全 文 ：第 26 卷 第 1 期 广东石油化工学院学报 Vol． 26 No． 1
2016 年 2 月 Journal of Guangdong University of Petrochemical Technology
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February 2016
不同品种荔枝叶多糖的提取及含量比较
范芳，翁楚垒
(广东石油化工学院 环境与生物工程学院，广东 茂名 525000)
摘要:利用酶解提取法、Sevag法脱蛋白、乙醇析出法对茂名地区三种荔枝(白腊、三月红、黑叶)的荔枝叶多糖进行了初步提
取，通过苯酚 －硫酸法对提取物中的多糖质量进行了测定，并对不同的荔枝叶多糖的质量进行了比较。结果表明，这三种
荔枝的荔枝叶多糖质量由多到少依次为:白腊 ＞三月红 ＞黑叶。
关键词:荔枝叶;多糖;提取;比较
中图分类号:TQ281 文献标识码:A 文章编号:2095 － 2562(2016)01 － 0028 － 03
荔枝是亚热带果树，常绿乔木，盛产于中国华南和西南等地，尤以广东和福建南部、台湾栽培最盛。现
代研究表明，荔枝具有抗氧化、延缓衰老、降血糖、降血脂、抗肿瘤及调节造血功能等生理作用，初步确定活
性多糖是荔枝多种生理功能的重要物质基础之一。茂名地区荔枝产量占全国 60%以上，而荔枝叶目前为
止还没有被利用起来，因此，本研究旨在对不同品种的荔枝叶多糖进行提取并比较其含量，为充分利用荔
枝叶废弃物提供理论依据。
1 材料与方法
1． 1 材料与设备
从茂名荔枝园采摘白腊、三月红、黑叶三种荔枝叶;无水葡萄糖、苯酚、浓硫酸、氯仿、无水乙醇、正丁
醇，均为分析纯。
可见分光光度计(V －50000 型，上海元析仪器有限公司);旋转蒸发器(ＲE － 2000A，上海亚莱生化仪
器厂) ;循环水式多用真空泵(SHB － III 型，郑州长城科工贸有限公司) ;数显恒温振荡器(THZ － 82B 型，
金坛市盛威试验仪器厂) ;电动离心机(80 － 2 型，常州奥华仪器有限公司) ;电热恒温鼓风干燥箱(DHG －
9246A型，上海精宏实验设备有限公司) ;电子天平(FA12084 型，上海精密科学仪器有限公司) ;数显恒温
水浴锅(HH －4 型，常州奥华仪器有限公司) ;冰箱(BCD －231E型，伊莱克斯(中国)电器有限公司) ;九阳
料理机(JYL － D051 型，九阳股份有限公司)。
1． 2 试验方法
1． 2． 1 荔枝叶多糖的提取
1)酶解提取。称取荔枝叶粉末 60 g，平均分为三组，各加入 0． 3 g(占荔枝叶粉末质量的 1． 5%)的纤
维素酶，然后加入 200 mL的蒸馏水(料液质量比 1∶ 10)，放入水浴锅中在 60 ℃温度下水浴 2 h。把水浴
后得到的样品用纱布(3 至 4 层)把液体跟固体分开。把取得的液体在 4 ℃下静置 24 h后，在转速为 4 000
r /min的离心机上离心 20 min。取上清液后重复离心两至三次［1］。
2)Sevag法脱蛋白。按照 25∶ 4∶ 1 的质量比在上述清液中分别加入氯仿和正丁醇，以 36 ℃的温度在
摇床里激烈摇晃 30 min，然后把摇晃后得到的样品以 4 000 r /min 的转速离心 20 min，去上清液。再重复
收稿日期:2016 － 01 － 11;修回日期:2016 － 01 － 29
基金项目:茂名市科技计划项目(0130320)
作者简介:范芳(1977—)，女，湖南隆回人，硕士，实验师，主要研究方向为天然产物的提取及活性研究。
脱蛋白的步骤两至三遍，就可以得到脱蛋白后的糖液［2］。
3)浓缩。把经过脱蛋白处理的样品糖液用旋转蒸发器在 60 ℃、35 r /min 的条件下进行浓缩，当浓缩
液约为样品糖液体积的 1 /2 时停止。
4)乙醇沉淀(醇沉)。向经过脱蛋白处理且经过浓缩后的糖液中加入 4 倍体积的乙醇(质量分数为
90%) ，摇匀后在 4 ℃的温度下静置 24 h。把静置后的糖液以 4 000 r /min 的转速离心 20 min，除去上清
液，洗净烘干后得到荔枝叶多糖的初步提取物，经过称量后可得出其质量［3］。
1． 2． 2 多糖质量的测定
1)标准曲线的绘制。准确吸取质量浓度为 0． 04 mg /mL的标准葡萄糖溶液各 0，0． 2，0． 4，0． 6，0． 8，1．
0，1． 2 mL至具塞试管中，加蒸馏水至 2 mL，再加 1 mL质量分数为 5%的苯酚，彻底混匀后加入 5 mL浓硫
酸，再次彻底混匀后在沸水中水浴 30 min，迅速冷却至室温并静置 20 min。以空白试剂作为参比液进行对
照，测定各溶液的吸光度，用紫外分光光度法于 490 nm处测定吸光度 A值。以葡萄糖质量为横坐标，吸光
度为纵坐标，绘制标准曲线［4］。
2)多糖质量的测定。准确称取三种荔枝叶多糖提取物 10 mg，于 100 mL容量瓶中加蒸馏水定容至刻
度，混匀后各吸取 1． 0 mL于具塞试管中，分别加入蒸馏水至 2 mL，再加入 1 mL质量分数为 5%的苯酚，混
匀后加入 5 mL浓硫酸，再次充分混匀，在沸水中水浴 30 min 后，迅速冷却至室温并静置 20 min。以蒸馏
水为空白对照，用紫外分光光度法于 490 nm处测定粗多糖样品的吸光度 A值，每种荔枝叶多糖提取液重
复以上步骤三次，求平均值。
2 结果与分析
2． 1 荔枝叶多糖提取
依据上述荔枝叶多糖提取方法，对白腊、三月红、黑叶三种荔枝叶多糖进行提取，称重后结果见表 1。
表 1 不同品种荔枝叶粗多糖提取量
提取次数
