全 文 ：收稿日期: 2011 － 12 － 15
作者单位: 1. 沈阳永大制药有限公司，沈阳 110027; 2. 中国
医科大学药分药化教研室，沈阳 110001
沈阳北陵地区葎草不同部位总黄酮含量考察
孟晓岩1，丁 勇2
［摘 要］ 目的 考察沈阳北陵地区葎草不同部位总黄酮含量。方法 以芦丁为对照品，采用 NaNO2-Al
( NO3 ) 3 -NaOH比色法测定总黄酮含量。结果 芦丁含量在 9. 776 ～ 68. 432 μg /mL范围内线性关系良好，平均加
样回收率为 97. 34%，RSD为 1. 41%，葎草中根、茎、叶柄、叶中总黄酮的含量分别为 9. 32、1. 82、3. 15、2. 89 mg /g。
结论 葎草不同部位中总黄酮的含量不同。
［关键词］ 葎草;总黄酮;含量测定
Determination of total flavonoids in different parts of Humulus scandens in Beiling
area of Shenyang MENG Xiao-yan1，DING Yong2 ( 1. Shenyang Yongda Pharmaceutical Company，Shenyang
110027，China; 2. Department of Pharmacy，China Medical University，Shenyang 110001，China)
［Abstract］ Objective To determine the total flavonoids in different parts of Humulus scandens in Beiling area
of Shenyang．Methods The total flavonoids was determined by NaNO2-Al( NO3 ) 3 -NaOH colorimetric method，with
rutin as a reference substance． Results The linear range of rutin was 9. 776 ～ 68. 432 μg /mL，the average recovery
rate was 97. 34%，RSD = 1. 41%，the total flavonoids contents in roots，stems，petiole，leaves were 9. 32，1. 82，3. 15，
2. 89 mg /g． Conclusion Total flavonoids content is different in Humulus scandens different parts．
Key words: Humulus scandens ; Total flavonoids; Content determination
中药葎草为桑科植物葎草［Humulus scan-
dens． ( Lour． ) Merr．］的全草，有 3 个栽培种。为
一年生或多年生草本，广泛分布于我国大部分地
区( 青海、新疆除外) 。别名拉拉秧、锯子草、五爪
龙、降龙草等，始载于《唐本草》［1］。葎草味甘、苦，
性寒，具有清热解毒、利尿消肿之功效。用于肺结
核潮热、肠胃炎、痢疾、感冒发热、小便不利、肾盂
肾炎、急性肾炎、膀胱炎、泌尿系结石; 外用治痈疖
肿毒、湿疹、毒蛇咬伤等［2］。其化学成分较为复
杂［3］，全草含木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、大波斯
菊苷、胆碱及天门冬酰胺，还有挥发油、鞣质及树
脂。葎草水提取液对革兰阳性菌具有较强的抗菌
活性，有研究证实其抗菌作用与葎草中所含的黄
酮类成分有关［4］。本文采用比色法，对沈阳北陵
地区葎草不同部位中总黄酮的含量进行测定。
1 仪器、试剂与药品
1. 1 实验仪器 1901 型紫外分光光度计( 北京普
析仪器设备有限公司) ; 电子分析天平( 北京赛多
利斯仪器有限公司) 。
1. 2 试剂与药品 亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠
等试剂均为分析纯。对照品芦丁为中国药品生物
制品检定所提供 ( 批号: 0714-9903，供含量测定
用) ，使用前置干燥器中干燥至恒重; 葎草于 2010
年 7 月采自沈阳北陵地区，经鉴定为桑科( Morace-
ae) 葎草属( Humulus) 植物葎草的全草。将其根、
茎、叶、叶柄分离后阴干，粉碎成细粉，作为样品。
2 实验方法与结果
2. 1 对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品
61. 1 mg，置于 100 mL 容量瓶中，加入 95%乙醇溶
液溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取 40 mL 置
于 100 mL 容量瓶中，加水至刻度，摇匀备用，配制
成 0. 244 4 mg /mL 的对照品溶液。
2. 2 供试品溶液的制备 取样品细粉约 1 g，精
密称定，置于圆底烧瓶中，加入 30 mL 石油醚溶
液，加热回流 30 min，弃掉石油醚溶液，加入 25 mL
乙醇溶液，加热回流提取 60 min，过滤。残渣同法
再加热回流提取 2 次，滤液合并后，水浴蒸干，残
渣用乙醇定量转移至 25 mL 量瓶中，加乙醇至刻
度，作为供试品溶液。
2. 3 最大吸收波长确定 取芦丁对照品溶液
2. 0 mL置 25 mL 容量瓶中，加水至 7 mL ;加 5%亚
硝酸钠溶液 1. 0 mL，混匀，放置 6 min; 再加 10%
硝酸铝溶液 1. 0 mL，混匀，放置 6 min。加氢氧化
钠试液 10 mL，最后加水稀释至刻度，摇匀，放置
15 min。随行试剂做空白，于 300 ～ 700 nm 波长范
围内全程扫描。在 510 nm 波长处有最大吸收，且
