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好 , 释药行为符合Weibull方程曲线。实验证明应用亲水凝
胶作为骨架材料 , 辅以亲水性阻滞剂可以明显延长药物释放
时间。采用 H PLC 法测定了原料及制剂中盐酸水苏碱的含
量 , 方法精密度和准确度都高于现有的标准方法 , 且方法简
便 , 成本低 , 可广泛用于盐酸水苏碱相关制剂的质量研究。
参考文献
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(收稿日期:2006—07—17;修回日期:2006—10—11)
正交实验优化裂叶荨麻根的多糖提取工艺
杨爱岗 , 冀保全 , 唐玲 , 冯宝民 , 王永奇＊ (大连大学生物工程学院药物研究所 , 辽宁 大连　116622)
摘要:目的　优选裂叶荨麻根中多糖的提取工艺。方法　以总多糖含量为指标 , 用正交实验的方法对荨麻多糖的提
取工艺进行优选。结果　提取温度对多糖提取的影响最显著 , 其次是提取次数 , 提取时间和用水量对其的影响很
小。结论　优选工艺为:用 10 倍的水量在 100 ℃下 , 回流提取 3 次 , 1h·次-1 。
关键词:裂叶荨麻;多糖;正交实验
中图分类号:R284.2　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1672-2981 (2007)01-0012-03
Optimum extraction of polysaccharides from the root of Urtica f issa
E.Pritz by orthogonal design
YANG Ai-gang , JI Bao-quan , TANG Ling , FENG Bao-min , WANG Yong-qi＊ (I nstitute of Materia Medica , Bio-
engineering College o f Dalian University , Dalian　116622)
Abstract:Objective　To de te rmine the optimum ex trac tion of poly saccharides from Urtica f issa E.Pritz .Methods　
The optimum ex traction conditions w ere investigated by or thogonal design , with po ly saccharides as the content index.
Results　The ext racting temperature and the times o f ex traction influenced the content o f po ly saccharides most , w hile
the duration of e xtr action and the amount of w ater used had lit tle influence on it.Conclusions　The optimum ex traction
procedure was 10 folds o f water , ref luxing and ex tracting for 3 times at 100 ℃, and 1 h f or ev ery turn.
Key words:Urtica f issa E .Pritz;poly saccharides;o rthogonal design
　　裂叶荨麻Urtica f issa E .P ritz 为一常用的民族药和民
间药 , 始载于 《本草图经》 , 具有祛风通络 、 平肝定惊 、 消
积通便 、 解毒等功效[1 , 2] , 在欧美很多国家 , 异株荨麻 Urti-
ca dioica L 被广泛用于治疗风湿性疾患以及前列腺增生等老
年性疾病 , 疗效显著[3] , 多糖为抗炎 、 抗癌的主要活性成分
之一[ 4 , 5] 。现代药理研究也证实 , 荨麻多糖有显著的抗炎 、
增强免疫作用。而大荨麻提取物中的多糖成分能够抑制前列
腺癌细胞的增殖[6] 。本试验以水溶性多糖含量为指标 , 对荨
麻多糖的提取工艺进行了优选。
1　材料和方法
1.1　仪器与试药
7230G 型可见光分光光度仪(上海精密科学仪器有限公
司);Labor ata 4000 型旋转蒸发仪 (Heido lph 公司);低速离
心机 (上海医用分析仪器厂);ALPHA1 -4 型冷冻干燥机
(CHRIS T 公司);5%重蒸苯酚溶液 (使用前配制), 其他试
剂均为国产分析纯。裂叶荨麻采自四川省金川县 , 由辽宁师
范大学陈辰教授鉴定分别为荨麻科荨麻属裂叶荨麻 (Urtica
f issa E .Pritz)的根部。
1.2　多糖的含量测定方法[ 7]
1.2.1　标准品溶液的制备　将葡萄糖在 105 ℃下干燥至恒
　　基金项目:国家自然科学基金资助项目 (30572317)
作者简介:杨爱岗 , 男 , 研究生 , 主要从事天然活性成分的研究 , Tel:(0411) 87402718 , E-mail:yangaigang88@163.com。
＊通讯作者:王永奇 , 男 , 教授 , 主要从事天然药物的研究和开发 , Tel:(0411) 87403834 , E-mail:dalianw yq@163.com。
Cen t ral South Pharmacy.February 2007 , Vol.5 No.1　中南药学 2007年 2月第 5卷第 1期
