全 文 :《食品研究与开发》2 003 年 01 月第 24 卷第 5期
山檀核黄酮的提取及其调血脂保健功能的研究
顾 军 庄桂东 莱阳农学院食品科学系 山东 莱阳 2 6 52 0
摘 要 本文介绍 了山检核中黄酮类物质的提取工艺 , 并报道 了所提黄酮类化合物的调节血脂的保健功能 。 按文
中所述 , 山检核提取黄酮的最佳条件为 30 % 酒精溶液 , 50 ℃ 下浸提 Z h 。 所提黄酮经小鼠实验证明 , 具有明显 的调
血脂功能 。
关键词 山检核 黄酮 调血脂
黄酮类化合物具有很高的药用价值 , 可清除人
体自由基 , 具有抗癌 、 防癌 、 抗氧化 、 抗病毒等生理
活性及药理作用 1[ 一 4 1。 目前国际上提取黄酮的主要
原料为银杏叶 , 但银杏叶资源有限 , 且价值昂贵 l5]
(每吨高达 1 0 0 美元以上 ) 。 山植属蔷薇科植物 ,其
果实核和叶中均含有丰富的黄酮 , 笔者等已从山植
叶中提取了黄酮 61[ 。 笔者等曾由山植核开发制取了
食用烟熏香味料和活性炭 7I] 。 本文研究了由山植核
提取黄酮的工艺 , 并研究所提黄酮的调血脂保健功
能 。
1 材料与方法
1
.
1
.
1 山碴核黄酮提取用实验材料
山植核 由山东省青州市果品加工厂采得 , 洗
净残存果肉 ,晾干后备用 。
酒精 由山东酒精总厂购得 , 食用级 , 乙醇含
量妻 95 %
正丁醇 A . R 级
芸香昔 生化试剂
1
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1
.
2 动物实验用试验材料
1
.
1
.
2
.
1 实验动物 由中国军事医学科学院动物
中心提供 , 健康 W ist a r 大鼠 40 只 , 雌性 , 体重
1 5 0一 2 0() g (批准文号为医动字第 8 7 0 7 M o l 号 ) 。
1
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1
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2
.
2 高脂饲料 基础饲料 79 % 、 胆固醇 1% 、
猪油 10 % 、蛋黄粉 10 % 。
1
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1
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2
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3 酶法测定 T C 、 T G 、 H D L 一 C 试剂盒
由北京中生生物工程高技术公司生产
1
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2 主要仪器
1
.
2
.
1 旋转式真空蒸发器 Z FQ 85 A 上海医
械专机厂
1
.
2
.
2 光栅分光光度计 72 2 型 上海第三分析
仪器厂
1
.
3 方法
1
.
3
.
1 山檀核黄酮提取的工艺流程
乙醇
弄 ~ 一一 -一 .一一一 ~一~一一- 一一 ,山植核一粉碎一加热浸提一过滤 回收乙 醇
滤渣习 L一一滤液 I咨 杏 }
烘干 真空浓缩一一一 J咨 奋干馏 萃取
了 、 了 、
香料粗液 核炭 有机 水层
杏 杏 溶剂层 杏
杏 去 4 杏
沉清分层 清洗 干澡 冷冻干燥
杏 4 4 咨
食用烟熏香料 高温活化 黄酮 黄酮
4
活性炭
1
.
3
.
2 动物试验方法 以基础饲料喂大鼠 7 d
后 ,空腹取尾血 ,酶法测定血清中总胆固醇 ( T C ) 、甘
油三脂 ( T G ) 、高密度脂蛋白胆固醇 ( H D L 一 C ) 。 根
据 T C 水平 , 将动物随机分为 4 组 : 高脂对照组 , 3
个受试组 (25 , 50 , 10 m g / k g · b · w ) 自正式试验
开始 , 各组动物换用高脂饲料 。 受试物组灌胃给予
不同剂量的山植核黄酮 , 高脂对照组灌胃给予等体
积的蒸馏水 , 灌胃量按 1 . om L / l o g
.
b
.
w 计算 , 每
日一次 ,连续 36 d ,空腹取尾血 ,测定各项血脂指标 。
1
.
4 测定方法
1
.
4
.
1 黄酮的测定方法 按迟玉森等介绍方法测定16 ’
1
.
4
.
2 保健功能评价依据 卫生部 《保健食品功
能学评价程序和检验方法》
1
.
5 数据处理方法
试验数据用 f ox p or 软件建立数据库 , 用 E IP
软件进行方差分析 。
2 结果与讨论
2
.
1 山植核黄酮提取工艺参数结果
2
.
1
.
