全 文 ：文章编号:0439-8114(2007)01-0133-03
第46卷第1期
2007年1月
湖北农业科学
HubeiAgriculturalSciences
Vol.46No.1
Jan.,2007
收稿日期:2006-09-20
基金项目:广东省农业攻关项目(2004B20401015)
作者简介:李升锋(1976-),男,湖北枣阳人,助理研究员,主要从事果蔬深加工研究,(电话)020-87237279(电子信箱)risemount@sina.com。
玫瑰茄(HibiscussabdarifaL.),属锦葵科木槿
属一年生草本植物,花萼为紫红色。玫瑰茄主要分
布于印度、东南亚、非洲和南美等国家和地区,目
前,我国云南、福建、两广等地已大面积种植[1]。玫瑰
茄花萼的化学组成主要有有机酸、碳水化合物、粗
蛋白、粗脂肪、花青素、多酚和类黄酮类物质等。传
统医学认为,玫瑰茄花萼具有清热、解渴、止咳和降
血压作用,在埃及,广泛用于治疗心脏和神经的疾
病;在印度,作为利尿、抗坏血病等药物;在塞内加
尔,玫瑰茄被推荐为杀菌剂、驱肠虫剂和降血压
剂[2]。近年来国内外对玫瑰茄花萼的保健功能和药
理作用进行了广泛深入的研究和报道,报道了玫瑰
茄具有抗氧化、抗肿瘤、降血压、保护肝脏和保护心
血管等药理作用和药用价值[3-7]。本研究以玫瑰茄干
花萼为原料,对其抗氧化物提取工艺进行初步探
索,为进一步开发其高附加值产品奠定理论基础。
1 材料与方法
1.1 材料
1)试验材料和试剂 玫瑰茄干花萼,广东省乳
源瑶族自治县提供;总抗氧化能力(T-AOC)测试
盒,南京建成生物研究所提供;无水乙醇、甲醇、乙
酸乙酯、硫酸亚铁、冰乙酸、盐酸、CH3COONa·3H2O,
氯化铁等试剂及其他试剂均为分析纯;80%甲醇、
60%甲醇、纯乙醇、80%乙醇、60%乙醇、40%乙醇、
20%乙醇自配,全为体积比。
2)试验用仪器和设备 UV-1700型分光光度
计,日本SHIMADZU公司;JC101-1A型数显鼓风干
燥箱,上海嘉程仪器设备厂;TDA-8002型水浴锅,
河北省黄骅航天仪器厂;QYQ-100-UL型移液器,
北京青云卓立精密设备有限公司;800型离心沉淀
器,上海手术器械厂。
1.2 方法
1)玫瑰茄提取液制取 将玫瑰茄花萼烘干后
磨成粉末,过 200目滤布,按要求称取质量为 M的
干花萼,进行提取试验,过滤后得提取液体积为V。
2)花青素含量测定 pH值示差法[8],扫描玫瑰
茄浸提液的吸收曲线,最大吸收波长为 517nm。花
青素含量(mg·L-1)=[(Aλ517-Aλ700)pH1.0-(Aλ517-Aλ700)pH4.5]
×MW×DF×1000/(ε×1),λVis-max为 λ517nm,MW
为分子量,DF为稀释因子,ε为摩尔吸光度。MW=
449.2,ε=26900。
3)多酚含量测定 采用 Folin-Ciocalteu法测
定。取10mg没食子酸,定容至100mL,配制成0.1
mg·mL-1的溶液,分别取 1、1.5、2、2.5、3、3.5、4mL
定容至25mL,制成浓度分别为4μg·mL-1、6μg·mL-1、
8μg·mL-1、10μg·mL-1、12μg·mL-1、14μg·mL-1、16
μg·mL-1的标准溶液。分别取 1mL标准溶液+1mL
福林-酚试剂+2mL10%Na2CO3混匀,25℃反应1h,
测定765nm波长处吸光度。以浓度为x轴,吸光度
为y轴,做标准曲线并计算回归方程。得标准曲线
回归方程为y=0.0553x+0.0111,r2=0.9991。总多酚
含量测定:分别取1mL玫瑰茄干花萼提取液加入1
mL福林-酚试剂和 2mL10%Na2CO3混匀,25℃反
玫瑰茄花萼抗氧化物的提取工艺
李升锋,徐玉娟,张友胜,吴继军,唐道邦,温 靖
(广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所/广东省农产品加工公共实验室,广州 510610)
摘要:通过单因素试验研究了玫瑰茄花萼抗氧化物的提取工艺,得到较佳的提取工艺条件为玫瑰茄花
萼∶40%乙醇(V/V)=1∶20(W/V),提取温度 75℃,提取时间 1.5h。在此条件下,得到的抗氧化物提取效率
为:试剂盒法测得总抗氧化物提取效率为每克花萼 4062.51单位,FARP法测得总抗氧化物提取效率为
每克花萼0.696mmolFeSO4当量,此时总多酚的提取效率为0.975%,花青素提取效率为0.074%。
关键词:玫瑰茄;干花萼;抗氧化物;提取工艺
中图分类号:Q949.757.3;R282.4 文献标识码:B
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2007.01.046
应1h,测定765nm波长处吸光度。代入标准曲线
计算提取液总多酚浓度(mg·L-1)。
4)FRAP法测总抗氧化能力 采用铁离子还原
力(Thefericreducingantioxidantpower,FRAP)
法[9]测定。取样品液100μL,加入300μL双蒸水,加
