全 文 :岗梅根醇提物抗炎活性的实验研究
罗雅劲 , 孙永学 , 代珍青 , 郑少萍 , 曾绮雯
(华南农业大学兽医药理研究室 , 广东 广州 510642)
中图分类号:S859.7 文献标识码:A 文章编号:1007-1474(2010)03-0001-02
摘要:为了研究岗梅根醇提物的抗炎活性 ,采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法 、鸡蛋清致大鼠足跖肿胀法 、大鼠棉球肉芽肿法和醋酸致小鼠毛
细血管通透性增高法观察岗梅根醇提物的抗炎作用。结果表明 ,岗梅根醇提物对炎症早期的渗出和后期结缔组织增生均有较明显的抑制作用
(P<0.05)。结论:岗梅根醇提物具有显著的抗炎活性。
关键词:岗梅根;醇提物;抗炎活性;小鼠
StudiesonAnti-InflammatoryActivityoftheMethanolExtractfromRoughhairedHolyRoot
LuoYajin, SunYongxue, DaiZhenqing, ZhengShaoping, CengQiwen
(LaboratoryofVeterinaryPhamacology, SouthChinaAgric.Univ., Guangzhou, 510642, China)
Abstract:Tostudyanti-inflammatoryactivityofthemethanolextractfromRoughhairedHolyRoot.Themodelsofxyleneinducedearedemain
mice, hindpawedemainducedbyegg-whiteinrats, granulomainducedbycoton-peletinrats, andcapilarypermeabilityincreaseinducedbyacetic
acidinmicewereusedtoobservetheanti-inflammatoryefects.ResultsindicatedthattheextractofRoughhairedHollyRootnotonlycouldinhibitthe
exudationofpreliminaryinflammatory, butalsomarkedlyabatethelaterproliferationofconnectivetissue.TheextractfromRoughhairedHolyRoothas
significantanti-inflammatoryactivity.
Keywords:RoughhairedHolyRoot;methanolextract;anti-inflammatory;mice
岗梅根是冬青科植物梅叶冬青 [ Ilexasprela(Hook.f.et
Arn.)Champ.exBenth]的根 ,性寒, 味甘苦, 功用主清热解毒、活
血生津 ,常用于感冒发热 、扁桃体炎 、咽喉肿痛等[ 1] 。岗梅根中
含有大量的皂苷、生物碱类化合物[ 2] , 是岭南地区的常用中药,
应用较广。目前 ,有关岗梅根醇提取物抗炎活性的系统报道较
少 ,笔者对岗梅根醇提物进行了抗炎作用的实验研究。
1 材料与方法
1.1 药物及试剂 (1)岗梅根醇提液。 自制方法:100%甲
醇 ,料液比 1∶10,室温 ,超声 30min, 提取 2次 , 浓缩, 相当于生
药 1g/ml。(2)复方草珊瑚含片。江中药业股份有限公司 ,批
号:国药准字 Z36021460。 (3)伊文思蓝。上海沪尚生物科技
有限公司。(4)二甲苯 、冰醋酸。分析纯 , 广州化学试剂厂。
1.2 实验动物 (1)清洁级昆明(KM)小鼠。体重 18 ~
22 g, 由广东省实验动物中心提供 , 合格证号:SCXK(粤)。
(2)SD大鼠。雌雄各半 ,体重 90 ~ 120 g, 由南方医科大学实
验动物中心提供 , 许可证号:SCXK粤 2006-0015。
1.3 主要仪器 (1)游标卡尺:上海量具刃具厂。 (2)紫外
可见分光光度计:UV-2450型 ,日本岛津。
收稿日期:2010-03-17
基金项目:广东省教育部产学研结合项目(2007040635)