空白对照无干扰。见图 1。
2. 4 标准曲线的绘制 精密吸取芦丁对照品溶
液 0. 0、1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6. 0、7. 0 mL，分置
于 8 只标号的 25 mL 容量瓶中;各加水至 7 mL，加
5%亚硝酸钠溶液 1. 0 mL，混匀，放置 6 min; 再加
10%硝酸铝溶液 1. 0 mL，混匀，放置 6 min。加氢
氧化钠试液 10 mL，最后加水稀释至刻度，摇匀，放
·882· 实用药物与临床 2012 年第 15 卷第 5 期 Practical Pharmacy And Clinical Remedies，2012，Vol． 15，No． 5
DOI:10.14053/j.cnki.ppcr.2012.05.002
图 1 芦丁显色后的光谱图
置 15 min。以第 1 瓶为空白溶液，于 510 nm 波长
处测定吸光度。以芦丁的浓度( C) 为横坐标、吸光
度( A ) 为纵坐标，得标准曲线的方程: A = 0. 011
72C-0. 007 17 ( r = 0. 999 9 ) 。芦丁在 9. 776 ～
68. 432 μg /mL 范围内与吸光度呈良好线性关系。
2. 5 精密度试验 分别取同一供试品溶液
2. 0 mL，按“2. 4”项下方法，自“加水至 7 mL”起，
依法测定吸光度，同法连续测定 5 次，测定结果分
别为 0. 311 8、0. 312 0、0. 311 8、0. 311 8、0. 311 6。
平均为 0. 311 8，RSD 为 0. 04%。结果表明，紫外
分光光度计测定总黄酮的含量精密度好。
2. 6 稳定性试验 取同一供试品溶液 2. 0 mL，按
“2. 4”项下方法，按 0、5、10、15、30、45、60 min时间
间隔，分别测定吸光度，测定结果分别为 0. 311 8、
0. 311 6、0. 311 7、0. 311 7、0. 302 5、0. 302 7、
0. 301 2。平均为 0. 307 6，RSD 为 1. 66%，试验结
果表明，供试品溶液制备 60 min内测定，吸光度无
明显变化，在此时间内测定供试品化学性质稳定。
2. 7 重复性试验 取 5 份样品，按“2. 2”项下方
法制备供试品溶液，按“2. 4”项下方法，依法测定
吸光度，结果总黄酮的含量 ( mg /g ) 分别为 9. 47、
9. 15、9. 32、9. 35、9. 39，平均为 9. 34，RSD 为
1. 27%。试验结果表明，用“2. 4”项下的方法测定
样品中总黄酮的含量，重现性较好。
2. 8 加样回收试验 取已知准确含量的样品 5
份( 9. 34 mg /g ) 0. 5 g，精密称定，置圆底烧瓶中，
精密加入芦丁对照品溶液( 25. 1 mg /mL ) 0. 2 mL，
加入 25 mL 乙醇溶液，加热回流提取 60 min，过
滤。残渣同法再加热回流提取 2 次，滤液合并后，
水浴蒸干，残渣用乙醇定量转移至 25 mL 量瓶中，
加乙醇至刻度，作为供试品溶液。按“2. 4”项下方
法测定吸光度，并计算含量及回收率。见表 1。
表 1 总黄酮回收率试验测定结果
编号 样品重( g)
样品中总黄酮量
( mg)
芦丁对照品
加入量( mg)
测的总黄酮
含量( mg)
回收率
( % )
平均值
( % )
RSD
( % )
1 0. 540 8 5. 05 9. 83 95. 2
2 0. 516 1 4. 82 9. 72 97. 6
3 0. 461 5 4. 31 5. 02 9. 25 98. 4 97. 34 1. 41
4 0. 479 7 4. 48 9. 43 98. 6
5 0. 545 6 5. 10 9. 96 96. 9
结果表明，按此方法测定葎草中总黄酮含量，
方法稳定，重现性好，且回收率在 95%以上，可作
为样品中总黄酮的含量测定方法。
2. 9 含量测定 按前述含量测定方法，测定葎草
不同部位( 根、茎、叶、叶柄) 的总黄酮的含量( n =
2) ，见表 2。从表 2 可知，葎草不同部位 ( 根、茎、
叶、叶柄) 的总黄酮类成分的含量不同，根中的含
量最高，茎中的含量最低，其由高到低的次序为:
根 ＞叶 ＞叶柄 ＞茎。
表 2 葎草不同部位总黄酮的含量( n =2)
部位
总黄酮含量( mg /g)
样品 1 样品 2 珋x ± s
根 9. 23 9. 41 9. 32 ± 0. 129
茎 1. 79 1. 82 1. 81 ± 0. 015
叶柄 3. 29 3. 15 2. 74 ± 0. 095
叶 2. 59 2. 89 3. 22 ± 0. 211
3 讨论
硝酸铝络合分光光度法测定总黄酮的原理见
文献［5-6］。一般与芦丁标准系列比较定量。
在总黄酮含量测定过程中，由于葎草茎、叶、
叶柄样本总黄酮含量较低，所以，为了使其吸光度
值在标准曲线的范围内，在供试品溶液显色过程
中吸取的量为 5 mL。
在供试品溶液制备的过程中，先用石油醚溶
液进行回流提取，是由于葎草中含有大量的叶绿
素，为防止其影响实验结果，故利用低极性的石油
醚先行提取。
参考文献:
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1984: 238．
［2］ 中国药材公司．中国中药资源志要［M］． 北京: 科学出版社，
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［5］ 刘立群．有机理论与药物分析［M］．北京: 人民卫生出版社，
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·982·实用药物与临床 2012 年第 15 卷第 5 期 Practical Pharmacy And Clinical Remedies，2012，Vol． 15，No． 5