全 文 ：齿缘草的质量标准研究
马丽娟，巴俊杰* ，布 仁，苗 娜，靳 瑞，田 林，周莹莹
(内蒙古医学院，内蒙古 呼和浩特 010110)
摘要 目的:研究蒙药材齿缘草的内在质量，为制定其质量标准提供参考。方法:采用 2010 年版中国药典方
法进行水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物的测定;采用薄层色谱法进行薄层色谱鉴别;采用高效液相色谱法进
行槲皮素和山奈素总量的含量测定。结果:10 批齿缘草中水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物及槲皮素和山奈素
总量的含量分别为 8. 16% ～ 8. 46%、14. 73% ～ 16. 19%、3. 91% ～ 4. 80%、17. 12% ～ 19. 39% 和 0. 0407% ～
0. 1032%，并建立了薄层色谱鉴别方法。结论:为制定齿缘草的质量标准提供了科学依据。
关键词 蒙药材;齿缘草;质量标准
中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2012)05-0563-03
收稿日期:2011-12-27
基金项目:国家药典委员会 2010 年度药品标准提高项目(453)
作者简介:马丽娟(1986 -)女，硕士研究生，主要从事中蒙药的质量标准研究。
* 通讯作者:巴俊杰，Tel:13948191552，E-mail:bajunjie1982@ sina. com。
齿缘草，蒙药名额布森-瓦德，为紫草科植物石
生齿缘草 Eritrichium rupestre (Pall. )Bunge 的干燥
地上部分，分布于我国的东北、华北和西北的东部，
西伯利亚和蒙古也有分布，主产于内蒙古的中西部
和甘肃、宁夏等地〔1，2〕。该药材收载于《中华人民共
和国卫生部药品标准》蒙药分册，有杀“粘”、清热、
解毒之功能，用于治疗瘟热流感，“协日”人脉症，
“协日”热，为常用蒙药。原标准有名称、来源、性
状、性味、功能与主治、用法与用量和贮藏七项内容，
本文增加了薄层鉴别、检查(水分、总灰分和酸不溶
灰分)、浸出物和含量测定四项内容，这对提高该药
材的质量标准和质量控制水平具有重要意义。
1 仪器与试药
Agilent1200 型高效液相色谱仪、Agilent 化学工
作站、VWD 检测器;UV-2450 型紫外可见分光光度
仪(日本岛津公司) ;TD型电子天平(德国赛多利斯
股份公司) ;SLD-1 型薄层色谱摄像仪(天津思利达
色谱技术开发公司) ;薄层展开槽(上海信谊仪器
厂) ;平头点样器(上海安亭微量进样器厂) ;SX2-型
马弗炉(上海浦东荣丰科学仪器有限公司) ;101-2
型恒温干燥箱(上海景迈仪器设备有限公司) ;HH-Z
型数显恒温水浴锅(金坛市杰瑞尔电器有限公司)。
槲皮素对照品、山奈素对照品(中国药品生物
制品检定所，批号分别为 10081-200907、110861-
200808) ;预制硅胶 G薄层板(烟台市化学工业研究
所，批号 110114，规格 200 mm × 100 mm，200 mm ×
150 mm) ;甲醇为色谱纯，甲苯、乙酸乙酯、甲酸、磷
酸、盐酸、三氯化铝等均为分析纯;水为超纯水;药材
由本项目组采集和委托采集，均经内蒙古医学院蒙
药学教授那生桑、药用植物学教授鞠爱华鉴定为石
生齿缘草。
2 方法与结果
2. 1 薄层鉴别 取本品粉末 2 g，加 60 %甲醇 50
mL，置水浴中加热回流 1 h，放冷，滤过，滤液蒸干，
残渣加水 30 mL使溶解，用石油醚(30 ～ 60 ℃)振摇
提取 2 次，每次 20 mL，弃去石油醚液，水液加盐酸 5
mL，加热回流 1 h，取出，迅速冷却，用乙醚振摇提取
2 次，每次 20 mL，合并乙醚液，用水 30 mL 洗涤，弃
