全 文 ：书·药学研究·
收稿日期:2013 － 10 － 23
作者单位:解放军第 180 医院药学科，福建 泉州 362000
基金项目:南京军医药卫生科研项目(10MA085)
* 通信作者
亮菌甲素注射液与不同溶媒的配伍稳定性考察
潘丹婷，林淑瑜，李玉堂，甘惠贞*
［摘 要］ 目的 考察亮菌甲素与 6 种常用输液的配伍稳定性及其荧光强度随溶剂 pH 值的变化情况。方
法 采用高效液相色谱法测定亮菌甲素注射液与 0. 9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、葡
萄糖氯化钠注射液、木糖醇注射液及乳酸钠林格注射液配伍后亮菌甲素的含量，采用 pH测定仪测定其酸碱度变
化，同时观察溶液的颜色及澄明度。配置不同 pH梯度的缓冲盐溶液，考察亮菌甲素在不同 pH 环境下荧光强度
的变化。结果 本实验所建立的色谱条件对亮菌甲素注射液的检测专属性好，亮菌甲素在 5. 0 ～ 80 μg /mL 浓度
范围内与其峰面积呈良好的线性关系(r2 = 0. 999 9)。高、中、低 3 种浓度的平均回收率分别为 103. 72%(ＲSD =
0. 17%)、103. 98%(ＲSD = 0. 01%)、103. 67%(ＲSD = 0. 25%) ;6 种配伍溶液在 24 h 时测得的药物含量均在
98. 61% ～ 100. 29%范围内。当溶液 pH为 5 ～ 8 时，呈蓝色荧光黄色液体;pH 为 4 ～ 5 时，肉眼观察微弱蓝色荧
光;pH为 2 ～ 4 时，肉眼观察为无色透明液体，在紫外灯下可见微弱蓝色荧光。结论 亮菌甲素在不同 pH值的溶
媒中的荧光强度不同，荧光的强弱不影响药物的稳定性，该药物与 6 种常用输液配伍后 24 h 内稳定性良好。
［关键词］ 亮菌甲素;配伍;稳定性;高效液相色谱法
Study on compatible stability of armillarisin injection with different kinds of sol-
vents PAN Dan-ting，LIN Shu-yu，LI Yu-tang，GAN Hui-zhen* (Department of Pharmacy，180th Hospital of PLA，
Quanzhou 362000，China)
［Abstract］ Objective To investigate compatible stability of armillarisin injection with 6 kinds of commonly
used infusions，and observe the changs of fluorescence intensity with armillarisin in different pH of solvents．Methods
The content changes of armillarisin injection were determined by HPLC after combined with 0. 9% sodium chloride inje-
cetion，5% glucose injection，10% glucose injection，glucose and sodium chloride injection，xylitol injection and sodium
lactate ringers injection． pH detector was used to determine the changes of pH value. The color and clarity were ob-
served at the same time． The change of fluorescence intensity with armillarisin in different pH environments was investi-
gated． Ｒesults Armillarisin showed a good linear relationship within the range of 5. 0 ～ 80 μg /mL(r2 = 0. 999 9)． The
