全 文 ：2008年 5月第 28卷第 3期
May.2008　Nol.28 　No.3
现　代　中　医　药
ModernTraditionalChineseMedicine · 61　·
实 验 研 究
柿叶黄酮对 L—NAME诱导的
高血压大鼠血压的影响＊
覃斐章　　林　兴　　张绪东　　黄仁彬
(广西医科大学药理学教研室 ,南宁 530021)
摘　要:目的 观察柿叶黄酮(PLF)对 SD大鼠和 NG-nitro-L-arginine-methlester(NG-硝基 -左旋精氨
酸甲酯 , L-NAME)诱导的高血压大鼠的降血作用。方法 用 L-NANE复制高血压大鼠模型。 (1)PLF单次股
静脉给药 , 以颈总动脉插管法连接多媒体生物信号记录系统测定给药前后大鼠的收缩压(SP)、舒张压(DP)和心
率(HR);(2)PLF灌胃 4W,每周末以大鼠尾动脉测压法测量给药前后清醒大鼠的血压。结果 (1)在急性降压
实验中 , PLF能使正常大鼠和 L-NAME诱导的高血压大鼠显著降低(P<0.05或 P<0.01), 但对去甲肾上腺
素(NE)和异丙肾上腺素(ISO)的作用无明显影响;(2)慢性降压实验观察到:与药前相比 , PLFH组第 15 d血压明显降低(P<0.05),第 30d达高峰 , PLFL组和 PLFM组第 20d血压明显降低(P<0.05), 第 30 d达高峰。 Ver组停药后 5d后血压恢复至给药前水平 ,而 PLF各剂量组停药后 15d后才恢复至给药前水平。结论 PLF对正常
大鼠和 L-NAME诱导的高血压大鼠的血压和心率均有降低作用。
关键词:柿叶黄酮;L-NAME诱导的高血压大鼠;降压
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1002-168X(2008)03-0061-03
TheHypotensiveEffectsofPersimmonLeafFlavonoids
Qinfeizhang　　LinXing　　ZhangXudong　　HuangRenbin
(DepartmentofPharmacology, GuangxiMedicalUniversity, Nanning530021, China)
Abstract:ObjectiveTostudyhypotensiveefectsofpersimmonleafflavonoids(PLF)onSDratsandNG-nitro-
L-arginine-methlester(L-NAME)inducedhypertensiveinrats.MethodsHypertensiveratswereproducedbyL-
NAME.(1)Multimediabiologicalsignalanalysissystemwasusedtorecordsystolicbloodpressure(SP), diastolicblood
pressure(DP)andheartrate(HR)bycarotidarteryintubationbeforeandafterPLFwasadministratedviafemoralvein.
(2)Persimmonleafflavonoidswasgivenbyintragastricfor4Weeks, andbloodpressureandHRweremeasuredweekly
withtail-cufmethodbeforeandaftertheadministrationofmedicine.Results(1)Inacutehypotensiveexperiments,
PLFcouldmarkedlyreducetheBPinnormalratsandL-NAMEinducedhypertensiveinrats(P<0.05 orP<0.
01), butdidnotinfluencetheeffectsofnorepinephrine(NE)andisoprenaline(ISO).(3)Afterintragastricadminis-
trationofPLFfor4 weeks, BP(P<0.05 orP<0.01)wassignificantlyreducedwithadose-dependentmanner.In
PLFHgroup, andobviousreductionofBP(P<0.05)occuredin15thdayafteradministrationandreachedpeakeffectin
the30thday.InPLFLgroupandPLFMgroup, anobviousreductionoftheBP(P<0.05)wasfoundinthe20thdayandreachedpeakeffectinthe30thday.Fivedaysafterthewithdrawalofdrugs, BPreturnedtothelevelbeforetreatmentin
the30thday.Fivedaysafterthewithdrawalofdrugs, BPreturnedtothelevelbeforetreatmentinVergroupbutittook
fifteendaystoinPLFgroups.ConclusionPlfcoulddecreasePBandHRinnormalratsandL-NAMEinducedhyper-
tensiveinrats.
