全 文 :Evaluation on antifungal activity of different polar fractions of
Enphorbia lunulata Bag obtained from Northwestern Hubei
YUHai- zhong,SUNYong- lin,LIAOXue- yi,WANGHai- yan
(School of Chemical Engineering and Food Science,Xiangfan University,Xiangyang,Hubei 441053,China)
Abstract:【Objective】Inhibitory effects of different polar fractions of Enphorbia lunulata Bag, collected from North-
western Hubei, were observed on mycelial growth and spore germination in three vegetable pathogenic fungi in order to
develop new plant fungicides. 【Method】The whole herb of E. lunulata was extracted with ethanol, methanol, ethyl acetate
and chloroform. And the antifungal activity of these extracts to Fusarium oxysporum f.sp. cucumber Owen, Botrytis cinerea
Pers, Sclerotium rolfsii Sacc was investigated by detecting the mycelium growth rate and the spore germination. 【Result】
Except weak inhibitory effect of methanol extract on B. cinerea and S. rolfsii, other different polar fractions showed strong
inhibitory activity which increased with increasing concentration of extracts. Chloroform fraction showed the highest inhibi-
tion effects to F. oxysporium f.sp cucumber (EC50 for 0.007 g/mL); ethyl acetate fraction’s inhibition effect was the highest
in both the B. cinerea (EC50 for 0.008 g/mL) and S. rolfsii (EC50 for 0.011 g/mL). Inhibition of different polar fractions in
E. lunulata on the above pathogenic fungi increased with increasing concentration. Similar inhibitory effects were observed
in mycelial growth, that of methanol-extracting fractions were relatively weaker, but the fractions extracted with ethyl ac-
etate and chloroform-extracting fractions were significantly stronger. The inhibitory efficiency of chloroform fraction to F.
oxysporium f.sp cucumber (0.005 g/mL) was the highest; while both, the B. cinerea (EC50 for 0.005 g/mL) and S. rolfsii
(EC50 for 0.004 g/mL) the ethyl acetate fraction was the highest. 【Conclusion】All the different polar fractions of E. lunulata