1 浸提剂乙醇浓度对黄酮提取的影响
8 4 《食品研究与开发》2 0 03 年 01 月第 24 卷第 5期
日0291
亡、
八曰,`气01勺4
4ù、洲ó,了
化学法提取黄酮的工艺过程 中 , 多采用乙醇的
水溶液 。 本研究中探讨了不同浓度的乙醇溶液对黄
酮提取结果的影响 , 如表 l 所示 。
表 l
浸提剂浓度 (% ) 9 5 7 5 70 6 0 3 0 10 0
吸光度 水相 - 一 0 . 5 17 0 . 19 3 0 . 5 7 2 0 . 2 9 9 0 . 2 6 1
醇相 一 0 . 79 6 0 . 2 0 1 0 . 89 4 0 . 4 13 0 . 3 3 7
浓度 水相 - 一 0 . 0 5 30 0 . 0 2 13 0 . 0 7 3 2 0 . 00 30 0 . 0 2 12
醇相 一 一 0 . 08 73 0 . U2 2 2 0 . 0 90 4 0 0 0 4 1 0 . 0 3 5 1
黄酮含量 水丰1 - 一 19 3 . 3 7 6 3 . 4 4 9 3 . 6 3 3 8 . 0 3 2 1 . 3
西亨tl1 - 一 3 5 2 . 7 7 0 7 . 5 4 2 7 . 0 2 9 3 . 2 2 8 1 . 4
黄酮总量 ( n : g ) 5 1 9 . 0 14 8 0 . 9 9 2 6 . 0 6 3 1 . 2 60 2 . 7
注 : “ 一 ” 者为无法萃取分离得到黄酮类化合物
实验中在 5 一 60 ℃下 , 分别加人不同浓度乙醇
溶液 2 0 0 m L ,保温浸提 4 h 。 由表 1 中结果可见 ,乙
醇浓度为 60 % 时 , 黄酮的提取量明显高于其它组 ,
这与由山碴叶中提黄酮时的结果相一致囚 。
2
.
1
.
2 浸提温度对黄酮类化合物提取的影响
由表 2 可见 , 温度超过 75 ℃时 , 提取液中黄酮
含量较低 ; 当温度低于 35 ℃ , 黄酮溶出量较少 , 含
量也较低 , 以 45 ℃ 一 5 ℃为最好 。
2
.
1
.
3 浸提时间对黄酮提取的影响
实验中分别保温 l . O h 、 2 . O h 、 3 . O h 、 4 . O h 、
5
.
O h
、
6
.
O h
,测定黄酮 的提取量 。 由表 3结果可见 ,
水相黄酮含量 s h 时含量最高 , 至 6 h 反而降低 ;醇
一川的黄酮含量至 4 h 时 ,含量突然升高 ,其后逐渐降
低 因此 , 如欲提取水相的黄酮 , 则浸提周期应为 5
h 若欲提取醇相的黄酮 ,则周期应为 4 h 。
2
.
2 山碴核黄酮的保健功能评价结果
2
.
2
.
1 山喳核黄酮对大 鼠体重的影响
连续给受试物山碴核黄酮 36 d , 各剂量组的大
鼠在整个试验过程中活动正常 , 与高脂对照组比较
无异常 , 其体重变化与对照组 比较无显著性差异
( P > 0
.
05)
, 说明受试物对大鼠的生长不产生异常
影响 。 结果见表 4 :
表 2 温度对黄酮在化合物含量的影响
温度厂r ) 2 5 35 4 5 5 5 6 5 7 5 8 5
厂泛七度 水相 ( } 3 54 )` . 4 3 7 0 . 7( )3 }) . 8 0 l f ) . 3 3 1 〔) 2 3 1 { ) . 23 8
内弃士「! ( ) 二2 3 ( ) 3 9 6 11 . 7 2( ) () 6( )4 「) 2 7 6 〔) 3飞〔) ( ) 2 74
浓曳 ( (、 } ) 水李{{ ( ) () 4 1 ( ) ( )4 1 () . ( ) 77 ( ) . 11 3 0 () 3 7 () ( ) 3 3 () ( ) 35
西李个L] ( ) . ( )2 8 〔) (〕3 7 ( ) . ( ) 8 1 ( ) . 0 7 1 0 . () 2 9 0 . ( ) 3 2 奄) . 0 2 7
绒酬 含员 水相 4 13 () 4 13 . 0 5比 . 0 5 35 . 4 2l 0 . 1 2( 卜 . 4 2( )t ()
内享牛! 1 3 7 3 0 4 9 8 . 3 5 3 1 . 9 5 5 3 . 0 2 3 2 . 1 Zf〕4 2硬抑 更)
黄酮总了.督〔 r: , g ) 78 6 9 一1 . 3 ] ()4 3 . 9 1() 9一 4 4 2 . 2 4 12 4 4 ( )9 . 0
2
.
2
.