average recovery of the three different concentrations of armillarisin was 103. 72%(ＲSD = 0. 17%) ，103. 98%(ＲSD =
0. 01%) ，103. 67%(ＲSD = 0. 25%)． The content of armillarisin were obtained 98. 61% ～ 100. 29% after 24 h. When
the pH value was 5 ～ 8，the color of the solvent of armillarisin showed the blue fluorescent yellow ． pH value was 4 ～ 5，
the color of the solvent of armillarisin showed the weak blue fluorescence with eyes． pH value was 2 ～ 4，the color of
the solvent of armillarisin showed weak blue fluorescence under UV light． Conclusion The different fluorescence in-
tensity of armillarisin in different pH of solvents which does not affect the stability of armillarisin，and the stability for
armillarisin compatible with the 6 kinds of commonly used infusions within 24 h is good．
Key words:Armillarisin;Compatibility;Stability;HPLC
0 引言
亮菌甲素是一种香豆素类化合物，系从假密
环菌中提取的有效成分之一。亮菌甲素具有降
酶、退黄的作用，临床上主要用于急、慢性胆囊炎
发作、其他胆道疾病并发急性感染及慢性浅表性
胃炎、萎缩性胃炎的治疗，是一种优良的肝胆用
药［1-2］。亮菌甲素由亮菌(环菌属假密环菌)中提
取，能促进肝细胞分泌胆汁，松弛奥狄括约肌，调
节胆道系统，促进胆道内容物排泄，从而减轻胆汁
淤积，同时能促进免疫功能，增强吞噬功能，改善
肝细胞水肿和肝纤维组织增生，促进受损的肝细
胞修复和再生，进一步改善肝功能。亮菌甲素可
缩短肝炎病程及黄疸持续时间，从而提高临床疗
效。亮菌甲素药物说明书“不良反应”一栏上无严
重不良反应，但有文献报道该药物在临床使用中
仍可发生严重不良反应［3］。
亮菌甲素在水中几乎不溶，为满足临床用药
需求，常需加聚维酮 K30、丙二醇、苯甲醇等增溶
剂以提高其在水中的溶解度［4］。这些增溶剂是否
会影响该药物在不同溶媒介质中的稳定性，未见
·6201· 实用药物与临床 2014 年第 17 卷第 8 期 Practical Pharmacy And Clinical Ｒemedies，2014，Vol． 17，No． 8
相关文献报道。我们在配液过程中观察到，亮菌
甲素与 5%葡萄糖注射液配伍时，溶液呈无色澄清
液体，与 0. 9%氯化钠注射液配伍时，溶液呈蓝荧
光黄色液体，不同溶媒药物的荧光强度不同。因
此本次实验采用高效液相色谱法测定亮菌甲素的
含量，以考察亮菌甲素与 6 种注射液的配伍稳定
性及其荧光强度随溶剂 pH值的变化情况。
1 仪器和试药
Ultimate3000 高效液相色谱仪(戴安中国有限
公司) ;JA2003 电子分析天平(上海方瑞仪器有限
公司) ;PHS-3C 型实验室 pH 计(上海诚宁环保科
技有限公司) ;注射器;移液枪;亮菌甲素注射液
(西安利君制药有限责任公司，规格:2 mL∶ 1 mg，批
号:120502) ;亮菌甲素对照品(中国药品生物制品检
定所，批号:MUST-11301403);0. 9%氯化钠注射液
(四川沱牌药业有限责任公司，规格:250 mL∶2. 25 g，
批号:B1210104) ;5%葡萄糖注射液(四川沱牌药
业有限责任公司，规格:250 mL∶ 12. 5 g，批号:
B1207301) ;10%葡萄糖注射液(四川沱牌药业有