had inhibition on the tested pathogenic fungi, hence E. lunulata can be used for bio-fungicide development.
Key words: Enphorbia lunulata Bag; extracts; pathogenic fungi; antifungal activity
收稿日期:2011-11-23
基金项目:湖北省教育厅优秀中青年人才项目(Q20082504);湖北省襄阳市科技攻关项目(200517,2011GG1C10);襄樊学院植物
资源研究开发培育团队项目(Kypytd200901)
作者简介:余海忠(1976-),博士,主要从事植物次生代谢产物应用研究工作,E- mail:haizhongvip@126.com
0 引言
【研究意义】鄂西北位于我国黄河和长江两大流
域过渡地带,是北亚热带和南温带气候交叉区域,特
殊的地理和气候特点造就了区域内丰富的植物资源。
猫眼草(Euphorbia lunulata Bge)即为其中常见的一种
野生有毒植物,其含有的七叶内酯(Aesculetin)及猫眼
草素(Maoyancaosu)等成分具有体外抑菌作用,有着潜
在的植物性农药开发前景。【前人研究进展】一直以来
鄂西北产猫眼草不同极性部位
提取物抑菌活性评价
余海忠,孙永林,廖雪义,王海燕
(襄樊学院化学工程与食品科学学院,湖北 襄阳 441053)
摘要:【目的】探讨鄂西北产猫眼草对3种常见蔬菜病原真菌菌丝生长及孢子萌发的影响,以期为新型植物源杀菌
剂开发提供一定的理论依据。【方法】以乙醇、甲醇、乙酸乙酯、氯仿4种有机溶剂依次对猫眼草全草进行浸提获得的提
取物,分别采用生长速率法和孢子萌发法测定不同极性部位提取物对黄瓜枯萎病菌、大白菜灰霉病菌和辣椒白绢病
菌菌丝生长和孢子萌发的抑制活性。【结果】除甲醇部对大白菜灰霉病菌、辣椒白绢病菌菌丝生长抑制作用较弱外,其
他不同极性部位提取物均对3种病原真菌菌丝生长表现出明显的抑制活性,且抑制作用均随着提取物浓度的升高而
增强,其中氯仿部对黄瓜枯萎病菌菌丝的抑制效果最好,EC50为0.007 g/mL,乙酸乙酯部对大白菜灰霉病菌和辣椒白
绢病菌菌丝的抑制效果最好,EC50分别为0.008和0.011 g/mL。猫眼草不同极性部位提取物对3种病原真菌孢子的抑制
作用均随着提取物浓度的升高而增强,其中甲醇部对3种病原真菌孢子的抑制作用相对较弱,乙酸乙酯部和氯仿部则
明显较强,且氯仿部对黄瓜枯萎病菌孢子的抑制效果最好,EC50为0.005 g/mL,乙酸乙酯部对大白菜灰霉病菌和辣椒
白绢病菌孢子的抑制效果最好,EC50分别为0.005和0.004 g/mL。【结论】猫眼草不同极性部位提取物对3种蔬菜常见病
原真菌均具有一定的抑制作用,是一种潜在的、可用于生物杀菌剂开发的植物。
关键词:猫眼草;有机溶剂;提取物;病原真菌;抑菌活性
中图分类号:S432.1 文献标志码:A 文章编号:2095-1191(2012)04-0443-06
DOI:10.3969/j:issn.2095-1191.2012.04.443
南方农业学报 JOURNAL OF SOUTHERN AGRICULTURE 2012,43(4):443-448
ISSN 2095-1191;CODEN NNXAAB http://www.nfnyxb.com
南 方 农 业 学 报
对猫眼草的研究多集中在医学领域,如在常规疾病治
疗方面,猫眼草具有祛寒、镇咳、平喘、拔毒止痒、利尿
消肿之功效;在汉方外用药中,猫眼草具有抗菌、抗病
毒作用,外用于淋巴结结核、皮癣、灭蛆等的治疗;在
肿瘤治疗方面,国内研究主要集中在肺癌和肝癌上
(迟静等,2003;俞发荣等,2005;肖宝红等,2006a,
2006b;张春玲和肖宝红,2006);Arisawa等(1992,2000)
从猫眼草中提取出抗促癌作用的黄酮类成分及一种
细胞毒成分β- peltoboykinolic acid,并证明该细胞毒成
分对Meth- A小鼠纤维肉瘤的抗肿瘤作用。但猫眼草
提取物应用于植物病原真菌的防治研究报道甚少,仅
见陈学文等(2005)报道采用抑菌圈法室内测定猫眼
草粗提物对8种常见植物病菌(小麦赤霉病菌、小麦根
腐病菌、番茄早疫病菌、苹果炭疽病菌、西瓜枯萎病
菌、苹果腐烂病菌、葡萄白腐病菌、烟草赤星病菌)的
抑菌作用,结果表明,当培养基中加入粗提物质量浓
度为0.01 g/mL时,对其中5种病原菌的相对抑制率达
70%以上;当质量浓度为0.005 g/mL时,对其中3种病
原菌的相对抑制率达60%以上,其抑制率随着质量浓
度的降低显著减弱。【本研究切入点】目前未见有关猫
眼草粗提物对常见蔬菜病原菌抑制效果的研究报道。
【拟解决的关键问题】研究猫眼草乙醇、甲醇、乙酸乙
酯及氯仿等有机溶剂提取物对黄瓜枯萎病菌(Fusari-
