全 文 ：　 　　　　　　　　　　　　　　　湖 南 中 医 学 院 学 报　　　　 1998年 12月第 18卷第 4期　
　 18　　　　　　　　　　　 Journal of Hunan College of TCM 　 Dec. 1998 Vol. 18 No. 4 　
野葛、粉葛中无机元素和氨基酸测定
向大雄　李焕德　赵绪元　许小美①
(湖南医科大学附属第二医院　长沙 410011)
关键词　葛根　矿物质　氨基酸
中国图书分类号　 R284. 1
　　近年来 ,随着葛根研究的深入 ,野葛在国内商品流通中
所占份额增大 ,野葛和粉葛的质量问题日益受到关注。 本文
对两种葛根的无机元素和游离氨基酸含量进行了测定 ,为客
观评价两者内在质量提供了依据。
1　仪器与材料
1. 1　仪器
AA-680型原子吸收分光光度仪 (日本岛津公司 ); LC-
9A型高效液相色谱系统 (日本岛津公司 ); LD5-2A型离心分
离机 (北京医用离心机厂 ) ; AEL-200型电子分析天平 (日本
岛津公司 )。
1. 2　材料
野葛 1(湖北产 );野葛 2(安徽产 );粉葛 1(湖南产 ) ;粉葛
2(湖南产 ) ;均由湖南医科大学附二院中药房提供并鉴定。所
用试剂均为分析纯 ,水为重蒸馏水。
2　方法与结果
2. 1　无机元素测定
2. 1. 1　样品的制备　称取野葛、粉葛细粉各约 1g ,精密称
定 ,放入三角烧瓶中 ,加入浓硝酸和高氯酸混匀 ,置于电热板
上消化至澄清 ,冷却后转移并定容至 25ml容量瓶中。
2. 1. 2　测定法　 Fe、 K、 Na、 Zn、 Mn、 Cu、 Ca、 Mg、 Sr等用火
焰法测定 , Pb、 As、 Li等用石墨炉法测定 ,结果见表 1。
　　　表 1　无机元素测定结果　　　 (μg /g )
野葛 1 野葛 2 粉葛 1 粉葛 2
K 6754 5131 9936 4469
Na 28. 4 46. 1 81. 7 42. 2
Li 0. 181 0. 131 0. 175 0. 111
Ca 19410 15762 2684 3424
Mg 3138 3943 841 473
Sr 39. 9 28. 1 1. 46 1. 82
Fe 51. 8 102 70. 2 140
Zn 18. 7 36. 6 22. 4 58. 2
Cu 5. 73 6. 44 4. 33 3. 41
Mn 5. 75 12. 0 6. 63 7. 40
Pb 4. 53 4. 21 3. 51 2. 42
As 2. 66 2. 80 0. 658 0. 582
2. 2　游离氨基酸测定
2. 2. 1　测定方法　高效液相色谱邻苯二甲酸柱前衍生法。
2. 2. 2　色谱条件 ODS C18柱 ( 150mm× 0. 4mm) ;流动相 A:
0. 05M醋酸缓冲液 ( p H6. 8)∶甲醇∶四氢呋喃 = 82∶ 17∶
1;流动相 B: 0. 05M醋酸缓冲液 ( pH6. 8)∶甲醇∶四氢呋喃
= 22∶ 17∶ 1;流速: 1ml /min,梯度洗脱 ,柱温 25℃ ;荧光检
测波长: 激发 338nm,发射 425nm。
2. 2. 3　样品处理　称取粉碎的样品按 1∶ 10加入蒸馏水 ,
80℃保温 30min,过滤 ,取滤液直接进行衍生反应。
2. 2. 4　衍生试剂　取邻苯二甲酸 10mg ,加 0. 5ml甲醇溶
解 ,再加入 2ml 0. 4M硼酸缓冲液 ( pH9. 4) , 30μlβ -疏基乙醇
混匀即得。
2. 2. 5　衍生反应及测定结果　取 10μl样品 ,加 100μl衍生
试剂混匀 ,室温反应 30min,上机测定 ,结果见表 2。
　　　表 2　游离氨基酸测定结果　　　 ( mg /g )
野葛 1 野葛 2 粉葛 1 粉葛 2
天冬氨酸 0. 096 0. 200 0. 130 0. 334
谷氨酸　 1. 004 0. 102 0. 132 0. 085
天冬酰胺 0. 027 0. 500 0. 870 0. 811
谷氨酰胺 0. 004 0. 026 0. 028 - -
丝氨酸　 0. 018 0. 049 0. 030 0. 033
组氨酸　 0. 005 0. 046 0. 085 0. 050
