全 文 ：收稿日期:2015-09-14
基金项目:国家自然科学基金(81360522) ;甘肃省自然科学基金(1310ＲJZA091)
作者简介:赵慧巧(1989-) ，女，在读硕士研究生，专业方向:中药新剂型研究;E-mail:1325478922@ qq. com。
* 通讯作者:景明，E-mail:1339512509@ qq. com。
基于药效学与毒理学结合的湿生扁蕾
与苦豆子配伍比例的优选
赵慧巧，景 明* ，卢年华，陈正君，张艳霞
(甘肃中医药大学，甘肃 兰州 730000)
摘要 目的:探讨湿生扁蕾与苦豆子的最优配伍比例，为临床安全合理用药提供理论依据。方法:采用热板致
小鼠疼痛、琼脂致小鼠肉芽肿、三硝基苯磺酸致大鼠腹泻的动物模型，观察湿生扁蕾与苦豆子不同配伍提取物的镇
痛、抗炎、止泻作用;并观察湿生扁蕾与苦豆子不同配伍提取物对小鼠的急性毒性。结果:随着湿生扁蕾配伍比例
的增加，其配伍提取物的镇痛、抗炎、止泻效果明显增强;随着苦豆子配伍比例的增加，其配伍提取物的镇痛、抗炎
效果也明显增强，但止泻作用增强不明显;灌胃给药未测得半数致死量(LD50) ，灌胃给药的最大耐受量(MTD)为
32. 0 g /kg，是成人临床拟日用剂量的 106 倍。结论:该实验采用药效学与毒理学结合的方法，综合评价优选的湿生
扁蕾与苦豆子配伍比例为 20∶ 1，与临床拟日用剂量完全吻合。
关键词 湿生扁蕾;苦豆子;配伍;药理学
中图分类号:Ｒ285. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2016)03-0656-03
DOI:10. 13863 / j. issn 001-4454. 2016. 03. 046
复方湿生扁蕾胶囊是由临床经验方研制而成的
结肠靶向释药的口服固体制剂，具有清热解毒、利湿
止泻的功效，主治大肠湿热所致的痢疾、肠炎等肠道
疾病，临床主要用于治疗溃疡性结肠炎。其处方为
湿生扁蕾、苦豆子两味药材，配比为 20∶ 1，其一日口
服剂量相当于苦豆子 1. 0 g，而以苦豆子为原料的苦
豆子片一日口服剂量相当于苦豆子 0. 8 g〔1〕。苦豆
子具有一定毒性，故复方湿生扁蕾胶囊及苦豆子片
中苦豆子剂量均较低。苦豆子在临床上治疗溃疡性
结肠炎疗效确切，将湿生扁蕾、苦豆子经提取加工制
成结肠靶向释药胶囊，经口服可直接将药物送至结
肠病灶部位，能提高疗效及减轻药物引起的全身不
良反应。目前对湿生扁蕾与苦豆子不同配伍剂量的
应用未见文献报道。本研究采用药效结合毒理的手
段对复方湿生扁蕾胶囊中湿生扁蕾与苦豆子的配伍
比例进行优选，进而确定湿生扁蕾与苦豆子的最佳
配伍比例，为临床合理用药提供理论依据。
1 材料与仪器
1. 1 实验动物 SPF 级昆明小鼠，体质量(18 ± 2)
g;SPF级 Wistar大鼠，体质量(180 ± 20)g，实验动物
生产许可证号:SCXK(甘)2011-0001，由甘肃中医药
大学动物实验中心提供。
1. 2 药物与试剂 湿生扁蕾药材 2012 年 7 月下旬
采自甘肃省临潭县冶力关镇，经甘肃农业大学陈垣
教授鉴定为龙胆科植物湿生扁蕾 Gentianopsis palu-
dosa(Hook. f. )Ma. 的全草;苦豆子药材 2012 年 10
月上旬采自甘肃省金塔县东坝镇，经甘肃中医药大
学杜弢教授鉴定为豆科植物苦豆子 Sophora alopecu-
roides L. 的种子;2，4，6-三硝基苯磺酸(上海至鑫化
工有限公司);大便隐血检测试剂盒(上海凯创生物
技术有限公司) ;柳氮磺胺吡啶(海南红惠制药有限
公司) ，临用前用蒸馏水配成 0. 03 g /mL 的混悬液;
琼脂(国药集团化学试剂有限公司) ;阿司匹林(广
东百澳药业有限公司)，临用前用蒸馏水配成 5. 0
mg /mL的混悬液。
