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药物与临床
马栗树籽提取物 (迈之灵)对肢体创伤患者血清细胞
因子 IL-6 、 IL-1β和 TNF影响的研究
刘雄1 , 廖前德2 , 曹焕新2 , 黄建军2 (1.湖南省儿童医院骨科 , 长沙　410007;2.中南大学湘雅医院骨科 , 长沙　
410008)
摘要:目的　研究马栗树籽提取物 (迈之灵)对肢体创伤软组织肿胀患者的血清细胞因子白细胞介素 VI (IL-6)、
白细胞介素 1β (IL-1β)和肿瘤坏死因子 (TNF)水平的影响。方法　四肢骨折创伤患者 120 例采用双盲法 , 随机
抽样分成观察组 (60 例)和对照组 (60 例)。观察组口服迈之灵片 , 对照组口服安慰剂片治疗 , 分别观察其肿胀和
疼痛程度。 2组均测量血清 IL-6 、 IL-1β 、 TNF值。 48 例正常人测量血清 IL-6 、 IL-1β 、 TNF 值。结果　骨折并软组
织损伤患者血清 IL-6 水平在发病 6 h 内升高 , 24～ 36 h 达到高峰 , 8 d 后基本降至正常 , 重度组血清 IL-6 水平高于
轻 、 中度组 (6 h , P<0.01;24 ～ 36 h , P <0.05), 观察组用迈之灵治疗 4 d 后血清 IL-6 水平明显下降 (P <
0.01)。创伤患者血清 TNF 、 IL-1β 水平升高 , 但持续时间短。结论　迈之灵消除肢体骨折软组织肿胀效果明显 ,
对轻 、 中度损伤患者的疗效优于重度损伤患者 , 能够明显降低患者血清 IL-6 水平 , 与其抗炎 、 抗渗出 、 抗氧自由
基等作用相关 , 一定程度上减轻和保护了机体的应激反应。
关键词:马栗树籽提取物;骨折;软组织损伤;细胞因子;白细胞介素Ⅵ ;白细胞介素 1β ;肿瘤坏死因子
中图分类号:R681.7　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1672-2981 (2009)10-0777-04
Effect of extract of horse chestnut seeds(aescuven forte)on
IL-6 , IL-1β and TNF in patients with limb trauma
LIU Xiong 1 , LIAO Qian-de2 , CAO Huan-xin2 , HUANG Jian-jun2 (1.Department o f Orthopedics , Hunan Chil-
dren s Hospital , Changsha 41007;2.Department o f Orthopedics , Xiangya Hospital , Central South University ,
Changsha 410008)
Abstract:Objective　 To observe the effect of ae scuven fo rte on the t reatment of soft tissue sw elling due to f racture
and the inf luence on damage index s , such as inte rleukin 6 (IL-6), interleuhin 1β (IL-1β), and tumer enco riss facto r
(TNF).Methods　A total of 120 patients w ith limb fracture soft tissue trauma were r andomly divided into a treatment
gr oup (60 patients) and a contro l g roup (60 pa tients).The patients in the trea tment g roup w ere given aescuven fo rte
pills , w hile the contr ol gr oup had placebo pills.We observed the pre- and po st medica tion blo od serum IL-6 , TNF ,
and IL-1β value respectiv ely.In the normal g roup , 48 people had their blo od serum IL-6 , TNF , and IL-1β tested.
Results　In the trea tment g roup , the serum levels of IL-6 significantly increased within 6 h follow ing the onse t of tr au-
ma and reached a plateau at 24 ～ 36 h , w hich returned to baseline by day 8.Serum levels of IL-6 in patients w ith severe
trauma we re higher than other s.Serum leve ls o f IL-6 in patients tr ea ted with aescuven for te significantly declined(P<
0.01)on day 4.Conclusion　The effect o f aescuven for te is obv ious on so ft tissue swelling due to fracture.The cura-
tive effect of severe truma is wo rse than tha t o f o the rs.Se rum levels of IL-6 descend in patients treated w ith aescuven
for te, w hich may result fr om the pro tection pr operties of aescuven for te , such as anti-inflammation , anti-exuda tion
and anti-free r adicals.