um oxysporum f.sp. cucumber Owen)、大白菜灰霉病菌
(Botrytis cinerea Pers)、辣椒白绢病菌(Sclerotium rolfsii
Sacc)等3种常见蔬菜病原真菌菌丝生长及孢子萌发的
影响,以期为新型植物源杀菌剂开发提供一定的理论
依据。
1 材料与方法
1. 1 供试材料
供试植物为猫眼草全草,采自湖北省襄阳市古隆
中风景区。处理步骤:先用自来水冲洗,再用蒸馏水润
洗,晾干后置干燥箱中45℃干燥,粉碎,粉碎物过40目
筛后置4℃冰箱密封保存,待用。供试植物病原真菌为
黄瓜枯萎病菌、大白菜灰霉病菌、辣椒白绢病菌,菌种
均来自浙江大学生物技术研究所,本实验室置培养箱
中25℃培养后保存。
1. 2 试剂与仪器
葡萄糖、琼脂粉均为生物纯,无水乙醇、甲醇、乙
酸乙酯、三氯甲烷、丙酮均为分析纯,购自上海国药集
团公司。仪器主要包括:FZ102微型植物粉碎机、
GZX- 9030- MBE电热恒温鼓风干燥箱、YSQ- LS- 30SII
立式压力蒸汽灭菌器、RE- 52AA旋转蒸发仪、DKB- 501A
超级恒温水槽、AL204电子分析天平、Finnpipette可调
式微量移液器、L RH- 250- Gb光照培养箱。
1. 3 猫眼草的抽提方法
取500 g猫眼草粉碎物加入1000 mL乙醇,密封浸
泡24 h,抽滤。滤渣用1000 mL乙醇浸泡48 h,抽滤。滤
渣再用1000 mL乙醇浸泡72 h,抽滤,合并3次滤液,得
滤渣R1和提取液E1;接着取1000 mL 甲醇浸泡滤渣
R1,重复上述3次抽滤步骤,得到滤渣R2和提取液E2;
同法,用1000 mL乙酸乙酯处理滤渣R2,得到滤渣R3
和提取液E3;用1000 mL氯仿处理R3,得到滤渣R4和
提取液E4;按1∶1∶1∶1的体积比各取E1、E2、E3、E4混合
得到提取液E5。最后分别对5种提取液进行减压浓缩
得猫眼草浸膏,置4℃冰箱密封保存。
1. 4 猫眼草不同极性部位提取物对病原真菌的抑菌
活性
1. 4. 1 生长速率法 采用余海忠等(2010)的方法,
取猫眼草浸膏分别用丙酮配成质量浓度为0.10、0.08、
0.06、0.04和0.02 g/mL药液。加热事先制备的PDA使其
溶化,当温度降至45℃左右时,将1 mL上述配制的药
液和丙酮(CK)分别与9 mL PDA混匀使总体积达到10
mL,并趁热倒入培养皿中制成厚薄均匀的平板,使培
养基中的药液质量浓度分别为0.010、0.008、0.006、
0.004和0.002 g/mL。供试菌种经PDA培养后用7.0 mm
打孔器打出一定数量的菌饼,用接种针小心将菌饼移
至含药液的培养基和对照培养基上,菌丝一面朝下,每
皿接1块,每个处理重复5次,置于25℃光照培养箱中培
养。培养一定时间后,测量菌落直径(十字交叉测量两
次,取平均值),计算菌丝生长抑制率,并使用SPSS
19.0 计算EC50、毒力回归方程及95%置信限。
菌丝生长抑制率(%)=(对照菌落直径-处理菌落
直径)/对照菌落直径×100
菌落直径(mm)=测量菌落直径平均值-7.0(菌饼
直径)
1. 4. 2 孢子萌发法 采用余海忠等(2008)的方法,
取猫眼草浸膏分别用丙酮配成质量浓度为0.80、0.40、
0.20、0.10和0.05 g/mL药液。用无菌生理盐水冲洗长满
供试病菌孢子的培养基,将孢子冲进锥形瓶中,用纱布
滤去杂质。在6个分别装有17 mL灭菌液体培养基的锥
形瓶中依次加入1 mL孢子悬浮液,然后再向其中5瓶依
次加入2 mL不同浓度猫眼草提取物,向第6瓶加对照液2
mL,使药液终浓度达到0.080、0.040、0.020、0.010和0.005
g/mL,每个处理重复5次,然后在摇床中培养。孢子萌发
(以孢子芽管长度大于孢子短直径者为萌发)后,用无
菌水稀释至适当浓度(以10×10低倍镜下,每个视野
30~40个孢子为宜),滴加到血细胞计数板上,在10×10
倍显微镜下观测计数,计算孢子萌发抑制率,并使用SPSS
19.0 计算EC50、毒力回归方程及95%置信限。
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余海忠等:鄂西北产猫眼草不同极性部位提取物抑菌活性评价
表 1 猫眼草不同极性部位提取物对黄瓜枯萎病菌菌丝生长的抑制作用
Tab.1 Inhibitory effects of extracts from different polar fractions of E. lunulata on mycelia growth of F. oxysporum f.sp. in cucumber
表 2 猫眼草不同极性部位提取物对大白菜灰霉病菌菌丝生长的抑制作用
