全 文 ：China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 47 中国药房 2010年第21卷第47期
研究的目的是利用HEK293T纤维细胞，建立基于荧光素酶报
告基因的HIF-1启动子的检测方法，用于测定HIF-1的表达，
将构建的荧光素酶报告基因载体瞬时转染到人胚肾纤维细
胞，通过测定荧光素酶活性来检测HIF-1的表达。试验发现，
高浓度芒柄花苷可抑制HIF-1的表达而低浓度可促进其表
达。这一发现可为黄芪的抗肿瘤作用及对其他疾病的治疗提
供一定依据，但具体的作用机制尚待进一步的研究。
参考文献
[ 1 ] Goldberg MA，Dunning SP，Bunn HF. Regulation of the
erythropoietin gene：evidence that the oxygen sensor is a
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2000，99（3）：577.
（收稿日期：2010-01-19 修回日期：2010-06-24）
Δ解放军济南军区后勤科研计划（CJN10L067）
＊主任药师。研究方向：中药制剂与医院药学。电话：
0378-3958759。E-mail：155SL@163.com
#通讯作者：教授，博士后，硕士研究生导师。研究方向：中药活性
成 分 及 新 药 研 发 。 电 话 ：0378-3880680。 E-mail：kangwe-
ny@hotmail.com
见血飞对小鼠出血时间和凝血时间的影响Δ
石 磊 1，2＊，李昌勤 1，廉婷婷 1，许启泰 1，康文艺 1 #（1.河南大学中药研究所，开封市 475000；2.解放军第155中心
医院，开封市 475003）
中图分类号 R285.5；R97 文献标识码 A 文章编号 1001-0408（2010）47-4424-02
摘 要 目的：观察见血飞石油醚、乙酸乙酯、甲醇部位的凝血作用。方法：采用毛细玻管法及玻片法观察这3个部位对小鼠凝血
时间的影响；采用断尾法观察其对小鼠出血时间的影响。结果：玻片法中，甲醇部位的3个剂量组、石油醚部位的中剂量组和乙酸
乙酯部位的低剂量组与空白组比较能显著缩短小鼠的凝血时间。毛细玻管法中，甲醇部位的3个剂量组及乙酸乙酯的高、中剂量
组与空白组比较能显著缩短小鼠的凝血时间。断尾法中，石油醚部位的低剂量组与空白组比较无显著性差异，其它各组的出血时
间都明显短于空白组。结论：在这3个部位中，见血飞甲醇部位的凝血作用最好，有提高机体凝血功能、增强止血的作用。
关键词 见血飞；凝血时间；出血时间
Effect of Toddalia asiatica on Bleeding Time and Clotting Time in Mice
SHI Lei，LI Chang-qin，LIAN Ting-ting，XU Qi-tai，KANG Wen-yi（Institute of Chinese Materia Medica，
Henan University，Kaifeng 475000，China）
SHI Lei（No. 155 Central Hospital of PLA，Kaifeng 475003，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To observe the blood coagulation of petroleum ether extract，ethyl acetate extract and methanol ex-
tract of Toddalia asiatica. METHODS：The glass capillary tube method and slide method were used to observe the effects of petro-
leum ether extract，ethyl acetate extract and methanol extract of T. asiatica on the clotting time. The tail of mice was cut to observe
the effect of the effects of petroleum ether extract，ethyl acetate extract and methanol extract of T. asiatica on the bleeding time. RE-
SULTS：In slide method，methanol extract，medium-dose petroleum ether and low-dose ethyl acetate significantly shortened the
clotting time，compared with blank group. In glass capillary tube method，methanol extract，high-dose and medium-dose ethyl ace-
tate and blank group significantly reduced the clotting time. In tail method，there was no significant difference in bleeding time be-
tween low-dose petroleum ether group and blank group. Those of other groups were significantly shorter than that of blank group，
there were significant differences. CONCLUSION：Among 3 kinds of extracts，the activity of methanol extract is the best. The
methanol extract of T. asiatica promote coagulation function and stypticity activity.