Key words:ex tract o f ho rse chestnut seeds;f racture;aescuven for te f racture so ft tissue damage;cell facto r;IL-6;
IL-1β;TNF
　　骨折时 , 暴力致皮下组织 、 小血管 、 肌肉组织等发生损 伤 , 有较多的组织细胞失活 , 出现广泛的内出血 、 血栓形
　　作者简介:刘雄 , 男 , 硕士研究生 , 主要从事骨科创伤与关节研究 , Tel:13973182507 , E-mail:liu xiongxyyy2008@yah oo.com　　
＊通讯作者:廖前德 , 男 , 博士生导师 , 主要从事骨科创伤与关节及骨组织工程 , T el:13549681539 , E-mai l:hnjz xjx@163.com
中南药学 2009年 10月第 7卷第 10期　Cent ral S outh Ph armacy.October 2009 , Vol.7 No.10
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成 、 组织坏死 、 局部水肿及严重的炎症反应 , 释放大量的细
胞因子。细胞因子是一类由多种类型细胞产生释放的小分子
内源性多肽 , 具有多种生理活性 , 参与炎症反应和创伤愈合
过程 , 其中白细胞介素 1β (IL-1β), 白细胞介素 VI (IL-6)、
肿瘤坏死因子 (TNF)作为促炎因子在软组织损伤中的作用
尤为突出。迈之灵是马栗树籽提取物 , 主要成分是七叶皂
苷 , 能够显著抑制血清中溶酶体的活性 , 降低毛细血管的通
透性 , 阻止液体进入周围组织 , 减少创伤后反应;能够提高
血管壁的弹性和张力 , 增加静脉回流的速度和流量 , 改善静
脉回流 , 对抗水肿;有显著的抗炎特性 , 能够有效干预细胞
因子的释放。本文将 (迈之灵)马栗树籽提取物应用于软组
织损伤患者 , 检测迈之灵对患者 IL-6 、 IL-1β 和 TNF 的影
响 , 进一步了解其对机体炎症反应综合症的形成和发展的影
响。
1　临床资料
1.1　临床资料
研究对象为 2009 年 3 月到 2009年 5 月在湘雅医院骨科
住院患者 120 例。其中男 67 例 , 女 53例 , 年龄最大 64 岁 ,
最小 18 岁 , 平均 36岁 , 肱骨骨折 26 例 , 肘关节内骨折 12
例 , 尺桡骨骨折 34 例 , 指掌骨折 15例 , 胫腓骨骨折 12 例 ,
胫骨股骨骨折 21 例。
1.2　病例分组
依患者入院时间 , 按 1∶1 比例随机分成 2 组 , 观察组
60 例 , 对照组 60 例。
1.3　肿胀程度评定
治疗前根据患处疼痛和肿胀情况将损伤分为轻 、 中 、 重
3 度。轻度肿胀:有疼痛感觉 , 有压痛 , 较正常皮肤肿胀 ,
但皮纹尚存在;中度肿胀:疼痛感觉明显 , 有压痛 , 皮纹消
失 , 但无水泡;重度肿胀:疼痛剧烈 , 皮肤重度肿胀 , 出现
水泡。按此标准 , 60 例观察组患者中轻度肿胀组 18 例 , 中
度肿胀组 30 例 , 重度肿胀组 12 例;对照组 60 例患者中轻
度肿胀组 17 例 , 中度肿胀组 33 例 , 重度肿胀组 10 例。 48
名健康人作为正常对照组 , 其中男 27 例 , 女 21 例。年龄
19 ～ 65 岁 , 平均年龄 34 岁。
2　方法
2.1　用药方法
2 组患者均常规给予抗感染治疗 , 抬高患肢消肿 , 观察
组患者于术后第 1 d 起 , 口服迈之灵 , 轻 、 中度损伤:300
mg ·次-1 , 2 次· d-1 ;重度损伤:450 mg · 次-1 , 2 次 ·
d -1 , 连续服药 10 d。对照组患者口服安慰剂片治疗。
2.2　观察方法[ 1]
为了准确地观测记录术后肢体的变化 , 被测肢体用龙胆
紫划好测量部位标志 , 于每日 9:00 用软尺测量患侧肢体肿
胀周径 , 观察皮纹及有无张力性水泡 , 并与健侧对比 , 做好
记录 , 按照肿胀程度评定标准进行分度。
2.3　临床疗效评价标准
痊愈:疼痛 , 肿胀消失;显效:疼痛 , 肿胀基本消失 ,
局部轻降 1个档次以上;有效:疼痛肿胀明显下降 , 局部仍
有中等压痛或肿胀消退不足 1个档次;无效:局部疼痛 , 肿
胀无改善或症状 , 体征加剧。
2.4　IL-6 、 IL-1β 和 TNF的质量浓度测定
分别于手术后 6 h 、 24 ～ 36 h、 第 4 d 、 第 8 d 抽取肘静
脉血 , 不抗凝 , 备用。
取静脉血 5 m L , 注入试管中待凝固后 , 分离血清 ,
-20 ℃保存 2 个月。测定前置室温或冷水中复溶 , 混匀后 ,
4 ℃ 3 000 r·min-1离心 5 min , 取上清液测定。
采用放射免疫 RIA 法 (RIA 检测试剂盒购自北京福瑞
生物有限公司)检测软组织损伤患者血清中 IL-6 、 IL-1β 和
TNF 的质量浓度。
2.5　统计学处理
采用 SPSS 10.0 统计软件进行统计学分析 , 所有数据用
x±s表示 , 组间及用药前后选用 t检验。 P<0.05 有显著差
异。
3　结果
3.1　血清 IL-6 水平的变化
