全 文 ：黑龙江农业科学２０１６（１０）：１２０～１２１
Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
南瓜叶黄酮超声辅助提取工艺研究
张 强
（西北农林科技大学 林学院，陕西 杨凌７１２１００）
摘要：南瓜叶营养成分丰富，并含有黄酮、多糖、多酚等功能成分，开发前景良好。为了优化南瓜叶黄酮提取
工艺，采用超声提取法提取南瓜叶中总黄酮，并测定了其抗氧化性活性。通过正交试验确定南瓜叶中黄酮提
取的最佳条件为，乙醇溶液浓度为７５％、超声功率３５０Ｗ、料液比１∶４０、提取温度７０℃条件下提取３０ｍｉｎ，其
影响的主次顺序依次为乙醇溶液浓度＞超声功率＞提取温度＞提取时间，在此条件下提取率可达１．８３％。
南瓜叶黄酮类化合物对ＤＰＰＨ自由基和羟自由基均有一定清除能力。超声波辅助提取法从南瓜叶中提取黄
酮类化合物可以加快提取速度，提高提取效率。
关键词：南瓜叶；黄酮；超声波辅助提取；抗氧化活性
中图分类号：Ｓ６４２．１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２－２７６７（２０１６）１０－０１２０－０２ ＤＯＩ：１０．１１９４２／ｊ．ｉｓｓｎ１００２－２７６７．２０１６．１０．０１２０
收稿日期：２０１６－０９－１４
基金项目：国家林业局林业公益性行业专项资助项目（２０１３
０４８１１）
作者简介：张强（１９７５－），男，陕西省蒲城县人，博士，讲师，从
事植物资源加工利用研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｑ１４６８＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ。
南瓜（Ｃｕｃｕｒｂｉｔａ ｍｏｓｃｈａｔａ Ｄｕｃｈ．）嫩叶在部
分国家和地区作为蔬菜食用，蛋白质含量和微量
元素含量较高［１］。同时含有胡萝卜素、酚类、黄酮
等活性成分［２］。南瓜叶醇提物有较强的抗氧化作
用，可延缓冷冻猪肉的油脂氧化和细菌侵染［３］。
乙醇提取是提取南瓜叶黄酮的常用方法，提取率
２％～３％，但是耗时较长，能耗较高［４－５］。超声波
辅助提取是近年来新兴的提取方法，具有快速高
效的特点。本文研究了超声波辅助提取法提取南
瓜叶黄酮工艺，旨在为进一步开发南瓜叶黄酮资
源提供试验基础。
１ 材料与方法
１．１ 材料
供试南瓜叶于９月２０日采自陕西眉县西北
农林科技大学猕猴桃试验站，除杂，烘箱６０℃烘
干。烘干后的南瓜叶用粉碎机粉碎过６０目筛。
南瓜叶干粉含水率７．６％。
芦丁标准品购于国药集团化学试剂有限公
司，２，２－联苯基－１－苦基肼基（ＤＰＰＨ，９７％）购于
Ｓｉｇｍａ公司（Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，美
国），其它试剂购自上海医药集团和西安试剂厂，
均为分析纯。
供试仪器有ＵＶ－１８００紫外分光光度计（上海
美谱达仪器有限公司），ＳＫ２５１０ＬＨＣ数控超声波
清洗器（上海科导超声仪器有限公司）。
１．２ 方法
１．２．１ 提取 南瓜叶干粉→超声乙醇浸提→离
心（４ ５００ｒ·ｍｉｎ－１，１０ｍｉｎ）→上清液→分析测
定。准确称取一定量的备用南瓜叶粉末置于
２０ｍＬ试管中，加入乙醇溶液２０ｍＬ，在一定温度
下超声波提取一定时间，离心取上清液置于
２５ｍＬ容量瓶，用蒸馏水定容作待测液。
１．２．２ 黄酮含量测定 以硝酸铝－亚硝酸钠比色
法［６］测定样品提取物中总黄酮含量。黄酮得率按
下式计算：
黄酮提取率（％）＝［提取液浓度（ｍｇ·ｍＬ－１）×
稀释倍数×体积（ｍＬ）／样品干重（ｇ）×１０００］×１００
１．２．３ 正交试验设计 由预实验结果，选择提取
溶剂浓度（Ａ）、超声波功率（Ｂ）、提取时间（Ｃ）、提
取温度（Ｄ）４个因素，每个因素选择３个水平，以
黄酮得率为考察指标，选用Ｌ９（３４）进行正交试验
设计，以确定南瓜叶中黄酮类化合物提取的最佳
工艺条件。因素水平设定见表１。
表１ 正交试验因素水平设计
Ｔａｂｌｅ １ Ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ
因素
Ｆａｃｔｏｒｓ
水平Ｌｅｖｅｌｓ
１ ２ ３
Ａ提取温度／℃ ６０ ７０ ８０
Ｂ提取时间／ｍｉｎ ３０ ４０ ５０
Ｃ超声功率／Ｗ ２５０ ３００ ３５０
Ｄ乙醇浓度／％ ７０ ７５ ８０
１．２．４ 抗氧化活性测定 ＤＰＰＨ 自由基和羟基
