全 文 ：收稿日期:2011 － 10 － 21
作者简介:刘秀芳 (1985 －) ，女，湖南湘潭人;硕士，主要从事植物遗传
育种及生物技术研究;E-mail:liuxiufang02101@ 126． com。
通讯作者:林文革，E-mail:smlwg@ vip． 163． com。
黄花倒水莲(Polygala fallax Hemsl)组培快繁技术研究
刘秀芳1， 林文革1， 苏明华2， 陈绍煌3， 吴美华1
(1．地缘(厦门)生物科技有限公司， 厦门 363000; 2．福建省亚热带植物研究所， 厦门 363006;
3．福建省三明林业学校， 福建 三明 366000)
摘要:以当年生黄花倒水莲幼嫩带腋芽茎段作为外植体，开展组织培养试验研究。结果表明:最佳外植体诱导培养基为
1 /2 MS + BA 2． 0 mg /L + NAA 0． 1 mg /L，诱导率可达 95． 1%;最佳增殖培养基为WPM + BA 1． 5 mg /L + NAA 0． 1 mg /L，增
殖系数为 6． 12，周期为 25 d，不定芽生长状况好;最佳生根培养基为 1 /2 WPM + IBA 0． 1 mg /L + ABT 0． 4 mg /L ，生根率为
95． 67%;以泥炭土∶黄泥土∶珍珠岩(2∶ 1∶ 1)为移栽基质，移栽成活率可达 92． 6%，苗木长势好，叶色绿。
关键词: 黄花倒水莲;药用植物;组织培养;快繁
中图分类号: S 722． 8 + 9 文献标志码: A 文章编号: 1001 － 4705(2012)02-0057-04
Study on Tissue Culture Techniques for Polygala fallax Hemsl
LIU Xiu-fang1，LIN Wen-ge1，SU Ming-hua2，CHEN Shao-huang3，WU Mei-hua1
(1． Diyuan (Xiamen)Biotechnology Company Ltd．，Xiamen 361006，China;
2． Fujian Institute of Subtropical Botany，Xiamen 361006，China;
3． Fujian Sanming Forestry School，Sanming Fujian 366000，China)
Abstract:Stems with axillary buds from Polygala fallax Hemsl were used as explants for tissue culture． The
results showed that the suitable medium of explants inducing was 1 /2 MS supplemented with BA 2． 0 mg /Land
NAA 0． 1 mg /L，and the inducing rate was 95． 1% ． The WPM supplemented with BA 1． 5 mg /L and NAA 0． 1
mg /Lwas the optimized proliferating medium with multiplication coefficient being 6． 12 and the growth cycle
being 25 d，and the shoots grew well． The best rooting medium was 1 /2 WPM supplemented with IBA 0． 1 mg /L
and ABT 0． 4 mg /L，and the rooting rate was 95． 67% ． The plantlets were transplanted in mixture media with
peat，yellow soil and perlite (2∶ 1∶ 1) ，and the survival rate was 92． 6% ．
Key words: Polygala fallax Hemsl;medicinal plant;tissue culture;rapid propagation
