全 文 ：小油桐叶石油醚萃取物的 GC-MS分析
王兆玉1 ,陈飞龙 2 ,梁文丰 1 ,汪 洋1 ,金嘉怡 1 ,谢晓滨 1 ,林敬明3＊
(1.广东药学院生命科学与生物制药学院 ,广东 广州 510006;2.南方医科大学中医药学院 ,广东 广州
510515;3.南方医科大学珠江医院药剂科 ,广东 广州 510282)
摘要 目的:分析小油桐叶的石油醚萃取物成分。方法:采用 GC-MS法分析小油桐叶的石油醚萃取物。结果:
分析石油醚提取物得到 76个峰 ,确定了其中 46种化合物(占 60.53%), 其中含量占 1%以上的有 13种化合物 ,占
所有化合物总量的 74.99%。含量最为丰富的 3种物质依次为:α-维生素 E(24.68%)、谷甾醇(16.49%)、角鲨烯
(8.93%)。此外 , 检测出小油桐叶还含有 β、γ和 δ3种构型的维生素 E, 维生素 E的总相对含量高达 29.11%。结
论:小油桐叶富含多种生物活性成分 , 有较高的开发利用价值。
关键词 小油桐叶;石油醚萃取;GC-MS
中图分类号:R284.1/R284.2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2009)07-1077-03
收稿日期:2008-10-24基金项目:广东省自然科学基金项目(7300489)作者简介:王兆玉(1975-),女,博士 ,主要从事能源与环境生物技术领域的研究;E-mail:wangzhoyu77@yahoo.com.cn。＊通讯作者:林敬明 , Tel:020-61643557, E-mail:linjm1231@21cn.com。
大戟科植物小油桐(JatrophacurcusL.)在民间
药用的历史由来已久〔1〕。由于其种子富含油脂 ,现
在它正作为一种适宜在贫瘠的干热河谷地区种植的
能源植物而日益受到重视。本研究采用气相色谱-
质谱联用(GC-MS)技术分析小油桐叶石油醚提取
物的成分 ,以期为综合开发利用小油桐生物活性物
质提供有益参考 。
1 材料与仪器
1.1 材料 实验用小油桐叶于 2008年 10月采自
中山大学珠海小油桐实验基地 ,经笔者鉴定为大戟
科植物小油桐 JatrophacurcusL.的叶。小油桐叶经
洗净 、阴凉处自然风干后 ,粉碎过 20目筛备用;所用
试剂为国产分析纯。
1.2 仪器 HP6890 /5973气相色谱质谱联用仪
(美国 Agilent公司);国产 SE-54毛细石英管柱(25
m×250 μm×0.25 μm);JPCT0620超声波发生器
(武汉嘉鹏电子有限公司)。
2 方法
2.1 石油醚超声萃取 以石油醚(60 ～ 90℃)为溶
剂 ,按照料液比 1∶8,超声波(40kHz)辅助提取 30
min后抽滤 ,将滤渣按照上述方法再抽提 2次 。合
并 3次滤液 ,浓缩提物至 1/30体积。
2.2 小油桐石油醚萃取物的 GC-MS分析 GC-
MS分析色谱条件:手动进样 ,进样量 1 μL;进样口
为分流模式 ,分流比 0.5∶1;进样口温度 250℃;载气
He,载气为恒流模式 ,柱流速 1.0mL/min,平均线速
41 cm/sec;分析柱为国产 SE-54毛细石英管柱(25m
×250μm×0.25μm);升温程序为:初始温度 120℃,
以 5℃/min升至 260℃,保持 27 min,共计 55min。
质谱条件:质谱电离能量 70 eV,电子倍增管电
压 1905V,离子源温度 230℃,四极杆温度 150℃,扫
描范围 30 ～ 550 m/z。
使用数据库为 Wiley275, NIST09数据库 。
3 结果与分析
应用 GC-MS技术 ,从石油醚萃取物中分析得到
76个峰 。应用计算机联机信息检索 ,确定了其中 46
种化合物(检出率为 60.53%);并用峰面积归一化
法确定了各成分的相对分子质量 ,见表 1。
4 讨论
民间应用证明小油桐内含物具有广泛的生理活
性作用 ,随着小油桐作为生物柴油植物被广为栽培 ,
关于其所含的化学活性物质也被越来越多地研究和
报道 。廖金旭等 〔2〕曾经对小油桐叶的 CO2超临界
萃取物进行 GC-MS分析 ,共检测出 14种化合物。
本研究共得到 76个化合物的峰 ,并确定了其中的
46种化合物 。经检测 ,叶提取物中含量占 1%以上
的有 16种化合物 ,占所有化合物量的 74.99%;其
中含量最为丰富的 3种物质依次为:α-维生素 E
(24.68%)、谷甾醇 (16.49%)、角鲨烯 (8.93%)。
此外 ,检测出小油桐叶还含有 β、γ、δ3种构型的维
生素 E,维生素 E的总相对含量高达 29.11%。
本研究表明 ,小油桐叶富含多种生物活性物质。
在今后的研究中 ,有必要对小油桐叶所含酮类 、苷类
等物质做进一步分析研究。
·1077·JournalofChineseMedicinalMaterials 第 32卷第 7期 2009年 7月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2009.07.049
