全 文 ：收稿日期: 2008-11-17
修回日期: 2009-01-29
作者简介:覃斐章 ( 1981-) ,女 ,硕士研究生 ,主要从事心血管药理学
研究。
广西科学 Guangxi Sciences 2009, 16( 3): 310～ 313
柿叶黄酮的降血压作用及其作用机制研究
Antihypertensive Effect and Its Mechanism of
Persimmon Leaf Flavonoid
覃斐章 ,林　兴 ,张绪东 ,黄仁彬
QIN Fei-zhang, LIN Xing, ZHANG Xu-dong, HUANG Ren-bin
(广西医科大学药理学教研室 ,广西南宁　 530021)
( Department of Pharmacology , Guangxi Medical Universi ty, Nanning, Guangxi, 530021, China)
摘要:用一氧化氮合酶抑制剂 NG -硝基 -L-精氨酸甲酯 ( NG -nitr o-L-a rginine-methlester, L-NAM E)复制高血压大
鼠模型研究柿叶黄酮对高血压大鼠的降血压作用。试验分为正常对照组、模型对照组 ,柿叶黄酮低、中、高剂量组
( 20mg· kg- 1· d- 1 , 40mg· kg- 1· d- 1, 80mg· kg- 1· d- 1 )、卡托普利组 ( 10 mg· kg- 1· d- 1 )。 每周测大鼠尾动
脉压 ,给药 4周后处死大鼠 ,测定血清中一氧化氮 ( NO)、血浆内皮素 ( ET )和血管紧张素 ( Ang )Ⅱ的含量。结果显
示 ,柿叶黄酮能明显降低 L-N AM E诱导的高血压大鼠的血压 ( P < 0. 05) ,并在剂量范围内呈剂量依赖性 ;与模
型对照组相比 ,血清 NO含量上升 [( 77. 15± 15. 14)μmol· L- 1v s( 30. 77± 10. 62)μmol· L- 1 , P < 0. 01 ],血浆
ET含量降低 [ ( 56. 21± 9. 23) pg· ml- 1 v s( 87. 28± 11. 75) pg· ml- 1 , P < 0. 01 ],血浆 AngⅡ含量降低 [( 503. 4±
33. 40) pg· ml- 1v s( 666. 62± 33. 45) pg· ml- 1 , P < 0. 01]。 柿叶黄酮可能是通过增加内源性舒血管活性物质的
释放和减少内源性收缩血管活性物质的释放来调节两者之间的平衡而发挥其抗高血压作用。
关键词:柿叶黄酮　降血压　高血压
中图法分类号: R285　　文献标识码: A　　文章编号: 1005-9164( 2009) 03-0310-04
Abstract: In o rder to study hypotensiv e effects and i ts mechanism of persimmon leaf f lavonoid,
hypertensive in rats w as indused by L-N AME. Hypertensiv e rats w ere induced by N G-vi tro-L-
arginine-methlester ( L-N AME) , and were devided into six groups. The normal control g roup w as
t reated by normal saline, model g roup was t reated by L-N AME alone, Low-, mid-, and high-dose
of f lav one groups w ere t reated by f lav one at the doses of 20, 40 and 80mg· kg- 1· d- 1 ,
respectively , and captopril g roup was treated by captopril at dose of 10 mg· kg- 1· d- 1 . Tail blood
pressure was measured every w eek. Rats were sacrificed to determine serum ni tric oxide ( NO) ,
plasma endothelin ( ET) and angiotensionⅡ ( AngⅡ ) af ter four w eeks of treatment. Persimmon leaf
flavonoid could decrease the tail blood pressure of rats in a dose dependant manner ( P <
0. 05) . Persimmon leaf f lav onoid could increase the serum NO ( 77. 15± 15. 14 vs 30. 77± 10. 62
μmol· L- 1 , P < 0. 01) , and decrease the plasma ET ( 56. 21± 9. 23 v s 87. 28± 11. 75 pg· ml- 1 , P
< 0. 01) and AngⅡ ( 503. 4± 33. 40 vs 666. 62± 33. 45 pg· ml- 1 , P < 0. 01) as compared wi th
model g roup. It is suggested that persimmon leaf f lav onoid may adjust the imbalance of
cardiovascular activ e substances by increasing the release of endogenous vasodi lators and reducing
the release of endogenous vasoconstricto rs, resulting in antihypertention.