KEY WORDS Toddalia asiatica；Clotting time；Bleeding time
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中国药房 2010年第21卷第47期 China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 47
见血飞又名飞龙掌血（Toddalia asiatica Lam.），是芸香科飞
龙掌血属植物的根或根皮，为贵州苗族用药。其具有活血化瘀、
止痛止血、驱风除湿之功效，是传统的活血化瘀中草药[1，2]。民间
用其根或根皮的水煎液及药酒治疗跌打损伤、风湿性关节炎
及多种痛症、血症。笔者对见血飞提取物的凝血作用进行了
实验研究，以为更好的发挥其药理作用提供理论依据。
1 仪器与材料
1.1 仪器
Laborota 4000型旋转蒸发仪（德国Heidolph公司）；电子天
平（瑞士Mettler Toledo公司）
1.2 试药
见血飞于 2008年 9月采集于贵州省都匀市，经贵州都匀
黔南民族师范学院郭志友副教授鉴定为真品。见血飞根 1.3
kg以甲醇冷浸 3次，每次 7 d，将滤液浓缩后，与 80目硅胶拌
样，分别用石油醚、乙酸乙酯和甲醇溶解，得到石油醚、乙酸乙
酯和甲醇部位；云南白药（云南白药集团股份有限公司，批号：
20061013）。
1.3 动物
昆明种小鼠（SPF级）110只，♂，体质量 18～22 g，购于华
中科技大学同济医学院实验动物学部（生产许可证号：SCXK
（鄂）2004-0007）。
2 方法与结果
2.1 统计学方法
结果用SPSS 17.0软件统计分析，数据以x±s表示。
2.2 见血飞对小鼠凝血时间（CT）的影响
取健康小鼠 110只，随机均分为 11组，即空白、云南白药
及见血飞石油醚部位高、中、低剂量（0.6、0.3、0.15 g·kg-1）、乙
酸乙酯部位高、中、低剂量（0.9、0.45、0.22 g·kg-1）、甲醇部位
高、中、低剂量（0.9、0.45、0.225 g·kg-1）组。ig给药，每天 1次，
连续 7 d。于第 7天 ig 40 min后从小鼠眼底静脉丛取血，用玻
片法和毛细玻管法测定CT。
玻片法[3]：末次给药40 min后，小鼠眼眶取血，用棉球擦去
第一滴血，再于载玻片两端各滴 1滴血，血滴直径约为 5 mm，
立即用秒表计时。每隔30 s用清洁大头针自血滴边缘向里轻
轻挑动一次，并观察有无血丝挑起。从采血开始至挑起血丝
止，所经历时间即为CT。
毛细玻管法[4]：末次给药40 min后，用直径为1 mm的毛细
管插入小鼠内眦眼球后静脉丛取血，以达 5 cm血柱为止。每
隔30 s折断毛细玻管一小截，检查有无血凝丝出现。记录从毛
细玻管采血到出现血凝丝的时间，此即为CT。
见血飞各部位提取物对小鼠CT的影响见表1。
由表 1可知，与空白组比较，见血飞甲醇部位的凝血作用
最好。
2.3 见血飞对小鼠出血时间（BT）的影响
用断尾法[3]测定BT：小鼠分组及给药同“2.2”项下。末次
给药 40 min后，将小鼠用胶布固定尾巴，用剪刀剪去尾尖约 3
mm，使血液自行溢出。每隔30 s用滤纸轻轻吸取血滴，以人工
形成创面到出血停止所经时间为BT。见血飞各部位提取物对
小鼠BT的影响见表2。
由表2可知，甲醇部位和乙酸乙酯部位的高、中、低剂量及
石油醚部位的高、中剂量组BT都明显低于空白组（P＜0.01或
P＜0.05）。其中甲醇部位的BT最短，止血作用最好。
3 讨论
CT是指血液自离体至凝固所需时间，其长短与第Ⅶ、Ⅷ、
Ⅺ等因子关系密切。测定CT是观察受试药物对血凝机制有无
影响的第一步[5]。见血飞甲醇部位能显著缩短小鼠CT、BT，表
明其对内源性凝血途径有促进作用，有明显的凝血作用。
见血飞乙酸乙酯部位和石油醚部位实验结果显示也有凝
血作用，但是实验中出现死亡现象，提示这 2个部位有毒性。
从结果来看，见血飞甲醇部位的凝血作用最好，并且其凝血作
用和用药量没有相关性，其主要凝血活性成分及其机制有待
进一步研究。
参考文献
[ 1 ] 全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编[M].北京：人
民卫生出版社，1990：903.
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影响[J].中药材，2001，24（12）：874.
（收稿日期：2010-06-28 修回日期：2010-08-12）
表1 见血飞各部位提取物对小鼠CT的影响
Tab 1 Effect of the extract of Toddalia asiatica on clotting
time in mice
组别
空白组
云南白药组
石油醚部位高剂量组
石油醚部位中剂量组
石油醚部位低剂量组
乙酸乙酯部位高剂量组
乙酸乙酯部位中剂量组
乙酸乙酯部位低剂量组
甲醇部位高剂量组
甲醇部位中剂量组
甲醇部位低剂量组
剂量/g·kg-1
-
0.6
0.6
0.3
0.15
0.9
0.45
0.225
0.9
0.45
0.225
CT/min
玻片法
1.952 9±0.527 6
1.463 9±0.471 3
1.283 3±0.455 2
1.145 8±0.417 8＊
1.886 1±0.773 6
1.174 3±0.688 3
1.246 5±0.582 4
1.116 7±0.744 0＊
0.670 0±0.239 0＊＊
0.686 7±0.148 9＊＊
0.638 1±0.150 8＊＊
毛细玻管法
1.980 0±0.710 1
1.491 3±0.320 4
1.766 7±0.750 3
1.550 0±0.529 3
1.796 2±0.568 8
1.147 6±0.579 5＊
1.243 8±0.564 6＊
1.276 9±0.654 0
0.954 8±0.338 8＊
0.739 6±0.419 9＊＊
0.748 1±0.194 6＊＊
与空白组比较：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01
vs.blank group：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01
表2 见血飞各部位提取物对小鼠BT的影响
Tab 2 Effect of the extract of Toddalia asiatica on bleeding
time in mice
组别
空白组
云南白药组
石油醚部位高剂量组
石油醚部位中剂量组
石油醚部位低剂量组
乙酸乙酯部位高剂量组
乙酸乙酯部位中剂量组
乙酸乙酯部位低剂量组
甲醇部位高剂量组
甲醇部位中剂量组
甲醇部位低剂量组
给药剂量/g·kg-1
-
0.6
0.6
0.3
0.15
0.9
0.45
0.225
0.9
0.45
0.225
BT /min
1.910 4±0.557 9
1.428 2±0.470 5
1.131 0±0.546 0＊
1.094 5±0.601 2＊
1.696 7±0.502 1
0.819 0±0.291 0＊
1.146 7±0.482 7＊
0.979 0±0.356 3＊
0.735 7±0.330 0＊＊
0.681 9±0.274 4＊＊
0.603 7±0.167 0＊＊
与空白组比较：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01
vs.blank group：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01
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