全 文 ：Central South Pharmacy. March 2014, Vol. 12 No.3　中南药学 2014 年 3 月 第 12 卷 第 3 期
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中药黄荆不同药用部位、不同采收时间的木脂素类
成分含量测定研究
陈正收 1，曾光尧 2*，周应军 2，唐莹翠 3，谭健兵 2，郭虹 2 （1.湖南金沙药业有限责任公司，长沙 410205；2．
中南大学药学院，长沙 410013；3．湖南省医药学校，长沙 410014）
摘要：目的　建立 HPLC法测定中药黄荆不同药用部位不同采收时间中木脂素类化学成分含量。方法　采用
反相高效液相色谱法，Kromasil ODS（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱为固定相，乙腈（A）-0.1%冰醋酸（B）
为流动相，梯度洗脱（0～ 10 min，15%A；10～ 40 min，28%A），检测波长为 255 nm，柱温为 25 ℃，流
速为 1 mL • min－ 1 。对不同产地、不同采收时间及药材不同药用部位的抗肿瘤木脂素的含量进行测定。结果
　二氢芳基萘类木脂素VBE-1与VBE-2在该条件下有较好的线性关系；黄荆不同药用部位中其果实含量较高，
茎（枝）中含量较少，根、叶中难以检测到。不同时间采收的黄荆子的木脂素含量测定研究结果显示，以 11
月采收其木脂素含量最高。结论　测定方法简便、准确，首次建立同时测定黄荆子药材中二氢芳基萘类木脂
素 VBE-1与 VBE-2的含量测定方法学，为充分利用黄荆药材资源打下了基础。
关键词：高效液相色谱法；含量测定；黄荆；VBE-1；VBE-2；木脂素
中图分类号：R917　　　　文献标识码：A　　　　文章编号：1672-2981(2014)03-0262-04
doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2014.03.018
Content determination of lignan compounds of Vitex negundo L. in differ-
ent medicinal parts from different harvest time
CHEN Zheng-shou1, ZENG Guang-yao2*, ZHOU Ying-jun2, TANG Ying-cui3, TAN Jian-bing2, GUO Hong2 (1. Hunan
Jinsha Pharmaceutical Co., Ltd, Changsha 410205; 2. School of Pharmaceutical Sciences, Central South University,
Changsha 410013; 3. Hunan Medical College, Changsha 410014)
Abstract: Objective To determine the content of lignans of Vitex negundo L. in different medicinal parts from differ-
ent harvest time, and to make full use of the antineoplastic resources of traditional medicine Vitex negundo L. Meth-
ods RP-HPLC was used to determine the content of anti-tumor lignans in different medicinal parts, producing areas
and harvest time. The chromatographic column Kromasil ODS (250 mm×4.6 mm, 5 μm) was used as the stationary
phase, and eluted with gradient elution of acetonitrile (A)-0.1% glacial acetic acid (B) (0－ 10 min，15%A；10－
40 min，28%A). The detection wavelength was 255 nm, the column temperature was 25 ℃ and the volume fl ow rate
was 1 mL • min－ 1. Results Lignans VBE-1 and VBE-2 had a good linear relationship under these conditions. Among
different medicinal parts, the fruits of Vitex negundo L. had the highest content of anti-tumor lignans, the stems
(branches) had less content while in the root and leaves the constituents were hardly detected. Content of anti-tumor
lignans from Fructus Viticis Negundo in different harvest time showed that fruits collected in November had the high-
est content of anti-tumor lignans. Conclusion The detection method is simple and accurate. The method of detecting
the content of VBE-1 and VBE-2 in Fructus Viticis Negundo simultaneously has been fi rstly established, which lays a
solid foundation for making full use of Vitex negundo L. resources.