限责 任 公 司，规 格:250 mL ∶ 25 g，批 号:
B1208113) ;葡萄糖氯化钠注射液(四川沱牌药业
有限责任公司，规格:250 mL∶葡萄糖 2. 25 g，氯化
钠 12. 5 g，批号:B1112252) ;木糖醇注射液(河南
天方华中药业有限公司，规格:250 mL ∶ 12. 5 g，批
号:F12050501) ;乳酸钠林格注射液(四川沱牌药
业有限责任公司，规格:500 mL，批号:B1210133) ;
甲醇(美国进口 Fisher色谱纯)、冰醋酸(美国进口
MＲEDA 色谱纯) ;水为超纯化水(本院消毒供应
室提供)。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱:Acclaim C18柱(250 mm ×
4. 6 mm，5 μm) ;流动相:0. 1 mol /L 冰醋酸-甲醇
(50∶ 50) ;流速:1. 0 mL /min;柱温:30 ℃;检测波
长:368 nm;进样量:20 μL。
2. 2 溶液的制备 (1)对照品溶液的制备:精密
量取亮菌甲素标准品 5 mg，置 10 mL 容量瓶中，加
流动相稀释至刻度，制得 0. 5 mg /mL 的亮菌甲素
对照品储备液，避光、室温下保存。(2)供试品溶
液的制备:模拟临床应用方法实际常用量配制，分
别取亮菌甲素注射液各 5 mg 加入 250 mL 的
0. 9%氯化钠、5%葡萄糖、10%葡萄糖、葡萄糖氯
化钠、木糖醇、乳酸钠林格注射液中，避光、室温下
保存。
2. 3 线性关系的考察 精密量取上述亮菌甲素
对照品储备液 1. 6 mL，置 10 mL 容量瓶中，加流
动相稀释至刻度。再分别精密吸取一定量，稀释制
成浓度分别为 5、10、20、40、80 μg /mL 的溶液。在
色谱条件下，分别进样 20 μL。以浓度(X，μg /mL)
为横坐标、峰面积积分值(Y)为纵坐标，进行线性
回归，得标准曲线方程 Y = 0. 995 3 X + 0. 256 2，
r2 =0. 999 9，结果表明，亮菌甲素在5. 0 ～80 μg /mL
浓度范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系
(见图 1)。
图 1 亮菌甲素标准曲线
2. 4 精密度试验 制备高、中、低 3 种不同浓度
的亮菌甲素对照品溶液(20、40、80 μg /mL)各 5
份，同日测定并连续测定 5 d，计算峰面积，得高、
中、低浓度的日内精密度 ＲSD 分别为 0. 01%、
0. 05%、0. 06%;日间精密度 ＲSD 分别为 1. 33%、
1. 62%、1. 82%，结果表明精密度良好。
2. 5 重复性试验 按照对照品溶液制备方法制
备 20 μg /mL 亮菌甲素对照品溶液 6 份，进样，测
得峰面积 ＲSD = 0. 34%，结果表明重复性良好。
2. 6 加样回收率试验 精密量取已知含量、不同
体积(300、500、1 000 μL)的供试品溶液各 3 份，分
别精密加入 500 μL 的对照品溶液(20 μg /mL) ，
取 20 μL 进样。结果亮菌甲素的加样回收率为
103. 45% ～ 104. 31%(见表 1)。
表 1 加样回收率实验结果(μg)
序号 样品含量 加入量 测得量 回收率(%)
1 25. 14 11. 05 37. 60 103. 89
2 25. 12 11. 01 37. 49 103. 75
3 25. 13 11. 05 37. 45 103. 51
4 41. 89 11. 05 55. 22 104. 31
5 41. 88 11. 02 54. 74 103. 47
6 41. 88 11. 04 55. 12 104. 15
7 83. 77 11. 03 98. 64 104. 05
8 83. 78 11. 04 98. 13 103. 50
9 83. 78 11. 05 98. 11 103. 45
·7201·实用药物与临床 2014 年第 17 卷第 8 期 Practical Pharmacy And Clinical Ｒemedies，2014，Vol． 17，No． 8
2. 7 稳定性试验 取同一份供试液，分别于 0、1、