2 山碴核黄酮对大鼠 T C 、 T G 、 H D L 一 C 的
影响
表 3 浸提时间对黄酮化合物提取的影响
浸提时间 ( h ) 1 . 0 2 . 0 3 0 4 . 0 5 0 6 . 0
吸 光度 水相 0 1( )0 0 . 16 3 ( ) . 3 19 ( ) . 84 4 0 . 5 5 7 0 . 3 8 1
醇相 ( ) 2 10 。 15 ) 0 . 3 6 8 ( ) . 7 2 2 0 . 5 6 1 0 3 0 7
浓度 水相 0 . 0 0 6 0 () . 0 12 2 ( ) . 0 3 0 1 0 . ( ) 9 1 0 . 0 6阅 0 ( )3 7 4
醉相 O ( )2 13 () . 0 1( )3 0 . () 3 6 7 0 . 0 78 3 0 0 6 () 1 0 ( )2 9 0
黄酮含量 水相 4 2 4 . 3 0 14 . 2 60 . 0 802 . 1 12 53 . 1 1 1 13 . 0
醇相 3 4 2 . 0 47 0 . ( ) 5 8 4 . 1 15 1 3 . 0 9 3 1 . 0 1 16 4
黄酮总量 (m g ) 7 6 6 . 3 10 84 . 2 11 84 . 1 2 3 1 5 . 1 2 184 . 1 2 2 7 7
表 4 山植核黄酮对大鼠体重的影响
剂量 动物数 体重 ( g ) 增重
( g
厂k g
.
b
.
w ) (只 ) 试验前 ( 、 士 5 ) 试验后 ( x 士 5 ) ( x 士 S )
0
.
0 10 17 3
.
7 15
.
6 2 5 3
.
1 3 7
.
4 10 1
.
1 2 7
.
0
1
.
25 9 17 9
.
4 2 1
.
0 2 9 6
.
3 25
.
4 11 6
.
9 3 3
.
0
2
.
5 9 1 8 5
.
3 15
.
1 3 19
.
2 4 2
.
5 13 3
.
9 3 2
.
0
5
.
0 10 1 8 3
.
5 10
.
7 2 9 4
.
6 33
.
8 1 1 1
.
1 2 9
.
1
给予高脂饲料后 , 对照组大鼠实验后与实验前
对比 ,大鼠的血清 T C 、 T G 均有明显增加 ,表明了高
脂模型 的造模成立 ,见表 5 。 与对照组比较 , 中剂量
山植核黄酮组明显降低大鼠的血清 T C 水平 ; 低 、
中 、 高剂量组均能明显降低大鼠的血清 T G 水平 ;
中 、 高剂量组均能明显升高大鼠的血清 H D L 一 C 水
平 。 因此 , 山碴核黄酮具有一定的调节血脂保健功能 。
3 结论
由本实验可以得出如下结论 :
1
. 山碴核中含有丰富的黄酮类物质 , 是开发黄
酮的优质资源 。
2
. 山碴核提取黄酮后 , 仍可用于提取含有烟熏
香料和活性炭 。
3
. 山植核中黄酮品质优良 , 具有明显而 良好的
调血脂保健功能 。
表 5 山植核黄酮对大鼠 T C 、 T G 、 H D I、 一 C 的影响
剂量
( g / k g
.
1)
动物数
w ) ( 只 )
T C ( nr g / d l ) T G ( nr g
z
d l ) DH 汇一 C ( m g / d l )
试验前 试验后 试验前 试验后 试验前 试脸后
( x 士 5 ) ( x 土 、 ) ( x 土 5 ) ( x 士 5 ) ( x 士 、 ) ( x 士 、 夕
82 4加 1 1 , 6 9 24 夕 76. 4 2} }) 粥 本引 9 5D. 5皇3 41 }J」3 8
53 5 2() 2 153 1 32 4 65 6 14 2团 9 14 8* 54心9 3 40. 0 18 7
85 9 14 , 135 3 24 {J
*
69 一)刃 3 63 1 15 3, 5不2 5 21 61 3 22 2 ,
尺 2 巧 3 17 卜6 33 2 不 }飞男 3 , { 5改 了阳 3 8 3 ` 3 9比 夕
注 : * 与付照札}比土t 子丁显著旅异 . ( P < 0 (巧 )
参 考 文 献
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、
t
.
J F
。助 d S e ! 19 6 4 . 29 : 2 7
R o b: 、 k J
o t 、 , 1
. 比 lo e i飞。 n 飞 P I、 。 。 1 : 。 。 a l 、 19 5 8 , 3 7 : 8 3 7 一 4 1
刘诗平等 . `卜草药 . 19)< 1 , 2 2 ( 4) : 18 2 一 l料
梁克军 . 「} , 草药通讯 . l t)7 (, , 〔3 ) : 3t) 一 4 3李俊义等 . 华西药杂志 . 19 94 , 9 ( 1 ) : 3 9 一 4 ( )
迟玉森等 . ` } , [动衍办 D比 . 1()’ 9 , , : 7 5一阴
迟 瓦森等 . 山东师范大学学报 . 19 95 , 9 : 12 一 曰
收稿 日期 : 2 )`0 3一〔)3 一 15