全 文 ：
第 35卷第 3期 湖南农业大学学报(自然科学版) Vol.35 No.3
2009 年 6月 Journal of Hunan Agricultural University (Natural Sciences) Jun．2009
文章编号：1007-1032(2009)03-0295-04
珙桐叶水提物的抗氧化性能
曾 军 a，石国荣 a，b*，张湘元 a，熊兴耀 b
(湖南农业大学 a.理学院；b.作物种质创新与资源利用国家重点实验室培育基地，湖南 长沙 410128)
摘 要：通过测定珙桐叶水提物粗品及其乙酸乙酯分部和水分部的还原能力、清除羟自由基和超氧阴离子自由
基的能力来研究其抗氧化性能．结果显示，100 µg珙桐叶水提物乙酸乙酯分部的还原能力与 60 µg V-C相当，其
清除羟自由基的 IC50值为 V-C的 2倍，但清除超氧阴离子自由基的能力较弱．珙桐叶水提物粗品及其乙酸乙酯分
部和水分部的还原能力、清除羟自由基的能力与其多酚含量呈正相关．
关 键 词：珙桐叶；还原能力；羟自由基；超氧阴离子
中图分类号：R284.1 文献标识码：A

Antioxidant property of water extract of Davidia involucrata Baill leaves
ZENG Juna，SHI Guo-ronga，b*，ZHANG Xiang-yuana，XIONG Xing-yaob
(a.College of Sciences；b.Cultivation Base of the State Key Laboratory of Crop Germplasm Innovation and Plant
Resource Utilization，HNAU，Changsha 410128，China)
Abstract：Antioxidant activities of the crude extract，ethyl acetate fraction and water fraction of water extract from
Davidia involucrata Baill leaves were evaluated by determining its total reducing power，the superoxide anion radical
and hydroxyl radical scavenging activities. Results showed that 100 µg ethyl acetate fraction of water extract exhibited
reducing activity = that produced by 60 µg L-ascorbic acid，its IC50 concentration of quenching hydroxyl radicals was
twice of the positive control V-C. However，its superoxide anion radical scavenging activity was low. The total reducing
power and hydroxyl radical scavenging activities were positively correlated with the respective total phenolic content.
Key words：Davidia involucrata Baill leaves；reducing power；hydroxyl radical；superoxide radical

珙桐(Davidia involucrata Baill)，又名鸽子树，是
中国特有的古老孑遗植物，世界著名的观赏植物[1]，
其种子、果皮能榨油，果实和果内皮可提炼香精，
果核内含有高蛋白质；花是蜜源，树皮与果皮可提
取拷胶或作活性炭原料[2]．目前，已从珙桐枝中提
取分离得到了 9种化合物[3-4]，从其叶提取物中分离
得到了 7种化合物[5-6]．从珙桐叶甲醇提取物中得到
的喹啉类生物碱甙(pumiloside)是抗肿瘤物质喜树
碱的生物合成前体．珙桐这一第三冰川期植物能够
存活至今，一定有其独特的抗菌、抗病毒的能力，
但关于其药理学活性的研究尚未见报道，而与其同
科的喜树属和紫树属的抗癌、抗病毒等生物活性已
为人们所知，并加以利用[7]．为此，笔者对珙桐叶
水提物的抗氧化性能进行了研究，旨在为天然抗氧
化剂的开发提供依据．
1 材料与方法
1.1 材 料
2007 年 10 月从湖南省张家界采集珙桐老叶，
于通风处自然阴干，用粉碎机粉碎，置干燥器内避
光保存备用．
Fonlin-Ciocalteu试剂、碳酸钠、没食子酸、磷
酸缓冲液、铁氰化钾、三氯化铁、维生素 C、七水
硫酸亚铁、双氧水、水杨酸、四甲基乙二胺、三(羟
甲基)氨基甲烷、过硫酸铵、醋酸、对氨基苯磺酸、
α-萘胺，均为国产分析纯，水为二次蒸馏水．
收稿日期：2009-02-16
基金项目：湖南农业大学人才科学基金项目(07WD07)；
湖南师范大学化学生物学及中药分析教育部重点实验室开
放基金项目(KLCBTCMR2008-04)
作者简介：曾 军(1983-)，女，湖南常德人，硕士研究
生，主要从事天然产物提取及功能研究；*通讯作者，
grshi@163.com.
DOI:10.13331/j.cnki.jhau.2009.03.026