作者简介:罗雅劲(1987-),男 ,广东人 ,硕士 ,从事药理学与毒理学
研究。 E-mail:lyj0759@163.com
通讯作者:孙永学(1969-),男 ,副教授 ,博士。
1.4 方法
1.4.1 对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 [ 3 , 4] 健康小鼠
50只 , 雌雄各半 ,随机分为 5组。分别为正常空白对照组 , 草
珊瑚组 , 岗梅根醇提液高 、低两个剂量组 , 模型组 , 每组 10
只。其中正常空白对照组 、模型组给予蒸馏水 ,给药组分别
按 2、 6、 12 g/kg体重灌胃给药 ,每日 2次 , 连续 4天。末次
给药 1 h后 , 每只小鼠左耳前后两面涂二甲苯 0.05 ml致肿 ,
右耳不涂以作对照 , 30 min后 , 处死动物 , 剪下左 、右耳 , 用
9 mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片 , 用天平称量 ,
计算耳肿胀度及抑制率 。
1.4.2 对大鼠棉球肉芽肿的影响 [ 5] 健康大鼠 30只 , 雌雄
各半 , 随机分为 3组 。分别为模型组 、岗梅根醇提液组和草
珊瑚组 , 每组 10只。模型组给予蒸馏水 , 给药组分别按 3、
12 g/kg体重灌胃给药 , 每日 1次 ,连续 8天。给药第 1天在
鼠蹊部手术植入灭菌棉球 10.0 mg, 第 9日手术剥出棉球肉
芽肿 , 称重 ,计算肉芽肿重量。
1.4.3 对大鼠鸡蛋清所致足跖肿胀的影响 [ 6] 健康大鼠 40
只 , 雌雄各半 ,随机分为 4组。分别为岗梅根醇提液高 、低两
个剂量组 , 草珊瑚组 , 模型组 , 每组 10只。模型组给予蒸馏
水 , 其他组分别按 3、 9、 12g/kg体重灌胃给药 ,每日 1次 ,连
续 8天。末次给药后 , 用游标卡尺测量大鼠右后足跖(标记)
厚度 , 记录。然后于各鼠标记处皮下注射 10%新鲜鸡蛋清生
理盐水 0.1 ml致炎 ,分别于致炎后 1、 2、 3、 4 h用游标卡尺
测量大鼠标记处厚度 , 记录数据。 以 “致炎后厚度 -致炎前
厚度”作为肿胀度 ,按 “(模型组肿胀度 -给药组肿胀度)/模
1贵州畜牧兽医 2010年 第 34卷 第 3期
型组肿胀度”计算肿胀抑制百分率。
1.4.4 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 [ 7] 健康小鼠 40
只 , 雌雄各半 ,随机分为 4组。分别为模型组 , 草珊瑚组 , 岗
梅根醇提液高 、低两个剂量组 , 每组 10只。其中模型组给予
蒸馏水 , 给药组分别按 3、 6、 12 g/kg体重灌胃给药 , 每天 1
次 , 连续灌胃 7天。 末次灌胃后 1 h, 各组均尾静脉注射
0.5%伊文思蓝生理盐水溶液 0.1 ml, 随即腹腔注射 0.6%冰
醋酸 0.2 ml。 30 min后脱颈椎处死 , 剪开腹部皮肤肌肉 , 用
生理盐水 5 ml分数次洗涤腹腔 , 用吸管吸出洗涤液。 收集
洗涤液 , 用生理盐水定容为 10ml, 1 000 r/min, 离心 10 min,
取上清液用分光光度计在 590 nm处测定吸光度值。
1.5 统计学处理 实验数据以 x±s表示 , 采用 SPSS统计
软件进行处理 , 检验差异显著性。
2 结果与分析
2.1 对小鼠耳廓肿胀的影响 岗梅根醇提液高 、低剂量组
与模型组比较 , 小鼠耳廓肿胀度明显减少 , 差异显著性检验
分别为差异极显著(P<0.01)和差异显著(P<0.05), 表明
岗梅根醇提液对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀具有明显抗炎
作用。见表 1。
表 1 岗梅根醇提液对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 (n=10)
组别 给药剂量(g/kg) 肿胀度(mg) 抑制率(%)
空白对照组 0.31±1.04
模型组 23.37±4.21**
岗梅根醇提液低剂量组 6 19.03±2.36■ 18.57