Tab.2 Inhibitory effect of extracts from different polar fractions of E. lunulata on mycelia growth of B. cinerea in Chinese cabbage
提取物
Extracts of
E. lunulata
EC50
(g/mL)
毒力回归方程
Toxicity regression
equation
95%置信限
95% confidence
limit0.010 g/mL 0.008 g/mL 0.006 g/m 0.004 g/mL 0.002 g/mL
乙醇 Ethanol 43.85 39.88 35.36 26.50 22.94 0.016 y=0.882x+1.582 0.010~0.062
甲醇Methanol 16.14 14.35 10.34 8.36 6.10 0.164 y=0.834x+0.656 0.037~1.425
乙酸乙酯 Ethyl acetate 57.64 49.12 42.91 25.51 15.85 0.008 y=1.768x+3.701 0.007~0.010
氯仿 Chloroform 47.27 35.70 24.50 18.68 14.57 0.014 y=1.418x+2.623 0.011~0.025
混合溶剂Mixed solvent 36.32 31.99 25.58 19.12 16.58 0.027 y=0.935x+1.471 0.015~0.180
表 3 猫眼草不同极性部位提取物对辣椒白绢病菌菌丝生长的抑制作用
Tab.3 Inhibitory effect of extracts from different polar fractions of E. lunulata on mycelia growth of S. rolfsii in pepper
提取物
Extracts of
E. lunulata
菌丝生长平均抑制率(%)
Average inhibitory rate of mycelia growth
EC50
(g/mL)
孢子萌发抑制率(%)=(对照萌发数-处理萌发数)/
对照萌发数×100
2 结果与分析
2. 1 供试病原真菌生长动力曲线图
绘制菌丝生长动力学曲线,找出该病原菌的线性
生长时期,作为评价药剂对该菌作用的选择时期。真
菌菌丝在培养基上的生长随时间是非线性的,测量真
菌菌丝生长直径时应选择在线性生长阶段(黄梁绮龄
等,1994)。由图1可知,猫眼草提取物作用于3种病菌
时,高浓度提取物作用的菌饼生长直径小于低浓度同
一时间的生长直径;测量的前3个时间点基本属于线
性生长,生长斜率比较平稳;后两次的生长斜率有的
比前时间段的大,说明在前3个测量时间段内菌丝可
能受到活性物质的抑制,因而生长较慢。
2. 2 猫眼草不同极性部位提取物对病原真菌菌丝
生长的抑制作用
由以上菌丝生长动力曲线图可知,大多数处理在
其前3个测量时间段病原真菌呈线性生长,生长速率
比较平稳,适合于实验数据分析;同时,由于每个平板
只含有10 mL的培养基,故生长时间过长可能会导致
病原真菌营养不良而过早老化;此外,在试验中有的
菌饼培养生长需要2~3 d,如持续观察测量的时间过
长,可能会使药液分解而失去药效。因此,在计算各个
处理的平均抑制率时,只考虑前3次的测量值。
由表1~3可知,除了甲醇部提取物对大白菜灰霉
病菌、辣椒白绢病菌抑制作用较弱外,猫眼草不同极
性部位提取物均对3种病原真菌具有明显的抑制活
性,且抑制作用均随着提取物浓度的升高而增强,其
中,乙酸乙酯部和氯仿部对供试病原菌菌丝均显示出
稳定的、较高的抑制率。以提取物浓度对数和抑制几
率值计算猫眼草不同极性部位提取物的有效抑制中
浓度EC50,可得对黄瓜枯萎病菌的EC50排序为:乙醇部
(0.035 g/mL)>甲醇部=乙酸乙酯部(0.023 g/mL)>混合
溶剂部(0.013 g/mL)>氯仿部(0.007 g/mL);对大白菜
灰霉病菌的EC50排序为:甲醇部(0.164 g/mL)>混合溶
剂部(0.027 g/mL)>乙醇部(0.016 g/mL)>氯仿部
(0.014 g/mL)>乙酸乙酯部(0.008 g/mL);对辣椒白绢
病菌的EC50排序为:甲醇部(0.388 g/mL)>乙醇部
(0.079 g/mL)>混合溶剂部(0.038 g/mL)>氯仿部(0.017
g/mL)>乙酸乙酯部(0.011 g/mL)。EC50越小,表明达到
50%抑制效果时所需的药剂浓度就越小,药剂抑制效
率也越高,因此,猫眼草提取物的氯仿部对黄瓜枯萎
病菌及乙酸乙酯部对大白菜灰霉病菌、辣椒白绢病菌
的抑制效率最高。
提取物
Extracts of
E. lunulata
菌丝生长平均抑制率(%)