黄花倒水莲(Polygala fallax Hemsl．)属远志科
(Polygalaceae)远志属(Polygala)植物，别名黄花参、
鸡仔树、吊吊黄、黄花吊水莲、观音串、黄花大远志
等［1］，分布于湖南、福建、广西、江西、广东和云南等
地，生于山坡疏林下或沟谷丛林中。黄花倒水莲属珍
贵中药材，药用其全草［2］;具有补益、强壮、祛湿、散瘀
功效，主治虚弱虚肿、急慢性肝炎、腰腿酸痛、跌打损
伤［3］;黄花倒水莲提取物具活血、抗炎［4］、抗血脂作
用［5］，同时通过小鼠实验表明黄花倒水莲具有增强免
疫［6］及耐缺氧等作用［7］。
黄花倒水莲药用价值早被民间所认知，近年来对
其药用的日益重视，市场需求量大，而目前栽培仍以种
子繁殖为主，种子产量低，采收困难，野生资源亦有限，
导致资源严重短缺［8］。选取黄花倒水莲优株进行无
性繁殖，既能快速繁殖苗木，且能保持其优良性状，是
当前迅速扩大苗木供应以及种植规模的关键途径。然
而，目前国内外关于黄花倒水莲研究主要集中于药用
成分及药用机理等方面，而组织培养方面，仅见同属植
物远志有相关报道［9］。因此，本研究选取综合性状优
良的黄花倒水莲植株，以带腋芽(未萌发)茎段作为外
植体，通过系列试验揭示其组培快繁技术，为黄花倒水
莲优质苗木的规模化生产乃至资源培育与利用奠定
基础。
1 材料与方法
试验材料为长势好的黄花倒水莲植株。
1． 1 外植体采集及消毒
于 4 月晴天取带腋芽幼嫩茎段作为外植体，用饱
和洗涤液浸泡处理 10 min，用软毛刷轻轻刷洗茎段表
面，流水冲洗 30 min，置于超净工作台上，剪成带 1 ～ 2
·75·
研究报告 刘秀芳 等:黄花倒水莲(Polygala fallax Hemsl)组培快繁技术研究
个节间的茎段，0． 1% KMnO4 处理 5 min，无菌水冲洗
2 遍，75%乙醇处理 20 s，再用 0． 1%升汞浸泡处理 10
min，无菌水冲洗 6 遍，接种于芽诱导培养基上。
1． 2 培养基及培养条件
1． 2． 1 芽诱导培养基
设置①1 /2 MS、②1 /2 MS + BA 1． 0 mg /L + NAA
0． 1 mg /L、③1 /2 MS + BA 2． 0 mg /L + NAA 0． 1 mg /L、
④1 /2 MS + BA 3． 0 mg /L + NAA 0． 1 mg /L、⑤1 /2 MS +
BA 4． 0 mg /L + NAA 0． 1 mg /L 五个处理，每处理 50
瓶，每瓶接种 1 个茎段外植体。30 d后对无菌率(未污
染外植体数 /接种外植体数)、诱导率(诱导成芽外植
体数 /未污染外植体数)及不定芽生长状况进行观察
统计。
1． 2． 2 增殖培养基
以木本植物用培养基(WPM)为基本培养基，添加
BA(1． 0、1． 5、2． 0 mg /L)及 NAA(0、0． 1、0． 2 mg /L)作
双因素组合试验，同时以空白 WPM 培养基作为对照，
每个处理 3 次重复，每次重复 5 瓶，每瓶接种 10 个单
芽，25 d后对增殖系数及生长状况进行观察统计。
1． 2． 3 生根培养基
以 1 /2 WPM为基本培养基，添加 IBA(0． 1、0． 2、
0． 3 mg /L)及 ABT 生根粉 1 号(0、0． 2、0． 4 mg /L)做双
因素组合试验，以 1 /2 WPM 空白培养基作对照，每个
处理 3 次重复，每次重复 10 瓶，每瓶接种 10 个不定单
芽(长 2 ～ 3 cm) ，25 d 后统计生根率，观察根系生长
状况。
以上培养基中均添加白砂糖 30 g /L(生根培养基
添加 15 g /L) ，卡拉胶 6． 5 g /L，调节 pH 值 5． 8 ～ 6． 0。
培养条件为温度(25 ± 1)℃，光照时间 11 h /d，光照强
度 3 000 lx。
1． 3 炼苗及移栽
待生根瓶苗 80%长出根原基时进行炼苗，7 d 后
将瓶苗轻轻夹出，洗净根部培养基，进行移栽。移栽基
质为:Ⅰ泥炭土 ∶ 珍珠岩(3 ∶ 1) ，Ⅱ黄泥土 ∶ 珍珠岩
(3∶ 1) ，Ⅲ泥炭土∶黄泥土∶珍珠岩(2∶ 1∶ 1) ，Ⅳ泥炭土∶