1. 3 主要仪器 ＲB-200 智能热板仪(上海益联科
教设备有限公司) ;KQ3200 超声波清洗器(昆山市
超声仪器有限公司) ;AE-240 电子天平(梅特勒-托
利多仪器上海公司)。
2 方法
2. 1 湿生扁蕾与苦豆子不同配伍提取物的制备
将湿生扁蕾、苦豆子药材分别粉碎，过 40 目筛，按不
同比例的 20 倍量分别称取湿生扁蕾、苦豆子的粉末
(10∶ 0. 5、15∶ 0. 5、20∶ 0. 5、10∶ 1. 0、15∶ 1. 0、20 ∶ 1. 0、
10∶ 1. 5、15∶ 1. 5、20∶ 1. 5)，混合，加 20 倍量体积分数
75%乙醇浸泡过夜，回流提取 3 h，提取液滤过，滤液
减压浓缩至无乙醇味，浓缩液冷藏，备用。临用时用
蒸馏水稀释至所需浓度。
2. 2 配伍提取物对热板致小鼠疼痛的影响〔2〕 取
雌性昆明小鼠，按表 1 分组，逐只放于(55 ± 0. 5)℃
热板仪上，记录小鼠舔后足反应所需时间(疼痛反
应潜伏期)作为小鼠的痛阈值，挑选痛阈值在 5 ～ 30
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1
s内的小鼠，按表 1 分组给药，分别灌胃“2. 1”项下
的 1 ～ 9 号配伍提取物，1 次 /d，连续灌胃给药 7 d，
于末次给药后 1 h，分别将小鼠置于(55 ± 0. 5)℃的
热板上，测定痛阈值，并计算痛阈提高率。
2. 3 对琼脂致小鼠肉芽肿的影响〔3〕 取昆明小鼠
110 只，雌雄各半，按表 2 分组，各组小鼠均在背部
皮下注射 2%琼脂 15 mL /kg，第 2 天开始灌胃给药，
连续 7 d，第 8 天将小鼠麻醉后脱颈椎处死，剥离琼
脂肉芽块，精密称量质量，计算肿胀抑制率。
2. 4 对三硝基苯磺酸致大鼠腹泻便血的影响〔4〕
分组如表 3 所示，取 Wistar 大鼠 120 只，雌雄各半，
禁食不禁水 24 h后，腹腔注射 2%的戊巴比妥钠，使
大鼠轻微麻醉后，将直径 2 mm 的乳胶管经肛门轻
轻插入大鼠体内大约 8 cm 处，将三硝基苯磺酸
(TNBS 150 mg /kg)的 50%乙醇溶液用注射器一次
性注入到大鼠的肠腔内，每只 0. 5 mL，将大鼠的尾
部提起，倒置 30 s，使造模剂充分渗透入大鼠的肠
腔。正常对照组大鼠注入等体积 50%乙醇。按表 3
分组给药，各组大鼠均于造模后 6 h 开始灌胃给药，
1 次 /d，连续 7 d，每天观察各组大鼠粪便，并利用大
便隐血检测试剂测定粪便隐血，记录大鼠发生腹泻
与粪便隐血的数量。
2. 5 配伍提取物对小鼠的急性毒性〔5〕 经预实
验，各配伍提取物均未测出小鼠灌胃的半数致死量
(LD50)，故只能测其一日灌胃最大耐受量(MTD)。
昆明小鼠 100 只，雌雄各半，按表 4 分组给药，各组
小鼠一次性灌服配伍提取物(浓度均为 0. 8 g /mL，
给药体积 0. 8 mL，小鼠平均体质量 20 g)，正常对照
组小鼠灌服生理盐水。给药后自由饮水，每天上、下
午各观察 2 次，连续观察 7 d。观察动物死亡情况，
并对死亡动物的心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏进行
HE染色，检测病理变化。
2. 3 统计学处理 采用 SPSS 19. 0 统计软件进行
分析，计量数据以 珋x ± s 表示，组间比较采用方差分
析。以 P ＜ 0. 01 为差异有统计学意义。
3 结果
3. 1 湿生扁蕾-苦豆子不同配伍提取物对小鼠热板
试验的影响 结果如表 1 所示，各给药组小鼠痛阈
均显著高于对照组(P ＜ 0. 01)，以 20∶ 1. 5 配比的镇
痛效果最佳。
表 1 湿生扁蕾-苦豆子不同配伍提取物对小鼠热板试验的影响(珔x ± s，n =10)