Average inhibitory rate of mycelia growth
EC50
(g/mL)
毒力回归方程
Toxicity regression
equation
95%置信限
95% confidence
limit0.010 g/mL 0.008 g/mL 0.006 g/m 0.004 g/mL 0.002 g/mL
乙醇 Ethanol 32.24 0.035 21.39 17.94 12.40 0.035 y=0.956x+1.388 0.018~0.369
甲醇Methanol 41.80 0.023 31.09 26.27 23.59 0.023 y=0.729x+1.190 0.012~0.193
乙酸乙酯 Ethyl acetate 39.51 0.023 26.37 19.62 17.64 0.023 y=0.969x+1.586 0.013~0.113
氯仿 Chloroform 61.30 0.007 48.64 26.52 18.94 0.007 y=1.799x+3.880 0.006~0.008
混合溶剂Mixed solvent 47.18 0.013 35.66 31.60 24.98 0.013 y=0.870x+1.635 0.009~0.041
菌丝生长平均抑制率(%)
Average inhibitory rate of mycelia growth
毒力回归方程
Toxicity regression
equation
95%置信限
95% Confidence
limit0.010 g/mL 0.008 g/mL 0.006 g/m 0.004 g/mL 0.002 g/mL
乙醇 Ethanol 27.72 22.90 20.44 18.51 13.09 0.079 y=0.706x+0.776 0.024~0.277
甲醇Methanol 19.49 15.29 13.35 11.12 9.95 0.388 y=0.587x+0.241 0.045~1.028
乙酸乙酯 Ethyl acetate 50.05 47.83 30.67 23.25 18.07 0.011 y=1.430x+2.823 0.008~0.016
氯仿 Chloroform 43.28 36.63 30.49 26.32 18.60 0.017 y=1.001x+1.774 0.011~0.052
混合溶剂Mixed solvent 36.27 29.73 26.49 22.04 18.73 0.038 y=0.739x+1.054 0.016~0.072
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南 方 农 业 学 报
图 1 猫眼草不同极性部位提取物下病原真菌生长动力曲线图
Fig.1 Growth vigor curve of pathogenic fungi treated with extracts from different polar fractions of E. lunulata
A:黄瓜枯萎病菌;B:大白菜灰霉病菌;C:辣椒白绢病菌;I:乙醇提取液;II:甲醇提取液;III:乙酸乙酯提取液;
IV:氯仿提取液;V:混合溶剂
A:F. oxysporum f.sp. in cucumber;B:B. cinerea in Chinese cabbage;C:S. rolfsii in pepper;I:Ethanol;II:Methanol;III:Ethyl acetate;IV:
Chloroform;V:Mixed solvents
生长时间(h)Growth duration
质量浓度Mass concentration 0.010 g/mL
质量浓度Mass concentration 0.040 g/mL× ×
质量浓度Mass concentration 0.008 g/mL
质量浓度Mass concentration 0.002 g/mL
质量浓度Mass concentration 0.006 g/mL
CK
生
长
直
径
(
m
m)
Gr
ow
th
di
am
et
er
I
II
III
IV
V
26 30 34 37 48
26 30 34 37 48
A B C
26 30 34 37 48
26 30 34 37 48
8.0 9.5 11.0 12.5 14.0
8.0 9.5 11.0 12.5 14.0
8.0 9.5 11.0 12.5 14.0
8.0 9.5 11.0 12.5 14.0
16.5 18.0 19.5 21.0 22.5
16.5 18.0 19.5 21.0 22.5
16.5 18.0 19.5 21.0 22.5
16.5 18.0 19.5 21.0 22.5
