气水肿、
荨麻疹[2]。经药理和临床试验证实,陆英所含的乌索酸、
齐墩果酸、谷淄醇是其抗肝炎的有效成分,其中乌索酸是
主要有效成分[3,4]。目前研究发现大多数活血化瘀中药能降
低动物血液黏度,明显延长动物出血时间和凝血时间,有
抗血小板聚集,抗血栓形成的作用[5]。实验研究了陆英及
其提取物乌索酸对小鼠出血、凝血时间的影响,结果报告
如下。
1 材料与方法
1. 1 药品及试剂
陆英原药材于 2010 年 8 月份采自宜春市袁州区湖田乡
境内,取全草晒干,粉碎、水煎 2 次,陆英煎剂浓度为
2. 6g /10ml (生药量)。乌索酸 (UA,纯度为 93%)由宜春
学院生物工程研究所药化实验室从植物陆英中提取,用 0. 2
% PluronicF68 (上海宏运化工制剂辅料技术有限公司)助
溶,分别配制成浓度为 1. 5g /L、3. 0g /L、6. 0g /L 的溶液,
超声振荡后备用。
1. 2 仪器。三用电热恒温水箱 (余姚市东方电工仪器厂) ;
SK2510HP超声震荡器 (上海楚定分析仪器有限公司) ;
AO210 型分析天平 (美国奥豪斯公司)。
1. 3 动物。昆明小鼠 40 只,雌雄各半,体重 20 ~ 30g (南
昌大学医学院实验动物科学部提供)。
1. 4 方法
1. 4. 1 陆英、乌索酸对小鼠出血时间影响
实验采用断尾法[6],取体重 20 - 30g 的小鼠 40 只,雌
雄各半,随机分 5 组,每组 8 只,分别为生理盐水组、乌
索酸低剂量组 (15mg /kg)、乌索酸中剂量组 (30mg /kg)、
乌索酸高剂量组 (60mg /kg)、陆英煎剂组。灌胃给药,给
药容积为 0. 1ml /10g,每天一次,连续 7 天,末次给药后 30
分钟,将小鼠放置于固定器中,并在距尾尖约 1cm 处作标
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第 33 卷 第 8 期
2011 年 8 月
宜春学院学报
Journal of Yichun College
Vol. 33,No. 8
Aug. 2011
① 收稿日期:2011 - 05 - 17
基金项目:江西省教育厅科技项目,赣教技字 2007 [312] 号,乌索酸抑制血栓形成和血小板聚集的实验研究。
作者简介:易增兴 (1974 -) ,男,江西宜春人,本科,讲师,主要从事药理教学与研究。
记,然后用手术剪在鼠尾标记处剪断,待血液自行溢出开
始计时,每隔 30s 用滤纸吸去血滴 1 次,直至血液自然停
止 (滤纸吸时无血为止) ,即为出血时间。用秒表记录出血
时间。
1. 4. 2 陆英、乌索酸对小鼠凝血时间的影响[7]
实验采用玻片法[8]。取体重 20 - 30g 的小鼠 40 只,雌
雄各半,随机分 5 组,每组 8 只,分别为生理盐水组、乌
索酸低剂量组 (15mg /kg)、乌索酸中剂量组 (30mg /kg)、
乌索酸高剂量组 (60mg /kg)、陆英煎剂组。灌胃给药,给
药容积为 0. 1ml /10g,每天一次,连续 7 天,末次给药 30
分钟后,将毛细玻璃管插入小鼠眼眶内使血液自行流出,
弃去第一滴血后,将血滴于清洁载玻片上,血滴直径为 5 -
10mm。滴后立即开始计时,此后每隔 20s,用干燥的针头
挑动血液 1 次,至针头能挑起纤维蛋白丝为止,即为凝血
时间。
1. 4. 3 统计方法。数据表达为 “均数 ± 标准差”,采用
SPSS10. 0 统计软件包对各组数据进行单因素方差分析。
2 结果
2. 1 陆英、乌索酸对小鼠出血时间影响结果见表 1。