去水洗液，乙醚液挥干，残渣加甲醇 1 mL使溶解，作
为供试品溶液。另取槲皮素对照品、山奈素对照品，
加甲醇制成每 1 mL 各含 0. 5 mg 的溶液，作为对照
品溶液。照 2010 年版中国药典一部薄层色谱法(附
录Ⅵ B)试验，吸取供试品溶液 5 μL，对照品溶液 1
μL，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以甲苯-乙酸乙
酯-甲酸(6∶ 2∶ 1. 1)的上层液为展开剂，展开，取出，晾
干，喷以 3 %三氯化铝乙醇溶液，热风吹干，置紫外光
灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱
相应的位置上，显相同颜色荧光斑点。结果见图 1。
图 1 不同批次齿缘草样品的薄层色谱图
1 ～ 5，7 ～ 11． 10 个批次齿缘草样品 6． 山奈素和槲皮素
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DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2012.04.007
2. 2 检查
2. 2. 1 水分测定:照 2010 年版中国药典一部水分
测定法(附录Ⅸ H 第一法)测定了 10 批药材的水
分，结果见表 1，水分在 8. 16% ～8. 46%之间。
2. 2. 2 总灰分和酸不溶性灰分测定:照 2010 年版
中国药典一部灰分测定法(附录 IX K)测定了 10 批
药材的总灰分和酸不溶性灰分，结果见表 1，总灰分
在 14. 73% ～16. 19%之间，酸不溶灰分在 3. 91% ～
4. 80%之间。
2. 3 浸出物测定 照 2010 年版中国药典一部水
溶性浸出物测定法(附录 X A)项下热浸法测定了
10 批药材的浸出物含量，结果见表 1，浸出物在
17. 12% ～19. 39%之间。
表 1 齿缘草水分、总灰分、酸不溶性
灰分和浸出物测定结果(n =2)
采集地区 水分/%
总灰分
/%
酸不溶
性灰分
/%
水热浸
出物
/%
呼和浩特市武川县 8. 40 16. 19 4. 77 18. 69
呼和浩特市和林格尔县 8. 29 15. 82 4. 80 19. 39
乌兰察布市卓资县 8. 39 15. 25 4. 18 19. 16
乌兰察布市凉城县 8. 22 16. 05 4. 62 19. 02
包头市赵长城地区 8. 46 14. 73 4. 63 17. 12
包头市五当召地区 8. 25 15. 49 3. 91 17. 95
包头市固阳县 8. 23 15. 29 4. 09 17. 54
乌海市海勃湾区 8. 16 15. 15 4. 07 18. 16
乌海市海南区 8. 17 14. 98 3. 97 18. 74
银川市贺兰山地区 8. 28 15. 36 4. 21 18. 43
2. 4 含量测定
2. 4. 1 色谱条件:Hypersil ODS色谱柱(4. 6 mm ×
200 mm，5 μm) ;流动相为甲醇-0. 4 % 磷酸溶液
(45∶ 55) ;检测波长为 368 nm;流速为 1. 0 mL /min;
柱温为25 ℃。理论板数按槲皮素峰计算应不低于
6000。
2. 4. 2 对照品溶液的制备:取槲皮素对照品和山
奈素对照品适量，精密称定，加 80 % 甲醇制成每 1
mL各含 6 μg的溶液，即得。
2. 4. 3 供试品溶液的制备:取本品粉末(过三号
筛)约 1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲
醇-盐酸(4∶ 1)混合溶液 50 mL，密塞，称定重量，置
水浴中加热回流 1 h，冷却，再称定重量，用甲醇补足
减失的重量，摇均，滤过，即得。