296 湖南农业大学学报(自然科学版) 2009年 6月
8904 型精密酸度计(中山集团)；UV-754 分光
光度计(上海精密科学仪器有限公司)；HH-4数显恒
温水浴锅(上海浦东物理光学仪器厂)；HEQ-C空气
浴振荡器(哈尔滨市东明医疗仪器厂)；AL204 电子
天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)；RE-52AA旋转
蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)；SHB-Ⅲ循环水式多
用真空泵、DLSB-5/10型低温冷却液循环泵(郑州长
城科工贸有限公司)．
1.2 方 法
1.2.1 样品的提取和纯化
称取 20 g珙桐叶干粉，25 ℃下以料液比 1 10∶
提取 3次，提取时间分别为 12、6、6 h，合并提取
液，浓缩并冻干．称取一定量水提物粗品用水溶解
后，再用乙酸乙酯萃取，分为乙酸乙酯分部和水分
部，分别浓缩冻干．以水为溶剂分别配成不同浓度
的粗提取物、乙酸乙酯分部和水分部溶液．
1.2.2 水提物多酚含量的测定
采用 Fonlin-Ciocalteu 法[8-9]测定水提物多酚含
量．在 10 mL试管中加入 2 mL不同浓度的样品溶
液和 0.5 mL Folin-Ciocalteu试剂，摇匀后再加入 3
mL Na2CO3溶液(1 mol/L)，用水定容．静置 15 min
后，在 765 nm 波长处测定吸光度．同时以没食子
酸为对照品，按标准曲线法，以多酚含量(y)与吸光
度值(x)建立线性回归方程：y = 0.040 3x－0.001 3，
R2=0.999 1．利用回归方程计算样品溶液中多酚的含
量，以mg /g表示．
1.2.3 还原能力的测定
采用铁氰化钾还原法[10-11]测定样品的还原能
力．分别取 1 mL不同浓度的样品溶液，加入 2.5
mL磷酸缓冲液(0.2 mol/L，pH6.6)和 2.5 mL 1%
K3 [Fe(CN)6]溶液，混匀后于 50 ℃水浴保温 20 min，
再加入 2.5 mL 10%三氯乙酸溶液和 1 mL 0.1%
FeCl3溶液，用水定容至 10 mL后，静置 1 h，在 700
nm 处测定吸光度．平行测定 3 次．在相同条件下
测定 V-C对照品的还原能力．
1.2.4 羟自由基(·OH)清除能力的测定
采用水杨酸法[12]测定样品溶液清除羟自由基
的能力．在 10 mL的试管中依次加入 0.5 mL FeSO4
溶液(5 mmol/L)，5 mL不同浓度的样品溶液和 0.5
mL H2O2(5 mmol/L)，摇匀，静置 10 min后，再加
入 2 mL 水杨酸溶液(10 mmol/L)，用水定容，摇
匀．10 min后，在 510 nm波长处以不加 H2O2和样
品溶液为参比测定吸光度．在相同条件下测定 V-C
对照品清除羟自由基的能力．平行测定 3次，按下
式计算珙桐叶水提物和 V-C对·OH的清除率(E)：
E=(1－(A1－A2)/A0)×100%.
式中：A0 为未加样品溶液时的吸光度；A1 为
样品溶液的吸光度；A2 为不加水杨酸时的吸光度．
1.2.5 超氧阴离子( 2O− ·)清除能力的测定
采用 AP-TEMED 体系法 [13]测定样品清除
2O
− ·自由基的能力．取 24 mL 1 mol/L HCl，36.6 g
三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)，0.23 mL 四甲基乙二胺
(TEMED)于 100 mL容量瓶中定容，配成试剂 A；
称取 0.14 g过硫酸铵(AP)，于 100 mL 容量瓶中用
水定容，配成试剂 B．取 0.4 mL 试剂 A，1.6 mL
试剂 B，反应 1 min 后，加入 2 mL不同浓度的样
品溶液，摇匀，再加入 0.4 mL盐酸羟胺(10 mmol/L)，
25 ℃下反应 20 min后，加入 2 mL对氨基苯磺酸(17
mmol/L)和 2 mL α-萘胺(7 mmol/L)，定容后于 25 ℃
下反应 25 min．在 510 nm波长处以不加 AP和样品
溶液为参比测定吸光度．在相同条件下测定 V-C对
照品清除超氧阴离子的能力．平行测定 3次．计算
珙桐叶水提物和 V-C对 2O− ·的清除率．
2 结果与分析
2.1 珙桐叶多酚含量
试验得知，珙桐叶水提物粗品中多酚含量较
高，1 g 珙桐叶水提物中多酚含量相当于(200.25±
3.42) mg的没食子酸．经过初步纯化后，乙酸乙酯
分部多酚含量为(367.65±4.39) mg/g，较水提物粗品
提高了 1.8 倍；水分部的多酚含量比粗提物稍低，
为(145.90±2.15) mg/g．
2.2 珙桐叶水提物的还原能力
图 1所示为珙桐叶水提物和V-C对照品的还原
能力，其中吸光度值越大，表示还原能力越强．
珙桐叶水提物具有一定的还原能力．在试验范
围内，珙桐叶水提物粗品及其乙酸乙酯分部和水分
部的还原力均随质量浓度的增加而增大．珙桐叶水