表 1 小油桐叶石油醚萃取物成分与相对含量
序号 峰号 相对含量/% 化合物名称
1 1 0.10 香叶烯 Geranylacetone
2 2 0.04 β-紫罗兰酮 beta.-Ionone
3 3 0.10 4-甲基-2, 6-二叔丁基苯酚 4-Methyl-2, 6-di-tert-burt-butylphenol
4 5 0.04 二氢猕猴桃内酯 Actinidiolide, dihydro-
5 7 0.04 十五醛 Pentadecanal
6 8 0.12 豆蔻酸 Tetradecanoicacid
7 11 0.38 六氢法尼基丙酮 Hexahydrofarnesylacetone
8 12 0.11 新植二烯 Neophytadiene
9 13 0.28 法尼基丙酮 Farnesylacetone
10 15 0.42 邻苯二甲酸二丁酯 Butylphthalate
11 16 2.69 棕榈酸 Palmiticacid
12 18 0.28 棕榈乙酸 Hexadecanoicacid, ethylester
13 19 0.04 十七烷酸 Heptadecanoicacid
14 21 0.05 二十一烷 Heneiocosane
15 22 1.34 叶绿醇 Phytol
16 23 1.79 亚油酸 Linoleicacid
17 24 0.97 油酸 Oleicacid
18 25 0.17 (Z, Z, Z)-9, 12, 15-十八烷三烯酸乙酯 9, 12, 15-Octadecatrienoicacid, ethylester, (Z, Z, Z)-
19 26 0.72 硬脂酸 Stearicacid
20 29 0.30 (E, E, E)-2, 6, 10, 14-四烯-3, 7, 11, 16-四甲基-十六烷-1-醇Hexadeca-2, 6, 10, 14-tetraen-1-ol, 3, 7, 11, 16-tetramethyl-, (E, E, E)-
21 31 0.05 二十二烷 Docosane
22 34 0.33 4, 8, 12, 16-四甲基十七碳烷-4-交酯 4, 8, 12, 16-Tetramethylheptadecan-4-olide
23 35 0.17 花生酸 Eiacosanoicacid
24 36 0.34 (E, E, E)-2, 6, 10, 14-十六碳烷四烯-1-醇-3, 7, 11, 15-四甲基乙酸2, 6, 10, 14-Hexadecatetraen-1-ol, 3, 7, 11, 15-tetramethyl-, acetate, (E, E, E)-
25 37 0.08 2-甲氧-6-(3′, 5′-二甲氧基)苯甲酸 2-Methoxy-6-(3′, 5′-dimethoxyphenyl)methylberizoicacid
26 38 0.14 二十五烷 Pentacosane
27 41 0.12 二十六烷 Hexacosane
28 42 0.46 二十七烷 Heptacosane
29 45 0.16 二十八烷 Octacosane
30 46 8.93 角鲨烯 Squalen
31 50 1.71 二十九烷 Nonacosane
32 53 0.28 δ-维生素 E delta.-Tocopherol
33 59 0.43 β-维生素 E beta.-Tocopherol
34 60 3.72 γ-维生素 E gamma.-Tocopherol
35 61 24.68 α-维生素 E alpha.-Tocopherol
36 62 3.63 菜油甾醇 Campesterol
37 64 2.23 β-豆甾醇 beta.-Stigmasterol
38 66 16.49 谷甾醇 Clionasterol
39 67 4.29 β-香树素 beta.-Amyrin
40 68 0.79 叶绿醌 Phytonadione
41 69 0.39 二氢菠菜留醇 Dihydrochondrilasterol
42 70 0.98 α-香树素 alpha.-Amyrin
43 72 2.05 24-亚甲基环木菠萝烷醇 24-Methylenecycloartanol
44 73 1.44 二甲基 2, 3-二(1, 3-二甲基吲哚-2-基)延胡索酸Dimethyl2, 3-bis(1, 3-dimethylindol-2-yl)fumarate
45 75 0.95 2-三十三烷酮 2-Tritriacontanone
46 76 0.92 3β-羟基-豆甾-5-烯-7-酮 Stigmast-5-en-7-one, 3.beta-hydroxy-
·1078· JournalofChineseMedicinalMaterials 第 32卷第 7期 2009年 7月
参 考 文 献
[ 1] 王兆玉 ,林敬明 , 徐增富 .能源植物小油桐生物活性成
分与药用价值研究进展 [ J] .中药材 , 2007, 30(10):
1332-1336.
