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蒙药材悬钩子木不同溶剂提取物的镇咳祛痰作用比较研究



全 文 :△课题来源:内蒙古自然科学基金资助项目。批准号:2010Zd25
作者简介:陈常莲(1961 -),女,内蒙古民族大学附属医院临床蒙
药剂部主任药师,主要从事蒙药剂型改革及有效物质研究;吴香杰
(通讯作者),内蒙古民族大学蒙医药学院教授。E - mail:changli-
an826@ 126. com 作者电话:15247543922
实验研究
蒙药材悬钩子木不同溶剂提取物的镇咳祛痰作用比较研究△
陈常莲1 吴香杰2 布和巴特尔2 白金亮2
(1. 内蒙古民族大学附属医院,内蒙古 通辽 028000;
2. 内蒙古民族大学蒙医药学院,内蒙古 通辽 028000)
摘 要:目的:探讨蒙药材悬钩子木不同方法提取物的镇咳、祛痰作用。方法:悬钩子木水Ⅰ提取物、乙醇提取物、水Ⅱ提取
物、乙醇提取物 +水Ⅱ提取物对小鼠连续灌胃给药,观察浓氨水引咳及气管酚红排泌的作用。结果:水Ⅰ提取物明显延长
氨水所致小鼠咳嗽潜伏期和减少咳嗽次数(P < 0. 05),增加小鼠气管酚红排泌量(P < 0. 05)。结论:悬钩子木的水提物
的镇咳、祛痰效果最好。
关键词:蒙药材;悬钩子木;镇咳;祛痰
中图分类号:R291. 2 文献标识码:A 文章编号:1006 - 6810(2014)06 - 0041 - 02
悬钩子木为蔷薇科(Rosaceae)植物库页悬钩子 Rubus
sachalinensis Leveille 的干燥茎枝;蒙药名“博格日乐吉
根”[1],汉语名为珍珠干或悬钩子木[1、2]。蒙医药文献记
载,味甘、苦,化味甘,治风热病、巴达干病、浮肿,治肺病特
效,也治热性时疫。《中华人民共和国卫生部药品标准·
蒙药分册》记载,悬钩子木具有解表、调元、止咳的功效;用
于未熟热,瘟疫,讧热,感冒,肺热咳嗽,气喘,赫依热[1、3]。
依据蒙药功效,本课题组经药理实验证实,该药对呼吸系统
疾病有较好的治疗作用。据文献,该药的水煎剂具有良好
的镇咳作用[4]。本实验用不同溶剂提取,以期寻找悬钩子
木止咳的“有效部位”,为进而研究镇咳祛谈作用的物质基
础提供药效学依据。
1 材 料
1. 1 动物:ICR种小鼠,体重为 18 ~ 22g,雌雄各半。购于
长春市亿斯实验动物技术有限公司提供。
1. 2 药物:蒙药材悬钩子木(批号:20121015),内蒙古民族
大学附属医院;酚红(批号:20091107),沈阳市试剂三厂;
氨水、乙醇均为分析纯。
1. 3 仪器:HW - 600 型三用恒温水浴锅,江苏金坛市荣华
仪器生产有限公司;DHG -9141N型恒温干燥箱,上海宝山
精工电子仪器厂;酒精计,沧州市西北庄红旗仪表厂;98 - 1
- B型电子调温电热套,天津市泰斯特仪器有限公司;
EYELA旋转蒸发仪,上海爱郎仪器有限公司;FAX15 - 4N
电子天平,上海民桥精密科学仪器有限公司;YLS - 8A 多
功能修咳引喘仪,准北正华生物仪器设备有限公司;TG16
- ws台式高速离心机,长沙湘仪离心机仪器有限公司;TC
新世纪紫外可见分光光度计,北京普斯通用仪器有限公司;
CSJ120 型粗碎机,丹东永德药化机械制造有限公司。
2 方法与结果[5、6、7]
2. 1 药物提取:取药材 80g,每次加 10 倍量蒸馏水回流提
取 2 次,每次提取 2h,得到水提取液Ⅰ,把水提液Ⅰ浓缩得
到浸膏 15. 0957g;另取药材 80g,加 10 倍量 95%乙醇回流
提取 1 次,再用 10 倍量 75%乙醇回流提取 2 次,每次提取
的时间 2h,将两次的提取液合并,得到乙醇提液,浓缩得到
浸膏 12 g;乙醇提取的药渣再加 10 倍水量的回流提取 2
次,每次提取 2h,得到水Ⅱ提取液,浓缩得到浸膏 1. 68g;把
水Ⅱ提取浸膏和乙醇提取浸膏 1:1 合并,共得到四组浸膏。
将得到的 4 种浸膏用蒸馏水配制等生药量(8. 56g·kg -1)
的药液,备用。
2. 2 小鼠氨水引咳实验:体重为18 ~22小鼠50只,雌雄各
半。随机分为 5组,每组 10只,分别为正常对照组、乙醇组、
水Ⅰ组、水Ⅱ组、乙醇 +水Ⅱ组等 5组,各组按生药量高剂量(8.