Keywords:persimmonleafflavonoids;L-NAMEinducedhypertensiveinrats;antihypertension
　　柿叶经考证为柿科(Ebenaceae)柿属(Diospy-
rosL.)植物柿(DiospyroskakiL.f.)的干躁叶 [ 1] ,
国内外药理研究表明柿叶有增加冠脉流量 、降血
压 、止血 、解热抑菌 、抗癌 、增强免疫功能等广泛的
药理活性[ 2] 。查阅有关资料提示 ,柿叶中的黄酮类
成分为作用于心血管系统的主要有效成分 [ 3] 。目
前关于柿叶的降血压作用少有报道 ,本实验用聚酰
胺树脂分离提纯富集柿叶黄酮 ,研究其对 SD大鼠
和 L-NAME诱导的高血压大鼠血压的影响 。
1　材料
1.1　仪器　ALC-nibp无创尾动脉压测量分析系
统(上海奥尔科特有限责任公司);MS4000生物信号
定量记录分析系统(广州市龙飞达科技有限公司)。
1.2　试药　柿叶黄酮(由广西医科大学药理教研
＊ 基金项目:广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻 0630002-2A)
DOI :10.13424/j.cnki.mtcm.2008.03.028
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室自行制备 ,新鲜柿叶用 70 %乙醇提取后用乙酸
乙酯萃取分离得到一定含量的粗黄酮 ,然后用聚酰
胺树脂吸附分离黄酮类物质 ,含量达 76%,批号:
070502);L-NAME(Sigma公司 ,美国);盐酸维拉
帕米注射液(浓度为 2.5×10-4g/L,上海和丰制药
有限公司 ,批号:060901)。
1.3　动物　SD大鼠 ,雌雄各半 ,体重(200±10)g,
由广西医科大学实验动物中心提供。
2　方法
2.1　复制高血压大鼠模型　参照 RossiMA[ 4]等的
方法复制高血压模型 ,每日 17:00待大鼠清醒后 ,
灌胃给予一氧化合俣酶抑制剂 L-NAME6mg/(kg
· d),连续给药 3W。根据张维忠等建议的动态血
压暂时参考标准 [ 5] ,以给 L-NAME3W后收缩压 /
舒张压符合白昼 >150 /100 mmHg, 夜间 >140/
90mmHg的大鼠为入选高血压大鼠的标准 。
2.2　急性降压实验　高血压大鼠和 SD大鼠均以
20%乌拉坦(5 mL/kg)腹腔麻醉 ,气管插管 ,连接
MS4000生物信号分析系统 ,记录收缩压(SP)、舒
张压(DP)和心率(HR)。给药剂量:柿叶黄酮低剂
量(PLFL)组 2.1mg/kg,柿叶黄酮中剂量(PLFM)组
4.2mg/kg,柿叶黄酮高剂量(PLFH)组 8.4mg/kg,
维拉帕米(Ver)组 0.1mg/kg和 NS组。股静脉给
药 ,记录 0, 1, 2, 4, 5, 10min时的 SP, DP和 HR的变
化情况 。
2.3　慢性降压实验　取高血压大鼠 50只 , SD大
鼠 10只 ,分 6组 ,每组 10只 ,即 PLFL组(0.067g/
(kg· d)), PLFM组(0.134g/(kg· d)), PLFH组(0.268g/(kg· d)), Ver组(0.001g/(kg· d)), L
-NAME组和 NS组。各组均于每日固定时间灌胃
给药 ,连续 8W,每周用 ALC-nibp无创尾动脉压
分析系统测定清醒大鼠尾动脉压 ,观察给药前后和
停药 2W后血压的变化情况。
2.4　统计学处理　所有数据均以(x±s)表示 ,采
用 SPSS软件进行配对 t检验。
3　结果
3.1　静脉柿叶黄酮对 SD大鼠和 L-NAME诱导的
高血压大鼠血压的影响　静脉 PLF后很快出现降压
作用 ,最大降压时间出现在给药后 1 ～ 2min, PLF各
剂量组药后 1min、2min、4min、5min的 SP和 DP值
与药前比有显著性差异(P<0.01或 P<0.05),药
后 10min血压恢复至药前水平。PLF各剂量组均能
剂量依赖性的降低 SP和 DP值 ,其中 DP值降低更
为明显 。PLF对 SD大鼠和 L-NAME诱导的高血压
大鼠均有降压作用 ,但对 L-NAME诱导的高血压大
鼠的降压幅度更大 。PLF药前 HR与药后 5min内
的 HR相比差异均非常显著(P<0.01), 3个剂量降
低 HR呈剂量依赖性。结果见表 1、表 2。
表 1　静注柿叶总黄酮对 SD大鼠血压的影响(kBp, x±s, n=10)
组别 给药前 1min 2min 4min 5min 10min