观察组患者血清 IL-6 水平在发病 6 h 内已有明显升高 ,
24～ 36 h 达到高峰 , 至第 8 d 基本降至正常 , 中度肿胀组患
者血清 IL-6 水平明显高于轻度肿胀组 (6 h , P <0.01;
24～ 36 h P<0.05), 重度肿胀组血清 IL-6 水平明显高于中
度肿胀组 (6 h , P <0.01;24 ～ 36 h , P <0.05 , 见表 1);
迈之灵治疗 4 d 后患者血清 IL-6 水平明显下降 (P<0.01)。
表 1　观察组患者血清 IL-6水平 (pg·mL-1)
Tab 1　Patient s serum levels of IL-6(pg·mL-1)in different groups
6 h内 24～ 36 h 4 d 8 d后
轻度肿胀组 (n=18) 49.26±16.77a 68.56±17.35a 62.58±16.33a 27.37±15.18d
中度肿胀组 (n=30) 78.84±17.42ab 93.52±23.55ab 85.37±21.43ab 33.71±17.21d
重度肿胀组 (n=12) 107.36±27.73ac 121.72±38.64ac 112.64±35.71ac 38.47±19.22d
正常组 (n=48) 24.26±14.53
　　注:a P<0.05与正常组相比较有统计学意义;bP <0.05 与轻度肿胀组相比较有统计学意义;cP <0.05与中度肿胀组相比较有统计学意
义;dP>0.05与正常组相比较无统计学意义。
　　n ote:aP<0.05 statistically signif icant compared wi th the normal group;bP <0.05 statisti cally significant compared wi th the mi ld group;cP <0.05
stat is tically sig ni fican t compared w ith mez zo g roup;cP>0.05 stat is ticaly signi ficant compared w ith th e normal grou p.
3.2　不同治疗组患者血清 IL-6 水平
观察组患者迈之灵治疗 4 d 后血清 IL-6 水平与对照组比
较明显下降 (P<0.05), 8 d后观察组患者血清 IL-6水平基
本降至正常 , 与对照组比较有统计学意义 (P <0.05) (见
表 2)。
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表 2　不同治疗组患者血清 IL-6水平的变化值 (pg·mL-1)
Tab 2　Serum IL-6 level in different treatment groups(pg·mL-1)
组别 (g rou p) 6 h 24～ 36 h 4 d 8 d
观察组 (n=60) 81.75±16.52a 98.43±21.47b 54.52±24.33c 35.64±14.27d
对照组 (n=60) 84.51±17.73 102.64±20.16 82.37±19.54 58.26±16.72
P值 P >0.05 P>0.05 P <0.05 P<0.05
　　注:a P>0.05与对照组相比较无统计学意义;bP>0.05与对照组相比较无统计学意义;cP<0.05与对照组相比较有统计学意义;dP <0.05
与对照组相比较有统计学意义。
　　note:aP>0.05 not s tati st ically signifi cant compared w ith the con t ral g rou p;bP>0.05 n ot stat is tically signif icant com pared w ith th e cont rol
g rou p;cP<0.05 stati sti cally signifi cant com pared w ith the con t rol group;dP<0.05 stati sti cally signifi cance com pared w ith the con t rol group.
3.3　TNF 水平的变化 (见表 3 、 4)
表 3　不同观察组患者血清 TNF水平
Tab 3　Level of serum TNF in different groups
6 h 24～ 36 h
轻度肿胀组(n=18) 1.08±0.13a 0.8±0.13b
中度肿胀组(n=30) 1.11±0.17a 0.83±0.14b
重度肿胀组(n=12) 1.16±0.15a 0.88±0.15b
正常组(n=48) 0.50±0.17
　　注:a P<0.05与正常组相比较有显著意义;bP>0.05与正常组
相比较无统计学意义。
　　note:aP <0.05 have stati sti cal signif icance com pared wi th normal
g rou p;bP >0.05 have n o statis tical signif icance compared wi th con tral
g rou p.