黄泥土∶珍珠岩(1 ∶ 2 ∶ 1) ;每处理 3 次重复，每次重复
500 株，移栽后做好田间温湿度管理，环境温度 25 ℃
左右，喷雾保湿，保持空气湿度 85% ～ 95%，覆盖遮阴
率 70%遮阳网，每 7 d喷洒 1 次广谱杀菌剂(70%多菌
灵、70%百菌清、70%甲基托布津 1 000 倍液交替使
用) ，30 d后长出新根，浇 1 次两倍MS大量溶液，约5 d
后长出新叶，此时统计成活率，观察苗木长势。
1． 4 试验数据统计方法
应用 Excell软件对试验数据进行方差分析，用新
复极差法进行多重比较。
2 结果与分析
2． 1 不定芽诱导
从表 1 可以看出，BA浓度对外植体芽诱导具有明
显影响，BA浓度为 0 ～ 2 mg /L 范围内，诱导率随浓度
升高而升高，且一定浓度 BA 可诱导外植体产生多芽
(图 1-1) ;当 BA浓度为 3 ～ 4 mg /L 时，易诱导产生玻
璃化不定芽，基部诱导产生无效愈伤组织，不利于外植
体诱导成芽。③号即 1 /2 MS + BA 2． 0 mg /L + NAA
0． 1 mg /L为最佳诱导培养基，诱导率可达 95． 1%，且
60%为多芽。
表 1 初代培养基对黄花倒水莲外植体芽诱导的影响
编号
接种量
(个)
未污染量
(个)
诱导成芽
量(个)
诱导率
(%) 生长状况
① 50 37 30 81． 1 单芽
② 50 40 36 90． 0 10%为多芽 10%
③ 50 41 39 95． 1 60%为多芽 60%
④ 50 38 26 68． 4 20%玻璃化，褐色愈伤
⑤ 50 43 21 48． 8 45%玻璃化，褐色愈伤
2． 2 增殖培养
将外植体诱导产生的不定芽转入增殖培养基进行
增殖培养。从表 2 可看出:在未添加激素的空白 WPM
培养基上，不定芽能正常生长，但增殖系数低，仅为
1． 62;附加 BA浓度在一定范围内(0 ～ 1． 5 mg /L) ，增
殖系数随浓度升高而增加，而随浓度继续升高(2． 0
mg /L) ，增殖系数反而下降，并出现畸形芽;同时附加
低浓度 0． 1 mg /L NAA 能提高增殖系数及瓶苗质量，
附加0． 2 mg /L的 NAA，则诱导产生褐色愈伤组织，降
低增殖系数及瓶苗质量。
表 2 BA及 NAA对黄花倒水莲不定芽增殖的影响
处理
BA
(mg /L)
NAA
(mg /L) 增殖系数 生长状况
1 0 0 1． 62 + + +
2 1． 0 0 3． 59 e E + + +
3 1． 0 0． 1 3． 80 d DE + + + +
4 1． 0 0． 2 3． 42 e E + + +
5 1． 5 0 5． 23 b B + + +
6 1． 5 0． 1 6． 12 a A + + + +
7 1． 5 0． 2 5． 11 b B + + +
8 2． 0 0 4． 47 c C + +
9 2． 0 0． 1 5． 12 b B + +
10 2． 0 0． 2 3． 92 d D +
注:(1)基本培养基为 WPM;(2)表中字母为 Duncan 多重比较结果，
小写字母为 0． 05 水平上显著，大写字母为 0． 01 水平上显著，下同;
(3)生长状况列:“ +”不定芽为生长状况差，基部褐色愈伤组织多，
10%畸形芽，颜色发黄;“ + +”不定芽为生长状况一般，基部有一定
量愈伤组织，10%畸形芽，颜色基本正常;“ + + +”为不定芽生长状
况良好，颜色较绿;“ + + + +”为不定芽生长状况好，颜色亮绿。
·85·
第 31 卷 第 2 期 2012 年 2 月 种 子 (Seed) Vol． 31 No． 2 Feb． 2012
BA 浓度、NAA 浓度及其交互作用对黄花倒水莲
增殖系数均存在极显著影响(p ＜ 0． 01)。多重比较结
果(表 2)表明:6 号处理的增殖系数最大，极显著高于
其它处理。对瓶苗生长状况进行观察，6 号处理不定
芽生长状况好，颜色亮绿(图 1-2)。因此，最佳增殖培
养基为 6 号处理，即 WPM + BA 1． 5 mg /L + NAA 0． 1
mg /L，增殖系数为 6． 12，周期为 25 d。