Key words: HPLC; content determination; Vitex negundo L.; VBE-1; VBE-2; lignans

基金项目：国家科技重大专项 -重大新药创制（No. 2009ZX09102-109）；长沙市科技计划重大专项（No. K1306054-11）。
作者简介：陈正收，男，高级工程师，硕士，主要从事新药研究与开发工作，Tel：（0731）85520872， E-mail：duanyouchen@126.com
* 通讯作者：曾光尧，男，讲师，在读博士，主要从事天然药物研究与开发工作，Tel：（0731）85520872，E-mail：zenggy2005@126.com
药物分析与检验
中南药学 2014 年 3 月 第 12 卷 第 3 期　Central South Pharmacy. March 2014, Vol. 12 No. 3
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黄荆为马鞭草科（Verbenaceae）牡荆属（Vitex L.）植
物 Vitex negundo L.，广泛分布于我国南部各省。众多文献
古藉均有收录，全植株均可入药 [1-2]，其果实黄荆子（Fructus
Vviticis Negundo）具祛风、除痰、行气、止痛的作用，有
治感冒、咳嗽、哮喘、风痹、疟疾、胃痛、疝气、痔漏等
功效；黄荆叶（Folium Viticis Negundo）能解表清热、利湿
解毒，民间用于治感冒、中暑、吐泻、痢疾、疟疾、黄疸、
风湿、跌打肿痛、疮痈疥癣；黄荆茎又称黄金条，能祛风
解表、消肿解毒，有治感冒咳嗽、风湿骨痛、牙痛、烫伤
等功效；黄荆根具解表、祛风湿、理气止痛、截疟、驱虫；
用于治感冒、咳喘、风湿、胃病、痧气腹痛、疟疾、蛲虫
病等。其化学成分有黄酮类、萜类、木脂素类等，其中木
脂素类化合物是近几年研究较多的一类化合物，文献表明
含二氢芳基萘母核的木脂素类化合物表现出较强的抗肿瘤
作用 [3-5]，其中 6-羟基 -4-（4-羟基 -3-甲氧基苯基）-3-羟
甲基 -7-甲氧基 -3，4-二氢（3R，4S）-2-醛基萘（VBE-1）
与 6-羟基 -4-（4-羟基 -3-甲氧基苯基）3-羟甲基 -5-甲氧
基 -3，4-二氢（3R，4S）-2-醛基萘（VBE-2）为其主要成分，
VBE-1其对乳腺癌MCF-7、ZR-75-1细胞株的 IC50分别为
3.2 和 2.1 μmol·L－ 1 [3]表现出较强抗肿瘤活性，并对人卵
巢癌、宫颈癌及肝癌等细胞增殖有较好的抑制活性。目前
该类成分用于抗肿瘤药物开发已处于临床前研究阶段，由
于黄荆各部位所含该类成分不同，因此，本文对其不同产
地、不同药用部位及黄荆子不同采收时间样品中的 VBE-
1、VBE-2含量进行了测定，并对 VBE-1、VBE-2在该药
材中的组织分布与地域分布进行了初步调查，为合理地开
发利用这一药材资源打下基础。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Aglient 1100 型高效液相色谱仪（美国 HP公司，
低压四元泵，自动进样器，柱温箱，UV 检测器，
ChemStation色谱工作站）；ZK82B型电热真空干燥箱（上
海市实验仪器厂有限公司）；KQ-400B型数控超声波清
洗器（昆山市超声仪器有限公司）；EYELA旋转蒸发仪
（日本东京理化）；DHG101型电热恒温鼓风干燥箱（巩
义市英峪予华仪器厂）；DV215CD电子分析天平（奥豪
斯国际贸易有限公司， 精度：0.01 mg）。
1.2 试药
黄荆药材各部位采自湖南长沙、湘潭、株洲、永州
等地，经中南大学谭桂山教授鉴定为黄荆 Vitex negundo
L.。VBE-1、VBE-2对照品（自制，经制备 HLPC纯化，
面积归一法测得质量分数分别为 99.75%和 99.24%）；
乙腈为色谱纯，冰醋酸为分析纯，水为超纯水；提取用
乙醇为分析纯（用超纯水自配）。
2 方法
2.1 溶液的制备
2.1.1 样品溶液的制备 将不同产地、采收时间及药用部
位的药材分别真空干燥，粉碎成细粉。取细粉 5 g，置
250 mL圆底烧瓶中，加 50 mL 60%乙醇（v/v），加热
回流 1 h，脱脂棉过滤；滤渣加 50 mL 60%乙醇加热回流
45 min，过滤，合并 2次滤液，用旋转蒸发器回收部分乙
醇后转移至 50 mL量瓶中，同浓度乙醇稀释至刻度，摇匀，
即得。
2.1.2 混合对照品溶液的制备 精密称取 VBE-1与 VBE-2
对照品，用甲醇溶解并定容到 50 mL，摇匀，即得。配制
成含 0.215 0 mg·mL－ 1 VBE-1和 0.119 6 mg·mL－ 1 VBE-2
的混合对照品溶液。
2.2 色谱条件及系统适用性试验