岗梅根醇提液高剂量组 12 17.38±3.49■■ 25.63
复方草珊瑚含片组 2 14.92±4.23■■ 36.15
注:与模型组比较 , ■表示 P<0.05, ■■表示 P<0.01;与空白对照组比
较 , **表示 P<0.01。
2.2 对大鼠棉球肉芽肿的影响 岗梅根醇提液组与模型组
比较 ,大鼠肉芽肿重量减少 ,差异显著(P<0.05),表明岗梅根
醇提液对大鼠棉球肉芽肿增生具有一定的抑制作用。见表 2。
表 2 岗梅根醇提液对大鼠棉球肉芽肿的影响 (n=10)
组别 给药剂量(g/kg) 肉芽肿重量(mg) 抑制率(%)
模型组 85.49±13.24
岗梅根醇提液组 12 73.18±17.33■ 14.39
复方草珊瑚含片组 3 57.72±14.66■■ 32.48
注:与模型对照组比较 , ■表示 P<0.05, ■■表示 P<0.01。
2.3 对大鼠足跖肿胀的影响 高 、低剂量岗梅根醇提液对
10%新鲜鸡蛋清生理盐水致炎后 1、 2、 3、 4h大鼠的足跖肿
胀度减少 , 与模型组比较 , 为差异显著(P<0.05)或差异极
显著(P<0.01), 表明岗梅根醇提液对急性炎性肿胀具有明
显抑制作用。见表 3。
2.4 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 岗梅醇提液高 、
低剂量组腹腔洗出液的吸光度值降低 , 与模型组比较 , 分别
为差异极显著(P<0.01)和差异显著(P<0.05), 表明岗梅
醇提液对炎性过程中毛细血管通透性增高具有一定的抑制
作用。见表 4。
表 4 岗梅根醇提液对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 (n=10)
组别 给药剂量(g/kg) 吸光度 A 抑制率(%)
模型对照组 0.418±0.082
岗梅根醇提液低剂量组 6 0.362±0.098■ 13.39
岗梅根醇提液高剂量组 12 0.317±0.124■■ 24.16
复方草珊瑚含片组 3 0.281±0.086■■ 32.77
注:与模型对照组比较 , ■表示 P<0.05, ■■表示 P<0.01。
表 3 岗梅根醇提液对鸡蛋清所致大鼠足跖肿胀的影响 (n=10)
组别 给药剂量(g/kg)
致炎前
(cm)
肿胀度(cm)(抑制率%)
1 h 2h 3h 4h
模型组 7.32±0.599 13.06±0.247 9.59±0.221 6.13±0.206 7.18±0.188
低剂量组 9 6.28±0.543 6.10±0.201(18.62)■ 5.54±0.191(13.57)■ 6.03±0.177(14.08)■ 6.44±0.148(21.27)■
高剂量组 12 6.77±0.576 6.11±0.191(22.67)■ 9.39±0.178(19.45)■ 10.48±0.153(25.72)■■ 8.13±0.151(19.68)■
草珊瑚组 3 9.34±0.588 7.72±0.156(36.84)■■ 7.20±0.148(33.03)■■ 8.87±0.142(31.06)■■ 7.20±0.122(35.11)■■
注:与模型对照组比较 , ■表示 P<0.05, ■■表示 P<0.01。
3 结论
试验采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法 、鸡蛋清致大鼠足跖
肿胀法 、大鼠棉球肉芽肿法和醋酸致小鼠毛细血管通透性增
高法等经典动物实验方法 , 研究岗梅根醇提物对炎症发生的
早期和晚期的影响。结果表明:岗梅根醇提液既可抑制炎症
早期的水肿和渗出 , 又可抑制炎症晚期的组织增生和肉芽组
织生成 , 表明岗梅醇提液具有显著的抗炎活性。这与王宗
锐 、刘郴淑等的研究结果相一致 [ 5 ~ 8] 。
本研究对岗梅根的抗炎活性进行了有益的探索 , 为岗梅
根药材的研究应用提供了一定的实验依据 , 但岗梅根醇提液
抗炎活性的机制及醇提液中发挥抗炎作用的物质基础尚需
进一步研究。
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2 贵州畜牧兽医 2010年 第 34卷 第 3期