2． 3 生根诱导
对长 2 ～ 3 cm、生长正常的不定芽进行生根培养。
从表 3 可以看出，未添加激素时，无根系产生;附加一
定浓度的生长素，能诱导不定芽生根;使用单一激素
IBA，浓度在 0． 1 ～ 0． 3 mg /L 范围内，生根率随浓度升
高而升高，且基部无愈伤组织产生;随浓度继续升高，
生根率降低，基部产生愈伤组织;附加一定浓度的
ABT，均产生毛细须根。
IBA浓度、ABT 浓度及其交互作用对黄花倒水莲
生根率均存在极显著差异(p ＜ 0． 01)。多重比较结果
表明，4 号处理生根率最高，与 3 号、6 号处理差异显著
(p ＜ 0． 05) ，与其它处理均差异极显著。对瓶苗进行
观察，4 号处理瓶苗基部无愈伤组织产生，根系较粗、
有毛细须根产生(图 1-3、1-4)。因此，最佳生根培养
基为 4 号，即 1 /2 WPM + IBA 0． 1 mg /L + ABT 0． 4 mg /
L，生根率为 95． 67%，根系质量高。
表 3 IBA、ABT对黄花倒水莲不定芽生根的影响
处理
IBA
(mg /L)
ABT
(mg /L)
生根率
(%)
生根
状况
愈伤组织
情况
1 0 0 0 细弱 无
2 0． 1 0 63． 33 d C 细弱 无
3 0． 1 0． 2 89． 33 b A B 较粗、有毛细须根 无
4 0． 1 0． 4 95． 67 a A 较粗、有毛细须根 无
5 0． 3 0 84． 33 b B 细弱 无
6 0． 3 0． 2 90． 67 b AB 粗壮、有毛细须根 少量
7 0． 3 0． 4 85． 33 c B 粗、短、有毛细须根 少量
8 0． 5 0 72． 33 d C 粗、短 少量
9 0． 5 0． 2 68． 33 d C 粗、短、有毛细须根 大量
10 0． 5 0． 4 57 e D 粗、短、有毛细须根 大量
注:基本培养基为 1 /2 WPM。
2． 4 试管苗移栽
对黄花倒水莲生根瓶苗进行炼苗移栽，从表 4 可
看出，移栽基质对其移栽成活率存在极显著差异(p ＜
0． 01)。多重比较结果表明，Ⅲ号移栽成活率最高，极
显著于其它组合。因此，最佳移栽基质为泥炭土∶黄泥
土∶珍珠岩(2∶ 1 ∶ 1) ，移栽成活率达 92． 6%，且茎秆呈
半木质化，叶色浓绿(图 1-5、1-6)。
表 4 不同移栽基质对黄花倒水莲试管苗移栽的影响
编号 基质
移栽成活率
(%) 生长状况
Ⅰ 泥炭土∶珍珠岩(3∶ 1) 88． 2 bB 嫩，叶色绿
Ⅱ 黄泥土∶珍珠岩(3∶ 1) 76． 0 dD 叶色略黄，掉叶
Ⅲ 泥炭土∶黄泥土∶珍珠岩(2∶ 1∶ 1) 92． 6 aA 茎秆半木质化，叶色绿
Ⅳ 泥炭土∶黄泥土∶珍珠岩(1∶ 2∶ 1) 83． 7 cC 茎秆半木质化、叶色黄
3 小结与讨论
(1)激素 BA 在不定芽诱导及不定芽增殖中均起
重要作用，且不同培养阶段适宜浓度不同。不定芽诱
导阶段以 2． 0 mg /L BA为最佳，浓度为 3 ～ 4 mg /L时，
会不同程度诱导产生玻璃化不定芽，这一现象同高浓
度细胞分裂素会增加油樟玻璃化苗相一致［10］;不定芽
增殖阶段以 1． 5 mg /L BA 为最佳，浓度继续升高反而
降低增殖系数，这与同属植物晋产远志试验结论一
致［9］。
(2)生长素和细胞分裂素比例协调能增大增殖系
数，提高成苗质量［11］。试验中当细胞分裂素 BA 浓度
为 1． 5 mg /L时，附加 0． 1 mg /L NAA较未添加 NAA处
理，黄花倒水莲增殖系数显著提高，生长状况好;附加
0． 2 mg /L NAA时，增殖系数较前者低，不定芽品质亦
有所下降。
(3)一定浓度的生长素有利于黄花倒水莲不定芽
生根，提高生根率;但生长素浓度过高，生根率反而下
降，同时诱导产生愈伤组织，而基部愈伤组织的形成会
大大降低根系品质，影响移栽成活率［12］。一定浓度范
围内，IBA同 ABT生根粉 1 号互作可显著提高黄花倒
水莲试管苗生根率，1 /2 WPM + IBA 0． 1 mg /L + ABT
0． 4 mg /L 诱导生根，生根率高达 95． 67%;且 ABT 的