Key words: persimmon leaf f lavonoid, antihypertension, hypertensive
　　高血压是我国常见的心血管疾病 ,在我国发病率
高达 10%～ 20% ,是危害人类健康的主要疾病。目前
寻找安全可靠 ,不良反应少的降血压药是高血压病的
研究重点。 黄酮对心血管系统具有良好的药理学作
用 [ 1]。柿科 ( Ebenaceae)柿属 (Diospy ros L. )植物柿
(Diospyros kaki L. f. )的新鲜或干燥叶 ,具有抗菌消
炎、生津止渴、清热解毒、润肺强心、镇咳止血、抗癌防
癌等多种保健功能 ,可以用于治疗冠心病、心绞痛、胃
溃疡出血、肺结核出血、功能性子宫出血等内脏出血
310 Guangx i Sciences, Vol. 16 No. 3, August 2009
DOI : 10. 13656 /j . cnki . gxkx . 2009. 03. 034
证 [2 ]。目前认为 ,柿叶的主要有效成分之一就是黄酮
类 [3 ]。本实验用聚酰胺树脂分离提纯富集柿叶黄酮 ,
研究其降血压作用。
1　材料和方法
1. 1　仪器
　　 ALC-nibp无创尾动脉血压测量分析系统 (上海
奥尔科特有限责任公司出品 ) ; 722s型可见分光光度
计 (上海精密科学仪器有限公司出品 ) ; SN-682γ闪烁
计数器 (上海核福光电仪器有限公司出品 )。
1. 2　试药
　　柿叶黄酮由广西医科大学药理教研室自行制备 ,
新鲜柿叶用 70%乙醇提取后用乙酸乙酯萃取分离得
到一定含量的粗黄酮 ,然后用聚酰胺树脂吸附分离黄
酮类物质 ,含量达 76% ,批号: 070502。 L-NAME是
美国 Sigma公司产品。卡托普利是常州制药厂产品 ,
批号: 20060611。内皮素 ( ET)试剂盒和血管紧张素
( Ang )Ⅱ试剂盒是北京北方生物技术研究所产品 ,批
号: 20070429、 20070430。 NO试剂盒是南京建成生物
工程研究所产品 ,批号: 20070405。
1. 3　动物
　　 SD大鼠 60只 ,♂ ,体重 ( 200± 10) g ,由广西医科
大学实验动物中心提供。
1. 4　复制高血压大鼠模型
　　根据 Sigmon等 [4 ]的方法 ,将 L-N AME溶于水中
( 75g· 100L- 1 )连续喂饲 3周 ( 75mg· kg- 1· d- 1 )复
制高血压大鼠模型。
1. 5　实验分组及给药
　　取高血压大鼠 50只 , SD大鼠 10只 ,分为 6组:
柿叶黄酮低剂量组 ( 20 mg· kg- 1· d- 1 )、柿叶黄酮中
剂量组 ( 40 mg· kg- 1· d- 1 )、柿叶黄酮高剂量组 ( 80
mg· kg- 1· d- 1 )、卡托普利组 ( 10 mg· kg- 1· d- 1 )、
模型对照组 (灌服等容积蒸馏水 )、正常对照组 (灌服
等容积蒸馏水 )。每组 10只 ,每日给药 1次 ,连续给药
4周。
1. 6　指标检测
　　每周用 ALC-nibp无创尾动脉血压测量分析系
统测量清醒状态下大鼠尾动脉血压。完成血流动力学
指标测定后 ,上述各组动物以戊巴比妥 30mg· kg- 1
腹腔注射麻醉 ,迅速从腹主总动脉取血 ,用分光光度
法检测血中 NO,放免法测定血浆 ET和 AngⅡ含量 ,
均按说明书操作。
1. 7　统计学处理
　　实验数据采用 SPSS 10. 0软件处理 ,以 x-± s表
示 ,多组间比较采用方差分析 ,两均数比较用 t检验。
2　结果
2. 1　L-NAME处理后血压测定值变化
　　对照组和高血压组在开始实验前 (即正常血压
值 ) ,收缩压 ( SP)和舒张压 ( DP)均无显著性差异 ;高
血压组喂饲 L-N AME 3周后 ,收缩压 ( SP)平均升高