入 3mL37℃预温的 FRAP工作液 (10mmol·L-1
TPTZ,20mmo1·L-1 FeC13,0.3mo1·L-1 CH3COOH-
CH3COONa缓冲液以1:1:10的比例混合),37℃水浴
10min,于 593nm读取吸光度值,结果以每升提取
液mmolFeSO4当量(FRAP值)表示。得到的标准曲
线回归方程是y=0.63x-0.0063,r2=0.9971。
5)试剂盒法测总抗氧化能力 按总抗氧化能
力检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)要求准
备工作液。取0.1mL待测样品液置于试管中,加入
检测试剂 2.0mL,混合均匀,在 37℃恒温水浴箱反
应30min,于520nm处测定吸收度值(OD)。在37℃
时,每分钟每毫升样品液使反应体系的吸光度值每
增加0.01时,为一个抗氧化能力单位。计算公式:总
抗氧化能力=(测定管 OD-对照管 OD)×反应液
(mL)×样品测试前稀释倍数/0.01×30×取样量(mL)。
6)提取效率 花青素的提取效率 α(%)=V×A/
M×10-3×100%;多酚的提取效率 β(%)=V×B/M×
10-3×100%;试剂盒法抗氧化化物提取效率 γ=V×
C/M×103(单位·g-1花萼);FARP法抗氧化物提取效
率δ=V×D/M(mmolFeSO4当量/g花萼);V为玫瑰茄
浸提液体积(L);A为浸提液花青素含量(mg·L-1);B
为浸提液多酚含量 (mg·L-1);C为试剂盒法测浸提
液总抗氧化能力(单位·mL-1浸提液);D为FARP法
测浸提液总抗氧化能力(mmolFeSO4当量·L-1提取
液);M为玫瑰茄干花萼质量(g)。
2 结果与讨论
2.1 提取溶剂对玫瑰茄抗氧化物提取效率的影响
水、纯甲醇、80%甲醇、60%甲醇、纯乙醇、80%
乙醇、60%乙醇、乙酸乙酯等各提取液中,60%乙醇
提取得到的提取液无论是试剂盒法,还是 FRAP法
测定的玫瑰茄花萼抗氧化物提取效率都是最大的,
因此暂选择 60%的乙醇作为玫瑰茄花萼抗氧化物
的提取溶剂(图1,图2)。
2.2 提取时间对玫瑰茄花萼抗氧化物提取效率的
影响
随着提取时间的延长,试剂盒法测量得到提取
的氧化物是呈增加后减少趋势的,试剂盒法测得总
抗氧化物提取效率在提取时间 2h达到了最大,而
FRAP法测量得到提取的抗氧化物一直呈增加的趋
势,花青素和总多酚的提取效率是先增加后减少,
花青素在 1.5h时达到了最大,为 0.0686%,而总多
酚在2h的提取效率最大为0.9%。抗氧化物提取效
率在 1.5h之前增长率是比较大,1.5h之后增长缓
慢,因此选择玫瑰茄花萼的抗氧化物的提取时间为
1.5h(图3)。
2.3 液料比对玫瑰茄花萼抗氧化物提取效率的影响
随着液料比增加,无论是试剂盒法还是FARP
法测量得到的玫瑰茄花萼抗氧化物的提取效率都
是增加的,同时花青素和总多酚的提取效率也是增
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加的,当浸提溶剂 60%乙醇与玫瑰茄花萼的比为
20∶1(V/W),再随着液料比的增加,抗氧化物、花青
素和总多酚的提取效率增加幅度较小,因此考虑选
择液料比为20∶1(V/W)。
2.4 提取温度对玫瑰茄花萼抗氧化物提取效率的
影响
从图5可以看出,玫瑰茄花萼的抗氧化物、花
青素和总多酚的提取效率都是先增加后减少,在
75℃时都达到了最大值,花青素为 0.076%,总多酚
为 0.936%,试剂盒法测得抗氧化物提取效率为
3362.07单位·g-1花萼,FARP法测得的抗氧化物提
取效率为0.651mmolFeSO4当量·g-1花萼。因此选择
浸提温度为75℃。
2.5 乙醇浓度对玫瑰茄花萼抗氧化物提取效率的
影响
从图 6可以看出,随着乙醇浓度的增加,玫瑰
茄抗氧化物、花青素和总多酚的提取效率都是先增
加后减少,其中玫瑰茄抗氧化物和总多酚提取效率
在40%乙醇作为溶剂时最大,试剂盒法测得抗氧化
物提取效率为4062.51单位·g-1花萼,FARP法测得
的抗氧化物提取效率为 0.696mmolFeSO4当量·g-1
花萼,总多酚的提取效率为 0.975%,此时花青素的
提取效率为0.074%。选择40%乙醇作为提取溶剂。
3 小结
综上所述,玫瑰茄抗氧化物的较佳提取条件为
玫瑰茄花萼∶40%乙醇(V/V)=1∶20(W/V),提取温度
75℃,提取时间1.5h,得到抗氧化物提取效率为:试
剂盒法测得总抗氧化物提取效率为 4062.51单位·
g-1花萼,FARP法测得的抗氧化物提取效率为0.696
mmolFeSO4当量·g-1花萼,此时总多酚的提取效率
为0.975%,花青素提取效率为0.074%。
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李升锋等:玫瑰茄花萼抗氧化物的提取工艺
(责任编辑 郑 威)
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