NS组 SP 13.04±1.17 12.94±1.22 13.15±0.79 12.87±0.85 13.06±2.10 13.20±0.54DP 10.79±1.32 10.84±1.63 10.65±0.94 10.44±1.12 10.87±1.84 11.02±0.72
Ver组 SP 12.75±2.30 10.22±2.01
＊＊ 10.53±1.94＊＊ 10.63±0.92＊＊ 10.14±1.59＊＊ 10.47±1.36＊＊
DP 10.81±1.90 7.40±1.50＊＊ 7.83±1.34＊＊ 7.96±0.85＊＊ 7.33±1.24＊＊ 7.43±1.79＊＊
PLFL组 SP 13.42±1.57 11.88±1.05
＊ 12.09±0.87＊ 12.88±1.05 13.09±0.87 13.24±2.03
DP 10.93±2.21 8.67±0.95＊＊ 8.86±1.33＊＊ 9.67±0.95＊ 10.06±1.33 10.73±1.70
PLFM组 SP 13.11±1.42 11.07±0.63
＊ 11.25±1.68＊ 12.26±2.03 12.56±2.03 13.08±0.88
DP 10.84±0.93 8.24±1.24＊＊ 8.59±1.03＊ 9.11±1.37＊ 9.51±1.37＊ 10.57±1.34
PLFH组
SP 13.07±0.99 10.35±1.26＊＊ 10.27±1.46＊ 11.30±0.87＊ 11.79±1.35＊ 12.84±2.14
DP 10.85±1.13 7.59±1.45＊＊ 7.75±0.85＊ 8.34±1.36＊ 8.80±1.65＊ 10.35±1.45
　　与给药前比较:＊P<0.05, ＊＊P<0.01
表 2　静注柿叶黄酮对 L-NAME诱导的高血压大鼠血压的影响(kBP, x±s, n=10)
组别 给药前 1min 2min 4min 5min 10min
NS组 SP 19.43±0.55 19.64±1.05 19.24±0.78 19.68±1.33 19.32±1.32 19.25±1.22DP 15.46±1.09 15.23±1.94 15.36±1.32 15.32±1.07 15.42±1.13 15.91±1.28
Ver组 SP 19.30±2.15 15.18±2.36
＊＊ 15.33±1.92＊＊ 15.17±2.26＊＊ 15.20±1.59＊＊ 15.14±1.82＊＊
DP 15.92±1.93 10.84±1.54＊＊ 10.53±2.11＊＊ 10.74±1.34＊＊ 10.63±1.57＊＊ 10.91±1.85＊＊
PLFL组
SP 19.43±1.03 17.45±1.90＊ 17.61±2.45＊ 17.92±1.04＊ 18.01±1.23＊ 19.46±1.39
DP 15.94±1.21 13.32±1.46＊＊ 13.54±1.09＊ 14.05±1.62＊ 13.94±1.55＊ 16.01±1.45
PLFM组
SP 19.50±0.69 16.97±1.30＊＊ 17.03±2.47＊ 17.33±1.54 17.40±1.73＊ 19.44±1.15
DP 15.83±1.04 12.56±1.85＊＊ 12.79±1.92＊＊ 13.14±1.23＊＊ 13.23±1.70＊＊ 15.79±1.43
PLFH组 SP 19.88±0.98 16.50±2.34
＊＊ 16.67±2.20＊＊ 17.12±1.37＊＊ 17.23±1.27＊＊ 19.53±0.78
DP 15.14±1.35 11.17±1.75＊＊ 11.41±1.75＊＊ 11.65±2.11＊＊ 11.82±1.91＊＊ 15.39±1.70
　　与给药前比较:＊P<0.05, ＊＊P<0.01
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3.3　PLF对去甲肾上腺素(NE)的影响　静脉注
PLF4.2 mg/kg后立即静脉注 NE0.01 mg/kg, SD
大鼠和 L-NAME诱导的高血压大鼠的血压均先
降后升 ,其血压升高值与单独 NE0.01mg/kg后血
压升高值无显著性差异(P>0.05),结果见表 3。
表 3　静注 PLF后立即精注 NE与单独静注 NE血压
升高值的比较(kBp, x±s, n=10)
组别 NE PLF+NE
正常大鼠 4.0±2.1 4.2±1.8
L-NAME诱导的高血压大鼠 5.4±2.5 5.9±2.3
3.4　PLF对异丙肾上腺素(ISO)的影响　静注
