全 文 ：SFE等方法提取山葡萄藤中白藜芦醇的研究
井山林 ,彭国平　(南京中医药大学植物药研究与新药开发中心 ,江苏 南京　210029)
摘要:目的　确定山葡萄藤中白藜芦醇的提取工艺条件 。方法　以白藜芦醇的提取率及提取液的含固量为指标 ,考察不
同提取方法对提取效果的影响。结果　虽然 SFE法的提取率不高 , 但其提取溶剂用量较少 、萃取产物含固量低。结论　
SFE 法作为山葡萄藤中白藜芦醇的提取工艺是切实可行的 , 但萃取条件有待于进一步优化。
关键词:山葡萄藤;白藜芦醇;提取分离技术;超临界萃取
中图号:R284.2　　　文献标识码:A　　　文章编号:1000-5005(2006)04-0248-02
　　白藜芦醇(Resveratol)是一种含多个酚羟基的
芪类化合物 ,具有抗菌 、抗癌 、抗血栓 、抗氧化 、调
节血脂等重要作用[ 1] 。它广泛存在于多种植物
中 ,如葡萄科 、豆科 、百合科 、蓼科等 。山葡萄藤为
葡葱上植物山葡萄 Vitis amurensis Rupr 的干燥藤
茎属葡萄科葡萄属植物 ,具有祛风止痛之功效 ,用
于外伤痛 、风湿骨痛 、胃痛 、腹痛 、神经性头痛 、术
后疼痛等 。其含有的多种生物碱尤其是延胡索乙
素等叔胺类生物碱是其作用的主要物质基础 。我
们在初步研究中发现其中含有白藜芦醇 ,本文对
白藜芦醇的提取工艺进行了比较研究。
1　材料
FY-230-40-11型超临界萃取装置(南通飞宇
石油科技开发有限公司);Waters高效液相色谱仪
(WDL-95 色谱工作站);16G-型高速离心机;
SB5200-型超声清洗机(上海 Branson 公司);AEL-
40SM 型电子天平(日本岛津);甲醇(色谱纯);
95%乙醇(化学纯);盐酸(化学纯);重蒸水;山葡
萄藤(购于亳州药材市场)经鉴定 ,符合《中国药
典》标准。
2　方法与结果
2.1　山葡萄藤的索氏提取[ 2]
取山葡萄藤(20 目)2份 ,每份约 0.5 g ,精密
称定 ,装入折叠好的小滤纸筒中 ,置于索氏提取器
中 ,烧瓶中加乙醇 50 mL ,于水浴上提取至回流液
无色 。提取液水浴蒸至小体积后 ,转移至 10 mL
的容量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,离心 ,取上
清液进样 ,测定 。
2.2　山葡萄藤的超声提取
取山葡萄藤(20目)1份 ,约 1 g ,精密称定 ,加
甲醇 20mL ,称重 ,超声 30min ,放冷 ,称重 ,补足溶
剂减失量 ,摇匀 ,离心 ,取上清液进样测定。
2.3　山葡萄藤的水提取
取山葡萄藤(20目)1份 ,约 30 g ,精密称定 ,
置于圆底烧瓶中 ,以水热回流提取 2次:第 1次加
8倍量醇 ,回流 2 h;第 2 次加 6倍量醇 ,回流 1.5
h 。滤过 ,合并滤液。取滤液1 mL ,加3 mL甲醇超
声处理10 min ,离心 ,取上清液进样测定 。
2.4　山葡萄藤的 SFE法提取[ 3]
取山葡萄藤(20 目)适量 , 装入萃取釜(1L)
中。在萃取釜温度达 50℃、分离釜温度达 40℃
时 ,调节萃取釜压力至 30 MPa 、分离釜压力至 6
MPa ,并调节主泵频率使 CO2 流量控制在 40 ～ 45
kg/h之间 , 然后连续泵入乙醇(副泵频率为 6
Hz),连续萃取 2.5 h 。每隔 0.5 h放取解析液 1
次 ,共得解析液 1 936 mL。
另取山葡萄藤(40目)适量 ,如前进行 SFE法
萃取 ,得解析液 2 040 mL。
上述解析液分别离心 ,进样测定 ,即可。
收稿日期:2006-03-10;修稿日期:2006-04-30
作者简介:井山林(1971-),男 ,江苏涟水人 ,南京中医药大学助理研究员。
—248— 南京中医药大学学报 2006 年 7月第 22 卷第 4 期JOURNAL OF NANJING TCMUNIVERSITY Vol.22 No.4 July.2006
DOI :10.14148/j.issn.1672-0482.2006.04.016
2.5　白藜芦醇的含量测定[ 4]
2.5.1　色谱条件
Lichrospher C18柱(4.6 mm ×250 mm , 5 μm),
Waters 515/2487高效液相色谱仪;λ=306 nm;流
动相为甲醇 -0.1%TFA(45∶55);流速 1.0 mL/
min;AUFS=1.0;T=30℃;进样量为5 μL。
2.5.2　标准曲线的制备
精密称取白藜芦醇 2.02 mg ,置于 10 mL的容
量瓶中 , 以甲醇溶解并稀释至刻度 , 得浓度为
0.202 mg/mL的标准贮备液 ,再分别配成浓度为
0.101 mg/mL 、0.0505 mg/mL 、0.025 25 mg/mL 、0.