46. 59% ( P < 0. 05 ) ,舒张压 ( DP)平均升高 42. 59%
( P < 0. 05) ,而对照组 3周后收缩压和舒张压均无
显著性差异。 结果见表 1。
表 1　 L-NAME处理 3周后血压测定值变化 ( kPa,x-± s, n=
10)
Table 1　 The change of BP induced by treatment with L-
NAME for 3 weeks( kPa, x-± s,n= 10)
组别
Group
血压
Blood pressu re
正常
Normal
3周后
3 w eeks later
对照组
Cont rol
group
SP 13. 01± 0. 70 13. 34± 0. 46
DP 10. 83± 0. 35 10. 99± 0. 41
高血压组
Hypertension
group
SP 12. 75± 0. 87 19. 45± 0. 69* #
DP 10. 79± 0. 50 15. 95± 1. 04* #
　　与高血压组的正常血压比较: * P < 0. 05;与对照组比较: # P
< 0. 05。 vs. normol value in hypertension group: * P < 0. 01; vs. cont rol
g roup: # P < 0. 05.
2. 2　柿叶黄酮对一氧化氮缺乏性高血压大鼠血压的
影响
　　模型对照组大鼠收缩压 ( SP)、舒张压 ( DP)、平均
压 ( M P)与正常对照组相比均明显升高 ( P < 0. 01) ;
连续给药 4周 ,卡托普利组与模型对照组相比血压显
著降低 ( P < 0. 01) ;柿叶黄酮高剂量组在给药第 2
周后血压开始出现下降趋势 ( P < 0. 05) ,柿叶黄酮
中、低剂量组在给药第 3周后血压也开始下降 ( P <
0. 05) ,柿叶黄酮各剂量组在给药第 4周后降压作用
更为明显 , SP、 DP、 MP与模型对照组相比显著性下
降 ( P < 0. 05或 P < 0. 01) ,柿叶黄酮对血压的降低
呈剂量依赖性。结果见表 2。
2. 3　柿叶黄酮对一氧化氮缺乏性高血压大鼠血浆
ET, AngⅡ及 NO含量的影响
　　模型对照组大鼠血浆 ET、 AngⅡ含量均较对照
组明显升高 ( P < 0. 01) , NO含量较正常对照组明显
降低 ( P < 0. 01)。给药组各组血浆 ET和 AngⅡ含量
较模型对照组有所降低 , NO含量有所升高 ( P <
0. 05)。柿叶黄酮中、高剂量组可以显著升高血清 NO
含量。 柿叶黄酮对血浆 ET和 AngⅡ含量的降低及
NO含量的升高均呈剂量依赖性。结果详见表 3。
311广西科学　 2009年 8月　第 16卷第 3期
表 2　柿叶黄酮对一氧化氮缺乏性高血压大鼠血压的影响 ( kPa,x-± s,n= 10)
Tabl e 2　 Effect of persimmon leaf fl avonoid on BP of L-NAME induced hypertensive in rats ( kPa,x-± s, n= 10)
组别
Group
血压
Blood
pressure
给药前
Before t reatmen t
给药 1周后
One week af ter
adminis tration
给药 2周后
Tw o w eeks af ter
administ ration
给药 3周后
Th ree w eeks af ter
administ ration
给药 4周后
Four w eeks af ter
administ ration
正常对照组
Normal cont rol group