56g·kg -1)灌胃给药 7d,正常对照组灌胃给同剂量的生理
盐水。末次给药半个小时后将小鼠置于多功能诱咳引喘仪
内,以恒压将 20%的氨水喷雾 10s,观察记录各组小鼠引咳
潜伏期以及小鼠 2min内咳嗽(以腹肌强烈收缩,同时张大嘴
为准)的次数。结果表明:与正常组比较水Ⅰ组,乙醇组,乙醇
+水Ⅱ组的咳嗽次数减少(P < 0. 05,P < 0. 01),水Ⅱ组的咳
嗽次数无没有明显变化(P >0. 05);与水Ⅰ组比较乙醇组和
乙醇 +水Ⅱ组的咳嗽次多数(P < 0. 01,P < 0. 05),说明水Ⅰ
组、乙醇组和乙醇 +水Ⅱ组的镇咳效果好。与正常组比较,水
Ⅰ组、乙醇 +水Ⅱ组的咳嗽潜伏期延长(P < 0. 05),说明以上
两组有延长潜伏期的作用。
表 1 悬钩子木对小鼠氨水引咳次数与潜伏期的影响(± s)
组别
动物数
(只)
给药量
(g·kg - 1)
咳嗽次数
(次 /min)
潜伏期时间
(S)
正常组 10 8. 56 18. 7 ± 6. 46 22. 5 ± 8. 89
水Ⅰ组 10 8. 56 6. 6 ± 2. 63▲ 37. 8 ± 17. 99■
乙醇组 10 8. 56 9. 4 ± 3. 4▲※ 24. 8 ± 8. 98
水Ⅱ组 10 8. 56 21. 3 ± 8. 88 25 ± 7. 80
乙醇 +水Ⅱ组 10 8. 56 12. 2 ± 5. 27▲※ 40. 6 ± 13. 81■
142014 年 6 月第 6 期 中国民族医药杂志
DOI:10.16041/j.cnki.cn15-1175.2014.06.030
注释:咳嗽次数:▲与正常组比较(P < 0. 05);※与水Ⅰ提取对比(P
<0. 05);潜伏期时间:■与正常组比较(P <0. 05)
2. 3 小鼠气管酚红实验:体重为 18 ~ 22 小鼠 50 只,雌雄各
半。随机分为 5 组,每组 10 只,分别为正常对照组、水Ⅰ组、
乙醇组、水Ⅱ组、乙醇 +水Ⅱ组等 5 组,各组按生药量高剂量
(8. 56g·kg -1)灌胃给药 7d,正常对照组灌胃给同剂量的生
理盐水。末次给药 30min 后腹腔注射 2%酚红生理盐水溶
液(0. 1mL·10g -1),25min 后脱臼处死,将小鼠仰位固定于
手术板上剪开颈正中皮肤,分别剪下自甲状软骨至气管分支
处等长的一段气管,放入 3mL 生理盐水的离心管中,加入
5%碳酸氢钠溶液 0. 1mL,离心(4000 /min ,5min )取上清液。
用分光光度计波长于 546 nm处测 OD 值。结果表明,与正
常组比较水Ⅰ组和乙醇组的吸光度测定值明显升高(P < 0.