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2. 3 猫眼草不同极性部位提取物对病原真菌孢子
萌发的抑制作用
由表4~6可知,猫眼草不同极性部位提取物对3种
病原真菌孢子的抑制作用均随着提取物浓度的升高
而增强,其抑制作用与抑制菌丝生长类似:甲醇部相
对较弱,乙酸乙酯部和氯仿部则显著较强。其EC50分布
如下:对于黄瓜枯萎病菌,乙醇部>甲醇部>乙酸乙酯
部>混合溶剂部>氯仿部,氯仿部(EC50为0.005 g/mL)
抑制效率最高;对于大白菜灰霉病菌,甲醇部>混合
溶剂部=乙醇部>氯仿部>乙酸乙酯部,乙酸乙酯
部(EC50为0.005 g/mL)抑制效率最高;对于辣椒白绢
病菌,甲醇部>乙醇部>混合溶剂部>氯仿部>乙酸乙
酯部,乙酸乙酯部(EC50为0.004 g/mL)的抑制效率最
高。同时,比较菌丝生长和孢子萌发的EC50发现,对
猫眼草不同极性部位提取物,病原真菌孢子比菌丝
更敏感。
3 讨论
本研究采用常规的离体实验方法,通过考察病原
菌菌丝生长和孢子萌发情况,完成了对猫眼草不同极
性部位提取物抑菌活性的初步测试,所得结果与陈学
文等(2005)的报道类似,表明猫眼草粗提物对植物病
原微生物具有一定的抑制作用,是一种潜在的、可用
于生物杀菌剂开发的植物。
离体抑菌作用方式通常有3种:一是抑制菌丝生
长,二是抑制孢子萌发,三是抑制芽管生长。作为生物
测定的常规方法,离体实验法的工作量大、效率底,对
菌丝生长等要求比较高,而且相对于活体测试法灵敏
度不高。杀菌剂筛选方法正确与否对发现新药剂具有
重要的作用,一种新的试验方法等于发现新的农药
(李树正,1990)。在天然产物农药研究过程中,常规的
筛选方法难以对微量的分离物进行抗菌活性跟踪,这
就要求建立灵敏度高、简便、快速、高效的筛选方法,
如周青春和罗勤(1998)利用溴化四氮唑比色法离体
筛选杀菌剂,极大提高了工作效率,结果客观可靠,且
数小时即可得出结果。目前,杀菌剂的生物测定方法
发展趋势是:离体实验向细胞水平发展,离体与活体
实验相结合向分子水平发展。因此,应从细胞、植株组
织以及分子生物学的角度来研究,探索适合天然产物
农药筛选的生物测定方法。
表 4 猫眼草不同极性部位提取物对黄瓜枯萎病菌孢子萌发的抑制作用
Tab.4 Inhibitory effect of extracts from different polar fractions of E. lunulata on spore germination of F. oxysporum f.sp. in cucumber
提取物
Extracts of
E. lunulata
孢子萌发平均抑制率(%)
Average sprouting inhibitory rate
EC50
(g/mL)
毒力回归方程
Toxicity regression
equation
95%置信限
95% confidence
limit0.080 g/mL 0.040 g/mL 0.020 g/mL 0.010 g/mL 0.005 g/mL
乙醇 Ethanol 42.63 30.49 19.43 9.38 3.23 0.013 y=2.514x+4.780 0.01~0.017
甲醇Methanol 67.72 50.16 31.43 18.88 7.56 0.008 y=2.774x+5.845 0.007~0.009
乙酸乙酯 Ethyl acetate 75.94 61.00 39.13 22.04 11.08 0.007 y=2.853x+6.234 0.005~0.009
氯仿 Chloroform 82.29 71.28 52.32 37.49 18.49 0.005 y=2.569x+5.917 0.004~0.006
混合溶剂Mixed solvent 80.18 69.80 46.76 29.89 15.03 0.006 y=2.756x+6.218 0.004~0.007
表 5 猫眼草不同极性部位提取物对大白菜灰霉病菌孢子萌发的抑制作用
Tab.5 Inhibitory effects of extracts from different polar fractions of E. lunulata on spore germination of B. cinerea in Chinese cabbage
提取物
Extracts of
E. lunulata
孢子萌发平均抑制率(%)
Average sprouting inhibitory rate
EC50
(g/mL)
毒力回归方程
Toxicity regression
equation
95%置信限
95% confidence
