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紫藤根茎叶化学成分预实验



全 文 :紫藤根茎叶化学成分预实验
*
宋 晓 姜国良 赵雪梅
(泰山医学院药学院,山东 泰安 271016)
摘要:目的 对紫藤根茎叶可能的化学成分进行预实验,初步探索紫藤根茎叶的化学成分。方法 通过化学成
分预实验、薄层色谱分析等方法,对紫藤的根茎叶三个部位的化学成分进行定性分析。结果 紫藤根茎叶中可能含
有生物碱、黄酮类、蛋白质、糖及苷类等多种化学成分。结论 初步确定紫藤根茎叶中含有多种有效成分,为进一步
开发紫藤的药用价值奠定基础。
关键词:紫藤;化学成分;预实验;薄层色谱
中图分类号:[R932] 文献标识码:A 文章编号:1004-7115(2013)11-0832-04
doi:10. 3969 / j. issn. 1004-7115. 2013. 11. 010
Preliminary test for chemical components of wisteria roots leaves
SONG Xiao JIANG Guo-liang ZHAO Xue-mei
(Pharmacy Department,Taishan Medical University,Taian 271016,China)
Abstract:Objective:To identify the chemical components of wisteria roots,stems and leaves. Methods:Preliminary ex-
periment of chemical components and the thin-layer chromatography (TLC)method was used to determine the chemical com-
ponents in wisteria roots,stems and leaves. Results:The results showed that the wisteria roots,stems and leaves maight con-
tain a variety of chemical elements,such as alkaloids,flavonoids,proteins,sugars,glycosides and so on. Conclusion:Wis-
teria roots,stems and leaves were preliminarily determined to contain a variety of effective components,and this research will
lay the foundation for further development of wisteria's medical values.
Key words:wisteria;chemical components;preliminary experiment;thin layer chromatography
紫藤(Wisteria sinensis (Sims)sweet)属豆科紫藤
属,喜缠绕上升,花序总状下垂,花期 4、5 月,花蓝紫
色,先叶开放,穗大而美,具芳香,花粉为扁球形,观
赏价值高,广泛应用于园林、庭院绿化及盆景用
材[1]。该物种为有毒植物,其豆荚、种子和茎皮有
毒。紫藤花精油的主要成分是龙涎香精内酷、里哪
醇、α-淞油醇等,提炼芳香油,并有解毒、止吐泻等功
效[2 - 3],紫藤花对香瓜枯萎病菌和白菜软腐病菌具
有良好抑制作用[4]。紫藤的种子有小毒,含有氰化
物,可治筋骨疼。紫藤皮具有杀虫、止痛、祛风通络
等功效,可治筋骨疼、风痹痛、蛲虫病等[5 - 6]。据文
献[5 - 6]报道紫藤瘤具有治疗胃癌的作用,民间也有
利用紫藤茎瘤配伍适量惹仁、野菱、诃子子治疗胃
癌。但目前为止对紫藤治疗胃癌的活性成分研究尚
未见到有文献报道。本研究旨在通过对紫藤的根茎
叶三个部位的化学成分进行定性分析,有望在抗癌
领域有一定的应用前景,开辟治疗胃癌的新领域。
1 仪器与试剂
1. 1 仪器
电子天平,电热恒温水浴锅(北京市长风仪器
仪表公司)、DESAGA 型双波长扫描仪 CD60(上海
康华生化仪器制造厂)、旋转蒸发器 RE-52A(上海
亚荣生化仪器厂)、SHB-III 循环水式多用真空泵
(郑州长城科工贸有限公司)、硅胶板(青岛市红星
硅胶试剂厂)、玻璃棒、50 ml 容量瓶、500 ml 圆底烧
瓶、100 ml量筒、烧杯、25 ml锥形瓶、三角瓶。
1. 2 材料
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泰 山 医 学 院 学 报
JOURNAL OF TAISHAN MEDICAL COLLEGE Vol. 34 No. 11 2013
* 作者简介:宋晓( 1989—) ,女,山东济南人,泰山医学院 2009 级药学本科学生。
通讯作者:赵雪梅( 1970—) ,女,山东泰安人,教授,硕士研究生导师,博士后,主要从事天然药物化学研究工作。