甘氨酸　 0. 023 0. 036 0. 017 0. 041
苏氨酸　 0. 013 0. 034 0. 027 0. 026
精氨酸　 0. 023 0. 058 0. 057 0. 055
丙氨酸　 0. 045 0. 208 0. 243 0. 145
酪氨酸　 0. 013 0. 048 0. 024 0. 034
蛋氨酸　 0. 005 0. 006 0. 006 0. 007
缬氨酸　 0. 009 0. 044 0. 037 0. 038
苯丙氨酸 0. 020 0. 045 0. 051 0. 056
异亮氨酸 0. 010 0. 025 0. 022 0. 026
亮氨酸　 0. 012 0. 041 0. 041 0. 051
赖氨酸　 0. 011 0. 016 0. 016 0. 020
色氨酸　 0. 344 0. 010 0. 009 0. 004
总　计　 1. 682 1. 494 1. 825 1. 515
3　小结
豆科植物野葛 Pueraia loba ta(Willd)　 (下转第 20页 )
① 湖南中医学院九七届毕业生
　 20　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　湖南中医学院学报 1998年第 18卷
2. 2　薄荷脑、樟脑、冰片的气相色谱法鉴别
2. 2. 1　供试液的制备　取伤痛外搽灵 4ml,加 95%
的乙醇至 10m l,搅拌均匀 ,静置片刻 ,过滤即得。
2. 2. 2　空白液的制备　取缺樟脑、冰片、薄荷脑的
外搽灵液 4m l,照供试液制备法制备。
2. 2. 3　标准品液的制备　分别取樟脑 20mg、薄荷
脑 10mg、冰片 10mg ,加 95%乙醇 10m l溶解即得。
2. 2. 4　条件　玻璃柱长 2m,内径 2mm;载体: 上试
102硅烷化白色担体 ( 40～ 60目 ) ,固定液: 聚乙二醇
己二酸酯 ,涤布浓度 2. 5% ,空气压 9. 5pt ,氢气压
2. 7pt ,氮气压 0. 9pt ,柱温 120℃ , FID温 180℃ ,衰
减 64,纸速 16mm /min。
2. 2. 5　气相色谱方法与结果　分别取冰片标准液 ,
薄荷脑标准液 ,樟脑标准液 ,空白液及供试液各
0. 8ml,依次注入气相色谱仪 ,衰减 64,纸速 16mm /
min,冰片、薄荷脑、樟脑标准液的出锋时间分别为
2. 37min, 1. 90min, 1. 62min;空白液未出现色谱峰 ;
供试液在 2. 35min, 1. 90min, 1. 61min 3处出现色
谱峰 ,见图 2。
图 2　薄荷脑、樟脑、冰片的 GC图谱
3　小结
伤痛外搽灵原方质量标准中仅对三七、马钱子
进行了薄层定性 ,而薄荷脑、樟脑、冰片均系芳香止
痛的主药 ,且理化性质相似 ,故增加对其的鉴别 ,从
而完善了质量标准。
在本文的实验条件下 ,薄层层析法不理想 ,而以
聚乙二醇己二酸酯为固定液 ,采用 GC法鉴别上述 3
种成分 ,共测试 3批 ,结果发现该法鉴别樟脑、薄荷
脑、冰片分离度高 ,重复性好 ,可作为该药质量控制
的一种方法。
(收稿日期　 1998— 07— 28)
(上接第 18页 ) Ohw i和甘葛藤 Pueraia thomsonii
Bea th的干燥根均为中国药典 95版收载的葛根品
种 ,后者因富含淀粉 ,又称粉葛。从形状看 ,野葛体轻
质韧 ,纤维性强 ,豆腥味浓 ,味苦微甜 ;粉葛体重 ,富
粉性 ,豆腥味淡 ,传统习用粉葛 ,并认为粉性强者质
佳。有人发现同属不同种的葛根所含总黄酮含量差
别很大 [1 ] ,且中国产粉葛的异黄酮、三萜类成分含量
远较日本、韩国产野葛低。
实验表明 ,两种葛根所含无机元素和氨基酸种
类基本相同 ,但野葛中 Sr含量约为粉葛的 20倍 ,
Ca、 Mg含量为粉葛的 4倍以上。湖北产野葛中谷氨
酸和酪氨酸含量分别为粉葛的 10倍和 30倍以上 ,
其它则差别不大。两种葛根中毒性元素 As、 Pb含量
低 ,均在 5ppm以下。
参考文献
1　顾志平 .中药葛根资源的调查研究 .中药材 , 1993; 16( 8): 13
(收稿日期　 1998— 03— 24)