limit0.080 g/mL 0.040 g/mL 0.020 g/mL 0.010 g/mL 0.005 g/mL
乙醇 Ethanol 78.29 58.80 36.85 18.78 8.72 0.007 y=3.169x+6.887 0.005~0.01
甲醇Methanol 28.76 14.13 8.88 4.92 1.71 0.020 y=0.587x+0.241 0.015~0.037
乙酸乙酯 Ethyl acetate 87.39 75.16 46.43 29.57 16.22 0.005 y=3.037x+6.939 0.003~0.008
氯仿 Chloroform 81.62 65.94 39.32 22.82 10.02 0.006 y=3.205x+7.087 0.005~0.009
混合溶剂Mixed solvent 75.94 53.28 32.32 13.96 5.49 0.007 y=3.513x+7.504 0.006~0.011
表 6 猫眼草不同极性提取物对辣椒白绢病菌孢子萌发的抑制作用
Tab.6 Inhibitory effects of extracts from different polar fractions of E. lunulata on spore germination of S. rolfsii in pepper
孢子萌发平均抑制率(%)
Average sprouting inhibitory rate
EC50
(g/mL)
毒力回归方程
Toxicity regression
equation
95%置信限
95% confidence
limit0.080 g/mL 0.040 g/mL 0.020 g/mL 0.010 g/mL 0.005 g/mL
乙醇 Ethanol 50.33 41.16 28.77 17.72 8.23 0.010 y=2.068x+4.097 0.009~0.014
甲醇Methanol 45.81 37.31 23.03 14.33 5.61 0.012 y=2.213x+4.281 0.010~0.015
乙酸乙酯 Ethyl acetate 88.72 78.61 53.66 39.54 25.55 0.004 y=2.565x+6.060 0.002~0.006
氯仿 Chloroform 85.95 71.82 47.43 30.57 14.14 0.005 y=3.039x+6.909 0.004~0.007
混合溶剂Mixed solvent 80.09 66.21 47.36 24.33 10.61 0.006 y=3.094x+6.894 0.005~0.008
提取物
Extracts of
E. lunulata
余海忠等:鄂西北产猫眼草不同极性部位提取物抑菌活性评价 447· ·
南 方 农 业 学 报
4 结论
本研究结果表明,猫眼草不同极性部位提取物对
3种蔬菜常见病原真菌均具有一定的抑制作用,可用
于开发植物源杀菌剂。
参考文献:
陈学文,王麦玲,吴文君. 2005. 猫眼草粗提取物对常见植物病
原菌抑菌作用的初步研究[J]. 陕西农业科学,(2):46-47.
Chen X W,Wang M L,Wu W J. 2005. Primary study on inhi-
bition of Enphorbia lunulata Bge crude extract to pathogenic
fungi of several common plants[J]. Shaanxi Journal of A-
gricultural Sciences,(2):46-47.
迟静,王沙平,于海萍. 2003.猫眼草缓解肺癌症状20例[J].中
国民间疗法,11(8):51.
Chi J,Wang S P,Yu H P. 2003. Enphorbia lunulata Bge was
used to relieve the symptoms in 20 cases of lung cancer
[J]. China’s Naturopathy,11(8):51.
黄梁绮龄,苏美玲,陈培榕. 1994. 香港地区红树植物资源研
究(I)——四种常见红树植物抑制植物病原真菌效能的
评价[J]. 天然产物研究与开发,6(1):5-8.
Huangliang Y L,Su M L,Chen P R. 1994. Study of mangrove
plants resources in Hong Kong(I)Evalution of antifungal
activity of the four common mangrove plants[J]. Natural
Product Research and Development,6(1):5-8.