PLF4.2mg/kg后立即静注 ISO0.5mg/kg, SD大鼠
和 L-NAME诱导的高血压大鼠的血压变化情况
与单独 i.vISO后血压的变化情况基本一致。静注
普奈洛尔 0.5mg/kg后立即静注 ISO0.5mg/kg则
出现 ISO作用被阻断 。
3.5　灌胃给予 PLF对 L-NAME诱导的高血压大
鼠血压的影响　L-NAME组大鼠 BP与 NS组相
比均明显升高(P<0.01);连续给药 4W, PLFH组
在给药 15 d后血压开始出现下降趋势 (P <
0.05), PLFL组 、PLFM组在给药 20d后血压也开始
下降(P<0.05), PLF各剂量组给药 30d后血压
降至最低 ,停药 5d后 , Ver组血压很快恢复至药前
水平 ,而 PLF组的降压作用较持久 ,至停药 15d后
才恢复至药前水平;PLF各剂量组药前 HR与药后
2 ～ 4W内的 HR相比有显著性差异(P<0.05), 3
个剂量组降低 HR呈剂量依赖性。结果见表 4。
表 4　灌胃给予柿叶黄酮对 L-NAME诱导的高血压大鼠血压的影响　(x±s, n=10)
组别 给药前 给药 15d后 给药 20d后 给药 30d后 停药 5d后 停药 15d后
NS组 SP 13.01±0.77
＊＊ 13.03±0.56＊＊ 12.80±0.57＊＊ 13.14±0.46＊＊ 12.87±0.97＊＊ 12.97±0.89＊＊
DP 10.83±0.85＊＊ 10.71±0.92＊＊ 10.91±0.58＊＊ 10.79±0.82＊＊ 10.98±0.56＊＊ 10.76±1.32＊＊
Ver组 SP 19.32±0.66 19.75±1.13 19.96±1.54 19.55±0.98 19.38±0.78 19.46±0.97DP 15.85±1.32 15.99±0.81 16.13±0.75 15.83±1.12 15.85±1.23 15.94±1.65
PLFL组 SP 19.68±1.11 19.12±0.93
＊ 18.79±1.19＊ 18.12±1.10＊ 19.15±1.35 19.75±1.45
DP 16.02±0.81 15.24±0.83 14.18±0.51＊ 13.30±0.60＊ 15.44±0.89 16.35±0.79
PLFM组
SP 19.32±1.16 18.75±1.08 17.81±0.88＊ 17.06±1.15 18.87±1.04＊ 19.34±0.96
DP 15.74±0.77 15.02±0.87 14.01±0.80＊ 12.50±0.75＊ 15.05±1.35 15.75±0.78
PLFH组 SP 19.17±0.90 18.04±0.75
＊ 17.06±0.48＊ 16.08±0.65＊＊ 18.00±1.34＊ 19.18±0.45
DP 16.09±0.85 13.73±0.50＊ 12.81±0.69＊＊ 11.95±0.79＊＊ 13.92±0.87＊ 16.09±1.83
　　与 L-NAME组比交:＊P<0.05, ＊＊P<0.01;
3　讨论
实验观察到静注 PLF后 , SD大鼠和 L-NAME
诱导的高血压大鼠迅速出现降压效应 ,最大降压效
应均在 2min以内 ,降压持续时间短 , 10min左右恢
复至给药前水平 ,说明 PLF降压迅速可能具有静脉
给药有前景。 PLF对两种大鼠的降压作用表现为
相似的时效关系 ,但在相同剂量和相同时间对 L-
NAME诱导的高血压大鼠的降压幅度略大于对 SD
大鼠的降压幅度 。灌胃给予 PLF观察到 , PLF的降
压作用表现为降压缓慢平稳 ,在给予 PLF15 ～ 20 d
后血压开始出现下降趋势 ,至 30d左右达最大降压
效应。 PLF的降压幅度虽比不上 Ver,但停药后 5d,
Ver组血压很快恢复至药前水平 ,而 PLF的降压作
用较持久 ,至停药 15d后才恢复至前药水平 ,说明
PLF可能具有较好的远期疗效。
因 PLF不影响 NE和 ISO对心血管作用 ,表明
PLF的降压作用不是通过阻断 α或 β受体而达到
的 [ 6] 。PLF对舒张压的影响程度明显高于对收缩
压的影响程度 ,因而认为 PLF主要是通过扩张外周
血管而起降压效应。 PLF通过抑制心脏 ,减慢心率
而减少心输出量和扩张外周血管可能为其降压机
制 ,这与钙通道阻滞钙内流入细胞内而使心率减
慢 ,心肌收缩力减弱 ,舒张血管平滑肌的作用相似 ,
是否是钙通道阻滞剂尚待进一步研究 。
参考文献
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(收稿日期:2008-02-22)