添加诱导其形成毛细须根，大大提高根系品质，有利于
试管苗移栽成活。
(4)试管苗移栽成活率存在差异与基质本身的保
水、保肥、透气性和自身稳定性有关［12］。不同移栽基
质对黄花倒水莲移栽成活率及生长状况有显著影响，
移栽基质黄泥土∶珍珠岩(3∶ 1)移栽成活率最低，且叶
片发黄，下部叶片掉落，可能原因为所选用黄泥土易板
结成块，透气性差;移栽基质泥炭土 ∶ 黄泥土 ∶ 珍珠岩
(2∶ 1∶ 1)移栽成活率最高，达 92． 6%，且茎秆呈半木质
化，叶色绿，长势好。
(5)黄花倒水莲是一种药用价值很高的植株，经
两年的试验研究，现已总结出一套黄花倒水莲苗木组
培扩繁体系，对于开发利用黄花倒水莲具重要意义。
(下转第 63 页)
·95·
研究报告 刘秀芳 等:黄花倒水莲(Polygala fallax Hemsl)组培快繁技术研究
［J］．农业科学研究，2005，26(4) :26 － 29．
［27］李艾莲．几种常用药用植物种子引发技术的研究［J］．中国
中药杂志，2000，25(7) :406 － 407．
［28］魏述英，朱祝军．辣椒种子引发优化技术试验［J］．中国农
学通报，2011，27(04) :169 － 172．
［29］张彦萍，刘海河，申书兴，等．多胺引发处理对茄子种子活
力及幼苗耐冷性的影响［J］． 园艺学报，2010，37(11) :
1 783 － 1 788．
［30］金闻博．农作物种子及烟草种子技术［M］．北京:科学技术
出版社，1993．
［31］段凤云．烤烟催芽包衣种子试验［J］．烟草科技，2003(9) :
40 － 41．
［32］孙渭，胡捷，李斌，等．烟草催芽包衣种生理生化指标测定
及根系发育状况研究［J］．烟草科技，2004(2) :39 － 40．
［33］卢秀萍，白永富．烤烟种子催芽时间与包衣后种子活力的
关系［J］．烟草科技，2004(2) :41 － 43．
［34］刘启彤，赖禄祥．烤烟催芽种子不同回干水分包衣对烟苗
生长的影响［J］．种子，2006，25(10) :

76 － 77．
(上接第 59 页)
注:黄花倒水莲组织培养。1 为外植体诱导产生多芽;2 为增殖阶段瓶苗;3 ～ 4 为生根瓶苗;5 ～ 6 为移栽成活苗。
图版 1
参考文献:
［1］中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志(第 43 卷
第 3 分册) ［M］．北京:科学出版社，1997:151 － 152．
［2］陈书坤．中国远志属植物的分类研究［J］． 植物分类学报，
1991，29(3) :193 － 229．
［3］江苏新医学院．中药大辞典(下册) ［M］．上海:上海科学技
术出版社，1986:2 079．
［4］寇俊平，马仁强，朱丹妮，等．黄花倒水莲的活血、抗炎作用
研究［J］．中药材，2003，26(4) :268 － 271．
［5］李良东，李洪亮，范小娜，等．黄花倒水莲提取物抗血脂作用
的研究［J］．时珍国医国药，2008，19(3) :650．
［6］何勇，李洪亮，卑占宇，等．黄花倒水莲提取物对小鼠免疫作
用的影响［J］．赣南医学院学报，2006，26(6) :828．
［7］朱秋萍，李洪亮，范小娜．黄花倒水莲水提取物耐缺氧作用
的研究［J］．赣南医学院学报，2007，27(4) :510 － 511．
［8］张杭颖，郑可利，卓翠蓝，等．药用植物黄花倒水莲研究进展
［J］．三明学院学报，2008，25(2) :197 － 199．
［9］胡侃．晋产远志种子萌发、组织培养及根显微结构研究
［D］．山西:山西大学硕士毕业论文，2008．
［10］曹春英．植物组织培养［M］．北京:中国农业出版社，2009:
40 － 41．
［11］刘长春，陈泽雄，龚雪芹，等．金富猕猴桃离体培养与植株
再生的优化研究［J］． 西南师范大学学报:自然科学版，
2007，32(5) :124 － 127．
［13］鞠志新，李志清，宁显宝，等． F1 大丽花组培苗快繁技术研
究［J］．安徽农业科技，2007，35(27) :6 374 － 6 375，6 401．
·36·
综 述 薛晓兵:中国烤烟种子引发包衣技术研究进展