全 文 ：第 43 卷第 24 期
2015 年 12 月
广 州 化 工
Guangzhou Chemical Industry
Vol. 43 No. 24
Dec. 2015
金银花露中苯甲酸钠的含量测定方法学研究
陆兴毅，黄忠亮
(广西百色食品药品检验所，广西 百色 533000)
摘 要:建立高效液相色谱分析金银花露中苯甲酸钠的含量测定方法。采用 Inertsil ODS － 3 色谱柱 (5 μm，4. 6 mm ×
250 mm) ;以 0. 02 mol·L －1醋酸铵溶液 －甲醇 (90∶10)为流动相;流速 1. 0 mL·min －1;检测波长为 230 nm;柱温:室温。苯
甲酸钠在 24. 4 ～ 122. 0 μg·mL －1范围内线性关系良好，苯甲酸钠的平均回收率为 102. 20%，ＲSD为 0. 49%。该方法操作简便，测
定结果准确可靠，可有效的用于金银花露中苯甲酸钠含量测定。
关键词:金银花露;苯甲酸钠;高效液相色谱法;含量测定
中图分类号:O657 文献标志码:A 文章编号:1001 － 9677(2015)024 － 0149 － 03
第一作者:陆兴毅 (1975 －) ，男，副主任药师，主要从事食品、药品质量标准研究。
Determination of Sodium Benzoate in Distilled Liquid of Honeysuckle
LU Xing － yi，HUANG Zhong － liang
(Baise Institute for Food and Drug Control，Guangxi Baise 533000，China)
Abstract:A method for determination of sodium benzoate in Distilled liquid of Honeysuckle by HPLC was established.
The chromatographic column of Inertsil ODS － 3 (5 μm，4. 6 mm × 250 mm)was used，the mobile phase was 0. 02%
ammonium acetate － methanol (90∶10)with 1. 0 mL·min －1 of flow rate，the detection wavelength was set at 230 nm and
the chromatography was operated at room temperature. The calibration curve of sodium benzoate was in good linearity over
the range of 24. 4 ～122. 0 μg·mL －1. The average recovery of sodium benzoate was 102. 20% while ＲSD was 0. 49%. This
method is convenient and accurate for the assay of sodium benzoate in Distilled liquid of Honeysuckle.
Key words:distilled liquid of honeysuckle;sodium benzoate;HPLC;assay
金银花露是忍冬科植物忍冬 Lonicera japonica Thunb. 的干
燥花蕾———金银花经水蒸气蒸馏而得的芳香露液。金银花中主
要含有有机酸类如绿原酸、异绿原酸和挥发油类如芳樟醇等主
要成分。金银花露具有清热解毒、凉散风热的功效，是治疗风
热感冒、暑热口渴、咽喉肿痛、痈肿疮疖、小儿胎毒的良
药［1］，金银花露生产中可以使用苯甲酸钠作为防腐剂，但过量
摄入苯甲酸钠会对人体健康带来危害［2 － 3］，《中国药典》规定
口服药品中苯甲酸钠的含量不得超过 0. 3%［4］，但未规定在各
制剂中的含量测定方法，目前已有口服制剂中苯甲酸钠含量测
定的报道［5］，但测定金银花露中苯甲酸钠的含量测定方法尚未
见报道，本文建立了用 HPLC测定金银花露中苯甲酸钠的方法，
并进行了方法学考察研究，本方法操作简单，结果可靠，可用
于金银花露中苯甲酸钠的质量控制。
1 仪器与试药
LC － 20A 高效液相色谱仪 (带有 SPD － M10A 二极管阵列
检测器和 SPD － 20A紫外检测器) ，日本岛津;LC － Solution 色
谱工作站;METTLEＲ TOLEDO XS205 电子天平，日本岛津。
甲醇(色谱纯) ;苯甲酸钠对照品 (批号:100433 －
200301，供含量测定用) ，购于中国食品药品检定研究院;市
售金银花露样品 6 批，4 个生产厂家，分别为广东恒诚制药有
限公司、湖北虎泉药业有限公司、湖北午时药业股份有限公
司、湖北凤凰白云山药业有限公司。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件
色谱柱:Inertsil ODS － 3 (5 μm，250 mm × 4. 6 mm) ;流
动相:0. 02 mol·L －1醋酸铵溶液 －甲醇 (90∶10);流速:1. 0 mL
·min －1;检测波长:230 nm;柱温:室温。