2、4、6、8、24 h 进样分析，根据亮菌甲素的峰面积
计算，得 ＲSD为 0. 62%(n = 7) ，结果表明稳定性
良好。
2. 8 供试品含量测定 分别取不同溶媒的供试
液，在 0、1、2、4、6、8、24 h分别测定，记录色谱峰面
积，根据回归方程计算得亮菌甲素的含量。以
(0 h)含量为 100. 00%，换算百分含量(见表 2)并
观察配伍液的 pH值、颜色、澄清度(见表 3) ，结果
表明配伍稳定性良好。
表 2 亮菌甲素配伍稳定性测定结果(%)
条件 0 h 1 h 2 h 4 h 6 h 8 h 24 h
0. 9%NS 100. 00 100. 11 100. 04 100. 08 100. 32 100. 24 100. 11
5%GS 100. 00 99. 92 99. 98 99. 99 100. 12 100. 06 100. 05
10%GS 100. 00 99. 85 99. 94 100. 07 100. 00 100. 11 100. 02
GNS 100. 00 100. 11 99. 86 99. 90 100. 04 99. 97 99. 98
木糖醇 100. 00 100. 18 100. 34 100. 28 100. 34 100. 35 100. 29
乳酸林格 100. 00 100. 07 98. 72 98. 74 98. 75 98. 69 98. 61
表 3 配伍液在室温条件下的物理相容性变化
配伍液
0 h
pH值 外观
1 h
pH值 外观
2 h
pH值 外观
4 h
pH值 外观
6 h
pH值 外观
8 h
pH值 外观
24 h
pH值 外观
0. 9%NS 5. 45 + + 5. 44 + + 5. 40 + + 5. 38 + + 5. 35 + + 5. 33 + + 5. 31 + +
5%GS 4. 66 + 5. 14 + + 5. 20 + + 5. 24 + + 5. 26 + + 5. 28 + + 5. 35 + +
10%GS 4. 11 － 4. 13 － 4. 21 － 4. 18 － 4. 04 － 4. 26 － 4. 40 －
GNS 4. 44 － 4. 44 － 4. 46 － 4. 35 － 4. 27 － 4. 33 － 4. 47 －
木糖醇 6. 19 + + 6. 10 + + 5. 86 + + 5. 77 + + 5. 62 + + 5. 63 + + 5. 60 + +
乳酸林格 6. 32 + + 6. 27 + + 6. 25 + + 6. 18 + + 6. 08 + + 6. 19 + + 6. 31 + +
注:“ + +”:肉眼观察蓝色荧光澄清液体;“ +”:肉眼观察微弱蓝色荧光澄清液体;“ －”:肉眼观察无色透明澄清液体
图 2 色谱图
注:A. 对照品溶液色谱图，B. 供试品溶液色谱图
2. 9 不同 pH条件下荧光强度考察试验 分别配
置 pH值为2. 0 ～8. 0的不同梯度的磷酸盐缓冲溶液
并各取 10 mL 于不同的比色管中，再分别加入
200 μL亮菌甲素注射液，观察其溶液的荧光强度。
pH为 5. 0 ～ 8. 0 时，呈蓝色荧光黄色液体;pH 为
4. 5 ～ 5. 0 时，肉眼观察为微弱蓝色荧光;pH 为
2. 0 ～ 4. 0 时，肉眼观察为无色透明液体，在紫外灯
下可见微弱蓝色荧光。
3 讨论
3. 1 亮菌甲素色谱条件的探索 本文分别考察了
以 0. 1 mol /L 乙醇-甲醇(50 ∶ 50)［5］和0. 1 mol /L冰
醋酸-甲醇(50 ∶ 50)［6］为流动相，发现在后者的条
件下，亮菌甲素峰形对称性增加，分离效果良好，
即选择 0. 1 mol /L 冰醋酸-甲醇(50 ∶ 50)作为流动
相。对照品溶液于 5. 780 min有强吸收峰，供试品
·8201· 实用药物与临床 2014 年第 17 卷第 8 期 Practical Pharmacy And Clinical Ｒemedies，2014，Vol． 17，No． 8
溶液于 5. 753 min 强吸收峰(见图 2 ∶ A-B)。由于
亮菌甲素为香豆素类化合物，具有内酯结构，溶液
的酸碱性对其存在形式有明显影响，碱性条件下，
易使亮菌甲素开环［4］。因此，为使亮菌甲素均以