紫藤的根、茎、叶分别采于 2011 年 6 月 10 日泰
山医学院校区。
1. 3 试剂
pH试纸、滤纸、称量纸,95%乙醇、60%乙醇、乙
酸乙酯、正丁醇、氯仿、石油醚、甲醇、醋酸,茚三酮、
三氯化铁、硅钨酸、碘-碘化钾、碘化秘钾、硫酸香草
醛、盐酸、镁粉、α-萘酚、枸橼酸、2% 二氯氧化锆、
25%二氯乙酸乙酯。
2 方法与结果
2. 1 化学成分预实验
2. 1. 1 提取液的制备
石油醚提取:取紫藤根、茎、叶各 5 g,加入 50 ml
石油醚,加热回流 3 h,过滤。滤液待进行预实验。
醇提取:取紫藤根、茎、叶各 5 g,加入 95%乙醇
50 ml,加热回流 2 h,过滤。滤液待进行预实验。
水提取:取紫藤的根、茎、叶各 5 g,加入蒸馏水
50 ml,80℃水浴加热回流 2 h,过滤。滤液待进行预
实验。
2. 1. 2 化学成分的预试
将上述所得滤液进行化学成分的预试,用碘化
铋钾、碘-碘化钾、硅钨酸试剂检查生物碱成分,用盐
酸-镁粉反应、ZrOCl2-枸橼酸反应检查黄酮类化合
物,用泡沫实验、氯仿-浓硫酸反应检查皂苷成分,用
茚三酮试剂检查蛋白质、氨基酸,用三氯化铁试剂检
查酚性成分,用 Molish 反应检查糖及苷类化合物,
用碱性反应检查蒽醌类成分,用酸性苦味酸试剂检
查强心苷,用硫酸香草醛试剂检查甾体萜类成分,用
油脂实验检查挥发油、油脂成分,用 pH 试纸检查有
机酸成分。
2. 2 薄层色谱预试法
2. 2. 1 化学成分系统提取法
紫藤根、茎、叶各 25 g,分别置于 500 ml圆底烧
瓶中,加入 60%乙醇 100 ml 加热回流 1 h,过滤,滤
液待用,滤渣再加入 60%乙醇 100 ml加热回流 1 h,
过滤,合并滤液;滤渣加入 95%乙醇 75 ml加热回流
1 h,过滤,合并滤液;滤渣再加入 95%乙醇 75 ml加
热回流 1 h,过滤,合并滤液待用,滤渣弃掉。
将上述滤液分次用旋转蒸发仪 35 ~ 40℃,减压
浓缩,浓缩至无醇味。然后将浓缩浸膏置于分液漏
斗中按 1∶ 1 分别加入石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正
丁醇萃取,各萃取两次,分别合并石油醚、氯仿、乙酸
乙酯和正丁醇萃取液,每种萃取液依次转移至各三
角瓶中待用。
2. 2. 2 薄层色谱分析
分别用毛细管吸取紫藤根、茎、叶的石油醚、氯
仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取液适量,点到硅胶薄层板
的起始线上,使用适当的展开剂展开,当展开至距薄
层板上边缘 1 cm 处时,将板取出做好标记,挥干展
开剂,及时用铅笔将斑点标出,记录 Rf。将上述根
茎叶四种萃取液的硅胶薄层色谱板在以氘灯为光
源,200 ~ 600 nm 下进行紫外薄层色谱 -双波长薄
层扫描。
2. 3 实验结果
2. 3. 1 化学成分预实验结果 通过进行生物碱,氨
基酸、多肽和蛋白质,有机酸,酚性成分,糖及苷类,
皂苷,黄酮体,挥发油及油脂类,蒽醌类检查,得出如
下结果,见表 1。
表 1 紫藤根茎叶化学成分预实验结果
序号 试剂 样品 成分
结果
根 茎 叶
A + + + + +
碘化铋钾 B + + + + + +
C - - -
1 A 生物碱 + + +
碘-碘化钾 B + + + + + +
C - - -
A + + +
硅钨酸 B + + + + + +
C - - -
A + + +
2 盐酸-镁粉反应 B 黄酮类 + + + + + +
C - - -
A + + + +
ZrOCl2 -枸橼酸反应 B + + + + + + +
C - - -
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续表
序号 试剂 样品 成分
结果
根 茎 叶
A + + + + + + -
泡沫实验 B - - -
C - - -
3 A 皂苷 + + + + -
氯仿-浓硫酸反应 B + + + + -
C - - -
A + + + + + + + + +
4 茚三酮 B 蛋白质、氨基酸 + + + + + +
C - - -
A + + + +
5 三氯化铁 B 酚性成分 + + + +
C - - +
A + + + + + + -
6 Molish反应 B 糖及苷类 + + + + -
C - - -
A + + +
7 碱性反应 B 蒽醌类 + + + + +
C - - -
A - + -
8 酸性苦味酸 B 强心苷 - + -
C - - -
A + + +
9 硫酸香草醛 B 甾体萜类成分 + - + +
C - - -
A - - -
10 油脂实验 B 挥发油、油脂 - - -
C - - -
A + + + + + + + + +
11 pH试 MM纸 B 有机酸 + + + + + + + + +
C + + + + + + + + +
注:(1)A:水提取液;B:醇提取液;C:石油醚提取液;(2)“ + + +”表明反应很显著;“ + +”表明反应较显著;“ +”表明有反应现象;“ -”