不同品种荔枝叶粗多糖质量 /mg
白腊 三月红 黑叶
1 92 108 90
2 80 104 64
提取次数
不同品种荔枝叶粗多糖质量 /mg
白腊 三月红 黑叶
3 90 113 79
平均值 90． 3 108． 3 77． 3
2． 2 葡萄糖标准曲线
以质量浓度为 0． 04 mg /mL的标准葡萄糖溶液制作标准曲线，紫外分光光度计测定吸收值见表 2。
表 2 苯酚 －硫酸法制作糖标准曲线
操作步骤
试管号
1 2 3 4 5 6 7
标准葡萄糖溶液 /mL 0 0． 2 0． 4 0． 6 0． 8 1． 0 1． 2
相当于葡萄糖质量 /μg 0 8 16 24 32 40 48
蒸馏水 /mL 2 1． 8 1． 6 1． 4 1． 2 1． 0 0． 8
A490nm 0 0． 040 0． 069 0． 119 0． 162 0． 194 0． 243
由表 2 绘制吸光值与葡萄糖质量之间关系的
标准曲线，如图 1 所示。
由图 1 可以得到回归方程如下:y = 0． 005 04x
－ 0． 002 93，Ｒ2 = 0． 996 87，回归方程 Ｒ2 大于 0． 99，
因此该葡萄糖标准曲线可信。
2． 3 三种荔枝叶多糖含量测定结果
根据上述多糖质量测定方法，可得到荔枝叶粗
多糖的 A490，如表 3 所示。 图 1 葡萄糖标准曲线
92第 1 期 范芳等:不同品种荔枝叶多糖的提取及含量比较
表 3 三种荔枝叶多糖的 A490值
测量次数
荔枝叶多糖 A490 /nm
三月红 白腊 黑叶
1 0． 180 0． 209 0． 164
2 0． 256 0． 244 0． 176
测量次数
荔枝叶多糖 A490 /nm
三月红 白腊 黑叶
3 0． 196 0． 206 0． 181
平均值 0． 211 0． 220 0． 174
代入 2． 2 标准曲线公式，可得三种荔枝叶多糖质量如表 4 所示。
表 4 三种荔枝叶多糖质量
测量次数
荔枝叶多糖质量 /μg
三月红 白腊 黑叶
1 36． 3 42 331
2 51． 4 49 35． 5
测量次数
荔枝叶多糖质量 /μg
三月红 白腊 黑叶
3 39． 5 41． 5 36． 5
平均值 42． 4 44． 2 35． 0
由表 4 可绘制出三种荔枝叶多糖质量柱状图，
如图 2 所示。
由图 2 可以看出，在第 1 次和第 3 次实验平均
值的结果中，白腊荔枝叶多糖含量高于其它两个品
种，而第二次实验中三月红的数据偏大，误差较大，
但通过求平均值，第四组柱状显示结果与第 1 和第
3 次实验结果相同。
多糖提取率的公式如下: 图 2 三种荔枝叶多糖质量比较
多糖提取率 =多糖质量 ×稀释倍数 ×多糖初提取质量 × 100%
样品量 ×荔枝叶粉末质量
将表 4中平均值数据代入上述公式，可得三月红、白腊、黑叶多糖提取率分别为 0． 23%、0． 20%、0． 14%。
3 结论
经过以上实验数据可以得出: (1)三月红、白腊、黑叶的荔枝叶多糖提取率分别为 0． 23%、0． 20%、0．
14%;(2)三种荔枝的荔枝叶多糖含量由多到少依次是白腊、三月红、黑叶。因此，若要大规模地提取多
糖，可考虑选择白腊荔枝叶。
［参考文献］
［1］刘晓涵，陈永刚，林励，等．蒽酮硫酸法与苯酚硫酸法测定枸杞子中多糖含量的比较［J］．食品科技，2009，34(9) :270 －272．
［2］鲁吉珂，古国峰，汪瑞，等．蝉花多糖提取工艺优化研究［J］．食品工业科技，2013，34(22) :196 － 199．
［3］李巧云，居红芳，翟春．五味子粗多糖提取工艺的研究［J］．食品科学，2004，25(5) :105 － 109．
［4］毛淑敏，许家珍，周帅飞．苯酚 －硫酸法联合 DNS法测定金银花不同花期多糖的含量［J］．中南药学，2015，13(1):90 －93．
Polysaccharides Extraction from Different Kinds
of Litchi Leaves and Comparison of Content
FAN Fang，WENG Chulei
(College of Environmental and Biological Engineering，Guangdong University of Petrochemical Technology，Maoming 525000，China)
Abstract:The polysaccharides in three kinds of litchi leaves is initially extracted by methods of enzymatic hydrolysis，Sevag depro-
teinization and ethanol precipitation，and the content of polysaccharide in each kind of sample is determined by using phenol － sulfu-
ric acid method． The polysaccharide contents from the three different Litchi leaves are compared，and the result is:Baila ＞
Sanyuehong ＞ Heiye．
Key words:Litchi Leaves;Polysaccharide;Extraction;Comparison
(责任编辑:贺嫁姿)
03 广东石油化工学院学报 2016 年