以 Kromasil ODS-1柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）为
色谱柱；流动相：乙腈（A）-0.1%冰醋酸溶液（B），
采 用 梯 度 洗 脱（0 ～ 10 min，15%A；10 ～ 40 min，
28%A）；检测波长：255 nm，柱温：25 ℃。
精密吸取混合对照品 VBE-1、VBE-2溶液和样品溶
液各 5 μL进样测定，并采用外标法计算样品中 VBE-1、
VBE-2的百分含量，色谱图见图 1。
2.3 线性关系考察
吸取 VBE-1、VBE-2混合对照品溶液 2、4、6、8、
10、20 μL进入液相色谱仪，按“2.2”项下色谱条件进
行测定，考察 VBE-1、VBE-2峰面积积分值与进样质量
的关系。其中VBE-1得回归方程Y＝1.884×103X－5.390，
r＝ 0.999 9，在 0.430 0～ 4.30 μg与峰面积线性关系良好；
VBE-2得回归方程Y＝ 1.658×103X＋ 2.916，r＝ 0.999 8，
在 0.239 2～ 2.392 μg与峰面积线性关系良好。
2.4 精密度试验
精密吸取“2.1”项下 VBE-1、VBE-2混合对照品溶
液 5 μL，连续进样 6次，按“2.2”项下色谱条件测定
VBE-1、VBE-2峰面积的积分值，RSD分别为 1.3%与
0.8%，表明精密度良好。
2.5 稳定性试验
精密吸取“2.1”项下 VBE-1、VBE-2混合对照品溶
液 5 μL，分别于 0、6、12、18、24、36、48 h进样，按“2.2”
项下色谱条件测定，VBE-1、VBE-2峰面积的 RSD分别
为 1.2%、0.88%，表明该溶液在室温条件下放置 48 h基
本稳定。
2.6 重复性试验
取湘潭产黄荆子（批号：1023）药材粉末 5份，每
份约 5 g，精密称定每份的重量，按“2.1.1”项下方法制
备 5份 50 mL供试品溶液。分别吸取 5份供试品溶液各
5 μL按“2.2”项下色谱条件进样测定，考察试验的重复
性。试验结果显示所用样品药材中 VBE-1的平均含量为
0.149%，VBE-2的平均含量为 0.065 6%；VBE-1的 RSD
为 1.9%，VBE-2的 RSD为 1.4%。
2.7 加样回收试验
精密称取 VBE-1对照品 25.4 mg和 VBE-2对照品
25.2 mg，分别置 25 mL量瓶中，加适量 60%乙醇超声（功
率 400 W，频率 40 kHz）使溶解，放冷，稀释至刻度，摇匀，
即得 VBE-1和 VBE-2的对照品储备液。取“2.6”项下的
0 5 10 15 20 25 30
图 1 VBE-1 和 VBE-2高效液相色谱图
Fig 1 HPLC chromatogram of VBE-1 and VBE-2
A.对照品（reference）；B.样品（sample）；1. VBE-1 ；2. VBE-2
0 5 10 15 20 25 30
t/min t/min
A B1
2
1
2
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2.8 样品含量测定
不同产地、不同采收时间的黄荆子中 VBE-1、VBE-2的
含量测定结果见表 2。不同产地、不同采收时间黄荆茎与根
中 VBE-1、VBE-2的含量测定结果见表 3。不同产地、不同
采收时间黄荆叶中 VBE-1、VBE-2的含量测定结果见表 4。
表 1 加样回收试验结果 (n＝ 6)
Tab 1 Recovery (n＝ 6)
成分
（composition）
取样量
（sample
weight）/g
样品中含量
（sample content）
/mg
加入量
（added amount）
/mg
测得量
（detected amount）
/mg
回收率
（recovery）
/%
平均回收率
（average
recovery）/%
RSD
/%
VBE-1 2.023 2 3.014 6 3.048 0 6.090 1 100.9 100.4 1.9
2.019 5 3.009 1 3.048 0 6.110 2 101.7
2.042 3 3.043 0 3.048 0 6.194 7 103.4
2.050 2 3.054 8 3.048 0 6.074 8 99.1
2.008 6 2.992 8 3.048 0 6.002 4 98.7
2.041 6 3.042 0 3.048 0 6.049 5 98.7
VBE-1 2.023 2 1.327 2 3.030 0 4.402 1 101.5 99.2 1.8
2.019 5 1.324 8 3.030 0 4.310 2 98.5
2.042 3 1.339 7 3.030 0 4.394 7 100.8