05,P <0. 01),说明以上两个组有祛痰作用。与水Ⅰ组比较
水Ⅱ组和乙醇 +水Ⅱ组的吸光度小(P < 0. 05,P < 0. 01),与
乙醇组比较水Ⅱ组和乙醇 +水Ⅱ组的吸光度没明显变化(P
>0. 05)证明水Ⅰ组的祛痰效果最好。
表 2 悬钩子木不同提取物的祛痰作用的比较(± s)
组别 动物数(只) 给药量(g·kg - 1)气道酚红排泌量(A)
正常组 10 8. 56 0. 1258 ± 0. 0595
水Ⅰ组 10 8. 56 0. 2948 ± 0. 1081▲
乙醇组 10 8. 56 0. 2248 ± 0. 1227▲
水Ⅱ组 10 8. 56 0. 1727 ± 0. 0765※
乙醇 +水Ⅱ组 10 8. 56 0. 1847 ± 0. 0682※
注释:吸光度:▲与正常组比较(P < 0. 05);※与水Ⅰ组比较(P < 0.
05);
3 讨 论
3. 1 蒙药“汤剂”是把药材粉碎混匀的粗粉,成人每次用
量 3 ~ 5g,加水 250mL微火煮至剩余 1 /3 水量,倾取汤液内
服。本实验对悬钩子木不同提取溶剂的研究结果显示,悬
钩子木水提物的止咳作用最为明显,验证了传统水煎用法
的合理性。
3. 2 本实验进一步证实,悬钩子木各种提取法中水提取物
的镇咳、祛痰的效果最好。本实验为寻找悬钩子木止咳、祛
痰的“有效部位”及作用的物质基础提供药效学依据。
参考文献
[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国
卫生部药品标准.蒙药分册〔S〕. 1998,42 - 43.
[2]内蒙古卫生厅.内蒙古蒙成药标准〔S〕.赤峰:内蒙古科
技出版社,1984:252.
[3]罗布桑. 蒙药学〔M〕. 呼和浩特:内蒙古人民出版社,
2006:205.
[4]吴香杰,布和巴特尔,扎苏娜. 蒙药材库页悬钩子和毛
接骨木抗炎镇咳作用的药理学研究〔J〕.内蒙古民族大
学学报(蒙医药学),2012,(22)1:28.
[5]王海青,石静丽,田军. 浙贝止咳颗粒镇咳祛痰及抗菌
作用研究〔J〕.中国实验方剂学杂志,2011,(17)16:207
- 210.
[6]侯仙明,张凯.肉桂镇咳祛痰及平喘作用的药效学研究
〔J〕.时珍国医国药,2009,(20)4:831 - 832.
[7]陈奇.中药药理研究方法学[M]. 北京:人民卫生出版
社 ,2000:238 - 244.
2014 年 3 月 13 日收稿
Comparison on Antitussive and Expectorant Effects of Different Extraction
Methods for Mongolian Medicine Ramulus Rubi
CHEN chang - lin1 WU Xiang - jie2 BUHE ba - te - er2 BAI Jin – liang2
(1. Attached Hospital,Inner Mongolia University for the Nationalities.
2. Mongolia - Medicine College,Inner Mongolia University for the Nationalities.)
[Abstract]Objective:To look for pharmacological function of Ramulus Rubi’s extracts by different extraction
methods. Methods:The water Ⅰ extract,ethanol extract,water Ⅱ extract,ethanol extract and water Ⅱ extract
of Ramulus Rubi are fed continuously,and the final effective extract is determined by pharmacodynamic experi-
ments through ammonia water inducing cough and phenol red secretion test. Results:The water Ⅰ extract have
significant influence on latent period and times of cough in mice caused by ammonia water (P < 0. 05),and it
can increase the tracheal phenol red secretion (P < 0. 05). Conclusion:The water extract of Ramulus Rubi has
the best Antitussive and Expectorant Effects.
[Key words]Mongolian Medicine,Ramulus Rubi,Antitussive,Expectorant,Different Extraction Methods.
24 中国民族医药杂志 2014 年 6 月第 6 期