第 35卷第 3期 曾 军等 珙桐叶水提物的抗氧化性能 297
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
20 40 60 80 100
质量浓度 /(µg·mL－1)
吸
光
度
V-C 粗品
乙酸乙酯分部 水分部








图 1 珙桐叶水提物的还原力
Fig.1 Reducing power of water extract from Davidia involucrata Baill
leaves

提物粗品经过乙酸乙酯萃取纯化后，乙酸乙酯分部
的还原能力显著增强，而水分部的还原能力略有减
弱．从图 1还可以看出，100 µg/mL珙桐叶水提物
乙酸乙酯分部的还原能力与 60 µg/mL的V-C相当．
2.3 珙桐叶水提物对 ·OH 的清除能力
珙桐叶水提物粗品及其乙酸乙酯分部、水分部
和对照品 V-C对·OH的清除作用如图 2所示．珙桐
叶水提物粗品及其乙酸乙酯分部和水分部都能清
除·OH，且清除能力与多酚含量呈正相关关系．在
试验范围内，珙桐叶水提物粗品及其乙酸乙酯分部
和水分部对·OH的清除作用均随质量浓度的增加而
增大．珙桐叶水提物粗品和水分部对·OH清除作用
较弱，质量浓度为 240 µg/mL时，对·OH的清除率
为 44.04%和 41.14%；乙酸乙酯分部对·OH 的清除
作用较强，清除率达 50%的质量浓度(IC50)为 106.53










图 2 珙桐叶水提物对羟自由基的清除作用
Fig.2 Hydroxyl radical scavenging activity of water extract from
Davidia involucrata Baill leaves
µg/mL，约为 V-CIC50值(52.61 µg/mL)的 2倍．
2.4 珙桐叶水提物对 2O − ·的清除能力
图 3所示为珙桐叶水提物粗品及其乙酸乙酯分
部、水分部和阳性对照品 V-C对 2O− ·的清除作用．









图 3 珙桐叶水提物对超氧阴离子的清除作用
Fig.3 Superoxide anion radical scavenging activity of water extract
from Davidia involucrata Baill leaves

珙桐叶水提物粗品及其乙酸乙酯分部和水分
部都能清除 2O− ·，在试验范围内，对 2O− ·的清除作
用均随质量浓度增加而增强．其中，乙酸乙酯分部
对 2O− ·的清除作用较强，其 IC50 值为 0.509 4
mg/mL，比 V-C的 IC50值(0.030 6 mg/mL)大 15.6
倍．
3 结 论
珙桐叶水提物有一定的抗氧化能力，其乙酸乙
酯分部的抗氧化能力较粗品显著增强．在试验范围
内，珙桐叶水提物粗品及其乙酸乙酯分部和水分部
的还原力、对·OH 和 2O− ·的清除作用均随质量浓度
的增加而增强．100 µg珙桐叶水提物乙酸乙酯分部
的还原能力与 60 µg V-C相当，清除羟自由基的 IC50
值为 V-C的 2倍，但清除超氧阴离子自由基的能力
较弱．珙桐叶水提物经过乙酸乙酯萃取纯化后，乙
酸乙酯分部的还原能力、对·OH 和 2O− ·的清除作用
均显著增加，这可能与多酚的供氢能力有关．由此
可见，珙桐叶水提物的乙酸乙酯分部可以作为天然
的抗氧化剂，其抗氧化作用的主要成分及作用机理
有待进一步研究．
0
20
40
60
80
100
120
0 0.3 0.6 0.9 1.2 1.5
质量浓度 /(mg·mL－1)
清
除
率
/%
V-C 粗品
乙酸乙酯分部 水分部
0

0
20
40
60
80
100
120
0 50 100 150 200 250
质量浓度 /(µg·mL－1)
清
除
率
/%
V-C 粗品
乙酸乙酯分部 水分部
0