自由基清除活性按照文献［７］方法测定。
所有试验进行３次平行试验，计算平均值。
０２１
１０期 张 强：南瓜叶黄酮超声辅助提取工艺研究
２ 结果与分析
２．１ 正交试验结果分析
由表２可以看出，各因素相互依赖、相互制约
影响提取效果。考察因素对南瓜叶中黄酮类化合
物提取效果影响程度不同，极差分析表明，其影响
的主次顺序为乙醇浓度＞超声波功率＞提取温
度＞提取时间，最佳的提取条件为 Ａ２Ｂ１Ｃ３Ｄ２，即
乙醇浓度７５％、超声波功率３５０ Ｗ、提取时间
３０ｍｉｎ、提取温度７０℃。以１∶４０的料液比，用正
交试验所确定的最优水平组合Ａ２Ｂ１Ｃ３Ｄ２做验证
试验，南瓜叶总黄酮提取率为１．８３％。
表２ 黄酮提取正交试验结果
Ｔａｂｌｅ ２ Ｒｅｓｕｌｔｓ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ
试验号
Ｎｏ．
Ａ Ｂ Ｃ Ｄ
黄酮提取率／％
Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｙｉｅｌｄ
１ １ １ １ １ １．４１
２ １ ２ ２ ２ １．５９
３ １ ３ ３ ３ １．５２
４ ２ １ ２ ３ １．６６
５ ２ ２ ３ １ １．６５
６ ２ ３ １ ２ １．６１
７ ３ １ ３ ２ １．７６
８ ３ ２ １ ３ １．４６
９ ３ ３ ２ １ １．３９
Ｋ１ １．５０７ １．６１０ １．４９３ １．４８３
Ｋ２ １．６４０ １．５６７ １．５４７ １．６５３
Ｋ３ １．５３７ １．５０７ １．６４３ １．５４７
Ｒ ０．１３３ ０．１０３ ０．１５０ ０．１７０
较好水平 Ａ２ Ｂ１ Ｃ３ Ｄ２
２．２ 南瓜叶黄酮抗氧化活性
ＤＰＰＨ 自由基法和羟基自由基法是测定体
外抗氧化活性的常用方法。ＤＰＰＨ 自由基是合
成的比较稳定的自由基，是最广泛使用的测定自
由基清除活性的自由基，操作简单，重复性高。试
验发现南瓜叶黄酮清除ＤＰＰＨ 自由基具有量效
关系，在黄酮浓度１０～１００ｍｇ·Ｌ－１时，黄酮浓度
与ＤＰＰＨ自由基清除率呈线性关系，回归方程为
Ｒ＝０．３０８ ７×Ｃ＋４３．８７（ｒ２＝０．８６３ ７），其中Ｒ为
自由基清除率，Ｃ为黄酮浓度，ＩＣ５０为１９．８６ｍｇ·Ｌ－１。
羟基自由基是活性氧自由基（ＲＯＳ）的一种，是代
谢过程中产生的自由基。试验发现了南瓜叶黄酮
清除羟基自由基的量效关系，黄酮浓度与ＤＰＰＨ
自由基清除率的线性回归方程为Ｒ＝１．５２６ ５×
Ｃ＋１５．９５（ｒ２＝０．９４７ ３），线性范围２～２５ｍｇ·Ｌ－１。
ＩＣ５０为２２．３１ｍｇ·Ｌ－１。由ＩＣ５０看出，南瓜叶黄酮对
ＤＰＰＨ自由基清除活性略高于对羟基自由基的
清除活性。而且活性较高，和抗坏血酸活性相近。
３ 结论
超声波辅助提取南瓜叶黄酮的影响因素主次
顺序为乙醇浓度＞超声波功率＞提取温度＞提取
时间，最佳的提取条件为乙醇浓度７５％、超声波
功率３５０Ｗ、提取时间３０ｍｉｎ、提取温度７０℃，此
条件下，南瓜叶黄酮提取率为１．８３％。南瓜叶中
黄酮具有较强的体外抗氧化活性。
参考文献：
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ｆｒｏｍ Ｐｕｍｐｋｉｎ Ｌｅａｖｅｓ
ＺＨＡＮＧ Ｑｉａｎｇ
（Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ，Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ＆Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ，Ｓｈａａｎｘｉ ７１２１００）
１２１
黑龙江农业科学２０１６（１０）：１２２～１２４
Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
黑豆甜米酒的制作及其营养保健功效
姜莉莉
（黄冈职业技术学院 生物与制药工程学院，湖北 黄冈４３８０００）
摘要：为优化甜米酒的风味和口感，研究了黑豆甜米酒的酿制，即以糯米、黑豆、甜酒曲为原料，黑豆添加量为
糯米重量的６％，甜酒曲添加量为糯米重量的０．６％，在３０℃下，发酵７２ｈ。阐述了黑豆甜米酒的营养成分及
其保健功效。制得的黑豆甜米酒，含有丰富的氨基酸、糖、大豆异黄酮、维生素和矿物、黑豆色素等营养成分，
具有多种保健功能。
关键词：黑豆；甜米酒；保健