[ 2] 廖金旭 , 颜钫 ,徐莺 , 等.麻疯树叶二氧化碳超临界萃取
物的化学成分分析 [ J] .化学研究与应用 , 2003, 15(5):
704-705.
青果药材的质量控制研究
申 放 ,黄婉锋
(广东省佛山市药品检验所 , 广东 佛山 528000)
摘要 目的:对青果药材进行薄层色谱鉴别及 RP-HPLC含量测定研究 ,以全面客观评价青果药材的质量。方
法:薄层色谱鉴别以青果对照药材及东莨菪内酯对照品为对照 , 以环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(6∶10∶7∶1.2)
为展开剂 , 在紫外 365 nm下检视;含量测定采用 HypersilODS2色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为甲醇-
0.25%冰醋酸溶液(5∶95), 流速:1.0mL/min, 检测波长:271 nm。 结果:青果药材中在对照药材 、东莨菪内酯对照
品相应位置上有相应的荧光斑点;含量测定中没食子酸在 0.07035 ～ 0.70350 μg呈良好的线性关系 , 样品中没食
子酸峰分离度良好。结论:首次建立了青果药材中东莨菪内酯的薄层色谱鉴别方法 , 并进行了没食子酸的含量测
定 , 提供了全面控制青果药材的科学依据。
关键词 青果;东莨菪内酯;薄层色谱;没食子酸;HPLC
中图分类号:R284.1/R282.5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2009)07-1079-03
收稿日期:2009-03-18作者简介:申放(1962-),男 ,副主任药师 ,主要从事药品监督检验工作;Tel:0757-83356538。
青果为橄榄科植物橄榄 CanariumalbumRae-
usch.的干燥成熟果实 ,收载于 2005年版中国药典
一部 ,具有清热 、利咽 、生津 、解毒的功效〔1〕。现代
研究表明 ,青果所含东莨菪内酯具有消肿 、抗炎及镇
痛作用 〔2〕;没食子酸具有抗炎 、抗肿瘤 、杀虫等药理
作用〔3〕 ,与青果的功能主治相一致 。但是 2005年版
中国药典收载的青果标准 ,仅有性状和显微鉴别两
项 ,对于青果的上述有效成分没有指标控制 ,可能导
致市场上的药材质量差异。有鉴于此 ,本文对青果
药材中所含东莨菪内酯进行了薄层色谱鉴别以及对
没食子酸进行了 RP-HPLC含量测定研究 ,以期为青
果药材的采购 、生产 、临床应用提供全面 、客观和科
学的质量控制依据。
1 仪器与材料
1.1 仪器 Agilent1100高效液相色谱仪 , KB-
250B超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
1.2 材料 甲醇为色谱纯 ,冰醋酸为分析纯 ,水为
超纯水 ,其余试剂均为分析纯;青果对照药材采集于
广东省潮州市归湖镇金光山 ,批号:20080716 ,经笔
者鉴定为橄榄科植物橄榄 CanariumalbumRaeusch.
的干燥成熟果实 。东莨菪内酯对照品 、没食子酸对
照品均购自中国药品生物制品检定所 ,批号分别为:
768-200103、110831-200302,测试药材购自广东 、四
川 、福建 、广西 ,经笔者鉴定均为橄榄科橄榄 Canari-
umalbumRaeusch.的干燥果实 。见表 1。
2 方法与结果
2.1 薄层色谱鉴别 取青果药材粉末 3 g,加浓氨
试液 2 mL润湿 ,加二氯甲烷 20 mL,超声处理 20
min,滤过 ,滤液在水浴上挥干。残渣加二氯甲烷 1
mL使溶解 ,即得。另取青果对照药材 3g,同法制成
对照药材溶液 。再取东莨菪内酯对照品适量 ,加二
氯甲烷制成每 1 mL含 0.2 mg溶液 ,作为对照品溶
液。分别吸取供试品 、对照药材溶液各 10 μL,对照
品 1 μL,分别点于同一硅胶 G薄层板上 ,以环己烷 -
三氯甲烷 -乙酸乙酯-甲酸(6∶10∶7∶1.2)为展开剂 ,
展开 ,取出。晾干 ,置紫外光灯(365 nm)下检视。
结果供试品在与对照药材相应位置上显相同颜色的
两个主斑点 ,与东莨菪内酯对照品对应位置上显相
同颜色的斑点 。见图 1。
2.2 含量测定 [ 4]
2.2.1 色谱条件与系统适用性:色谱柱:Hypersil
ODS2(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 流动相:甲醇 -
0.25%冰醋酸溶液(5∶95),柱温:30℃,检测波长:
271 nm。理论塔板数按没食子酸计算应不低于
·1079·JournalofChineseMedicinalMaterials 第 32卷第 7期 2009年 7月