298 湖南农业大学学报(自然科学版) 2009年 6月
参考文献：
[1] 贺金生，林 洁，陈伟烈．我国珍稀特有植物珙桐的
现状及其保护[J]． 生物多样性，1995，3(4)：213-221．
[2] 唐晓军． 珙桐的特性与价值[J]．西南园艺，2002，30(3)：
54-55．
[3] 向桂琼，卢馥荪．中国特有植物珙桐化学成分研究
[J]．植物学报，1989，31(7)：540-543．
[4] 刘 荣，王从周，欧阳明安．珙桐枝皮中的生物碱甙
成分研究[J]．广西植物，2007，27(2)：277-280．
[5] 欧阳明安，周剑宁．珙桐叶中的黄酮甙成分[J]．广西
植物，2003，23(6)：568-570．
[6] 刘 荣，欧阳明安．珙桐叶中喹啉类生物碱甙- pumilo-
side结构鉴定[J]．亚热带植物科学，2006，35(1)： 35-38．
[7] 黄 江，刘 荣，王从周，等．珙桐科植物化学成分
研究进展[J]．亚热带植物科学，2005，34(2)：70-75．
[8] Tang Y T，Wu J，Kuo Y H，et al．Antioxidant activities
of natural phenolic compounds from Acacia confuse bark
[J]．Bioresource Technology，2007，98(5)：1120-1123．
[9] 傅冬和，黄建安，刘仲华．大小叶种茶儿茶素抗氧化
作用比较[J]．湖南农业大学学报：自然科学版，2002，
28(1)：29-31．
[10] Kuda T，Tsunekawa M，Goto H，et al．Antioxidant
properties of four edible alagas harvested in the Noto
Peninsula，Japan[J]．Journal of Food Composition and
Analysis，2005(18)：625-633．
[11] 刘 硕，蒋道松，李 娈．斑地锦与地锦总黄酮含量
及抗氧化活性比较[J]．湖南农业大学学报：自然科学
版，2007，33(3)：287-293．
[12] Smirnoff N，Cumbes Q J．Hydroxyl radical scavenging
activity of compatible solutes[J]．Phytochemistry，1989，
28(4)：1057-1060．
[13] 范智超，张志琪．川芎多糖的提取、纯化及抗氧化活
性的研究[J]．天然产物研究与开发，2005，17(5)：
561-563．

责任编辑：娄 敏
英文编辑：罗文翠

(上接第 294 页)
参考文献：
[1] 余送辉，甘 霖．华容皱皮柑[J]．中国南方果树，2003，
32(2)：21．
[2] 余送辉．柑橘地方良种华容皱皮柑的初步研究[D]．长
沙：湖南农业大学园艺园林学院，2003．
[3] 张鞍灵，高锦明，王姝清．黄酮类化合物的分布及开
发利用[J]．西北林学院学报，2005，15(1)：69-74．
[4] 李 红，敖海英，赵 征．柑橘类黄酮功能及利用的
研究进展[J]．食品研究与开发，2003，24(1)：18-20．
[5] 王仁才，欧阳建文，成智涛，等．超临界流体萃取技
术在果实功效成分提取中的应用[J]．湖南农业大学学
报：自然科学版，2006，32(2)：225-228．
[6] 张秀荣．黄酮类化合物心血管作用的研究进展[J]．心
血管病学进展，2003，24(3)：173-175．
[7] 蓝航莲，孙树侠．柑橘类黄酮的生理活性和研究进展
[J]．中国食物与营养，2003(2)：17．
[8] 周鸣谦，王仁才，邓子牛，等．不同品种柑橘落果的
药用成分研究[J]．湖南农业大学学报：自然科学版，
2008，34(4)：438-441．
[9] 吴桂苹．柑橘果实主要类黄酮成分检测及含量分析
[D]．重庆：西南大学，2007．
[10] Anagnostopoulou M A，Kefalas P，Kokkalou E，et al．Analysis
of antioxidant compounds in sweet orange peel by
HPLC-diode array detection-electrospray ionization mass
spectrometry[J]．Biomedical Chromatography，2004，
19(2)：138-148．
[11] Nogata Y，Sakamoto K，Shiratsuchi H，et al． Flavonoids
composition of fruit tissues of Citrus species[J]．Biosci
Biotechnol Biochem，2006，70(1)：178-192．
[12] 王 青．四种橘属生药品质评价及相关提取物研究
[D]．沈阳：沈阳药科大学中药学院，2005：32-33．
[13] 付小梅，吴志瑰，褚小兰，等．枳壳中黄酮类成分的
研究[J]．中药材，2006，29(11)：1187-1188．
[14] 许永兴，瞿海斌，程翼宇．从枳壳中分离纯化新橙皮
苷对照品[J]．中草药，2005，36(4)：525-527．

责任编辑：王赛群
英文编辑：罗文翠