表 4　不同治疗组患者血清 TNF水平 (pg·mL-1)
Tab 4　Level of srum TNF in different treatment groups(pg·mL-1)
组别 (group) 6 h 24～ 36 h
观察组 (n=60) 1.13±0.14a 0.86±0.12b
对照组 (n=60) 1.15±0.18 0.89±0.17
P值 P >0.05 P>0.05
　　注:a P>0.05与对照组相比较无统计学意义;P b>0.05与对照
组相比较无统计学意义。
　　note:a P > 0.05 n ot s tati st ically signi ficant com pared wi th th e
cont rol grou p;P b > 0.05 n o s tati st ically signif icant compared w ith
th e cont rol group.
3.4　血清 IL-1β 变化及消肿情况
血清 IL-1β 的变化与 TNF 变化相似 , 而且治疗组消肿
时间明显优于对照组 , 表明其消肿止痛效果反应迅速[ 1] 。
4　讨论
肢体骨折软组织损伤患者处于应激状态 , 机体免疫系统
被激活 , 体液中检出多种细胞因子和急性期蛋白。细胞因子
(CK)是一类由多种类型细胞产生释放 , 具有多种生理活
性 , 能调节生长变化和免疫功能 , 参与炎症发生和创伤愈合
过程的内源性可溶性小分子多肽。 IL-6 是细胞因子家族中
的重要一员 , 是一种多功能的细胞因子 , 在内环境稳态被干
扰的情况下 , 几乎都伴随着 IL-6 释放 , 包括内毒素血症 、
创伤和急性感染等。本文中暴力作用致肢体骨折 , 软组织损
伤严重 , 严重损害了机体内环境 , IL-6释放 、 升高显著。产
生 IL-6的主要细胞有脂肪细胞 、 粒细胞 , 平滑肌细胞 、 肥
大细胞 、 软骨细胞或纤维细胞 、 角质细胞 、 T 细胞和 B细胞
等[ 2-5] 。典型的刺激 IL-6 产生的因素为 IL-1 , TNF 和细菌
内毒素[ 3] 。骨折后再灌注损伤 , 低氧可刺激相关细胞释放
IL-6 , 使机体中血浆 IL-6水平升高[ 6-8] 。
IL-6 参与多种组织细胞生长分化和功能调节 、 免疫调
节 、 炎症 、 血细胞生成等。近年来研究发现血液循环中三分
之一的 IL-6 源于脂肪细胞 , 而内脏脂肪较皮下脂肪分泌 IL-
6 的作用更强[9-10] 。实验证明骨胳肌细胞能分泌 IL-6[ 11-12] 。
并且在应激状态和剧烈运动时血浆中绝大部分 IL-6 由骨胳
肌细胞分泌 , 因此 IL-6 称为 “运动因子” [ 13-14] , 甚至有人把
IL-6 称为 “肌因子” [ 15-16] 。本试验中 , 发现骨折患者 IL-6 水
平明显高于非运动系统疾病产生的 IL-6。
研究发现观察组患者血清 IL-6 水平在发病 6 h 内已经明
显升高 , 24～ 36 h 达到高峰 , 第 8 d 基本恢复正常 , 血清中
升高的 IL-6 能刺激肝细胞合成急性期蛋白 , 参与免疫反应 ,
刺激血细胞生成等 , 是应激反应的主要调节因素之一。本试
验组发现 IL-6 升高的水平与肢体损伤肿胀程度成正相关 ,
损伤越大 , 肢体肿胀越明显 , 血清 IL-6 水平越高。故患者
急性期血清 IL-6 升高水平也许能够作为判断骨折患者肢体
损伤程度的指标之一。
糖皮质激素在不同组织及细胞中对 IL-6 起负调节作用 ,
且可以抑制炎症反应的不同阶段。马栗树籽提取物 (迈之
灵)的主要药物成分是七叶皂苷钠 , 是中药娑罗子干燥果实
中提炼的三萜皂钠 , 有抗炎 、 抗渗出的作用。相关文献报道
它可以刺激机体肾上腺皮质激素的分泌[17] 。本试验中骨折
患者应用马栗树籽提取物4 d后血清 IL-6 水平明显下降 , 而
对照组患者血清 IL-6 水平无明显变化。这可能与七叶皂苷
具有促进机体垂体-肾上腺素轴的反应有关。七叶皂苷还有