012 62 mg/mL 、0.006 31 mg/mL 和 0.003 155 mg/
mL的系列标准液 。分别吸取上述溶液 20μL ,注
入液相色谱仪 ,测定 ,以吸收峰的峰面积为纵坐标
(Y)、标准品浓度(mg/mL)为横坐标(X)绘制标准
曲线 ,得回归方程:Y =(2.761×107)X +7.672×
106 , r=0.999 7。由此可知 ,白藜芦醇的进样浓度
在0.003 155 ～ 0.202 mg/mL 之间 ,其峰面积与浓
度呈良好的线性关系 。
2.6　结果
不同方法提取结果见表 1。
表 1　不同方法提取结果的比较
提取方法 药材粒度(目) 含量(%) 提取率(%) 固含物(%)
甲醇超声法 >20 0.125 8 —＊ 8.964
乙醇索氏提取法 >20 0.078 91 62.73 12.45
水煎煮法 >20 0.036 53 29.04 11.58
SFE法 1 >20 0.001 583 12.58 0.896
SFE法 2 >40 0.003 814 30.32 1.062
　　　　　　　　　　注:＊提取率以甲醇超声提取法为 100%。
3　讨论
(1)传统上山葡萄藤采用水煎煮的提取工艺 ,
但是其中白藜芦醇的提取率很低。其原因在于白
藜芦醇难溶于水 ,能溶于乙醇 、乙酸乙酯 、丙酮等
中极性溶剂。若仅仅用少量的水来提取 ,是难以
得到较高提取率的。本实验的主要目的就在于确
定其最佳提取溶剂。
(2)SFE-CO2 技术是利用超临界 CO2 的高渗
透性和高溶解能力来提取和分离物质的一种新的
单元提取分离技术。本法具有常温 、无毒 、环境友
好 、使用安全简便 、萃取时间短 、产品质量高等特
点 ,它主要用于低极性的小分子化合物的萃取 ,对
于极性稍大的化合物(如某些内酯 、生物碱 、黄酮
及酚类等),可在使用夹带剂的条件下将这些物质
从固体物料中萃取出来;对于一些热敏性和易氧
化的物质 ,本法尤其适合 。从实验结果可以看出 ,
虽然超临界萃取的提取率不高(萃取条件有待进
一步优化),但超临界萃取物中白藜芦醇的含量
高。因此 ,本法是提取和富集白藜芦醇较为有效
的方法。
参考文献:
[ 1]赵霞 , 陆阳 , 陈泽乃.白藜芦醇的化学药理研究进展
[ J] .中草药 , 1998 , 29(12):837.
[ 2] 杨云 ,冯卫生.中药化学成分提取分离手册[ M] .北京:
中国中医药出版社 , 1998.149.
[ 3] 王振中 ,彭国平.超临界 CO2 萃取技术提取夏天无成
分的研究[ J] .中国中药杂志 , 2002 , 27(8):585.
[ 4] 王磊 ,黄澜 , 张勉 ,等.虎杖商品药材中白藜芦醇苷及其
苷元含量的测定[ J] .中草药 , 2002 , 27(5):344.
(编辑:李伟东)
An Investigation into Extraction of Resveratrol from Amur Grape Vine with SFE and Other Methods
JING Shan-lin , PENG Guo-ping
(Plant Medicine Research and New Drug Development Center , Nanjing University of Traditional Chinese Medicine , Nanjing , Jiangsu ,
210029 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To establish the technique conditions for extracting resveratrol from amur grape vines.METHOD　
Studies were conducted on the effect of different extraction methods on the results of extraction , with the extraction rate of resveratrol and
the content solid substances in the extract as the indexes.RESULTThough its extradionrateis lower , but SFE method required relatively
less solvent and low content of solid substances.CONCLUSION　 SFE method can be used as the method for extracting resveratrol
from amur grape vines , but its optional extration technique londitions are depended on further research.
KEY WORDS:amur grape vine;resveratrol;extraction end separation;SFE
—249—井山林 , 等:SFE等方法提取山葡萄藤中白藜芦醇的研究　第 4期