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重 , 精密称取 50.0 mg , 置于 250 m L 的容量瓶中 , 加蒸馏
水至刻度 , 吸取 5 m L 于 25 mL 的容量瓶中 , 加蒸馏水定
容 , 最终浓度为 0.04 mg ·mL-1 , 储藏备用[ 8] 。
1.2.2　标准曲线的绘制　分别取 0.04 mg ·m L-1的标准葡
萄糖溶液 0 、 0.2 、 0.4、 0.6 、 0.8 和 1.0 m L 于 10 m L的试
管中 , 不足 1.0 m L的用蒸馏水补齐 , 向试管中分别加入苯
酚溶液 2 mL 和浓硫酸 4 mL , 静置 5 min , 然后于 60 ℃的水
浴上 30 min , 490 nm 处测定吸光度[ 9] , 吸光度 A 为纵坐标 ,
葡萄糖浓度 C (μg · mL-1)为横坐标 , 绘制标准曲线 , 得
到回归方程 A=0.002 8 C+0.009 9 , r=0.999 7 , 线性范围
为 8.0 ～ 40.0 μg ·mL-1 。
1.2.3　荨麻多糖的测定　精确称取适量裂叶荨麻提取物
冻干粉 50 mg , 蒸馏水溶解后离心去除沉淀 , 上清液在
250 mL 的容量瓶定容至刻度 , 按照 “ 1.2.2” 项相同操
作 , 在490 nm 处测定吸光度 , 代入回归方程 , 计算提取物
中的多糖含量。
1.3　正交实验方法设计[ 7 ,10 , 11]
多糖通常采用热水提取 , 影响因素主要有提取温度 、 提
取时间 、 水的用量及提取的次数等 , 本试验采取四因素三水
平 (见表 1), 每次实验称取药材粉末 10 g , 按照 L 9 (34)
条件进行提取 , 提取液离心取上清液 , 减压浓缩后冷冻干
燥 , 按照 “ 1.2.3” 项测定多糖含量。
表 1　正交实验因素水平表
Tab 1　Factor level of orthogonal test design
水平
(level)
A温度
(t em perature)
/ ℃
B提取时间
(t ime of
ext ract ion)
/ h
C用水量
(volumn of
w ater)
/倍
D 提取次数
(t imes of
ex t raction)
/次
1 60 1 10 2
2 80 2 15 3
3 100 3 20 4
2　结果和分析
2.1　正交实验结果
9 次正交实验称取的原药材量 、 水提取质量以及其多糖
含量和总糖得率见表 2
表 2　荨麻样品中多糖的含量
Tab 2　Polysaccharides content of the ur tica fi ssat E.pri tz s root
样品标号
(No.)
原药质量
(weight of
crude drug)
/ g
提取物量
(w eigh t of
ext raction)
/ g
多糖含量
(p oly saccharides
content)
/ %
多糖得率
(yield of
polysaccharides)
/%
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10.01
10.02
10.01
10.01
10.01
10.04
10.01
10.03
10.01
0.543
0.634
0.662
0.745
0.667
0.771
0.957
1.153
0.971
36.65
39.91
39.43
44.97
44.52
45.65
52.03
52.39
48.51
1.99
2.53
2.61
3.35
2.97
3.52
4.98
6.04
4.71
2.2　级差 、 方差分析
多糖得率进行级差和方差分析 , 结果见表 3 、 表 4。
表 3　级差分析表
Tab 3　Decibel analysis
试验号
(t est No.) A B C D
多糖得率
(yield of polysaccharides)
/ %
1 1 1 1 1 1.99
2 1 2 2 2 2.53
3 1 3 3 3 2.61
4 2 1 2 3 3.35
5 2 2 3 1 2.97
6 2 3 1 2 3.52
7 3 1 3 2 4.98
8 3 2 1 3 6.04
9 3 3 2 1 4.71
K 1 7.13 10.32 11.55 9.66
K 2 9.84 11.55 10.59 11.04
K 3 15.74 10.83 10.56 12.00
k1 2.38 3.44 3.85 3.22
k2 3.28 3.85 3.53 3.68
k3 5.24 3.61 3.52 4.00
R 2.86 0.41 0.33 0.78
　　从级差分析结果来看 , 影响总多糖得率的因素主次顺序
为:A>D>B>C , 提取温度对试验结果影响最大 , 其次是
提取次数 , 提取时间和用水量对提取率的影响较小。
表 4　方差分析表
Tab 4　Analysi s of variance
方差来源
(source of variance)
离差平方和
(ss)
自由度
(d· f)
方差
(variance) F P
A 12.89 2 6.45 58.63 <0.05
B 0.24 2 0.12 1.09 >0.05
D 0.91 2 0.45 4.09 >0.05
误差 (error) 0.21 2 0.11
　　通过方差分析可知提取温度 A 对实验结果有极显著的
意义 (P<0.05), 其次是提取次数 D , 而提取时间 B , 用水
量 C 对实验结果无显著意义 (P>0.05)。
2.3　验证试验
按照优选的最佳提取工艺制备 3 批样品 , 测定其中的多
糖的含量 , 结果表明 , 提取出的总多糖含量最高 , 原药中多
糖得率高达 5.94%, RSD为 1.24%。
3　讨论