中图分类号：ＴＳ２６２．９１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２－２７６７（２０１６）１０－０１２２－０３ ＤＯＩ：１０．１１９４２／ｊ．ｉｓｓｎ１００２－２７６７．２０１６．１０．０１２２
甜米酒的主要原料是糯米，以根霉为发酵剂，
进行固态发酵酿制而成。甜酒酿制作过程中，根
霉菌产生了糖化酶类，边糖化边发酵［１］，造就了其
独特营养和风味。甜米酒中含多种氨基酸、还原
糖、维生素和各种矿物质等营养成分［２］，以其营养
丰富、酒度低、酸甜可口的特点深受广大群众喜
爱。近年来保健型米酒的开发制作成为研究的热
点，主要是在米酒酿造原料中添加中药材或药食
两用的食材，例如杜仲米酒［３］、首乌芝麻米酒［４］、
银杏叶米酒［５］等。
黑色食品因营养价值很高，口味好，有很好的
健身壮体、滋补食疗作用在国内外掀起了一股“黑
色食品热”［６］。黑豆又名橹豆、黑大豆等 ，味甘性
收稿日期：２０１５－１２－１５
作者简介：姜莉莉（１９８２－），女，湖北省襄阳市人，硕士，讲师，
从事食品工程研究。Ｅ－ｍａｉｌ：８０４０６９８９＠ｑｑ．ｃｏｍ。
平，是常见的黑色食品。黑豆具有高蛋白、低热量
的特性，含有蛋白质、脂肪、维生素、微量元素等多
种营养成分，同时又具有多种生物活性物质，如黑
豆色素、黑豆多糖和异黄酮等，具有除燥热、解毒
素、消浮肿、止腹泻等作用［７］。
黑豆甜米酒是以糯米为主要原料，添加黑豆，
采用传统米酒与现代果酒的生产工艺相结合，通
过一定的发酵技术，使黑豆中的营养成分充分溶
入到酒中，可以提高黑豆营养利用率和甜米酒的
营养价值，优化甜米酒的风味和口感。
１ 黑豆甜米酒酿制工艺
黑豆甜米酒酿制工艺流程（见图１）。
图１ 黑豆甜米酒酿制工艺流程图
Ｆｉｇ．１ Ｐｒｏｃｅｓｓ ｆｌｏｗ ｄｉａｇｒａｍ ｏｆ ｂｌａｃｋ ｂｅａｎｓ ｓｗｅｅｔ ｒｉｃｅ ｗｉｎｅ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｐｕｍｐｋｉｎ（Ｃｕｃｕｒｂｉｔａ ｍｏｓｃｈａｔａ Ｄｕｃｈ．）ｌｅａｖｅｓ ｈａｖｅ ｎｏｔ ｙｅｔ ｂｅｅｎ ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌｉｚａｔｉｏｎ ｕｔｉｌｉｚｅｄ ａｌｔｈｏｕｇｈ ｔｈｅｙ
ａｒｅ ｒｉｃｈ ｉｎ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｓｕｃｈ ａｓ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｅｓ．Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃ－
ｔｉｎｇ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｐｕｍｐｋｉｎ ｌｅａｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ，ｔｈｅ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ａｓｓｉｓｔｅｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｅｓ ｆｒｏｍ ｄｒｙ ｍａｔｕｒｅ ｐｕｍｐ－
ｋｉｎ ｌｅａｖｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ，ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ
ｐｏｗｅｒ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ ｏｎ ｔｈｅ ｐｕｍｐｋｉｎ ｌｅａｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｅｓ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｙｉｅｌｄ ｗｅｒｅ
ｓｔｕｄｉｅｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｗａｓ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｂｙ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｄｅｓｉｇｎ．Ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ
ｔｈｅ ｐｕｍｐｋｉｎ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ＤＰＰＨ ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌ，ｈｙｄｒｏｘｙｌ ｒａｄｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｔｈｅ
ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｐｒｉｍａｒｙ ａｎｄ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｏｒｄｅｒ ｏｆ ｆａｃｔｏｒｓ ａｆｆｅｃｔｉｎｇ ｔｈｅ ｐｕｍｐｋｉｎ ｌｅａｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｅｘ－
ｔｒａｃｔｉｏｎ ｙｉｅｌｄ ｗａｓ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ＞ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｐｏｗｅｒ＞ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ＞ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ．Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗａｓ：ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ ７５％，ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｐｏｗｅｒ ３００Ｗ，ｍａｔｅｒｉａｌ ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ １∶４０，
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ７０℃，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ３０ｍｉｎ．Ｕｎｄｅｒ ｔｈｉｓ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｐｕｍｐｋｉｎ ｌｅａｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｅｓ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｙｉｅｌｄ
ｒｅａｃｈｅｄ １．８３％．Ｐｕｍｐｋｉｎ ｌｅａｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｅｓ ｓｈｏｗｅｄ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ＤＰＰＨ ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌ ｈｙｄｒｏｘｙｌ ｒａｄｉｃａｌ．Ｔｈｅ
ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ａｓｓｉｓｔｅｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｕｌｄ ｅｎｈａｎｃｅ ｔｈｅ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｅｓ ｆｒｏｍ ｐｕｍｐｋｉｎ ｌｅａｆ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｕｍｐｋｉｎ ｌｅａｆ；ｆｌａｖｏｎｏｉｄｅｓ；ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ａｓｓｉｓｔａｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ
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