表明无反应现象或很弱。
2. 3. 2 薄层扫描结果 通过薄层色谱扫描,得到扫 描图谱的分析结果见表 2 ~ 4。
表 2 紫藤根的薄层扫描分析结果
提取液 展开剂 Rf(λmax /nm)
石油醚
石油醚∶ 乙酸乙酯
16∶ 9
0. 85
(315 强;250 弱)
0. 78(280) 0. 34(280)
氯仿
石油醚∶ 乙酸乙酯
3∶ 2
0. 55
(320 强;265 弱)
0. 31(285) 0. 28(260)
乙酸乙酯
氯仿∶ 甲醇
4∶ 1
〗0. 74(260) 0. 64(260)
0. 52
(285 弱;245 强)
0. 25
(285 弱;240 强)
正丁醇
氯仿∶ 甲醇
1∶ 1
0. 64
(245 强;275 弱)
0. 53
(240 弱;270 强)
0. 39
(240 强;275 弱)
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表 3 紫藤茎的薄层扫描结果
项目 展开剂 Rf(λmax /nm)
石油醚
石油醚∶ 乙酸乙酯
16∶ 9
0. 82(295) 0. 44(285)
氯仿
石油醚∶ 乙酸乙酯
8∶ 1
0. 64
(235 强;265 弱)
0. 45
(245 强;280 弱)
0. 37
(245 强;285 弱)
乙酸乙酯
氯仿∶ 甲醇
3∶ 1
0. 70(260) 0. 55(265)
0. 47
(265 强;235 弱)
0. 2
7(285 弱;245 强)
正丁醇
氯仿∶ 甲醇
1∶ 1
0. 54
(245 强;275 弱)
0. 38
(240 强;265 弱)
0. 26
(240 强;265 弱)
表 4 紫藤叶的薄层扫描结果
项目 展开剂 Rf(λmax /nm)
石油醚
石油醚∶ 乙酸乙酯
16∶ 9
0. 80(440) 0. 60(440) 0. 48(420)
0. 29
(265 强;220 弱)
氯仿
石油醚∶ 乙酸乙酯
1∶ 1
0. 52(285)
乙酸乙酯
氯仿∶ 甲醇
4∶ 1
0. 60(245)
正丁醇
氯仿∶ 甲醇
3∶ 1
0. 64(245)
3 讨 论
由表 1 结果分析可以推断:①紫藤根茎叶中可
能含有生物碱、黄酮类、蛋白质、酚性成分、蒽醌类、
甾体萜类及有机酸成分;其中根和茎中还含有皂苷、
糖及苷类成分,茎中含有强心苷类成分;通过油脂实
验,根茎叶三部分均未检测出挥发油及油脂。②水
提液中和醇提液中检测出的化学成分类型较石油醚
提取液中多。③水提液中含有的皂苷、蛋白质和糖
及苷类成分较醇提液和石油醚提液中多,醇提液中
所含有的生物碱、黄酮类成分及蒽醌类较水提液和
石油醚提液中多。④对石油醚提液所进行的化学成
分检测,三氯化铁试验有反应现象,为阳性结果,其
他反应均为阴性结果,说明石油醚提液中可能含有
少量的酚性成分。
由表 2 紫藤根氯仿的萃取液第一个点扫描结
果,最大吸收波长在 320 nm 和 265 nm,由此推测,
可能是黄酮类化合物的特征吸收,说明根中可能存
在黄酮类化合物;由表 2 紫藤根正丁醇提取液第二
点的扫描结果,最大吸收波长在 240 nm 和 270 nm
有吸收峰,蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨
酸在 280 nm 处左右有较强的吸收,肽键在 238 nm
处左右有较强吸收,由此推断根中可能含有蛋白质
类物质;由表 3 紫藤茎氯仿萃取液第二点的扫描结
果,最大吸收波长在 240 nm和 280 nm,因为苯醌类
在 240 nm左右有强吸收峰,在 285 nm 左右有中强
吸收峰,由此可推断可能是苯醌类化合物;由表 4 中
叶-石油醚萃取液三个点紫外薄层扫描在 420 nm 和
440 nm左右有特征吸收,推断这些可能是色素类物
质。
综上所述,紫藤根茎叶中可能含有生物碱、黄酮
类、蛋白质、酚性成分、蒽醌类、甾体萜类及有机酸等
化学成分。本文首次对紫藤根茎叶进行了化学成分
预实验,初步确定了其可能含有的化学成分,为进一
步进行该植物生物活性成分的确定、提取、分离研究
提供了研究基础。
参考文献:
[1] 包启伟.福建西北部术本攀援植物观赏与应用[J]. 浙江林学
院学报,2000,17( 2) : 225 - 228.
[2] 李峰,傅佑丽. 紫藤花油化学成分的气相色谱∕质谱法分析
[J].曲阜师范大学学报,2008,8( 2) : 81 - 83.
[3] 李祖光,雅芳,芮昶.紫藤鲜花香气化学成分的研究[J]. 香料
香精化妆品,2005,2( 1) : 1 - 3.
[4] 姜艳华,樊晓晖,姜华.紫藤活性成分的提取与抑菌作用初探
[J].河南农业科学,2009,3( 1) : 60 - 63.
[5] 全国中草药汇编:下册[M]. 第 2 版. 北京: 人民卫生出版社,
1975: 620.
[6] 周国平.癌症秘方验方偏方大全[M]. 北京: 中国医药科技出
版社,1992: 175.
(收稿日期 2013-07-13)
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