2. 4. 4 测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试
品溶液各 20 μL，注入液相色谱仪，依法测定，即得。
2. 4. 5 线性关系的考察:精密吸取槲皮素浓度为
0. 0157 mg /mL 和山奈素浓度为 0. 0150 mg /mL 的
对照品储备液 1. 0、2. 0、4. 0、6. 0、8. 0 、10. 0 mL，分
别置入 10 mL棕色量瓶中，80 %甲醇稀释至刻线。
分别精密吸取 20μL，注入高效液相色谱仪，依法测
定，记录峰面积，以峰面积(Y)对浓度(X)进行回归
分析，结果见表 2。
表 2 线性关系考察结果(n =6)
成分 回归方程 r 线性范围/ng
槲皮素 Y =92. 296X － 3. 6893 0. 9997 31. 4 ～ 314
山奈素 Y =95. 508X － 14. 105 0. 9999 30. 0 ～ 300
2. 4. 6 精密度试验:精密吸取同一供试品(呼和浩
特市武川县)溶液，重复进样 6 次，测定峰面积积分
值。结果槲皮素峰面积的 RSD为 0. 95%;山奈素峰
面积的 RSD为 0. 71%。结果表明本方法有良好的
精密度。
2. 4. 7 稳定性试验:精密吸取同一供试品(呼和浩
特市武川县)溶液 20μL，分别于配制后 0、2、4、6、8、
12 h 进样，依法测定。结果表明槲皮素峰面积的
RSD为 0. 73%;山奈素峰面积的 RSD 为 1. 39%，供
试品溶液在 12 h内基本稳定。
2. 4. 8 重复性试验:取同一批号供试品(呼和浩特
市武川县)6 份，精密称定，依法制成供试品溶液，依
法测定。结果槲皮素含量平均值为 0. 05703%，RSD
为 0. 67%;山奈素含量平均值为 0. 04402%，RSD为
0. 76%，表明该方法重复性良好。
2. 4. 9 回收率试验:采用加样回收法。取已知含
量的同一批号供试品(呼和浩特市武川县)6 份，每
份约 0. 5 g，精密称定，精密加入 80%甲醇 30 mL、盐
酸 10 mL，摇均，精密加入槲皮素浓度为 0. 02824
mg /mL和山奈素浓度为 0. 01972 mg /mL 的对照品
混合溶液 10. 0 mL，按供试品溶液制备方法依法制
备并依法测定，结果槲皮素和山奈素的平均回收率
分别为 96. 96%、97. 92%，RSD 分别为 1. 54%、
1. 91%，表明回收率良好，见表 3 及表 4。
2. 4. 10 样品含量测定:取 10 个产地的样品，依法
制备供试品溶液并依法测定槲皮素、山奈素含量，结
果见表 5，齿缘草所含槲皮素和山奈素总量在
0. 0407% ～0. 103%之间，不同产地间差异显著。
3 讨论
3. 1 薄层鉴别对照品和含量测定成分的选择 槲
皮素和山奈素具有抗炎、抗菌、抗病毒和镇痛作用，
这与齿缘草具有清热、解毒功能，用于治疗瘟热流感
及蒙医的“协日”人脉症、“协日”热有着密切关系，
说明槲皮素和山奈素是齿缘草的主要有效成分;齿
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表 3 槲皮素回收试验结果
试验号 样品中含量 /mg 加入量 /mg 测得量 /mg 回收率 /% 平均值 /% RSD /%
1 0. 2854 0. 2824 0. 5579 96. 49
2 0. 2852 0. 2824 0. 5572 96. 30
3 0. 2855 0. 2824 0. 5550 95. 44
4 0. 2853 0. 2824 0. 5669 99. 70
5 0. 2854 0. 2824 0. 5608 97. 52
6 0. 2853 0. 2824 0. 5573 96. 32
96. 96 1. 54
表 4 山奈素回收试验结果