由级差分析和方差分析可知:提取温度对多糖含量结果
影响最大 , 温度升高加快了分子运动 , 促进了多糖的提取;
其次是提取次数 , 显然新溶剂的增入 , 使渗透压变大有利于
多糖的溶出;提取时间和用水量对多糖的提取率均没有显著
影响 , 说明这两个因素设置的最低水平已经满足提取多糖的
需要 。
综合各个因素的影响 , 在保证多糖的提取率的同时 , 从
节约能耗 , 减少浓缩时间的角度考虑 , 采用的最佳提取多糖
工艺为 A3B1C1D2 , 即提取温度为 100 ℃, 用 10 倍的水量回
流提取 3次· h-1 。
通过 3次验证试验表明该工艺的稳定性好 , 方便 , 多糖
的提出率达到标示量的 98.7%, 说明该正交实验方法科学 ,
合理 。
中南药学 2007年 2月第 5卷第 1期　Cen tral South Pharm acy .February 2007, Vol.5 No.1
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(收稿日期:2006—11—14;修回日期:2006—12—13)
高效液相色谱法同时测定抗呼吸道病毒复方胶囊中黄芩苷
与白藜芦醇苷的含量
盛习锋1 , 曾光尧2＊ , 谭健兵2 , 申璀2 , 方磊2 , 周应军2 (1.湖南师范大学医学院 , 长沙　410013;2.中南大学
药学院 , 长沙　410013)
摘要:目的　建立同时测定抗呼吸道病毒复方胶囊中黄芩苷和白藜芦醇苷方法。方法　采用反相高效液相色谱法 ,
Kromasil　ODS 柱 (250 mm×4.6 mm , 5 μm), 流动相为磷酸二氢钠 (0.03 mol· L-1 , H3PO 4 调 pH=3.0)-乙
腈梯度洗脱 (0 min , 83∶17;8.00 min , 83∶17 ;15.00 min , 80∶20;40.00 min , 75∶25), 检测波长 303 nm ,
柱温 30 ℃, 流速 0.7 mL · min -1 。结果　抗病毒复方中黄芩苷和白藜芦醇苷在该条件下有较好的线性关系。
结论　测定方法简便 、 准确 , 为抗呼吸道病复方质量评价提供了可靠的依据。
关键词:抗呼吸道病毒复方胶囊;黄芩苷;白藜芦醇苷;高效液相色谱法
中图分类号:R927.1　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1672-2981 (2007)01-0014-03
Simultaneous determination of baicalin and polydatin in capsules of
compound inhibiting respiratory virus
SH ENG Xi-feng 1 , ZENG Guang-yao2＊ , TAN Jian-bing 2 , SHEN Cui2 , FANG Lei2 , ZH OU Ying-jun2 (1.S chool
of Medicine , H unan Normal University ;2.School of Pharmaceutical Sciences , Central South University , Chan-
gsha　410013)
Abstract:Objective　To establish a method for the simultaneous de te rmination o f baicalin and polydatin in capsules of
compound inhibiting respira to ry virus.Methods　H PLC w as used with K romasil ODS (250 mm ×4.6 mm , 5 μm)
column , 0.03 mo l· L-1 sodium dihydro gen phosphate (pH =3)-acetonitrile (0 min , 83∶17;8.00 min , 83∶17;
15.00 min , 80∶20;and 40.00 min , 75∶25)was used as the mobile phase.The de tection w aveleng th was 303 nm ,
the temperature was 30 ℃ and the flow ra te was 0.7 mL ·min-1 .Results　The tw o compounds had good linearity.
Conclusion　The method is quick , accurate and suitable fo r the de te rmination of baicalin and po lyda tin in capsule of
compound inhibiting respira to ry virus.
Key words:capsules of compound inhibiting re spir atory virus;baicalin;po lyda tin;H PLC
　　　　基金项目:中南大学人才引进启动基金 (1811)
作者简介:盛习锋 , 女 , 讲师 , 硕士 , 主要从事天然药物教学与研究 , Tel:(0731) 8912473 , E-mail:shengxi63@yahoo.com.cn。
＊通讯作者:曾光尧 , 男 , 讲师 , 硕士 , 主要从事天然药物研究与开发 , Tel:(0731) 2650372 , E-mail:zenggy2005@126.com。
Cen t ral South Pharmacy.February 2007 , Vol.5 No.1　中南药学 2007年 2月第 5卷第 1期