2.050 2 1.344 9 3.030 0 4.274 8 96.7
2.008 6 1.317 6 3.030 0 4.302 4 98.5
2.041 6 1.339 3 3.030 0 4.349 5 99.4
表 2 不同产地、采收时间的黄荆子中 VBE-1、VBE-2的含量
Tab 2 Content of VBE-1 and VBE-2 of Vitex negundo L. from
different origins and different harvest time
产地
（origin）
采收时间
（harvest time）
含量（content）/%
VBE-1 VBE-2
湘潭 10月 21日 0.153 0.076
湘潭 10月 23日 0.144 0.054
湘潭 11月 24日 0.215 0.174
永州 08月 29日 0.089 0.085
永州 10月 07日 0.098 0.120
永州 11月 07日 0.285 0.252
长沙 09月 01日 0.078 0.064
长沙 10月 10日 0.198 0.141
株州 10月 29日 0.099 0.078
株州 11月 29日 0.103 0.078
表 3 不同产地的黄荆茎与根中 VBE-1、VBE-2的含量
Tab 3 Content of VBE-1 and VBE-2 in the stem and root of Vitex
negundo L. from different origins and different harvest time
产地
（origin）
采收时间
（harvest time）
含量（content）/%
VBE-1 VBE-2
长沙 /黄荆茎 11月 20日 0.022 0.032
湘潭 /黄荆茎 10月 21日 0.031 0.078
株州 /黄荆茎 11月 29日 0.026 0.051
永州 /黄荆茎 11月 07日 0.037 0.073
永州 /黄荆根 11月 07日 0.007 0.004
长沙 /牡荆根 11月 07日 0.004 0.005
表 4 不同产地、采收时间的黄荆叶中 VBE-1、VBE-2的含量
Tab 4 Content of VBE-1 and VBE-2 in the leaves of Vitex negundo
L. from different origins and different harvest time
产地
（origin）
采收时间
（harvest time）
含量（content）/%
VBE-1 VBE-2
长沙 /黄荆叶 10月 06日 0 0.014
湘潭 /黄荆叶 10月 21日 0 0
株州 /黄荆叶 11月 29日 0 0
永州 /黄荆叶 11月 07日 0 0
结果表明，不同产地、不同采收时间的黄荆子中 VBE-
1、VBE-2的含量有差异。同一产地的黄荆果实中，以成熟
果实（11月前后）中 VBE-1、VBE-2的含量较高。黄荆抗
肿瘤药用部位主要为其果实即黄荆子，抗肿瘤药用价值较
高。黄荆茎（枝）中抗肿瘤木脂素含量较低，其叶、根中
基本不含 VBE-1与 VBE-2。药用黄荆子的适宜采收时间为
11月左右。
3 结论
本文建立了高效液相方法同时测定黄荆子木脂素类成分
VBE-1与 VBE-2的含量，在该色谱条件下，VBE-1、VBE-2
在一定浓度范围内呈良好的线性关系。为精确分析黄荆药材
化学成分研究奠定基础。
不同产地、不同采收时间的黄荆子中 VBE-1、VBE-2
含量差别较大，表明 VBE-1、VBE-2的含量与产地有关，即
可能与当地的气候、土壤、日照长短等因素有关。样品采集
由于地域限制，采集样品产地过于集中，样品数量有限，具
体影响情况有待进一步研究。
黄荆子粉末（含 VBE-1约 0.149%， VBE-2约 0.065 6%）
6份，每份约 2.0 g，精密称定；分别在上述 6份药材中
加入 VBE-1、VBE-2对照品储备液各 3.0 mL，按“2.1.1”
项下方法制备。分别吸取 6份供试品溶液各 5 μL进样测
定，结果显示，VBE-1平均回收率为100.4%，RSD为1.9%，
VBE-2平均回收率为 99.2%，RSD为 1.8%（见表 1）。
中南药学 2014 年 3 月 第 12 卷 第 3 期　Central South Pharmacy. March 2014, Vol. 12 No. 3
265

参考文献
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上海科学技术出版社，1999：596-599．
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rican Association for Cancer Research，2009，15（16）：