组别 剂量 /(g /kg)
痛阈值 / s
给药前 给药后 1 h
痛阈提高率 /%
对照组 － 17. 61 ± 2. 79 17. 43 ± 2. 64 －
阿司匹林组 0. 10 13. 73 ± 2. 63 22. 19 ± 1. 52＊＊ 61. 62
湿生扁蕾-苦豆子 10∶ 0. 5 组 3. 00 15. 21 ± 1. 89 19. 66 ± 1. 98＊＊ 29. 26
湿生扁蕾-苦豆子 15∶ 0. 5 组 4. 43 13. 79 ± 2. 81 19. 23 ± 2. 22＊＊ 39. 45
湿生扁蕾-苦豆子 20∶ 0. 5 组 5. 86 17. 32 ± 1. 94 24. 93 ± 1. 85＊＊ 43. 94
湿生扁蕾-苦豆子 10∶ 1. 0 组 3. 14 14. 78 ± 2. 37 19. 77 ± 2. 54＊＊ 33. 76
湿生扁蕾-苦豆子 15∶ 1. 0 组 4. 57 16. 43 ± 2. 75 23. 48 ± 2. 23＊＊ 42. 91
湿生扁蕾-苦豆子 20∶ 1. 0 组 6. 00 14. 42 ± 2. 60 21. 13 ± 2. 14＊＊ 46. 55
湿生扁蕾-苦豆子 10∶ 1. 5 组 3. 29 15. 46 ± 2. 76 21. 52 ± 2. 25＊＊ 38. 20
湿生扁蕾-苦豆子 15∶ 1. 5 组 4. 71 14. 37 ± 2. 34 20. 96 ± 2. 01＊＊ 45. 86
湿生扁蕾-苦豆子 20∶ 1. 5 组 6. 14 17. 68 ± 2. 51 26. 53 ± 1. 87＊＊ 50. 06
注:与对照组比较，＊＊P ＜ 0. 01
表 2 湿生扁蕾-苦豆子不同配伍提取物对琼脂致小鼠肉芽肿的影响(珔x ± s，n =10)
组别 剂量 /(g /kg) 琼脂肉芽质量 /g 抑制率 /%
对照组 － 0. 672 ± 0. 093 －
阿司匹林组 0. 10 0. 247 ± 0. 064＊＊ 63. 24
湿生扁蕾-苦豆子 10∶ 0. 5 组 3. 00 0. 468 ± 0. 055＊＊ 37. 22
湿生扁蕾-苦豆子 15∶ 0. 5 组 4. 43 0. 339 ± 0. 072＊＊ 45. 01
湿生扁蕾-苦豆子 20∶ 0. 5 组 5. 86 0. 370 ± 0. 057＊＊ 52. 44
湿生扁蕾-苦豆子 10∶ 1. 0 组 3. 14 0. 378 ± 0. 089＊＊ 43. 75
湿生扁蕾-苦豆子 15∶ 1. 0 组 4. 57 0. 324 ± 0. 063＊＊ 51. 79
湿生扁蕾-苦豆子 20∶ 1. 0 组 6. 00 0. 277 ± 0. 093＊＊ 58. 78
湿生扁蕾-苦豆子 10∶ 1. 5 组 3. 29 0. 335 ± 0. 051＊＊ 50. 15
湿生扁蕾-苦豆子 15∶ 1. 5 组 4. 71 0. 281 ± 0. 077＊＊ 58. 18
湿生扁蕾-苦豆子 20∶ 1. 5 组 6. 14 0. 233 ± 0. 069＊＊ 65. 33
注:与对照组比较，＊＊P ＜ 0. 01
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3. 2 湿生扁蕾-苦豆子不同配伍提取物对琼脂致小
鼠肉芽肿的影响 结果如表 2 所示，各给药组小鼠
肉芽肿质量均显著低于对照组(P ＜ 0. 01)，以
20∶ 1. 5的配比效果最佳。
3. 3 湿生扁蕾-苦豆子不同配伍提取物对三硝基苯
磺酸致大鼠腹泻便血的影响 结果如表 3 所示，正
常对照组大鼠均未发生腹泻和便血，模型组大鼠出
现了不同程度的腹泻、便血。与模型组比较，柳氮磺
胺吡啶组、各配伍提取物组大鼠发生腹泻和便血的
个数明显减少，而且随着湿生扁蕾配比的增加，大鼠