试验号 样品中含量 /mg 加入量 /mg 测得量 /mg 回收率 /% 平均值 /% RSD /%
1 0. 2202 0. 1972 0. 4152 98. 88
2 0. 2203 0. 1972 0. 4170 99. 76
3 0. 2205 0. 1972 0. 4142 98. 20
4 0. 2201 0. 1972 0. 4097 96. 14
5 0. 2203 0. 1972 0. 4154 98. 94
6 0. 2204 0. 1972 0. 4089 95. 58
97. 92 1. 91
表 5 齿缘草样品中槲皮素和山奈素
含量测定结果(n =2)
采集地区 槲皮素含量 /%
山奈素
含量 /%
总含量
/%
呼和浩特市武川县 0. 0601 0. 0431 0. 1032
呼和浩特市和林格尔县 0. 0585 0. 0352 0. 0937
乌兰察布市卓资县 0. 0465 0. 0327 0. 0792
乌兰察布市凉城县 0. 0594 0. 0422 0. 1016
包头市赵长城地区 0. 0121 0. 0298 0. 0419
包头市五当召地区 0. 0090 0. 0317 0. 0407
包头市固阳县 0. 0136 0. 0289 0. 0425
乌海市海勃湾区 0. 0236 0. 0288 0. 0524
乌海市海南区 0. 0241 0. 0272 0. 0513
银川市贺兰山地区 0. 0388 0. 0334 0. 0722
缘草的化学成分研究表明槲皮素和山奈素是该植物
的主要成分〔3〕。所以选择槲皮素和山奈素为薄层
鉴别的对照品和含量测定的成分。
3. 2 薄层鉴别供试品溶液制备方法的改进 薄层
鉴别供试品溶液的制备方法主要参考 2010 年版中
国药典一部金钱草〔4〕项下薄层鉴别中供试品溶液
的制备，但得到的色谱有色素影响，不清晰，特别是
槲皮素层析点模糊。本文做了两点改进，一是考虑
到石油醚脱色效果比乙醚好，且可避免游离的槲皮
素和山奈素溶于乙醚而损失，故将水解前用乙醚脱
色除杂改为用石油醚。二是最后得到的乙醚提取液
用水洗一次，这样可除去水溶性色素、糖类化合物和
蛋白质，不但使色谱清晰，而且降低了供试品溶液的
粘度，便于点样。通过改进得到了较好的薄层色谱。
3. 3 含量测定中供试品溶液制备方法的考察 主
要参考 2010 年版中国药典一部瓦松〔4〕项下槲皮素、
山奈素含量测定中供试品溶液制备方法，分别考察
了提取溶剂浓度、水解酸度、提取水解时间和提取水
解温度的影响。结果显示，以甲醇-盐酸(4∶ 1)为溶
剂、提取水解时间为 60 min、提取水解温度为加热回
流状态时槲皮素和山奈素的峰面积最大。
3. 4 回收率测定液制备方法的考察 开始做回收
率试验时，取供试品约 0. 5 g，精密称定，加已知浓度
的对照品溶液 10 mL，加甲醇 30 mL，最后加盐酸 10
mL，按供试品溶液制备方法依法制备并依法测定，
结果回收率明显偏低。经过多次试验，发现改变加
试剂的顺序，可以得到正常的回收率，即已知浓度的
对照品溶液最后加，特别是在加盐酸后摇均再加。
分析其原因可能是在非酸性条件下，槲皮素和山奈
素易与供试品中的金属离子络合，造成回收率偏低。
参 考 文 献
［1］内蒙古植物志编辑委员会 . 内蒙古植物志［M］. 第四
卷 . 第二版 . 呼和浩特:内蒙古人民出版社，2000:170.
［2］朱亚民 . 内蒙古植物药志［M］. 第二卷 . 呼和浩特:内
蒙古人民出版社，2000:417.
［3］刘清华，杨峻山 . 石生齿缘草的化学成分［J］. 中国天
然药物，2005，3(3) :178-180.
［4］国家药典委员会 . 中华人民共和国药典［S］. 一部 . 北
京:中国医药科技出版社，2010:58，204.
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