表 1 陆英和乌索酸对小鼠尾出血时间的影响
组别
剂 量
(mg /Kg)
动物数
(只)
出血时间 (秒)
生理盐水组 - 8 172. 5 ± 34. 9
乌索酸低剂量组 15 8 210 ± 22. 3*
乌索酸中剂量组 30 8 251. 25 ± 22. 3** △
乌索酸高剂量组 60 8 225 ± 27. 8**▲
陆英煎剂组 2600 8 255 ± 16**
注:与生理盐水组比较* P < 0. 05;**P < 0. 01;与乌索
酸低剂量组比较△P < 0. 01;▲P > 0. 05。
实验结果表明,与生理盐水组比较,陆英及乌索酸各
剂量组均对小鼠的出血时间的影响差异有统计学意义 (P <
0. 01) ,提示陆英煎剂和乌索酸能延长小鼠出血时间;乌索
酸各剂量组比较,除中剂量组与低剂量组间有极显著性差
异 (P < 0. 01)外,其他各组之间无明显差异 (P > 0. 05)。
表明乌索酸在一定剂量范围内,有延长小鼠出血时间的作
用,随着剂量的加大而增加。对影响小鼠出血时间的最佳
乌索酸剂量,还有待进一步研究。
2. 2 陆英和乌索酸对小鼠凝血时间的影响结果见表 2。
表 2 陆英和乌索酸对小鼠凝血时间的影响
组别
剂 量
(mg /Kg)
动物数
(只)
凝血时间 (秒)
生理盐水组 - 8 60 ± 14
低剂量乌索酸组 15 8 67. 5 ± 17***
中剂量乌索酸组 30 8 107. 5 ± 28**△
高剂量乌索酸组 60 8 80 ± 14*▲
陆英煎剂组 2600 8 85 ± 13*
注:与生理盐水组比较* P < 0. 05;**P < 0. 01;***P >
0. 05,与乌索酸组低剂量比较△P < 0. 01;▲P > 0. 05。
与生理盐水组比较,陆英及乌索酸 (中、高剂量)组
均对小鼠的凝血时间差异有统计学意义 (P < 0. 05) ,其中
乌索酸中剂量组差异有统计学意义 (P < 0. 01) ,表明陆英、
乌索酸能有效延长小鼠凝血时间。乌索酸各剂量组比较,
中剂量组与低剂量组差异有统计学意义,其他组差异无统
计学意义。
3 讨论
中国医学认为血瘀症是血液循行发生不畅或淤滞之症,
是“积血”、“蓄血”之症。血瘀症的病理主要是血液的停
滞和血流不畅或血流阻断,即所谓充血或缺血。中医根据
体症如疼痛、出血、紫舌、咳喘、寒热、肿块来判断有无
血瘀存在。现代医学表明,这些体症都与血液的流动性和
血粘度的异常有关。血液流动性下降、粘滞性的增高,血
细胞聚集性增高、分散性下降,血液凝固性增加及浓稠性
的变化与血瘀症密切相关。属于血瘀症的疾病有缺血性脑
血管病、急性心肌梗塞、冠心病慢性供血不足、血栓闭塞
性脉管炎、急性出血性疾病等。中医治疗血瘀症的一项治
则是活血化瘀,用活血药物使流动不畅或停滞的“瘀血”,
变为流动的“活血”,可使许多血液流变学呈高粘度血症或
高凝状态的患者避免发生梗塞的可能。活血化瘀类中药能
通利血脉、促进血行、消散瘀血。陆英为活血化瘀中药,
其主要有效成分乌索酸有降血脂、抗动脉粥样硬化、抑制
血管平滑肌细胞增殖、清除自由基抗氧化等作用。实验结
果表明,陆英及其提取物乌索酸 (15、30、60mg /kg)均能
延长小鼠出血时间和凝血时间,尤以乌索酸中剂量组极为
明显。提示陆英和乌索酸可能抑制凝血因子、血小板和毛
细血管功能,具有明显的抗凝作用,进而说明陆英与乌索
酸可起到活血化瘀之功效,但其药理作用机制尚有待深入
研究。
参考文献:
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第 8 期 宜春学院学报 第 33 卷