SP 13. 01± 0. 70 12. 71± 0. 61 13. 01± 0. 56 12. 80± 0. 57 13. 14± 0. 46
DP 10. 83± 0. 85 10. 64± 0. 73 10. 71± 0. 92 10. 91± 0. 58 10. 79± 0. 82
M P 11. 44± 0. 82 11. 22± 0. 93 11. 36± 0. 75 11. 42± 0. 60 11. 46± 0. 95
模型对照组
Model group
SP 19. 41± 0. 71* 19. 57± 0. 65* 20. 09± 0. 94* 19. 86± 0. 90* 19. 45± 0. 69*
DP 15. 95± 1. 04* 16. 01± 0. 95* 15. 88± 0. 85* 16. 05± 0. 74* 15. 92± 1. 05*
M P 16. 93± 0. 47* 17. 02± 0. 94* 17. 11± 0. 86* 17. 14± 0. 91* 16. 93± 0. 55*
卡托普利组
Captopri l group
SP 19. 64± 0. 70 15. 23± 0. 77# # 15. 02± 0. 73# # 14. 88± 0. 73# # 14. 93± 0. 59# #
DP 15. 85± 0. 96 11. 84± 0. 94# # 11. 64± 0. 83# # 11. 50± 0. 74# # 11. 65± 0. 55# #
M P 16. 94± 0. 77 12. 84± 0. 73# # 12. 64± 1. 08# # 12. 50± 1. 15# # 12. 62± 0. 65# #
黄酮低剂量组
Low dosage of
f lavonoid
SP 19. 68± 1. 11 19. 37± 1. 20 19. 12± 0. 93 18. 79± 1. 19 18. 12± 1. 10#
DP 16. 02± 0. 81 15. 70± 0. 91 15. 44± 0. 83 14. 38± 0. 51# 13. 50± 0. 60#
M P 17. 07± 0. 90 16. 75± 0. 57 16. 50± 0. 88 15. 69± 0. 72 14. 89± 0. 71#
黄酮中剂量组
Medium dosage of
f lavonoid
SP 19. 32± 1. 16 19. 00± 1. 22 18. 75± 1. 08 17. 81± 0. 88# 17. 06± 1. 15#
DP 15. 74± 0. 77 15. 45± 0. 63 15. 22± 0. 87 14. 11± 0. 80# 12. 70± 0. 75#
M P 16. 74± 0. 96 16. 47± 0. 75 16. 23± 0. 64 15. 20± 0. 93 14. 02± 0. 69# #
黄酮高剂量组
High d osag e of
f lavonoid
SP 19. 17± 0. 9 18. 77± 1. 07 18. 04± 0. 75# 17. 06± 0. 48# # 16. 08± 0. 65# #
DP 16. 09± 0. 85 15. 62± 0. 90 13. 93± 0. 50# 13. 01± 0. 69# # 12. 05± 0. 79# #
M P 16. 95± 1. 07 16. 50± 0. 48 15. 12± 0. 54# 14. 22± 0. 70# 13. 26± 0. 54# #
　　与正常对照组比较 ,* P < 0. 01;与模型对照组比较 ,# P < 0. 05, # # P < 0. 01。 vs. the normal cont rol group: * P < 0. 01; vs. model group:
# P < 0. 05,# # P < 0. 01.
表 3　柿叶黄酮对一氧化氮缺乏性高血压大鼠血浆 ET,AngⅡ 及 NO含量的影响 (x-± s, n= 10)
Tabl e 3　 Effects of persimmon leaf fl avonoid on the l evel s of ET, AngⅡ and NO in L-NAME induced hypertensive in rats (x-±
s ,n= 10)
组别
Group
E T含量
ET content ( pg· ml- 1 ) AngⅡ含量AngⅡ content ( pg· ml- 1 ) NO含量NO con tent(μm ol· L- 1)
正常对照组 Normal cont rol 46. 45± 6. 05 477. 98± 35. 68 105. 45± 19. 53
模型对照组 Model group 87. 28± 11. 75* 666. 62± 33. 45* 30. 77± 10. 62*
卡托普利组 Captopril g roup 49. 57± 8. 25# # 489. 97± 38. 45# # 82. 81± 16. 86# #
黄酮低剂量组 Low dosage of f lavonoid 70. 94± 15. 05# 592. 84± 29. 21# 42. 79± 11. 85#
黄酮中剂量组 M edium dosage of f lavonoid 66. 35± 9. 45# 570. 82± 30. 78# 62. 00± 11. 85# #
黄酮高剂量组 High dosage of flavonoid 56. 21± 9. 23# # 503. 45± 33. 40# # 77. 15± 15. 14# #
　　与正常对照组比较 ,* P < 0. 01;与模型对照组比较 ,# P < 0. 05,# # P < 0. 01。 vs. normal cont rol group: * P < 0. 01; vs. model g roup: # P
< 0. 05,# # P < 0. 01.
3　讨论
　　应用一氧化氮合成酶抑制剂 L-N AME复制高
血压大鼠模型 ,该方法简单易行 ,连续喂饲 L-N AME
3周后即可形成稳定的高血压 [ 5]。在本实验中 ,与对
照组相比 ,高血压组收缩压和舒张压明显升高 ( P <
0. 05)和持续而稳定的高血压表明造模成功。 给药 1
月 ,给药组各组大鼠的尾动脉血压较模型对照组明显
降低 ( P < 0. 05) ,而且在给药剂量范围内呈剂量依
赖性。表明柿叶黄酮及卡托普利在给药后均具有良好
的降血压作用。
　　血管内皮细胞既可以产生收缩血管物质 ,也能产
生舒张血管物质 ,在维系血管舒缩平衡、正常张力中
起着重要作用 [6 ]。 NO是内皮细胞释放的主要舒血管
物质 ,除可以直接舒张血管外 ,还可以通过阻断 Ang
Ⅱ对近曲小管钠的重吸收及降低胞内 cAMP影响肾
312 Guangx i Sciences, Vol. 16 No. 3, August 2009
脏对水盐的重吸收和滤过 ,抑制肾小球旁细胞分泌等
作用调节血压 [7 ];此外 , NO还可以使血管平滑肌细
胞处于细胞增殖静止状态抗血管壁增殖 [ 8]。 ET是由
血管内皮分泌的缩血管多肽 ,是目前已知缩血管作用
最强最持久的细胞因子 ,且具有很强大的促进平滑肌
增殖的作用 [9 ]。目前认为 ,血管壁中还存在着持久作
用的促生长因子 ,如 AngⅡ [10 ] . AngⅡ除了产生血管
收缩效益导致血压增高外 ,也能促进血管增殖 ,产生
心脏血管重构效应 [ 11]。 AngⅡ 、 ET、 NO之间相互联
系 ,相互影响。 ET有血管紧张素转化酶活性 [ 12] ,可以
催化合成 AngⅡ ,而 AngⅡ可诱导内皮细胞 ET基因
表达增强 [ 13] ,故 ET和 AngⅡ可以相互促进。 AngⅡ
与 NO除具有相反的血管紧张度外 ,在高血压动物模
型中也存在相反的血管和细胞增殖反应 [14 ]。 ET和
NO是一对具有拮抗作用的血管活性物质 ,它们在生
物学效应和生物合成方面有相互调节作用 ,它们之间
的动态平衡维持着血管的正常张力 [ 9]。本实验结果显
示 ,模型对照组大鼠血压明显升高 ,血清 NO水平降
低 , ET水平显著升高 ,这与鄢定红等 [15 ]研究结果一
致。经柿叶黄酮治疗后 ,大鼠血清 NO水平显著升高 ,
血浆 ET和 AngⅡ水平降低 ,提示柿叶黄酮的降压作
用可能与促进血管内源性舒血管物质的释放及抑制
内源性缩血管物质的释放 ,调节体内两者的平衡状态
有关 ,其确切的降压机制有待进一步研究。
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(责任编辑:邓大玉 )　　
313广西科学　 2009年 8月　第 16卷第 3期