封闭血管的作用 , 增加血管张力 , 抗水肿 , 抗渗出 。本试验
中发现患者应用马栗树籽提取物后 , 肢体消胀明显。当然 ,
七叶皂苷还具有镇痛抗氧自由基有作用[ 1] 。
TNF 是重要的前炎性因子 , 有 2 种成分 TNF-α的
TNF-β , 其中 TNF-α主要来源于巨噬细胞 , TNF-β 来源于
T 细胞。它和许多其他炎症介质 IL-Iβ 、 IL-6 相互作用 , 而
在炎症中起中枢作用。 TNF-α在急性炎症中可以调节中性
粒细胞的功能 , 白细胞与 TNF-α在接触后可提高对低讯号
刺激的反应;通过上调黏附分子对血管上皮的作用 , 促使白
细胞黏附和外渗 、 毛细胞血管渗漏及组织损害。 血清中
TNF-α在骨折损伤后 1 h 就可以测到 , 在随后 6 h 内急剧上
升 , 持续时间短 , 约 1 d 到 1.5 d 即降至正常。 本试验发现
TNF 在手术后 6 h 升高明显 , 24 ～ 36 h 即降至接近正常 ,
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并且观察组与对照组的血清 TNF 水平在相应时间段无统计
学差异 , 应用迈之灵对血清 TNF 水平影响不大。考虑原因
是 TNF 在血浆中半衰期短 , 而迅速被肝脏灭活消除所致 ,
如果把时间段细分 , 如术后 6 h 后每2 h 测一次血清 TNF水
平 , 则观察组和对照组 TNF 值可能有较大差异。 TNF 升高
没有 IL-6明显 , 且持续时间短 , 但是 TNF 是一个始动因
子 , 致中性多核白细胞 (PM N)游走 , 激活上调黏附分子 ,
刺激 NO生成和释放更多的细胞因子和炎症介质。
IL-6 能与 TNF-α协同作用于广泛的微血管系统 , 使血
管内皮细胞被过度激活 , 将促使组织因子表达并激活外源型
凝血系统 , 加上血管内皮细胞表面受体 、 内皮细胞黏附因子
(ECAM-1)、 细胞间黏附分子 (ICAM-1)的表达也将促进
黏附 , 结果是造成微循环血栓形成及组织损伤 , 还能刺激血
管内皮收缩 , 间隙增宽 、 血管通透性增加 , 大分子物质进入
组织间隙。七叶皂苷可以很好拮抗 ATP 含量减少及磷脂酶
A2 的增加 , 减少炎症介质前体的释放 , 减少中性粒细胞黏
附与激活 , 保护静脉并可减少水肿。七叶皂苷能够促使合成
与蛋白聚糖退化之间的平衡 , 有助于形成合成网 , 加固毛细
血管壁和防止渗漏;提高静脉张力的作用。七叶皂苷还能抑
制核因子-KB (NF-KB)的活性 , 阻止 NF-KB 从胞浆进入
细胞核 , 从而减少炎症介质大量释放 , 随着 TNF-α, IL-6
下降 , 软组织损伤有所改善。
IL-1 主要是单核巨噬细胞系统产生 , IL-1β 启动炎症级
联反应 , 可活化中性粒细胞 , 上调黏附因子表达 , 并刺激趋
化因子 , 但 IL-1β 不直接促进凋亡 , IL-1β 在急生炎症中起
重要作用 , IL-1β 首先出现于原发器官 (部位), 随后大量产
生于其他脏器 , 其分布及功能如同 TNF-α。
骨折合并软组织胀肿患者急性期有明显的细胞因子的变
化 , 其中 IL-6水平的升高明显 , 与损伤程度相关 , 持续时
间长 , 血清 TNF 及 IL-1β 水平有一定程度升高 , 持续时间
短。马栗树籽提取物治疗后 IL-6 水平下降明显 , 与马栗树
籽提取物的抗炎 、 抗水肿 、 抗氧自由基等作用有关。由于肝
脏的灭活作用 , 七叶皂苷对 IL-1β 、 TNF 水平的影响未能得
以揭示。尽管如此 , IL-1β 及 TNF 作为炎症的始动因子 , 其
重要性应予以充分重视。
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(收稿日期:2009-06-08;修回日期:2009-08-24)
C ent ral S outh Ph arm acy.October 2009 , Vol.7 No.10　中南药学 2009年 10月第 7卷第 10期