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[4] 申璀，曾光尧，谭健兵，等．黄荆子化学成分研究 [J]．中
草药，2009，40（1）：33-36．
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2008，5（1）：24-28．
（收稿日期： 2013-10-14； 修回日期： 2013-11-14）
高效液相色谱法同时测定土地海苓煎颗粒中
芒果苷、辛弗林的含量
张红梅，白妮，鲁杨（延安市中医医院，陕西 延安 716000）
摘要：目的　建立同时测定土地海苓煎颗粒中芒果苷和辛弗林含量的 HPLC法。方法　色谱柱：岛津 Shim-
pack VP-ODS C18（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相：乙腈 -水（1 000 mL水中加磷酸二氢钾 0.6 g、十二
烷基磺酸钠 1.0 g、冰醋酸 1.0 mL），梯度洗脱；流速：0.8 mL • min－ 1；检测波长：258 nm。结果　芒果苷在
150.0～ 4.7 mg • L－ 1与峰面积线性关系良好（r＝ 0.999 9），平均回收率 99.8%；辛弗林在 750.0～ 46.9 mg • L－ 1
与峰面积线性关系良好（r＝ 0.999 9），平均回收率 98.0%。结论　本方法简便、准确、重复性好，可用于
土地海苓煎颗粒中上述 2种成分的含量控制，为该药的质量评价提供依据。
关键词：土地海苓煎颗粒；芒果苷；辛弗林；高效液相色谱法
中图分类号：R917　　　　文献标识码：A　　　　文章编号：1672-2981(2014)03-0265-03
doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2014.03.019
Determination of mangiferin and synephrine in Tudihailingjian
granules by HPLC
ZHANG Hong-mei, BAI Ni, LU Yang (Hospital of Chinese Medicine, Yan’an Shaanxi 716000)
Abstract: Objective To establish an HPLC method to determine the content of mangiferin and synephrine in Tudi-
hailingjian granules. Methods The column was Shim-pack VP-ODS C18 (4.6 mm×150 mm, 5 μm). The mobile phase
consisted of acetonitrile-water with gradient elution. The fl ow rate was 0.8 mL • min－ 1 and the detection wavelength
was 258 nm. Results The calibration curve was linear at 150.0－ 4.7 mg • L－ 1 for mangiferin, and 750.0－ 446.9
mg • L－ 1 for synephrine. The average recovery was 99.8% and 98.0%, respectively. Conclusion The method is accu-
rate and reliable, which can be used in the determination of mangiferin and synephrine in Tudihailingjian granules.
Key words: Tudihailingjian granule; mangiferin; synephrine; HPLC

作者简介：张红梅，女，副主任中药师，执业药师，主要从事中药制剂质量控制与新药研究，Tel：13772250716。
土地海苓煎颗粒为延安市中医医院生产的医院制剂，
批准文号为陕药管制字【2001】第 3694号，由黄芩、知母、
猪苓及枳实等味药组成，具有清热利湿解毒、宣调三焦
的功能，临床用于治疗湿热下注所致之小便淋漓、灼热、
涩痛或尿频尿急、小腹胀满、腰困腰痛等病症。芒果苷、
辛弗林分别是知母、枳实的主要活性成分，具有明显的
润肠滑道、破气、散痞、消积等作用，为了有效的控制
土地海苓煎颗粒质量，提高其质量控制标准，本文在其
现行标准仅收载的黄芩薄层色谱鉴别的基础上，通过参
考有关文献 [1-4]，优化色谱条件，建立了利用梯度洗脱法