2. 2 对照品溶液的制备
取苯甲酸钠对照品适量，精密称定，用甲醇制成 0. 1 mg·
mL －1的对照品溶液，即得。
2. 3 供试品溶液制备
精密量取供试品 5 mL，置 50 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻
度，摇匀，微孔滤膜(0. 45 μm)过滤，即得。
2. 4 阴性样品溶液
按药品标准处方和制法配制成不含苯甲酸钠的溶液。
2. 5 系统适用性试验
依次取“2. 2”，“2. 3”，“2. 4”项下的溶液，按照“2. 1”
项的色谱条件进样 10 μL进行测定，记录色谱图。结果苯甲酸
钠峰理论板数可达 7000，保留时间为 7. 2 min，阴性样品溶液
在相应位置无色谱峰，表明其他成分对苯甲酸钠含量测定无干
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扰。见图 1。
图 1 金银花露中苯甲酸钠含量测定 HPLC色谱图
2. 6 线性关系
精密称取苯甲酸钠对照品 15. 25 mg，置于 25 mL量瓶，用
甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每 1 mL 含苯甲酸钠
0. 610 mg 的储备液，分别精密量取储备液 1. 0，2. 0，3. 0，4. 0，
5. 0 mL，各置于 25 mL 量瓶，用甲醇稀释至刻度，摇匀。按“2. 1”
项下色谱条件，分别进样 10 μL测定。以峰面积 A 对浓度 C(μg·
mL －1)做线性回归处理，得回归方程为:A =2. 663 ×104 C － 2. 278
× 103，r = 0. 9999。结果表明苯甲酸钠在 24. 4 ～ 122. 0 μg·
mL －1浓度范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系。同时按 S /N
＞ 3 求得苯甲酸钠的最低检测限为 0. 062 μg;S /N ＞ 10 测得定
量限为 0. 155 μg。
2. 7 精密度试验
取“2. 6”项下浓度为 73. 2 μg·mL －1的对照品溶液，进
样 10 μL，重复进样 6 次，测定其峰面积。结果苯甲酸钠峰面
积的 ＲSD为 0. 31%(n = 6)。表明本方法进样精密度良好。
2. 8 重复性试验
取同一批金银花露样品，精密量取 5 mL，共 5 份，按照
“2. 11”项下的方法操作，进样 10 μL，在上述色谱条件下进行
测定，结果苯甲酸钠的含量平均值为 0. 787 mg·mL －1，ＲSD =
0. 61%(n = 5)。表明此法重复性良好。
2. 9 稳定性试验
取金银花露样品，按照“2. 11”项下的方法制成供试品溶
液，分别在 0，2，4，6，8 h 依上述色谱条件测定，记录主峰
面积。结果苯甲酸钠峰面积的 ＲSD 为 0. 68 %，表明供试品溶
液在 8 h内比较稳定。
2. 10 回收率测定
精密量取已测知含量的金银花露 (含苯甲酸钠浓度为
0. 8497 mg·mL －1)2 mL，共 6 份，置 100 mL量瓶中，分别精
密加入苯甲酸钠对照品溶液(浓度为 0. 8510 mg·mL －1)1. 0
mL、2. 0 mL和 3. 0 mL，用甲醇稀释至刻度，摇匀，以微孔滤
膜(0. 45 μm)过滤，进样 10 μL，按照“2. 1”项下色谱条件测
定。另精密称取苯甲酸钠对照品适量，加甲醇溶解并稀释制成
每 1 mL约含 100 μg的溶液，按上述色谱条件测定，用外标法
以峰面积计算含量，同时计算回收率。结果见表 1。
表 1 加样回收试验结果 (n = 6)
样品含
量 /mg
对照品
加入量 /mg
测得
量 /mg
回收
率 /%
平均回收
率 /%
ＲSD /%
1. 6994 0. 8510 1. 7633 101. 54
1. 6994 0. 8510 1. 7469 102. 73
1. 6994 1. 7020 2. 5365 102. 82
1. 6994 1. 7020 2. 5216 102. 18
1. 6994 2. 5530 3. 2977 102. 08
1. 6994 2. 5530 3. 3026 101. 85
102. 20 0. 49
2. 11 样品测定
精密量取本品 5 mL，置 50 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻
度，摇匀，用微孔滤膜(0. 45 μm)过滤，取滤液按照 “2. 1”
项下色谱条件测定，记录色谱图;另精密称取苯甲酸钠对照品
适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每 1 mL约含 100 μg的溶液，
按上述方法测定。以外标法计算苯甲酸钠含量，结果见表 2。
表 2 样品测定结果
样品编号 苯甲酸钠含量 /(mg·mL －1)
1 0. 787
2 0. 850
3 0. 828
4 12. 113
5 0. 894
6 －
3 讨 论
图 2 苯甲酸钠紫外吸收图谱
(1)将苯甲酸钠对照品溶液用二极管阵列检测器在 200 ～
400 nm范围进行扫描，发现苯甲酸钠在 230 nm 波长附近有较