发生腹泻和便血的个数减少更明显。但苦豆子配比
的增加对大鼠发生腹泻和便血的影响不明显，配伍
比例中湿生扁蕾最大配比的止泻作用最强。
表 3 湿生扁蕾-苦豆子不同配伍提取物对三硝基苯磺酸致大鼠腹泻便血的影响(n =10)
组别 剂量 /(g /kg) 1 d 3 d 5 d 7 d 9 d 12 d
正常对照组 － 0 0 0 0 0 0
模型组 － 10 10 9 8 6 5
柳氮磺胺吡啶组 0. 30 10 7 5 3 1 0
湿生扁蕾-苦豆子 10∶ 0. 5 组 1. 50 10 8 6 4 2 1
湿生扁蕾-苦豆子 15∶ 0. 5 组 2. 21 10 6 4 2 1 0
湿生扁蕾-苦豆子 20∶ 0. 5 组 2. 93 10 5 3 2 0 0
湿生扁蕾-苦豆子 10∶ 1. 0 组 1. 57 10 8 7 4 3 1
湿生扁蕾-苦豆子 15∶ 1. 0 组 2. 29 10 6 3 3 1 0
湿生扁蕾-苦豆子 20∶ 1. 0 组 3. 00 10 6 3 2 0 0
湿生扁蕾-苦豆子 10∶ 1. 5 组 1. 64 10 8 6 4 2 1
湿生扁蕾-苦豆子 15∶ 1. 5 组 2. 36 10 6 4 2 1 0
湿生扁蕾-苦豆子 20∶ 1. 5 组 3. 07 10 5 3 2 0 0
3. 4 湿生扁蕾-苦豆子不同配伍提取物对小鼠的急
性毒性 配伍提取物小鼠灌胃的最大耐受量(总生
药量)为 32. 0 g /kg，是成人临床拟日用剂量(21 g /
70 kg)的 106 倍，小鼠灌胃苦豆子的最大耐受量为
1. 52 g /kg，是成人临床拟日用剂量(1 g /70 kg)的
106 倍，见表 4。组织病理学检查结果显示，湿生扁
蕾-苦豆子对最大耐受量实验死亡动物的心脏、肝
脏、脾脏、肺脏、肾脏均未引起明显病理性改变。
表 4 湿生扁蕾-苦豆子不同配伍提取物对小鼠
的急性毒性
组别
剂量 /
(总生药 g /kg)
剂量 /
(苦豆子 g /kg)
死亡数 /
只
正常对照组 － － 0
湿生扁蕾-苦豆子 10∶ 0. 5 组 32. 0 1. 52 0
湿生扁蕾-苦豆子 15∶ 0. 5 组 32. 0 1. 03 0
湿生扁蕾-苦豆子 20∶ 0. 5 组 32. 0 0. 78 0
湿生扁蕾-苦豆子 10∶ 1. 0 组 32. 0 2. 91 2
湿生扁蕾-苦豆子 15∶ 1. 0 组 32. 0 2. 00 1
湿生扁蕾-苦豆子 20∶ 1. 0 组 32. 0 1. 52 0
湿生扁蕾-苦豆子 10∶ 1. 5 组 32. 0 4. 17 3
湿生扁蕾-苦豆子 15∶ 1. 5 组 32. 0 2. 91 2
湿生扁蕾-苦豆子 20∶ 1. 5 组 32. 0 2. 23 1
4 讨论
在湿生扁蕾与苦豆子的不同配伍比例中，湿生
扁蕾配比的增加对配伍提取物的镇痛、抗炎、止泻作
用影响明显，苦豆子配比的增加对配伍提取物的镇
痛、抗炎作用有增强效应，但对止泻作用的影响并不
明显;配伍提取物的最大耐受量(总生药量，湿生扁
蕾∶苦豆子 = 20∶ 1. 0)为 32. 0 g /kg，对应苦豆子的最
大耐受量为 1. 52 g /kg，为成人临床拟日用剂量的
106 倍。该配比最大耐受量实验无死亡动物，各心
脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏的检测均未发现明显病理
性改变，表明湿生扁蕾∶ 苦豆子 = 20∶ 1. 0 浸膏口服
安全可靠。
综上所述，本研究确定了方中湿生扁蕾与苦豆
子的最优配伍比例，不仅为临床用药的安全性提供
了依据，并为该复方制剂的开发提供了一定的理论
依据。
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