李树正. 1990. 农药生物测定方法及其问题[J]. 农药译丛,12
(5):48-51.
Li S Z. 1990. The pesticide bio-assay methods and their prob-
lems[J]. Translated Collection of Pesticide,12(5):48-51.
肖宝红,张春玲,王英年,孙荣丽,武晓. 2006a. 中药猫眼草对
小鼠 Lewis 肺癌细胞凋亡的影响[J]. 齐鲁医学杂志,21
(6):525-526,528.
Xiao B H,Zhang C L,Wang Y N,Sun R L,Wu X. 2006a. Ef-
fects of Chinese medicine crescent euphorbia on induced
cell apoptosis in Lewis lung cancer in mice[J]. Medical
Journal of Qilu,21(6):525-526,528.
肖宝红,张春玲,武晓. 2006b. 猫眼草水提物对小鼠 Lewis肺
癌的抑制作用及机制探讨[J]. 中国中药杂志,31(12):
1003-1005.
Xiao B H,Zhang C L,Wu X. 2006b. Experimental study on the
theraputic effect of crescent euphorbia on lewis lung cancer
in mice[J]. China Journal of Chinese Materia Medica,31
(12):1003-1005.
俞发荣,冯书涛,连秀珍,谢明仁. 2005. 猫儿眼提取物对荷瘤
小鼠肝癌细胞毒性及免疫功能的影响[J]. 中国临床康
复,9(22):170-171.
Yu F R,Feng S T,Lian X Z,Xie M R. 2005. Effects of mao-
eryan extract on cytotoxicity of liver cancer strain cells
and immune function in tumor-bearing mice[J]. Chinese
Journal of Clinical Rehabilitation,9(22):170-171.
余海忠,刘慧宏,雷思远,肖作安,杨霄. 2008. 鱼腥草 95%醇
提物对 5种蔬菜病原真菌的生物活性研究[J]. 西北农业
学报,17(4):163-167.
Yu H Z,Liu H H,Lei S Y,Xiao Z A,Yang X. 2008. Study on
bioactivity of 95% ethanol extracts from Houttuyniae corda-
ta to five vegetable pathogenic fungi[J]. Acta Agriculture
Boreali-Occidentalis Sinica,17(4):163-167.
余海忠,孙永林,廖雪义,王海燕. 2010. 鄂西北产香樟籽乙醇
提取物成分及其抑菌活性研究[J]. 西南农业学报,23
(4):1094-1098.
Yu H Z,Sun Y L,Liao X Y,Wang H Y. 2010. Chemical
composition,antibacterial and antifungal activities of ethanol
extracts of Cinnamomum camphora(Linn.)presl seeds from
Northwestern Hubei Province[J]. Southwest China Journal
of Agricultural Sciences,23(4):1094-1098.
张春玲,肖宝红. 2006. 猫眼草水提物对 Lewis肺癌组织 Cas-
pase23表达的影响[J]. 临床肿瘤学杂志,11(12):901-
903.
Zhang C L,Xiao B H. 2006. The study of the effects of crescent
euphorbia on the expression for caspase -3 in lewis lung
cancer[J]. Chinese Clinical Oncology,11(12):901-903.
周青春,罗勤. 1998. 杀细菌剂微量快速筛选方法的研究[J].
植物保护,(4):23-24.
Zhou Q C,Luo Q. 1998. Study on the rapidly trace screening
methods of bactericide[J]. Plant Protection,(4):23-24.
Arisawa M,Bai H,Shimizu S,Koshimura S,Tanaka M,Sasaki
T,Morita N. 1992. Isolation and identification of a cytotoxic
principle from Chrysosplenium grayanum Maxim.(Saxifra-
gaceae)and its antitumor activities[J]. Chemical and Phar-
maceutical Bulletin(Tokyo),40(12):3274-3276.
Arisawa M,Takahashi M,Takezawa E,Yamoguchi T,Tonsawa
Y,Nishide A,Nakagawa M. 2000. Construction of chiral 1,
2-cycloalkanopyrrolidines from L-proline using ring closing
metathesis(RCM)[J]. Chemical and Pharmaceutical Bul-
letin(Tokyo),48(10):1593-1596.
(责任编辑 麻小燕)
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