大吸收，见图 2。在 230 nm 波长处其他成分对其测定无影响，
为保证检测的灵敏度，确定采用测定波长为 230 nm 进行定量
分析。
(2)本法以 0. 02 mol·L －1醋酸铵溶液 －甲醇 (90∶10)
为流动相，系统分离效果较好，峰形对称，柱效高，保留时间
适宜，峰面积重现性好。
(3)从 6 批样品的测定结果看出，样品中含有苯甲酸钠均
(下转第 203 页)
第 43 卷第 24 期 卢轩，等:天然药物化学教学改良刍议 203
识的章节被安排到最后讲授，使学生不易深入理解糖和苷这一
部分的理论内容，也造成各论学习的困难加大。特别是当两位
教师同时授课时，各负责前后部分，更造成了前后知识的衔接
出现问题。因此在本院教学安排中将萜类，甾体及其苷类的内
容调整至糖和苷之后讲授，既联系具体化合物讲授糖和苷中的
较为枯燥的理论知识，降低了授课和学生学习的难度，又保持
了授课的完整性，提高教学质量，收到了良好的效果。
2 理论联系实际，板书结合多媒体，知识讲
授穿插趣味故事
2. 1 理论联系实际
中华人民共和国教育法规定:教育必须为社会主义现代化
建设服务，必须与生产劳动相结合，培养德、智、体等方面全
面发展的社会主义事业的建设者和接班人［3］。天然药物化学学
科理论性较强，由于受到课时限制，在授课中往往容易忽视与
实践的结合，造成学生误解本学科与生活实践脱节，最终用处
不大，也就不能够用心的学习。所以在实践教学中，我们必须
加入联系实际的内容。比如:讲解提取分离方法中的浸渍法与
煎煮法时，可以联系生活中煎药及泡酒的过程，既阐明了溶剂
选择的重要性，又生动的讲明了提取方法;讲解皂苷类化合物
时，可以根据其具有表面活性这一特性，联系实际生产中泡沫
分离技术以及日常生活中洗涤剂选择的知识，增强本学科的实
践性。这样才能讲好天然药物化学，让理论知识回归到实践中
去，达到教育的目的。
2. 2 板书结合多媒体
现代的教学主要以多媒体为主，该方法的优点是较为直
观，可以加入大量的实物图片与动画，具有节省时间与精力，
吸引学生兴趣的特点。但是单纯的多媒体教学容易导致授课进
度加快，学生跟不上老师思路，没有充分的课上时间去消化吸
收相关知识，而且根据课件制作要求，不能出现大量的文字内
容，教师授课时要加入大量的讲解和扩展内容，这就造成许多
内容学生上课听不懂，笔记记不下，课后复习看不懂的后果。
同时，单纯的多媒体教学容易造成老师跟学生之间的互动减
少，出现老师对电脑，学生对屏幕的机械课堂现象，师生之间
的交流越少越不利于学生的学习和及老师本身教学水平的提
高。所以针对天然药物化学学科特点，在课堂上采用重点内容
用板书，图解内容看课件的板书结合多媒体的方法，增强师生
间的交流互动，收到良好的教学效果。
2. 3 知识讲授穿插趣味故事
兴趣是最好的老师。天然药物化学受课时所限，大多数讲
授内容只能浮于表面，只有重点内容可以深入讲解，所以学生
课后的学习十分重要，若不能提高学习兴趣，很难使学生掌握
本学科内容。但是天然药物化学学科涉及大量有机反应，生物
合成反应以及有机波谱解析知识，理论性较强，照本宣科的讲
解不能吸引学生主动学习，导致跟不上 －失去兴趣 －更跟不上
的恶性循环，这也是学生普遍反映天然药物化学难学，难懂的
主要原因。在实践教学中，笔者采用穿插趣味故事的方法，让
学生了解到天然药物与现实生活的联系十分紧密，许多生活中
的现象与天然药物有关，本学科知识也能解答生活中常见的问
题，从而喜欢天然药物化学，也就能够学好天然药物化学。
如:讲解提取分离时，以植物精油的水蒸气提取和脂吸收法为
例，结合现代精油应用进行讲授;讲解黄酮时，以花朵的颜色
为例，既生动又富含知识性;讲解三萜类化合物之前，先以人
参的回阳救逆小故事开始;讲解生物碱之前，以关羽刮骨疗毒
治疗乌头碱中毒的故事开始，引导学生进入课堂，既使学生掌
握了知识，又提高了兴趣。
3 结 语
通过多年实践，本教研室对天然药物化学的教学进行了改
良，主要是以教学大纲为依据，通过调整授课学时和顺序，利
用多种教学手段和方法，以学生为本，因材施教，收到了良好
的效果。但是由于学生生源不同，基础各异以及天然药物化学
学科本身的复杂性，本课程的授课技巧还有可以提高的空间，
如何讲好天然药物化学值得不断深入研究。
参考文献
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檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵
1 －4．
(上接第 150 页)
低于处方中规定的 20 mg·mL －1，其中有 1 批样品不含苯甲酸
钠，与其说明书标示内容吻合。但是不同厂家的产品中苯甲酸
钠的含量差别很大，最低值与最高值相差 10 余倍，然而最高
值又未达到处方值水平，这些使用了苯甲酸钠的金银花露产品
能否确保达到防腐抗菌效果并如何确定最低有效浓度，值得各
厂家进一步探讨。目前我国药品质量标准中尚缺乏具体的防腐
剂含量测定方法，对生产企业所使用防腐剂不能达到严格监
管。
4 结 论
本文采用 HPLC 测定金银花露中苯甲酸钠的含量，并进行
了方法学考察研究，本方法操作快速简便，重现性好，专属性
强，结果可靠，可为提高该制剂的质量标准提供技术参考。
参考文献
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