内酯形式存在，样品溶液制备和流动相中均采用
0. 1 mol /L冰醋酸溶液，所使用的色谱系统简单，避
免梯度洗脱带来的不便，分析结果令人满意。
3. 2 亮菌甲素与常见的不同溶媒的配伍变化
本试验的目的是考察亮菌甲素与 0. 9% NS、5%
GS、10%GS、GNS、木糖醇、乳酸林格液等 6 种注射
液的配伍稳定性，以及配伍液在室温条件下的物
理相容性变化(见表 3) ，为临床用药提供依据。因
此，配伍液均按照临床实际在室温、不避光条件下
配制。试验结果表明，该药物分别与 10% GS、GNS
的配伍液在 0 h肉眼观察为无色透明澄清液体;分
别与 0. 9% NS、木糖醇、乳酸林格的配伍液为蓝色
荧光澄清液体;与 5% GS 的配伍液为微弱蓝色荧
光澄清液，且该配伍液在 1 h后肉眼观察为蓝色荧
光澄清液体。由表 2 结果可得出，尽管不同配伍
液荧光强度不同，在 24 h 内亮菌甲素的含量基本
不变，稳定性均良好。
3. 3 亮菌甲素的荧光强度随溶剂 pH值变化 当
溶液 pH 为 5 ～ 8 时，呈蓝色荧光黄色液体;pH 为
4 ～ 5时，肉眼观察微弱蓝色荧光;pH为 2 ～ 4 时，肉
眼观察为无色透明液体，在紫外灯下可见微弱蓝
色荧光。香豆素衍生物在紫外光照射下呈现蓝色
或紫色荧光，在碱性溶液中荧光增强。荧光的强
弱和有无，与结构中的取代基种类和位置有关［7］。
当荧光物质本身是弱酸或弱碱时，溶液的酸度对
其荧光强度有较大的影响，这主要是因为在不同
酸度中分子和离子间的平衡改变，因此，荧光强度
也有差异［8］。
4 结论
静脉给药是药物直接进入血液循环，除了对
药物的质量有严格的要求外，对药物进入人体之
前，即药物贮存、配制溶媒、配制浓度、配伍药物、
特殊人群使用注意事项以及给药速度等也都作了
严格规定。亮菌甲素注射液是肝病科常用的退黄
降酶药，本品说明书上未说明“不良反应”、“毒副
作用”、“注意事项”，为控制和防范亮菌甲素注射
液不良反应的发生，建议用药过程中，密切观察病
情变化，注意发现药物不良反应的早期症状，以便
及时停药和处理，防止进一步发展［9］。本试验参
考了配伍稳定性的相关文章的研究［10］，用相关方
法进行了此试验。试验结果表明，该试验方法具
有简便、准确、灵敏度高，重现性好，线性范围广等
优点，可作为亮菌甲素的含量测定。测定结果显
示，亮菌甲素在不同 pH 的溶媒中的荧光强度不
同，荧光的强弱不影响药物的稳定性，该药物与 6
种常见不同溶媒配伍 24 h 内稳定性良好。根据实
验结果还可以看出，亮菌甲素随 pH 值的增大，荧
光强度越强。
参考文献:
［1］ 李鹏，陈琴华，王众勤，等． HPLC 法测定人血浆中亮菌甲素
琥珀酸单酯浓度［J］．中国药师，2010，13(8) :1092-1094．
［2］ 杨丽红，叶选怡，凌庆枝，等． 亮菌的临床应用与研究进展
［J］．北方药学，2013，10(3) :66-67．
［3］ 朱梅芳．亮菌甲素注射液不良反应的观察及护理［J］． 当代
护士，2013，6:89-90．
［4］ 李鹏，李春刚，朱瑜，等．反相高效液相色谱法测定亮菌甲素
琥珀酸单酯注射液含量［J］．医药导报，2009，28(11) :1493-
1494．
［5］ 胡婷婷，于波涛，姜云平，等． HPLC 法测定亮菌甲素注射液
的含量及有关物质［J］． 西南国防医药，2005，15(5) :513-
515．
［6］ 任慧霞，张平，程刚，等．高效液相色谱法测定亮菌水提液中
亮菌甲素的含量［J］．安徽医药，2012，16(6) :759-760．
［7］ 吴立军．天然药物化学［M］． 第 5 版． 北京:人民卫生出版
社，2007:118．
［8］ 李发美． 分析化学［M］． 第 6 版． 北京:人民卫生出版社，
2007:224．
［9］ 张婷．亮菌甲素常见不良反应的护理与防范［J］． 临床医药
实践，2010，19(9B) :1254-1255．
［10］ 苏雪媚，巩晓宇，黄伟东，等．氨茶碱注射液与 5 种常用输液
的配伍稳定性考察［J］． 中国药房，2013，24(42) :3986-
3988．
·9201·实用药物与临床 2014 年第 17 卷第 8 期 Practical Pharmacy And Clinical Ｒemedies，2014，Vol． 17，No． 8